הבשלת ביצית רקמת שחלה במבחנה לשימור פוריות

סיכום

מוצגת כאן הבשלת ביצית רקמת שחלה (OTO-IVM), טכניקה נגישה במעבדת רבייה בסיוע רפואי (MAR) המציעה אפשרויות מציאותיות נוספות לשימור פוריות למטופלות הזקוקות לשימור רקמת שחלה.

תקציר

ויטריפיקציה של ביציות בוגרות היא סטנדרט הטיפול לשימור פוריות אצל נשים בסיכון לאי פוריות. עם זאת, שימור רקמת שחלה בהקפאה (OTC) הוא עדיין האפשרות היחידה לשימור פוריות אצל נשים שצריכות להתחיל טיפול גונדוטוקסי בדחיפות או בילדים לפני גיל ההתבגרות. במהלך הכנת קליפת השחלה לשימור בהקפאה, מסירים רקמה מדולרית. זקיקים אנטרליים גדלים שוכנים בגבול הממשק של קליפת המוח-מדולר של השחלה ונשברים במהלך תהליך זה, ומשחררים את קומפלקס הקומולוס-ביצית שלהם (COC). על ידי בדיקה יסודית של הרקמה המדולרית הבינונית והמקוטעת, ניתן לזהות קומפלקסים לא בשלים אלה של קומולוס-ביציות מבלי להפריע להליך ה-OTC. הביציות הלא בשלות שמקורן ברקמת השחלה יכולות להבשיל בהצלחה במבחנה, וליצור מקור נוסף לגמטות לשימור פוריות. אם OTC מבוצע בתוך או ליד מעבדת רבייה בסיוע רפואי, כל הכלים הדרושים להבשלה חוץ גופית (IVM) וכלי ויטריפיקציה של ביציות יכולים להיות בהישג יד. יתר על כן, עם הפוגה ורצון הילד, עומדות בפני המטופלת אפשרויות מרובות לשיקום פוריות: השתלת רקמת שחלה או העברת עוברים לאחר הזרעת ביציות מזוגגות/מחוממות. לפיכך, התבגרות ביצית ברקמת השחלה (OTO-IVM) יכולה להיות טכניקה נלווית לשימור פוריות נלווית.

מבוא

אפשרויות שימור פוריות (FP) לנשים המתוכננות לטיפול גונדוטוקסי, טיפול לשינוי מין, או לנשים שיש להן נטייה גנטית לאי ספיקת שחלות מוקדמת, תלויות בבריאות ובגיל המטופלת, מסגרת הזמן הזמינה, סוג הטיפול, העדפת המטופלת ונהלי FP הזמינים במרכז הפוריות הנבחר. ויטריפיקציה של ביציות בוגרות המתקבלות לאחר גירוי שחלתי עם גונדוטרופינים ושאיבת ביציות במחזור מעבדה של רבייה בסיוע רפואי (MAR) נחשבת לאופציה המועדפת עבור FP ^1,2. עם זאת, עבור נערות לפני גיל ההתבגרות, נשים שבהן נדרשת התחלה דחופה של טיפול גונדוטוקסי או כריתת גונדקטומיה, או נשים עם סיכון גבוה לאמנוריאה קבועה עקב טיפול גונדוטוקסי, מחזור של ....

פרוטוקול

המחקר הנוכחי על OTO-IVM אושר על ידי הוועדה האתית המקומית של UZ-Brussels (נספח לפרויקט 2008/068 ופרויקט 2022/303). כל המטופלים חתמו על הסכמה מדעת בכתב. כל מטופלת הוערכה באופן פרטני על ידי רופא מומחה לרפואת פוריות, אחות נווטת והאונקולוג המפנה כדי להרכיב את תוכנית הטיפול האופטימלית ב-FP, תוך התחשבות בהעדפות המטופל¹⁴. בקיצור, חולים הזכאים ל-OTC זקוקים בדחיפות ל-FP והם מתחת לגיל^{36 ו-14}. כדי לשלב OTC עם OTO-IVM, לא ניתן היה לתת כימותרפיה או הקרנות בששת החודשים שקדמו ל-OTC.

1. סביבת מעבדה וכוח אדם

1. בצע OTC בארון זרימה למינרי Class A.
....

תוצאות

במהלך העשור האחרון, 98 מטופלות שעברו כריתת שחלות או ביופסיית שחלות ללא מרשם הוצעו גם OTO-IVM. התוצאות המוצגות כאן הן עדכון של התוכנית הקלינית כפי שפורסמה לפני ^7,13. ביציות לא בשלות שהושגו במהלך עיבוד רקמת השחלה הבשילו במבחנה בעיקר במשך 30 שעות. עם זאת, זמן התבגרות גמיש יותר הותר מסיבות מעשיות או בגלל התבגרות נמוכה, שנעה בין 28-42 שעות. המטופלים בחרו בעיקר בזיגוג ביציות (85/98) או על פי בקשה ספציפית של המטופל - העוברים נוצרו על ידי הזרעת ביציות בוגרות וזי.......

דיון

העדיפות של הליך FP היא תמיד לתפעל ולהקפיא את קליפת השחלה על פי פרוטוקול ההפעלה הסטנדרטי שתוקף במרפאה. החיסרון ב-FP הוא היעדר פרוטוקול סטנדרטי זמין בספרות שפורסמה לגבי OTC ו-OTO-IVM. קשה להעריך את היעילות והתוקף של הטכניקות וההתאמות מכיוון שיש פער זמן גדול בין הקפאה/ויטריפיקציה להפשרה/התחממות בסביבה קלינית. אם יבוצעו שינויים בפרוטוקול ה-OTC כדי להגביר את היעילות של OTO-IVM, חיוני לאמת את פרוטוקול ה-OTC המותאם לבריאות הרקמות בעת שימור בהקפאה והפשרה. בדו"ח זה, הפרוטוקול ל-OTC, המשמש באופן ש.......

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
1000 ומיקרו; L טיפים לסנן	Eppendorf / VWR International	613-6780	COC חיפוש
Benchtop Cooler	Fisher Scientific	15-350-54	מכסה מצנן ספסל משמש להכנת הרקמה, מחזיק צינור מצנן ספסל לשמירה על קריוביאלים עם
צלחת תרבית תאי קורנינג מקוררת בינונית, לא מטופלת, 100 מ"מ	צלחת 430591 בינלאומית של קורנינג / VWR		להכנת רקמות שחלות
CryoSure-DMSO	WAK Chemicals	0482	Cryoprotectant לשימור הקפאה של רקמות שחלות
Cumulase	Origio/CooperSurgical	16125000A	אנזים היאלורונידאז אנושי רקומביננטי להסרת תאי קומולוס לאחר IVM
תרסיס טיהור: Suprox	Medipure LTD	MP016	תמיסת זיהום לטיפול אספטי עם פעולת קוטל חיידקים ונקבעים
אזמל	חד פעמיSwann-Morton	0511	הכנת רקמות שחלות
פלקון 14 מ"ל מבחנה פוליסטירן תחתון עגול, עם מכסה הצמד,	מיכל בינוני של בז סטרילי/VWR International	BDAA352057	nbsp;
מסננת תאי פלקון 70 ומיקרו; m	Falcon/VWR International	352350	מסנן לסילוק זיהום כדוריות דם אדומות וחיפוש COC
בקרת הקפאה אמפולה תא קריולוגי ובקר טמפרטורה		קריולוגי CL-8800i    CC60AS	מכונת הקפאה איטית
FSH: Menopur 75 IU	Ferring	BE197504	הורמון מגרה זקיקים: תוסף ל-IVM בינוני
טיפול בפיפטה 290-310 ומיקרו; m	Vitrolife	15538	חיפוש COC: העברה עדינה של COC מבלי לפגוע בקישוריות תאי ביצית-קומולוס
hCG: Brevactid 5000 IE	Ferring	5008001036	Human Chorionic Gonadotropin: תוסף ל-IVM
בינוני צינור אבטחה גבוה	CryoBioSystem	022252	קריוביאלי, אטום בחום לאחסון
בטוח פתרון HSA	Vitrolife	10064	סרום אנושי אלבומין: תוסף למדיום IVM
L-15 medium	Life Technologies Europe	31415-029	מדיום טיפול להכנת רקמת שחלה
MediCult IVM מערכת	Origio/CooperSurgical	82214010	מדיום להפריה חוץ גופית המכיל גם מדיום LAG וגם מדיום IVM. יש להשלים את מדיום IVM כמפורט בפרוטוקול
METZENBAUM מספריים פינו 140 מ"מ	VIZ08280314 תחזוקה כירורגית		מספריים בגודל בינוני להסרת מדולה ראשונית
כלים Nunc 4 בארות לאיסוף COC IVF	Nunc / VWR International	144444	COC במהלך חיפוש COC ותרבות IVM
דישון Nunc Invitro צלחת פטרי עם מכסה מאוורר, 60 מ"מ, לא פירוגני,	תרמו סטרילי צלחת NUNC150270 מדעית / VWR		לחיפוש COC
מדיום לטיפול בביציות: מדיום שטיפה עם הפרין	אוריג'יו / קופר 10765060 כירורגי		מדיום חיפוש לחיפוש COC
Ovoil	Vitrolife	10029	לתרבית IVM
תערובת פניצילין / סטרפטומיצין	Life Technologies Europe	15140-148	תוסף לטיפול ללא מרשם
מספריים, מעוקל, להב באורך 150 מ"מ, להב 20 מ"מ	תחזוקה כירורגית	VIREBST999-SC	מספריים בגודל קטן להסרת שאריות מדולה

&שמן