עבודה זו מציגה מודל חייתי של פיברוזיס המושרה על ידי מעבר אנדותל למזנכימלי, כפי שניתן לראות במומים לבביים מולדים כגון היצרות קריטית של אבי העורקים או תסמונת לב שמאל היפופלסטית, המאפשרת הערכה היסטולוגית מפורטת של רקמות, זיהוי מסלולי איתות רגולטוריים ובדיקת אפשרויות טיפול.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
מודל השתלת לב חולדה הטרוטופי בילוד לחקר המעבר מאנדותל למזנכימלי
במאמר זה
סיכום
תקציר
לפיברואלסטוזיס אנדוקרדיאלי (EFE), המוגדר על ידי הצטברות רקמות תת-אנדוקרדיאליות, יש השפעות משמעותיות על התפתחות החדר השמאלי (LV) ומונע מחולים עם היצרות מולדת קריטית של אבי העורקים ותסמונת לב שמאל היפופלסטית (HLHS) תיקון כירורגי אנטומי דו-חדרי מרפא. כריתה כירורגית היא כיום האפשרות הטיפולית היחידה הזמינה, אך EFE חוזר לעתים קרובות, לפעמים עם דפוס גדילה חודר עוד יותר לתוך שריר הלב הסמוך.
כדי להבין טוב יותר את המנגנונים הבסיסיים של EFE ולחקור אסטרטגיות טיפוליות, פותח מודל בעלי חיים המתאים לניסויים פרה-קליניים. המודל החייתי לוקח בחשבון כי EFE היא מחלה של הלב הלא בוגר והיא קשורה להפרעות זרימה, כפי שנתמך על ידי תצפיות קליניות. לפיכך, השתלת לב הטרוטופית של לב תורם חולדה בילוד היא הבסיס למודל זה.
לב חולדה ילוד מושתל בבטנה של חולדה מתבגרת ומחובר לאבי העורקים האינפרא-כלייתי ולווריד הנבוב התחתון של הנמען. בעוד זילוח של העורקים הכליליים משמר את הכדאיות של הלב התורם, קיפאון זרימה בתוך LV גורם לצמיחת EFE בלב מאוד לא בוגר. המנגנון הבסיסי של היווצרות EFE הוא המעבר של תאי אנדותל אנדוקרדיאליים לתאים מזנכימליים (EndMT), שהוא מנגנון מתואר היטב של התפתחות עוברית מוקדמת של המסתמים והספטה, אך גם הגורם המוביל לפיברוזיס באי ספיקת לב. היווצרות EFE ניתן לראות באופן מאקרוסקופי בתוך ימים לאחר ההשתלה. אקוקרדיוגרפיה טרנס-בטנית משמשת לניטור כדאיות השתל, התכווצות ופטנט האנסטומוזות. לאחר המתת חסד, רקמת EFE נקצרת, והיא מראה את אותם מאפיינים היסטופתולוגיים כמו רקמת EFE אנושית מחולי HLHS.
מודל in vivo זה מאפשר ללמוד את מנגנוני התפתחות EFE בלב ולבחון אפשרויות טיפול למניעת היווצרות רקמה פתולוגית זו ומספק הזדמנות לבדיקה כללית יותר של פיברוזיס המושרה על ידי EndMT.
מבוא
פיברואלסטוזיס אנדוקרדיאלי (EFE), המוגדר על ידי הצטברות קולגן וסיבים אלסטיים ברקמה התת-אנדוקרדיאלית, מציג כאנדוקרדיום מעובה פניני או אטום; EFE עובר את רוב הגדילה הפעילה במהלך תקופת העובר והינקות המוקדמת1. במחקר נתיחה שלאחר המוות, 70% מהמקרים עם תסמונת לב שמאל היפופלסטית (HLHS) היו קשורים לנוכחות של EFE2.
תאים המבטאים סמנים לפיברובלסטים הם אוכלוסיית התאים העיקרית ב-EFE, אך תאים אלה מבטאים במקביל גם סמני אנדותל אנדוקרדיאלים, דבר המהווה אינדיקציה למקורם של תאי EFE אלה. הקבוצה שלנו קבעה בעבר כי המנגנון הבסיסי של היווצרות EFE כרוך בשינוי פנוטיפי של תאי אנדותל אנדוקרדיאליים לפיברובלסטים באמצעות מעבר אנדותל למזנכימלי (EndMT)3. ניתן לזהות EndMT באמצעות צביעה כפולה אימונוהיסטוכימית עבור סמני אנדותל כגון אשכול התמיינות (CD) 31 או אנדותל כלי דם (VE)-קדהרין (CD144) וסמנים פיברובלסטים (למשל, אקטין שריר אלפא-חלק, α-SMA). יתר על כן, קבענו בעבר את התפקיד הרגולטורי של מסלול TGF-ß בתהליך זה עם הפעלת גורמי השעתוק SLUG, SNAIL ו- TWIST3.
EndMT הוא תהליך פיזיולוגי המתרחש במהלך התפתחות הלב העוברית ומוביל להיווצרות הספטה והמסתמים מכריות אנדוקרדיאליות4, אך הוא גם גורם לפיברוזיס איברים באי ספיקת לב, פיברוזיס בכליות או סרטן וממלא תפקיד מפתח בטרשת עורקים וסקולרית 5,6,7,8. EndMT בפיברוזיס לב מוסדר בעיקר באמצעות מסלול TGF-β, כפי שאנו ואחרים דיווחנו 3,9. גירויים שונים תוארו כגורמים ל-EndMT: דלקת 10, היפוקסיה 11, שינויים מכניים 12 והפרעות זרימה, כולל שינויים בזרימת הדם התוך-חללית 13, ו-EndMT עשוי להיות גם תוצאה של מחלה גנטית 14.
מודל בעלי חיים זה פותח באמצעות מרכיבי המפתח של התפתחות EFE לבבית, שהם חוסר בשלות ושינויים של זרימת הדם intracavitary, במיוחד קיפאון זרימה. חוסר הבשלות הושג על ידי שימוש בלבבות חולדות ילודים כתורמים, שכן חולדות יילודים ידועות כלא בשלות מבחינה התפתחותית מיד לאחר הלידה. השתלת לב הטרוטופית הציעה מתן הגבלת זרימה תוך חללית15.
מנקודת מבט קלינית, מודל בעלי חיים זה מאפשר לחקור טוב יותר את ההשפעה של EndMT על החדר השמאלי הגדל (LV). מגבלת הגדילה המוטלת על לב העובר והיילוד באמצעות היווצרות EFE16 הנגרמת על ידי EndMT מונעת מחולים עם חסימות בדרכי זרימת החדר השמאלי (LVOTO) כגון היצרות מולדת קריטית של אבי העורקים ותסמונת לב שמאל היפופלסטית (HLHS) מתיקון כירורגי אנטומי אנטומי מרפא17. מודל בעלי חיים זה מאפשר את חקר המנגנונים התאיים וויסות היווצרות רקמות באמצעות EndMT ומאפשר בדיקה של אפשרויות טיפול תרופתי 3,18.
אקוקרדיוגרפיה טרנס-בטנית משמשת לניטור כדאיות השתל, התכווצות ופטנט האנסטומוזות. לאחר המתת חסד, היווצרות EFE ניתן לצפות באופן מקרוסקופי בתוך 3 ימים לאחר ההשתלה. רקמת EFE מראה את אותם מאפיינים היסטופתולוגיים כמו רקמת EFE אנושית מחולים עם LVOTO.
לפיכך, מודל בעלי חיים זה, למרות שפותח לשימוש בילדים בספקטרום של HLHS, יכול להיות מיושם בעת חקר מחלות שונות המבוססות על המנגנון המולקולרי של EndMT.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל ההליכים בבעלי חיים נערכו בהתאם למועצה הלאומית למחקר. 2011. מדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה: מהדורה שמינית. הפרוטוקולים של בעלי החיים נבדקו ואושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים בבית החולים לילדים בבוסטון.
לפני הניתוח, כל כלי הניתוח הם autoclaved קיטור, חיץ Krebs-Henseleit שונה, עם ריכוז סופי של 22 mmol / L KCl, מוכן כמו פתרון cardioplegic (טבלה 1). התמיסה עוברת סינון מעוקר ומאוחסנת בטמפרטורה של 4°C למשך הלילה. מיקרוסקופ כירורגי (12.5x) נדרש להליך השתלת לב חולדה הטרוטופית בילוד.
1. הכנה והרדמה
- השתמשו בחולדות לואיס זכר/נקבות במשקל של כ-150 גרם (גיל 5-6 שבועות) כמושתלים.
- בתור התחלה, גלחו בנדיבות את בטנה של החולדה עם סכין גילוח.
- הכניסו את החולדה לתא איזופלורן, והפעילו את זרימת החמצן ב-2 ליטר/דקה עם 2% איזופלורן עד שבעל החיים מורדם כראוי אך עדיין נושם באופן ספונטני. הזריקו 45 מ"ג/ק"ג קטמין ו-5 מ"ג/ק"ג קסילזין תוך צפקי (IP), כמו גם 300 U/kg הפרין. יש לוודא הרדמה תקינה באמצעות בדיקת צביטת בוהן.
הערה: עקוב בקפידה אחר הנשימה הספונטנית וקצב הלב באמצעות מישוש החזה כדי להבטיח מצב המודינמי יציב לאורך כל התהליך. - עבור אינטובציה, הניחו את החולדה על מדף אלכסוני (איור 1), הדקו את השיניים הקדמיות באמצעות חוט, והניחו את הראש פונה לכיוון המנתח.
- הניחו את האור בצד החיצוני של הצוואר על אזור מיתרי הקול, תפסו את הלשון בשתי אצבעות ודחפו אותה מעט כלפי מעלה ושמאלה כדי לספק ראייה אופטימלית לאינטובציה. השתמש 18 גרם, 2 בצינורית עבור 100-150 גרם חולדה. אבטח את הצינור intratracheal עם קלטת.
הערה: לופים כירורגיים עם הגדלה של פי 3.5 מומלצים לאינטובציה. - חברו את צינורית האינטובציה למכונת ההנשמה של בעלי החיים הקטנים, והתאימו את ההגדרות בהתאם להוראות היצרן בהתאם לגודל החי.
הערה: השתמש בהגדרות הבאות עבור חולדה של 150 גרם: מצב עוצמת קול; קצב נשימה, 55/דקה; נפח גאות, 1.3 מ"ל 50% יחס I/E, אך ניתן לכוונן זאת בהתאם לצורך. להבטיח תנועת חזה דו-צדדית תקינה ושווה, ולתת איזופלורן ברציפות ב-0.5%-2% דרך מכונת ההנשמה. - הניחו את החולדה על כרית חימום (כדי לשמור על טמפרטורת גוף תקינה) במצב שכיבה כשהזנב פונה לכיוון המנתח. לעקר את הבטן שלוש פעמים עם תמיסת betadine ו 70% אתנול לסירוגין. יש לתת סיכה לעיניים, ולכסות את החולדה עם רפש כירורגי סטרילי, משאיר את הבטן חשופה.
2. הכנה כירורגית והשתלה הטרוטופית של לב תורם היילוד בחולדה הנתרמת
- בצע לפרוטומיה בקו האמצע באמצעות אזמל 15 להבים לחתך העור, והשתמש במספריים כדי לפתוח את דופן הבטן הקדמית, ולאחר מכן חשיפה קהה של אבי העורקים הבטני retroperitoneal ו vena cava נחות (IVC) עם אפליקטורים קצה כותנה.
- גייסו את המעיים (כולל המעי הגס היורד), והניחו אותם לכיוון הרביע העליון הימני. מכסים את המעיים בגזה חמה ספוגה במי מלח. השתמש retractors כדי להבטיח חשיפה אופטימלית של IVC ואבי העורקים הבטן.
- בצע דיסקציה קהה של IVC אינפרא כלייתי ואבי העורקים הבטני כלפי מעלה לכיוון הביפורקציה. קשרו את כל העורקים והוורידים המסתעפים האינפרא-כליתיים (למשל, עורק מזנטרי תחתון ועורקי בלוטות הלימפה) בתפר ניילון 10-0.
הערה: קיימת שונות רבה באנטומיה של ענפים צדדיים אלה. נטר את הדופק והדופק של אבי העורקים באופן חזותי כאשר אין ניטור המודינמי אחר זמין. להעריך את עומק ההרדמה הנכון כל 15 דקות באמצעות בדיקת צביטת בוהן. התאימו את ריכוז האיזופלורן בהתאם. - לאחר שהלב התורם נקצר מחולדה ילודית, העבירו את הלב הנכרת בתנאים סטריליים באגן כירורגי המכיל חיץ קרבס-הנסלייט לשדה הניתוח. השקו את לב התורם לסירוגין בתמיסה קרדיופלגית קרה כקרח.
הערה: כאשר מנתח שני זמין, הלב צריך להיות מוכן באותו זמן, כמו מנתח שני מקטין את זמן ההרדמה הכולל של החיה המקבל ואת זמן איסכמיה של הלב התורם. כאשר מנתח שני אינו זמין, כסו את בטנו של המושתל במי מלח חמים, והשגיחו על בעל החיים במהלך הליך הקציר. - החל ארבעה מלחציים קטנים כלי דם א-טראומטיים על המקטעים הדיסטליים והפרוקסימליים של אבי העורקים האינפרא-כלייתי וה- IVC. במידת הצורך, יש לחסום באופן זמני כלי דם שלילי עם תפר משי 7-0, ולשחרר את התפר לאחר ההליך. מניחים תפר ניילון 10-0 אנכית על הקיר הקדמי של אבי העורקים כדי להקל על אבי העורקים. בצע אבי עורקים עם שני חתכים אופקיים קטנים (בצורת טריז) עם מספריים על ידי משיכה קלה למעלה את התפר.
הערה: כדי להסיר קרישי דם, מומלץ לשטוף את לומן אבי העורקים עם מי מלח heparinized. - הניחו את לב התורם בצד שמאל (מנקודת מבטו של בעל החיים) של אבי העורקים והדקו את אבי העורקים האינפרא-כלייתי של המקבל ואת אבי העורקים העולה של התורם מקצה לצד בעמדות 12 ו-6 של אבי העורקים עם תפרים. ממשיכים עם התפרים השלישי והרביעי בעמדות 3 ו-9, הופכים בעדינות את הלב לצד ימין של אבי העורקים לאחר התפר השלישי. השלם את האנסטומוזה העורקית על ידי הוספת תפר אחד או שניים לכל אינטרספייס.
הערה: יש להקפיד להימנע מלגעת באבי העורקים העולה של התורם או באבי העורקים הבטני של המקבל עם מלקחיים בעת יצירת האנסטומוזה כדי למנוע נזק לרקמות. - סובבו את החולדה נגד כיוון השעון, כשהראש פונה לכיוון ידו השמאלית של המנתח. העבר את אבי העורקים של התורם לצד שמאל של אבי העורקים הבטני כדי לאפשר ראייה אופטימלית על IVC.
- בצע venotomy על IVC, מעט פרוקסימלי אנסטומוזה אבי העורקים, באמצעות להב 11 לנקב ו microscissors להתאמת גודל הולם על פי קוטר של תא המטען הראתי של התורם. שוב, לשטוף את לומן intracaval עם מלוחים heparinized.
- התחל באנסטומוזה הוורידית בין ה- IVC של המקבל לבין גזע הריאה של התורם, אשר מושגת בצורה הטובה ביותר על ידי הנחת תפרי ניילון קטועים 11-0 על הקיר האחורי של כלי השיט, החל מעמדות השעה 12 ו- 6 (הקשורות ל- IVC), ולאחר מכן הנח תפר ניילון רציף 11-0 על הקיר הקדמי (משעה 6 לכיוון השעה 12).
- מכסים את האנסטומוזות ברצועות קטנות של ספוג ג'לטין נספג, ומסירים את מהדקי כלי הדם המתחילים בצורה דיסטלית. השתמשו באפליקטור קצה כותנה כדי לדחוס קלות את הספוגים לקבלת המוסטאזיס אופטימלי.
- שימו לב למילוי כלי הדם הכליליים של השתל בזמן שחרור המלחציים המיקרו-וסקולריים הדיסטליים, וודאו שהלב התורם מתחיל לפעום מיד עם שחרור המהדק הפרוקסימלי.
הערה: ניתן לדרג את כדאיות השתל מ-0 עד 4 תוך ניתוחית על פי ציון סטנפורד שונה19 כדי לאשר תפקוד השתל הולם. - החזירו את המעיים לבטן על ידי הקפדה שלא לעוות את האנסטומוזה העורקית והוורידית.
- יש לתת מלוקסיקאם (1 מ"ג/ק"ג) ואתיקה XR (0.65 מ"ג/ק"ג) באופן תת-עורי בזמן שהחיה מורדמת במלואה כדי לברר שיכוך כאבים לאחר הניתוח. לאחר מכן, סגור את דופן הבטן עם תפר ויקריל רציף נספג 5-0 לפני סגירת העור עם תפר ויקריל נספג 6-0 תוך עורית.
הערה: הנחיות לגבי כשלים נפוצים ופתרון בעיות מוצגות בטבלה 2.
3. קצירת לב תורם היילוד
- הניחו את החולדה התורמת היילודית בתא עם איזופלורן (2%) לצורך הרגעה. מתן קטמין (75 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (5 מ"ג/ק"ג), כמו גם הפרין (300 U/kg) תוך צפק.
- אשרו את עומק ההרדמה על ידי צביטת אצבע, והניחו את החולדה במצב שכיבה כשהזנב פונה אליכם. לעקר את כל בית החזה ואת דופן הבטן עם בטאדין ואתנול 70% שלוש פעמים לחילופין. כסו את החולדה בשפשוף כירורגי סטרילי.
- באמצעות מיקרוסקופ כירורגי 12.5x, הסר את כל דופן בית החזה הקדמי על ידי התחלה עם חתך אופקי באמצעות אזמל 15 להבים ב xyphoid ואחריו חתכים אנכיים לרוחב עד בית השחי משני הצדדים עם מספריים. לאחר מכן ניתן להסיר את דופן בית החזה הקדמי על ידי המשך חתך אופקי נוסף ממש מתחת לצוואר.
- לנתח את IVC, ימין ושמאל vena cavae, וכלי ריאה עם מספריים, ולאחר מכן להקיף ולקשור את כל כלי הדם עם תפר משי 7-0. יש לתת 3 מ"ל של תמיסת קרבס-הנסלייט קרה כקרח, עתירת אשלגן לאטריום הימני על ידי ניקוב IVC עם מחט 30 גרם ודחיפה קלה של הסרעפת כלפי מטה עם מלקחיים.
- חותכים את IVC, SVCs, כלי ריאה, אבי העורקים עם מספריים. העבר את עורקי הריאה רחוק ככל האפשר ואת אבי העורקים הדיסטלי לגזע הברכיוצפלי כדי להבטיח אורך תקין באמצעות אזמל 11 להבים.
- להפריד את תא המטען הריאתי ואת אבי העורקים עולה עם microscissors, ולשטוף את הלב עם פתרון cardioplegic קר כקרח באמצעות מזרק 3 מ"ל.
4. שחזור הנמען וניטור השתל
- לאחר הניתוח, תנו לחולדה מספיק זמן להתעורר, מה שקורה בדרך כלל בחלון זמן של 15 דקות, ותנו לה להתאושש על כרית חימום.
הערה: אין צורך באנטיביוטיקה בשל הסיכון הנמוך מאוד לזיהום וכדי לא לפגוע במודל הניסוי, ולא חלה הגבלה על מזון או מים. - לאחר ההשתלה, עקוב אחר תפקוד השתל על ידי מישוש הלב המושתל מדי יום, אך קח בחשבון שלפעמים זה יכול להיות קשה להערכה בגלל כיסוי המעי.
הערה: אקוקרדיוגרפיה בטנית יכולה למדוד בצורה מדויקת יותר את כדאיות השתל. עבור אקוקרדיוגרפיה, להרדים מעט את החולדה עם איזופלורן (1-2%) בשאיפה דרך חרוט האף, ולמקם אותו על כרית חימום. אקוקרדיוגרפיה מבוצעת בדרך כלל ביום שלאחר הניתוח (POD) 1, POD 7 ו- POD 14. כדי לאפשר הערכה של הדופק וההתכווצות, אפשר לקבל בקלות תצוגות של ציר ארוך וציר קצר (איור 2A, B). כדי להעריך את האנסטומוזות, השתמשו באקוקרדיוגרפיה של דופלר (איור 3A), ואשרו את היווצרות רקמת EFE כפי שהיא נראית כשכבה אנדוקרדיאלית בהירה בתוך חלל החדר השמאלי (איור 3B, C).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
כדאיות השתל והכאה
בעבודה זו, כדאיות השתל הוערכה חזותית לאחר שכל המהדקים הוסרו, והותר זמן זילוח משוער של 10-15 דקות עם בטן פתוחה לתצפית על השתל. אותה מערכת ניקוד לאימות אובייקטיבי של כדאיות השתל שימשה להערכה חזותית בסוף הניתוח ולאקוקרדיוגרפיה ב- POD 1, POD 7 ו- POD 14.
0 = אין תפקוד איבר; 1 = (מנוחה) תפקוד איברים, רק התכווצות מינימלית; 2 = תפקוד איברים חלש או חלקי; 3 = קצב התכווצות או עוצמה מופחתת, אך תפקוד איברים הומוגני; 4 = כיווץ אופטימלי של אטריום וחדר (120-160 פעימות לד...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
מודל חייתי זה של השתלה הטרוטופית של לב חולדה תורם יילוד לתוך בטנו של המקבל יוצר את האפשרות לחקור פיברוזיס שמקורו ב- EndMT באמצעות הערכה היסטולוגית מפורטת של רקמות, לזהות מסלולי איתות רגולטוריים ולבחון אפשרויות טיפול. מכיוון ש- EndMT הוא המנגנון הבסיסי למחלות פיברוטיות של הלב, למודל זה יש ערך רב בתחום ניתוחי לב ילדים ומעבר לו. במודל זה, גורמים רבים יכולים להשפיע לרעה על תוצאות ההליך. לפיכך, טיפול נכון ברקמה השברירית מאוד עקב חוסר בשלות הלב התורם, טיפול נכון בבעלי חיים במהלך ההרדמה ומיומנויות מיקרוכירורגיות ברמה גבוהה הן ד...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תודות
מחקר זה מומן על ידי מיזמים נוספים - Single Ventricle Research Fund (SVRF) ו-Single Ventricle Expansion Fund (ל-I.F.) ומלגת מריאטה בלאו של OeAD-GmbH מקרנות שסופקו על ידי המשרד הפדרלי האוסטרי לחינוך, מדע ומחקר BMBWFC (ל-G.G).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מערכת הנשמה מתקדמת למכרסמים, SAR-1000 | CWE, Inc. | 12-03100 | מאוורר לבעלי חיים קטנים |
| aSMA | Sigma | A2547 | נוגדן לאימונוהיסטוכימיה |
| Axio observer Z1 | מיקרוסקופ הפוך קרל זייס | ||
| Betadine פתרון | Avrio Health L.P. | ||
| CD31 | Invitrogen | MA1-80069 | נוגדן לאימונוהיסטוכימיה |
| DAPI | Invitrogen | D1306 | נוגדן לאימונוהיסטוכימיה |
| DemeLON ניילון שחור 10-0 | DemeTECH | NL76100065F0P | 10-0 תפר ניילון |
| ETFE IV קטטר, 18G x 2 | TERUMO | SURFLO SR-OX1851CA | צינורית אינטובציה |
| מיקרו קליפ 8 מ"מ | רובוז מכשיר כירורגי ושות' | RS-6471 | מהדקים מיקרו-וסקולריים |
| מונופילמנט שחור ניילון 11-0 | SURGICAL SPECIALTIES CORP | AA0130 | 11-0 ניילון |
| O.C.T. רקמה מורכבת-Tek | 4583 | מדיום הטבעה לדגימת רקמות קפואות | |
| p-SMAD2/3 | Invitrogen | PA5-110155 | נוגדן לאימונוהיסטוכימיה |
| מכרסם, מעמד עבודה הטיה | Hallowell EMC. | 000A3467 | מדף אלכסוני לתפרי משי אינטובציה |
| , לא נספגים, 7-0 | Braintree Scientific | NC9201231 | תפר משי |
| שבלול/חילזון | Abcam | ab180714 | נוגדן לאימונוהיסטוכימיה |
| Vicryl מצופה לא צבוע 5-0 P-3 18 " | Ethicon | J493G | 5-0 Vicryl |
| מצופה לא צבוע Vicryl 6-0 P-3 18" | Ethicon | J492G | 6-0 Vicryl |
| VE-Cadherin | Abcam | ab231227 | נוגדן לאימונוהיסטוכימיה |
| Zeiss OPMI 6-SFR | Zeiss | מיקרוסקופ כירורגי | |
| זן, מהדורה כחולה, 3.6 | Zen | תוכנת מיקרוסקופ הפוך |
מקורות
- Lurie, P. R. Changing concepts of endocardial fibroelastosis. Cardiology in the Young. 20 (2), 115-123 (2010).
- Crucean, A., et al. Re-evaluation of hypoplastic left heart syndrome from a developmental and morphological perspective. Orphanet Journal of Rare Diseases. 12 (1), 138(2017).
- Xu, X., et al. Endocardial fibroelastosis is caused by aberrant endothelial to mesenchymal transition. Circulation Research. 116 (5), 857-866 (2015).
- Eisenberg, L. M., Markwald, R. R. Molecular regulation of atrioventricular valvuloseptal morphogenesis. Circulation Research. 77 (1), 1-6 (1995).
- Illigens, B. M., et al. Vascular endothelial growth factor prevents endothelial-to-mesenchymal transition in hypertrophy. Annals of Thoracic Surgery. 104 (3), 932-939 (2017).
- Zeisberg, E. M., Potenta, S. E., Sugimoto, H., Zeisberg, M., Kalluri, R. Fibroblasts in kidney fibrosis emerge via endothelial-to-mesenchymal transition. Journal of the American Society of Nephrology. 19 (12), 2282-2287 (2008).
- Zeisberg, E. M., Potenta, S., Xie, L., Zeisberg, M., Kalluri, R. Discovery of endothelial to mesenchymal transition as a source for carcinoma-associated fibroblasts. Cancer Research. 67 (21), 10123-10128 (2007).
- Souilhol, C., Harmsen, M. C., Evans, P. C., Krenning, G. Endothelial-mesenchymal transition in atherosclerosis. Cardiovascular Research. 114 (4), 565-577 (2018).
- Zeisberg, E. M., et al. Endothelial-to-mesenchymal transition contributes to cardiac fibrosis. Nature Medicine. 13 (8), 952-961 (2007).
- Rieder, F., et al. Inflammation-induced endothelial-to-mesenchymal transition: A novel mechanism of intestinal fibrosis. American Journal of Pathology. 179 (5), 2660-2673 (2011).
- Johnson, F. R. Anoxia as a cause of endocardial fibroelastosis in infancy. AMA Archives of Pathology. 54 (3), 237-247 (1952).
- Shimada, S., et al. Distention of the immature left ventricle triggers development of endocardial fibroelastosis: An animal model of endocardial fibroelastosis introducing morphopathological features of evolving fetal hypoplastic left heart syndrome. Biomedical Research. 2015, 462-469 (2015).
- Weixler, V., et al. Flow disturbances and the development of endocardial fibroelastosis. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 159 (2), 637-646 (2020).
- Purevjav, E., et al. Nebulette mutations are associated with dilated cardiomyopathy and endocardial fibroelastosis. Journal of the American College of Cardiology. 56 (18), 1493-1502 (2010).
- Friehs, I., et al. An animal model of endocardial fibroelastosis. Journal of Surgical Research. 182 (1), 94-100 (2013).
- Emani, S. M., et al. Staged left ventricular recruitment after single-ventricle palliation in patients with borderline left heart hypoplasia. Journal of the American College of Cardiology. 60 (19), 1966-1974 (2012).
- Hickey, E. J., et al. Critical left ventricular outflow tract obstruction: The disproportionate impact of biventricular repair in borderline cases. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 134 (6), 1429-1436 (2007).
- Oh, N. A., et al. Abnormal flow conditions promote endocardial fibroelastosis via endothelial-to-mesenchymal transition, which is responsive to losartan treatment. JACC: Basic to Translational Science. 6 (12), 984-999 (2021).
- Blanchard, J. M., Pollak, R. Techniques for perfusion and storage of heterotopic heart transplants in mice. Microsurgery. 6 (3), 169-174 (1985).
- Kokudo, T., et al. Snail is required for TGFbeta-induced endothelial-mesenchymal transition of embryonic stem cell-derived endothelial cells. Journal of Cell Science. 121 (20), 3317-3324 (2008).
- Wu, B., et al. Endocardial cells form the coronary arteries by angiogenesis through myocardial-endocardial VEGF signaling. Cell. 151 (5), 1083-1096 (2012).
- Clark, E. S., et al. A mouse model of endocardial fibroelastosis. Cardiovascular Pathology. 24 (6), 388-394 (2015).
- Kovacic, J. C., et al. Endothelial to mesenchymal transition in cardiovascular disease: JACC state-of-the-art review. Journal of the American College of Cardiology. 73 (2), 190-209 (2019).
- Derynck, R., Zhang, Y. E. Smad-dependent and Smad-independent pathways in TGF-beta family signalling. Nature. 425 (6958), 577-584 (2003).
- Daugherty, A., et al. Recommendation on design, execution, and reporting of animal atherosclerosis studies: A scientific statement from the American Heart Association. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (9), e131-e157 (2017).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
