הפרוטוקול מתאר שיטה להתערבות טווינה במודל ארנב של דלקת מפרקים ניוונית בברך.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
* These authors contributed equally
הפרוטוקול מתאר שיטה להתערבות טווינה במודל ארנב של דלקת מפרקים ניוונית בברך.
דלקת מפרקים ניוונית בברך (KOA) מאופיינת בעיקר בשינויים ניווניים בסחוס של מפרק הברך וברקמות הרכות שמסביב. יעילותה של טווינה בטיפול ב- KOA אושרה, אך יש לחקור את המנגנון הבסיסי. מחקר זה נועד לבסס מודל ארנב KOA אפשרי מבחינה מדעית שטופל בטווינה כדי לחשוף את המנגנונים העומדים בבסיסו. לשם כך, 18, ארנבים ניו זילנדים זכרים בני 6 חודשים חולקו באופן אקראי לקבוצות דמה, מודל וטווינה, עם 6 ארנבים בכל קבוצה. מודל KOA הוקם על ידי הזרקת תמיסת פפאין 4% לחלל מפרק הברך. קבוצת טווינה התערבה עם טווינה בשילוב עם שיטת תיקון סיבובי מפרק הברך במשך 4 שבועות. רק האחיזה והקיבוע הסטנדרטיים בוצעו בקבוצות דמה ומודל. בתום ההתערבות בת השבוע, נצפה טווח התנועה של מפרק הברך (ROM), ובוצע צביעת סחוס המטוקסילין-אאוסין (HE). המחקר מראה כי Tuina יכול לעכב אפופטוזיס chondrocyte, לתקן רקמת סחוס, ולשחזר ROM מפרק הברך. לסיכום, מחקר זה מדגים את ההיתכנות המדעית של טיפול Tuina עבור ארנבים מודל KOA, תוך הדגשת היישום הפוטנציאלי שלו במחקר של KOA ומצבים דומים הקשורים למפרקי הברך.
דלקת מפרקים ניוונית בברך (KOA) היא מחלה ניוונית של מפרק הברך, המתבטאת בעיקר בכאבי ברכיים, נפיחות, עיוותים ותנועה מוגבלת, עם שיעור נכות גבוה ושכיחות גבוהה יותר בנשים, עם 527.81 מיליון חולים עם דלקת מפרקים ניוונית ברחבי העולם בשנת 2019 ושכיחותה העולמית מהווה 60.6% מכלל השכיחות העולמית של OA1. מבחינה קלינית, הטיפול ב- KOA מחולק בדרך כלל לטיפולים לא כירורגיים וכירורגיים. טיפולים לא כירורגיים כוללים פיזיותרפיה, טיפול תרופתי והזרקת פלזמה עשירה בטסיות דם 2,3. טווינא היא שיטת טיפול נפוצה, בטוחה, אמינה ויעילה ברפואה הסינית. מחקר זה משתמש בטווינה בשילוב עם שיטת תיקון סיבובי מפרק הברך לטיפול ב- KOA. טכניקות טווינא כגון שיטת הלישה והלחיצה הסיבובית יכולות לאזן את רקמת השריר, להפחית כאב, להתאים את רמות הגורמים הדלקתיים, לשפר את חילוף החומרים ברקמות ולעכב ניוון סחוס מפרקי 4,5. שיטת התיקון הסיבובי של מפרק הברך יכולה להתאים את יישור עצמות הגפיים התחתונות והמפרקים, לשפר את מרווח מפרק הברך, להחזיר את קו הכוח הרגיל ולאזן את הביומכניקה של הגפיים התחתונות 6,7,8,9. תרגילי התנגדות יכולים לשפר את מסת השריר ואת כוחו ולקדם את חידוש רקמת הסחוס10,11. מחקר ראשוני מצא כי פרוטוקול Tuina זה יעיל משמעותית יותר מכמוסות גלוקוזאמין סולפט פומיות בטיפול ב- KOA, עם תחילת פעולה מהירה יותר ועיכוב משמעותי של ניוון כונדרוציטים ותיקון רקמת סחוס פגועה12. בטיפול ב- KOA, בהשוואה לטיפול בטווינה, לתרופות נוגדות דלקת שאינן סטרואידים יש תופעות לוואי ויעילות לא מספקת לטווח ארוך, סיכונים ועלויות ניתוחיות גבוהות יחסית, ודורשות אינדיקציות מסוימות לטיפול כירורגי, עם בעיות לאחר הניתוח וסיבוכים פריפרוסתטיים13,14,15. בהשוואה לטיפול תרופתי וניתוח, טיפול Tuina עבור KOA מציע מספר יתרונות, כולל תופעות לוואי מופחתות, סיכון נמוך יותר, בטיחות משופרת, חסכוניות ויעילות לאורך זמן. בנוסף, הוא יכול להקל ביעילות על כאבי מפרקי ברכיים, נפיחות, קפיצות ותנועה מוגבלת 6,13,16,17.
עם זאת, יש להבהיר את המנגנון של Tuina לטיפול ב- KOA, המגביל את השיפור והשלמות של פרוטוקול הטיפול ב- KOA. לכן, לימוד מנגנון התערבות טווינה ב- KOA באמצעות ניסויים בבעלי חיים היא שיטה יעילה. לארנבים, בהשוואה לחולדות, יש מזג צייתני ומפרקי ברכיים גדולים יותר. המבנה האנטומי והאינדקסים הביוכימיים של הסחוס דומים לאלה של בני אדם, ולכן זהו נושא מתאים לחקר המנגנון של מחלת מפרקי הברך על ידי Tuina18. מודל KOA שהוקם על ידי הזרקת פפאין לחלל מפרק הברך של ארנבים יש את היתרונות של זמן דוגמנות קצר, טראומה מופחתת, שיעור הצלחה גבוה, שיעור הישרדות גבוה, ומנגנון פתולוגי דומה KOA19. מחקר זה נועד לבסס פרוטוקול ניסויי בבעלי חיים אפשרי מבחינה מדעית להתערבות Tuina ב- KOA ולחקור את המנגנון של Tuina.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחקר אושר על ידי ועדת האתיקה של בית החולים המסונף של אוניברסיטת שאנדונג לרפואה סינית מסורתית (מספר אישור: 2020-29).
1. חיות ניסוי
2. שיטת קיבוץ
3. ביסוס מודל KOA
4. מניפולציה Tuina
5. מדידת ROM של מפרק הברך
הערה: לפני המדידה, הרגיעו את הארנב. סטטיסטיקאי המדידה ומפעיל המדידה שונים זה מזה.
6. צביעת Hematoxylin-eosin (HE)
7. ניתוח נתונים
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מידת ההגבלה בתנועת הברך והנזק לרקמת הסחוס משקפת את חומרת ה-KOA. הרום של מפרק הברך משקף את מידת ההגבלה של תנועת מפרק הברך. ככל שהרום של מפרק הברך קטן יותר, כך המגבלה בתנועת מפרק הברך חמורה יותר. להיפך, ככל שהרום של מפרק הברך גדול יותר, כך מידת תנועת הברך תקינה יותר. צביעת HE כדי לבחון את המורפולוגיה והמבנה של רקמת הסחוס משקפת את מידת הנזק לרקמת הסחוס. ככל שפני השטח של רקמת הסחוס לא סדירים יותר, קיומם של סדקים ופגמים גבוה יותר, ככל שמספר הכונדרוציטים נמוך יותר, עובי שכבת הסחוס דק יותר, סידור התאים לא מסודר יותר, פיזור התאי...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תכנון פרוטוקול הניסוי חשוב במיוחד כדי לחקור את המנגנון של טווינה בטיפול ב- KOA. דוגמנות KOA בוצעה על ארנבים על ידי הזרקת פפאין בוואישיאן. Waixiyan ממוקם בקריפטה הצידית של הרצועה הפטלרית, שקל לאתר, והחלל המשותף בין עצם הירך לטיביה גדול כאן במהלך כיפוף הברך, מה שמקל על הזרקה לחלל מפרק הברך ומונע נזק לרקמות הסובבות, כך שקל להקים את מודל KOA34. במהלך התערבות טווינה בארנבי KOA, ארנבי המודל הוצבו כראוי כדי להקל על ניהול טווינה. הארנבים הוכנסו לקופסת קיבוע הארנבים בצד הבריא שלהם, כשראשם קבוע, ורגשותיהם נ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים פוטנציאליים.
עבודה זו נתמכה על ידי פרויקט המדע והטכנולוגיה של הרפואה הסינית המסורתית במחוז שאנדונג (2021Q080) ופרויקט הירושה של בית הספר האקדמי לרפואה סינית מסורתית של בית הספר לרפואה סינית מסורתית [Lu-Wei-Letter (2022) 93].
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 0.9% הזרקת נתרן כלורי | סצ'ואן קרן פרמצבטיקה ושות' | Z22121903-20 | |
| ° מקרר C | Haier | BD-328WL | |
| 4% תמיסת קיבוע | Solarbio | P1110 | |
| 4° מקרר C | Haier | SC-315DS | |
| אתנול נטול מים | סינופארם | ||
| מכונת הסרת רקמות אוטומטית | Dakowei (Shenzhen) ציוד רפואי ושות' | HP30 | |
| פיצוץ | שנחאי Yiheng Scientific Instruments Co. | DHG-9070A | |
| Coverslip | Biyuntian | FCGF50 | |
| אמבט מים תרמוסטט חשמלי | שנחאי Yiheng Scientific Instruments Co. | HWS-26 | |
| הטמעת שולחן הקפאה | Changzhou Paishijie ציוד רפואי ושות ' | BM450 | |
| מכונת הטמעה | Changzhou Paishijie ציוד רפואי ושות ' | BM450A | |
| תמיסת הסרת אבדן של חומצה אתילנדיאמינטטראצטית | Servicebio | G1105-500ML | |
| מיקרוסקופ הפוך פלואורסצנטי | Leica Leica | DM IL LED | |
| ערכת צביעה המטוקסילין-אאוזין | Cisco Jet | EE0012 | |
| חומצה הידרוכלורית | אזור פיתוח כלכלי וטכנולוגי Laiyang מפעל | ||
| גוניומטר משותף רפואי | KOSLO | ||
| מסטיק ניטרלי | Cisco Jet | EE0013 | |
| ארנב ניו זילנדי זכר בדרגה רגילה | מרכז גידול וגידול ג'ינאן Xilingjiao | SCXK (Lu) 2020 0004 | |
| פפאין (3000 U/mg) | Bioss | D10366 | |
| מכשיר הלבנה וייבוש רקמות פתולוגי | Changzhou Paishijie ציוד רפואי ושות'. | PH60 | |
| קוצץ חשמלי לחיות מחמד | Codos | CP-3180 | |
| תיבת תיקון ארנב | כל מותג | ||
| פורס מסתובב | Leica | 531CM-Y43 | |
| מכשיר קביעת פרמטרים טכניקת Tuina | שנחאי DuKang Instrument Equipment Co. Ltd. | ZTC-![]() | |
| Ventilator | TALY ELECTRIC | C32 | |
| קסילן | פויו ריאגנט |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.