פרוטוקול זה מתאר תהליך פשוט המשתמש במיקרו-תבניות פלסטיק נוחות לפעולות מיקרו-הבלטה פשוטות לייצור מיקרו-ערוצים על נייר תאית ננו-פיברילציה, להשגת רוחב מינימלי של 200 מיקרומטר.
Method Article
פרוטוקול זה מתאר תהליך פשוט המשתמש במיקרו-תבניות פלסטיק נוחות לפעולות מיקרו-הבלטה פשוטות לייצור מיקרו-ערוצים על נייר תאית ננו-פיברילציה, להשגת רוחב מינימלי של 200 מיקרומטר.
ננו-נייר, המופק מתאית ננו-פיברילציה, עורר עניין רב כחומר מבטיח ליישומים מיקרופלואידים. המשיכה שלו טמונה במגוון תכונות מצוינות, כולל משטח חלק במיוחד, שקיפות אופטית יוצאת דופן, מטריצת ננו-סיבים אחידה עם נקבוביות ננומטרית ותכונות כימיות הניתנות להתאמה אישית. למרות הצמיחה המהירה של מיקרופלואידיקה מבוססת ננו-נייר, הטכניקות הנוכחיות המשמשות ליצירת מיקרו-ערוצים על ננו-נייר, כגון הדפסה תלת-ממדית, ציפוי ריסוס או חיתוך והרכבה ידניים, שהן חיוניות ליישומים מעשיים, עדיין בעלות מגבלות מסוימות, בעיקר רגישות לזיהום. יתר על כן, שיטות אלה מוגבלות לייצור ערוצים בגודל מילימטרי. מחקר זה מציג תהליך פשוט המשתמש במיקרו-תבניות פלסטיק נוחות לפעולות מיקרו-הבלטה פשוטות כדי לייצר מיקרו-ערוצים על ננו-נייר, ולהשיג רוחב מינימלי של 200 מיקרומטר. המיקרו-ערוץ שפותח עולה בביצועיו על גישות קיימות, ומשיג שיפור של פי ארבעה, וניתן לייצר אותו תוך 45 דקות. יתר על כן, פרמטרי הייצור עברו אופטימיזציה, וטבלת עיון מהירה נוחה מסופקת עבור מפתחי יישומים. הודגמה הוכחת היתכנות עבור מערבל למינרי, מחולל טיפות והתקנים אנליטיים פונקציונליים מבוססי ננו-נייר (NanoPADs) המיועדים לחישת רודאמין B באמצעות ספקטרוסקופיית ראמאן משופרת בפני השטח. ראוי לציין כי ה- NanoPADs הציגו ביצועים יוצאי דופן עם מגבלות זיהוי משופרות. ניתן לייחס תוצאות יוצאות דופן אלה לתכונות האופטיות המעולות של ננו-נייר ולשיטת המיקרו-הבלטה המדויקת שפותחה לאחרונה, המאפשרת אינטגרציה וכוונון עדין של ה-NanoPADs.
לאחרונה, נייר תאית ננו-פיברילציה (NFC) (ננו-נייר) התגלה כחומר מצע מבטיח ביותר עבור יישומים שונים כגון אלקטרוניקה גמישה, התקני אנרגיה וביו-רפואיים 1,2,3,4. ננו-נייר, המופק מצמחים טבעיים, הוא חסכוני, תואם ביולוגית ומתכלה, מה שהופך אותו לחלופה מושכת לנייר תאית מסורתי 5,6. תכונותיו יוצאות הדופן כוללות משטח חלק במיוחד עם חספוס פני שטח של פחות מ-25 ננומטר ומבנה מטריצת תאית צפופה, המאפשר יצירת ננו-מבנים בעלי מבנה גבוה7. קבוצות הידרוקסיל שופעות של ננו-נייר תורמות למבנה הננוצלולוז הקומפקטי והצפוף שלו8. ננו-נייר מציג שקיפות אופטית מעולה ואובך אופטי מינימלי, מה שהופך אותו מתאים היטב לחיישנים אופטיים. בנוסף, ההידרופיליות הטבועה בו מאפשרת זרימה ללא משאבה, אפילו עם המבנה העבה שלו, ומספקת תנועת נוזל אוטונומית 9,10. לננוצלולוז יישומים מגוונים בחיישנים ביולוגיים, התקנים אלקטרוניים מוליכים, פלטפורמות תרביות תאים, קבלי-על, סוללות ועוד, ומציג את הרבגוניות והפוטנציאל שלו11,12. בפרט, ננוצלולוז מבטיח עבור התקנים מיקרופלואידים אנליטיים מבוססי נייר (μPADs), ומציע יתרונות ייחודיים על פני נייר כרומטוגרפיה קונבנציונאלי.
בעשור האחרון, μPADs השיגו תשומת לב משמעותית בשל המחיר הזול שלהם, תאימות ביולוגית, פעולה ללא משאבה, וקלות הייצור 13,14. מכשירים אלה התגלו ככלי אבחון יעיל של נקודת טיפול, במיוחד בהגדרות מוגבלות במשאבים15,16,17. התקדמות משמעותית בתחום זה הייתה פיתוח הדפסת שעווה, שפותחה על ידי ג'ורג' וייטסיידס18 וקבוצת בינגצ'נג לין19, שאפשרה יצירת μPADs פונקציונליים על ידי שילוב מיקרו-ערוצים על נייר כרומטוגרפי. לאחר מכן, μPADs התפתחו במהירות, וטכניקות ביו-חישה שונות, כולל שיטות אלקטרוכימיות 20, כימילומינסנציה 21, ובדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזימים (ELISA)22,23,24, יושמו בהצלחה לזיהוי סמנים ביולוגיים מגוונים כגון חלבונים 25,26, DNA 27,28, RNA 29,30, ו אקסוזומים31. למרות הישגים אלה, μPADs עדיין מתמודדים עם אתגרים, כולל מהירויות זרימה איטיות ואידוי ממס.
מספר שיטות הוצעו ליצירת מיקרו-ערוצים על ננו-נייר32,33,34. גישה אחת כוללת הדפסה תלת ממדית של מרכיבים המקריבים לתוך החומר, אך היא דורשת ציפוי הידרופובי המגביל את פעולתו ללא משאבה33. טכניקה נוספת כוללת ערימה ידנית של שכבות תעלה בין יריעות ננו-נייר באמצעות דבק, שהוא עתיר עבודה32. לחלופין, ציפוי סיבי ננוצלולוז בהתזה על תבניות מעוצבות מראש יכול ליצור מיקרו-ערוצים, אך הוא כרוך בהכנת עובש יקרה וגוזלת זמן34. יש לציין כי שיטות אלה מוגבלות למיקרו-ערוצים בקנה מידה מילימטרי, מה שפוגע ביתרונות של התקנים מיקרופלואידים בכל הנוגע לצריכת נפח ריאגנטים ואינטגרציה. פיתוח תהליך פשוט של תבניות מיקרו-ערוצים ננו-נייר ברזולוציה בקנה מידה מיקרומטרי נותר אתגר.
מחקר זה מציג שיטת דפוס מיקרו-ערוצית ייחודית של ננו-נייר המבוססת על מיקרו-הבלטה מעשית. הגישה מציעה מספר יתרונות על פני השיטות הקיימות, שכן היא אינה דורשת ציוד יקר או מיוחד, היא פשוטה, חסכונית ומדויקת ביותר. תבנית מיקרו-ערוצית קמורה מיוצרת על ידי חיתוך בלייזר של סרט פוליטטרה-פלואוראתילן (PTFE), הידוע באינרציה הכימית שלו ובתכונות הנון-סטיק שלו. תבנית זו משמשת לאחר מכן להבלטת מיקרו-ערוצים על קרום ג'ל ננו-נייר. שכבה שנייה של ג'ל ננו-נייר נמרחת על גבי כדי ליצור תעלות חלולות סגורות. באמצעות טכניקת דפוס זו, מפתחים התקנים מיקרופלואידים בסיסיים על ננו-נייר, כולל מערבל למינרי ומחולל טיפות. בנוסף, מודגם ייצור של מיקרוסקופ ראמאן משופר בפני השטח (SERS) NanoPADs. יצירה באתרו של מצע SERS מבוסס ננו-חלקיקי כסף מושגת על ידי החדרת שני ריאגנטים כימיים (AgNO3 ו- NaBH4) לתעלות, וכתוצאה מכך ביצועים יוצאי דופן עם גבולות גילוי נמוכים (LODs).
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
1. תהליך מיקרו-הבלטה לתבניות מיקרו-ערוציות על ננו-נייר
2. בניית התקנים מיקרופלואידים בסיסיים

3. גידול AgNP באתרו

4. מדידת SERS
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
שיטה ייחודית ליצירת תבניות מיקרו-ערוצים על גבי ננו-נייר פותחה תוך שימוש במיקרו-תבניות פלסטיק מעשיות באמצעות טכניקת מיקרו-הבלטה נוחה. יש לציין כי שיטה זו משיגה תבניות מיקרו-ערוציות בקנה מידה קטן כמו 200 מיקרומטר, המייצג שיפור של פי ארבעה בהשוואה לשיטות קיימות32,33,34. לאחר כוונון עדין של פרמטרי התבניות, ההנחיות שסופקו מציגות חזרתיות מצוינת בתהליך הייצור, המאופיין בסטיות תקן מינימליות. השונות הגבוהה ביותר שנצפתה ברוחב היא רק 2.5%,...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
המוקד העיקרי של מחקר זה הוא לפתח שיטה פשוטה לייצור מיקרו-ערוצים על ננו-נייר. טכניקת הבלטה יעילה פותחה תוך שימוש ב-PTFE כתבנית להתמודדות עם אתגר זה12. על ידי אופטימיזציה של הטמפרטורה ולחץ ההבלטה, נערכה סדרה של ניסויים כדי לבסס תהליך ייצור אמין עבור NanoPADs. בנוסף, הודגם שימוש בטבלת ייחוס מהיר להתאמת היישומים של NanoPADs בתחומים שונים. למרות ששיטה זו יעילה ויציבה, נתקלו בכמה אתגרים. בתחילה, מתכות שימשו כתבניות בשל חלקותן, אך התעוררו קשיים בהסרתן מג'ל ננו-נייר דביק. בסופו של דבר, PTFE נבחר בשל תכונו...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
למחברים אין מה לחשוף.
המחברים מודים על התמיכה הכספית מהתוכניות של הקרן למדעי הטבע של ג'יאנגסו להשכלה גבוהה (22KJB460033), ותוכנית המדע והטכנולוגיה של ג'יאנגסו - חוקר צעיר (BK20200251). עבודה זו נתמכת חלקית גם על ידי מרכז המחקר של אוניברסיטת XJTLU AI, מרכז המחקר ההנדסי של מחוז ג'יאנגסו למדעי הנתונים והחישוב הקוגניטיבי ב- XJTLU ופלטפורמת החדשנות SIP AI (YZCXPT2022103). התמיכה של מעבדת המפתח הממלכתית להנדסת מערכות ייצור באמצעות הפרויקט הפתוח (SKLMS2023019) ומעבדת המפתח להנדסה ביונית, משרד החינוך, מוכרת גם היא.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| AgNO3 | Hushi (שנגחאי, סין) | 7761-88-8 | >99% |
| אתנול | Hushi (שנגחאי, סין) | 64-17-5 | >99% |
| Hexadecane | Macklin (שנגחאי, סין) | 544-76-3 | >99% |
| LabSpec software | Horiba (יפן) | LabSpec5 | |
| מלמין | מקלין (שנגחאי, סין) | 108-78-1 | >99% |
| NaBH4 | Aladdin (שנחאי, סין) | 16940-66-2 | >99% |
| תוכנת מעבדת מקור | OriginLab (ארה"ב) | ||
| פוליאתילן טרפתלט (PET) | מאיירס תעשיות (אקרון, ארה"ב) | ||
| סרטי פוליטטרפלואורואתילן | שנזן Huashenglong חומר פלסטי ושות', בע"מ (שנזן, סין) | סרט טפלון | |
| PVDF מסנן קרום | EMD Millipore Corporation (ארה"ב)VVLP04700 | גודל נקבוביות: 0.1 μ m | |
| ספקטרומטר ראמאן | Horiba (יפן) | Xplo RA | |
| Rhodamine B | Macklin (שנחאי, סין) | 81-88-9 | >95% |
| מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM) | FEI (ארה"ב) | Scios 2 HiVac | |
| פרוסת סיליקון | Horiba (יפן) | קוטר: 5 מ"מ | |
| תמיסת NFC מחומצנת TEMPO | אוניברסיטת טיאנג'ין למדע וטכנולוגיה | 1.0% משקל מוצק, רמת קרבוקסילט 2.0 ממול/גרם מוצק, קוטר ננו-סיבים ממוצע: 10 ננומטר |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission