פרוטוקול זה מספק מודל עכברי של סרטן המעי הגס הקשור לקולופרוקטיטיס כיבית המושרה על ידי אזומתאן בשילוב עם דקסטרן סולפט נתרן. המודל שימש להערכת היעילות של תרכובות הרפואה הסינית המסורתית במניעה וטיפול בסרטן המעי הגס.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
ביסוס מודל סרטן קולופרוקטיטיס בעכברים והערכת ההשפעה הטיפולית של הרפואה הסינית
במאמר זה
סיכום
תקציר
סרטן המעי הגס והחלחולת (CRC) הוא ממאירות נפוצה של מערכת העיכול והפך לממאירות השלישית בשכיחותה בעולם ולגורם השני בשכיחותו למוות הקשור לממאירות. קולופרוקטיטיס כיבית (UC) היא נגע טרום סרטני, ו- CRC הקשור ל- UC (UC-CRC) הוא תת-הסוג הנפוץ ביותר של CRC. לכן, מודל UC-CRC סביר הוא אבן הפינה והערובה לפיתוח תרופות חדשות. הרפואה הסינית המסורתית (TCM) נמצאת בשימוש נרחב בטיפול ב- UC-CRC בשל יעילותה הטובה. כמרשם טוניק קלאסי של TCM, מרתח Liujunzi (LJZD) כבר בשימוש נרחב בטיפול UC-CRC. במחקר זה, מודל UC-CRC הוקם על ידי שילוב של אזומתאן ודאקסטרן סולפט נתרן, וניתן LJZD. הנתונים אישרו כי LJZD יכול לעכב ביעילות מעבר סרטן ב- UC-CRC באמצעות משקל גוף עכבר, אורך המעי הגס, גורמים פתולוגיים ודלקתיים, תפקוד מחסום המעי הגס וסמנים סרטניים. פרוטוקול זה מספק מערכת להערכת היעילות של TCM במניעה וטיפול ב- UC-CRC.
מבוא
סרטן המעי הגס והחלחולת (CRC) הוא ממאירות נפוצה במערכת העיכול, הממאירות השלישית בשכיחותה והשנייה בשכיחותה בעולם, המהווה 10% מהיארעות הסרטן העולמית ו-9.4% מכלל מקרי המוות הקשורים לסרטן 1,2. גורמים גנטיים, דלקת כרונית, תזונה עתירת שומן, סוכרת ופלורת מעיים חריגה הם גורמי סיכון ל-CRC 3,4. ביניהם, מחלות מעי דלקתיות, במיוחד קולופרוקטיטיס כיבית (UC), היא גורם סיכון ברור ל- CRC 5,6. CRC (UC-CRC) הוא תהליך מעבר של דלקת, היפרפלזיה לא טיפוסית וסרטן המבוסס על דלקת כרונית של המעי הגס, השונה ממודל התפתחות אדנ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
הליך בעלי החיים אושר על ידי ועדת האתיקה של אוניברסיטת צ'אנגצ'ון לרפואה סינית (מספר שיא: 2021214). עכברי C57BL/6J ספציפיים נטולי פתוגן (8-10 שבועות, משקל 18-22 גרם), זכר ונקבה, שוכנו בכלובים מאווררים באופן עצמאי בטמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס ולחות יחסית של 65%. העכברים החלו את הניסוי לאחר 7 ד' של הזנה אדפטיבית, שבמהלכה הייתה להם גישה חופשית למים ולתזונה.
1. הכנת סמים
- הכנת LJZD
הערה: התרופה הסינית שבה נעשה שימוש נרכשה מבית החולים המסונף של אוניברסיטת צ'אנג-צ'ון לרפואה סינית וזוהתה כרפואה סינית מקורית (ראה טבלה 1).- שים Dangshen (12 גרם), Baizhu (12 גרם), Gancao (6 גרם), Chenpi (12 גרם), Jian....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
המרתח של LJZD הוכן לפי יחס הרכב התרופות בטבלה 1 ושיטת המרתח של TCM באיור 1A. לפי נקודת הזמן המצוינת באיור 1B, עכברים קיבלו הזרקה תוך-צפקית של 1 מ"ג/מ"ל AOMביום השביעי, ולעכברים ניתנה גישה חופשית למי שתייה המכילים 2% DSSבשבועות השלישי, השישי והתשיעי. מודל העכבר UC-CRC הוקם בהצלחה בשבוע ה-15. בינתיים, עכברים טופלו ב- LJZD על ידי gavage משבוע 7 עד שבוע 15. הנתונים הראו כי בהשוואה לקבוצת הביקורת.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
CRC הוא אחד מסוגי הסרטן הנפוצים ביותר בעולם, עם כ-1,148,000 מקרים חדשים ויותר מ-576,000 מקרי מוות מדי שנה. CRC ניתן לחלק לשלושה סוגים על פי סיבות שונות, כולל תורשתי, ספורדי UC-CRC31. שכיחות CRC בחולים עם מחלות מעי דלקתיות כגון UC גבוהה משמעותית מזו שבאוכלוסייה הכללית. UC מגרה את התפתחות CRC באמצעות מסלול סרטן דלקתי, אשר שונה ממסלול אדנוקרצינומה טיפוסי6. נכון לעכשיו, הגורם UC-CRC אינו ידוע, נגרם בעיקר על ידי דלקת כרונית חוזרת לטווח ארוך, עם שיעור תמותה של עד 60%
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין מה לחשוף.
תודות
עבודה זו נתמכה על ידי מחלקת המדע והטכנולוגיה של מחוז ג'ילין (YDZJ202201ZYTS181).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| Azoxymethane | Sigma | A5486 | |
| 5-חומצה סליצילית אמינו | Kuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd | 3819413 | |
| C57BL / 6J עכברים | Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd | NO 210726210100853716 | |
| כיסוי להחליק | ג'יאנגסו Shitai ציוד ניסיוני ושות', בע"מ | 10212432C | |
| צבע DAB ערכת פיתוח | ג'יאנגסו שיטאי ציוד ניסיוני ושות', בע"מ | 2005289 | |
| מכונת התייבשות | ווהאן Junjie אלקטרוניקה ושות', בע"מ | JJ-12J | |
| Dextran סולפט נתרן | Dalian Meilun ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ | MB5535 | |
| מכונת הטבעה | ווהאן Junjie אלקטרוניקה ושות', בע"מ | JB-P5 | |
| Hematoxylin-eosin צבע | ווהאן מאה תואר ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ | B1000 | |
| IL-6 | ג'יאנגסו Meimian תעשייתי ושות', בע"מ | MM-0163M2 | |
| Isoflurane | RWD מדעי החיים ושות', בע"מ | R510-22-10 | |
| KI67 נוגדן ראשוני | גוגל ביוטכנולוגיה בע" | GB121141 | |
| מסטיק ניטרלי | ווהאן מאה מעלות ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ | 10004160 | |
| שקופית אובייקט | ג'יאנגסו שיטאי ציוד ניסיוני ושות', בע"מ | 10212432A | |
| נוגדן ראשוני אוקלודין | Affnity | DF7504 | |
| מיקרוסקופ אופטי אורתוסטטי | Nikon Nikon Eclipse CI | ||
| מיקרוטום פתולוגי | שנחאי Leica Instrument Co., Ltd | RM2016 | |
| ZO-1 נוגדן ראשוני | Abcam | ab221547 |
מקורות
- Sung, H., et al. Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 Cancers in 185 Countries. CA Cancer J Clin. 71 (3), 209-249 (2021).
- Tsai, K. Y., et al.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
