ניתוח טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת של הברך בשרקנים מזדקנים של Dunkin-Hartley לאחר הזרקה תוך מפרקית

סיכום

שרקנים דנקין-הארטלי הם מודל מבוסס של בעלי חיים לחקר דלקת מפרקים ניוונית. מחקרים כאלה עשויים להפיק תועלת מהזרקות תוך מפרקיות מסיבות שונות, כולל חקירת חומרים חדשים או טיפול במחלות. אנו מתארים מתודולוגיה להזרקות ברך תוך מפרקיות בשרקנים ולאחר מכן ניתוח טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת להערכת שינויים בברכיים הקשורים לדלקת פרקים.

תקציר

מטרת פרוטוקול זה היא להנחות חוקרים בביצוע טכניקה מונחית מישוש של הזרקת ברך תוך מפרקית בשרקנים והערכה באמצעות טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת. שרקנים דנקין-הארטלי הם מודלים חזקים לחקר דלקת מפרקים ניוונית מכיוון שהם מפתחים באופן ספונטני דלקת מפרקים ניוונית בברכיהם. מתן תרופות תוך מפרקיות היא שיטה נפוצה לחקר ההשפעות של תרופה ניסיונית in vivo. בבני אדם, חומרים טיפוליים הניתנים באמצעות הזרקה תוך מפרקית יכולים להציע הקלה בכאב ולעכב התקדמות נוספת של דלקת מפרקים ניוונית. כמו בכל מין, החדרת מחט לחלל המפרק עלולה לגרום לפציעה, שעלולה לגרום לכאב, צליעה או זיהום. תופעות לוואי כאלה עלולות לפגוע ברווחת בעלי החיים, לבלבל את תוצאות המחקר ולחייב בעלי חיים נוספים להשיג את יעדי המחקר. לכן, חובה לפתח טכניקות הזרקה נכונות למניעת סיבוכים, במיוחד במחקרי אורך הדורשים זריקות תוך מפרקיות מרובות וחוזרות. באמצעות המתודולוגיה המוצגת, חמישה שרקנים קיבלו זריקות ברך דו צדדיות בהרדמה כללית. שבעה ימים לאחר ההזרקה, בעלי חיים עברו המתת חסד אנושית לצורך ניתוח חומרת דלקת מפרקים ניוונית. לא התרחשו תופעות לוואי לאחר הרדמה או זריקות בברך, כולל צליעה, כאב או זיהום. ניתוח טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת רנטגן של הברך יכול לזהות שינויים פתולוגיים הקשורים לדלקת מפרקים ניוונית. נתוני טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת מצביעים על כך שדלקת מפרקים ניוונית חמורה יותר בבעלי חיים מבוגרים, כפי שמצוין על ידי צפיפות מינרלים מוגברת בעצמות ועובי טרבקולרי עם הגיל. תוצאות אלה עולות בקנה אחד עם שינויים היסטולוגיים וציוני מנקין מותאמים, מערכת ניקוד מבוססת ובשימוש נרחב להערכת חומרת דלקת פרקים באותם בעלי חיים. פרוטוקול זה יכול לשמש לזיקוק זריקות תוך מפרקיות בשרקנים.

מבוא

דלקת מפרקים ניוונית (OA) משפיעה על 32.5 מיליון מבוגרים בארה"ב. זה נגרם על ידי אובדן פרוגרסיבי של סחוס מפרקי, דלקת קלה של הרקמות בתוך ומסביב למפרקים, והיווצרות של אוסטאופיטים וציסטות עצם ^1,2. הסימפטומים מתבטאים בדרך כלל בשלבים מאוחרים יותר של המחלה, כאשר הטיפולים הנוכחיים מספקים הקלה פליאטיבית בלבד, כמו גם תופעות לוואי מערכתיות. המחסור בתרופות משנות מחלה נובע מהבנה לקויה של המנגנונים הבסיסיים של המחלה³. כתוצאה מכך, קיים צורך רפואי קריטי ומתמשך בחומרים משופרים לטיפול ב- OA.

קיימים מספר מודלים של בעלי חיים של OA הבוחנים מרכיבים שונים של תהליכי המחלה⁴. בעוד שקיימים מספר מודלים כירורגיים, כולל טרנסקציה של הרצועה הצולבת הקדמית וערעור יציבות המניסקוס המדיאלי, אלה פולשניים ודורשים רמה גבוהה של מיומנות טכנית⁵. מודלים המושרים כימית הם הליכים פחות פולשניים באופן יחסי המשמשים בדרך כלל לחקר מנגנוני כאב OA⁶. מודל עכבר נפוץ אחד כזה כולל השראת OA על ידי הזרקת ברך תוך מפרקית של מונוסודיום יודואצטט (MIA). מודל זה מייצר פנוטיפ דמוי כאב הניתן לשחזור, חזק ומהיר שניתן לדרג על ידי שינוי מינון MIA⁷. פרטים טכניים של השראת מודל זה תוארו בעבר⁷. תרגום טכניקה זו למכרסמים גדולים יותר, כמו שרקנים, קשה בשל ההבדלים האנטומיים ביניהם. הבדלים מסוימים כוללים שרירים מוגברים סביב העצמות הסמוכות וחלל המפרק בשרקן ופיבולה מפרקית וטיביה בהשוואה לאיחוי דיסטלי שנראה בעכברים⁸. שרקנים Dunkin-Hartley, זן שרקנים זמין באופן נרחב, הם מודל מבוסס של בעלי חיים OA מכיוון שהם מפתחים את המחלה באופן טבעי, ובכך מציעים מודל חזק לחקר ההשפעות של טיפולים חדשניים הניתנים על ידי הזרקה תוך מפרקית על התקדמות המחלה⁹. שרקנים דנקין-הארטלי מתחילים לפתח OA בגיל שלושה חודשים, כאשר הזכרים מציגים התפתחות מואצת ופנוטיפ¹⁰ חמור יותר. אצל שרקנים, OA מתקדם עם הגיל, ובגיל 12 חודשים, פתולוגיה קשורה ניכרת בהדמיה¹¹. מודלים ספונטניים של OA, כמו מודל דנקין-הארטלי, אינם דורשים כל התערבות כדי לגרום ל-OA ובכך לשחזר את ההתפתחות וההתקדמות של פנוטיפ המחלה בבני אדם, ובכך לספק מודל תרגומי רב עוצמה¹⁰. יתר על כן, ההתפתחות הספונטנית של OA מאפשרת שליטה פנימית כאשר טיפולים חדשניים ניתנים באופן חד צדדי בברך אחת של בעל חיים נתון. בקרה פנימית זו ממזערת את ההשפעות של שונות בין בעלי חיים בעת ניתוח נתונים ועשויה לסייע בהפחתת מספר בעלי החיים הכולל.

ניתוח טומוגרפיה ממוחשבת מיקרו רנטגן (μCT) הוא כלי רב עוצמה המאפשר הערכה כמותית של חומרת OA¹². μCT כולל סריקת תמונות רנטגן מרובות ברזולוציה גבוהה, המתקבלות מדגימה מסתובבת או ממקור וגלאי רנטגן מסתובב¹³. לאחר מכן, נתונים נפחיים תלת מימדיים (3D) משוחזרים בצורה של פרוסות תמונה מוערמים¹⁴. מכיוון שלעצם מינרלית יש ניגודיות מצוינת ב- μCT, ניתן להשתמש בשיטה זו כדי להעריך תכונות תלת-ממדיות ולבצע ניתוחים כמותיים של שינויים הקשורים ל- OA 15,16,17. μCT מציע מספר יתרונות על פני כלים נפוצים יותר, כולל היסטופתולוגיה וניתוח הליכה. בניגוד להערכה היסטולוגית של מקטע אחד או כמה של רקמות, μCT סורק את כל המפרק ומציע הערכה הוליסטית יותר של נגעי OA¹⁸. בעוד ניתוח הליכה יכול להבחין בשינויים סימפטומטיים בתפקוד המפרקים לאורך זמן, שינויים במפרקים מתפתחים הרבה לפני שינויים תפקודיים הקשורים OA. μCT יכול לספק מדד רגיש יותר של התפתחות OA לפני תחילת הצליעה. שתי מדידות כמותיות רלוונטיות במיוחד כוללות צפיפות מינרלים בעצם ועובי טרבקולרי כאשר שניהם עולים לאורך ההתקדמות של OA^19,20. זה יכול להיות מועיל לפצל את הניתוח לצלחת subchondral ועצם trabecular, כפי שיש להם תכונות שונות, כדי להשיג מדידות חזקות יותר השוואות.

המטרה הכוללת של שיטה זו היא לסייע לחוקרים לבצע בהצלחה זריקות תוך מפרקיות על שרקנים. הפרוטוקול המוצג השתמש בחמישה (n=2), תשעה (n=1) ו-12 חודשים (n=2) שרקנים זכרים בני חודש דנקין-הארטלי; ניתן להסיק פרוצדורות לזני שרקנים אחרים ולגילאים הדורשים זריקות ברך תוך מפרקיות. במודלים ספונטניים של OA, כמו מודל דנקין-הארטלי, התקדמות המחלה והתגובה לטיפול סדרתי מנוטרים לעתים קרובות לאורך תקופות זמן ארוכות, הנמשכות שבועות עד חודשים⁹. פרוטוקול מורחב זה מביא למספר רב של זריקות תוך מפרקיות, ולכן חשוב שתהיה טכניקת הזרקה מתאימה כדי למנוע תופעות לוואי, כולל כאב, צליעה או זיהומים, שכולם יכולים להשפיע על רווחת בעלי החיים ולבלבל את תוצאות המחקר תוך צורך בבעלי חיים נוספים במחקר. הפרוטוקול המוצג מתאר מתודולוגיה של זריקות תוך מפרקיות בשרקנים וניתוח עוקב של נתוני μCT.

פרוטוקול

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית של דרום קרוליינה. המחקר פעל לפי העיקרון של 3R.

1. תכשירים להזרקה תוך מפרקית

1. אפשרו לשרקנים של דנקין-הארטלי להתאקלם במתקן לפחות שבוע לפני תחילת הניסוי.
   הערה: נעשה שימוש בשרקנים זכרים בני 5- (n = 2), 9- (n = 1) ו- 12- (n = 2). זכרים מציגים התפתחות מואצת ופנוטיפ חמור יותר של OA.
2. יש לגלח את אזור הברך בעזרת סכין גילוח חשמלי.
   הערה: יש להיזהר מהפטמות באופן מדיאלי.
3. מרדימים את השרקן בתא איזופלורן המספק 3-5% איזופלורן בתערובת O₂ (קצב זרימה 2.5 ליטר/דקה) ולאחר מכן מעבירים את השרקן לקונוס אף המחובר למעגל הרדמה שאינו נושם. התאמת איזופלורן כדי לשמור על מישור כירורגי של הרדמה במהלך ההזרקה, בדרך כלל עם קצב זרימת חמצן של 0.5-1 ליטר לדקה ו 1-3% איזופלורן.
   הערה: זריקות תוך מפרקיות גורמות לכאב קל ורגעי. בעלי חיים מורדמים במהלך ההליך כדי למנוע תפיסה של גירויים כואבים ולשפר את דיוק ההזרקה. במחקר המוצג, מתן משככי כאבים, כולל תרופות נוגדות דלקת לא סטרואידיות, יפריע להתקדמות OA²¹. בשל הכאב הרגעי, בתנאי הרדמה ופוטנציאל של משככי כאבים לבלבל את המודל, משככי כאבים לא ניתנו אלא אם בעלי חיים הציגו תופעות לוואי, כולל צליעה וסימני כאב במישוש המפרקים לאחר ההזרקה. החוקרים צריכים לשקול את השימוש משככי כאבים עבור זריקות שגרתיות. משככי כאבים מומלצים כאשר מתרחשות תופעות לוואי. משטרי משככי כאבים יש לדון עם הווטרינר המוסדי ולאשר על ידי IACUC לפני תחילת המחקרים.
4. ודא שהשרקן נמצא בעומק הרדמה מתאים על ידי חוסר תגובה של צביטת בוהן.
5. יש להניח חומר סיכה סטרילי לעיניים על שתי העיניים כדי למנוע התייבשות ופציעה.
6. לדלל בטדין עם מים סטריליים עד 10%.
7. לדלל אתנול 200 הוכחה עם מים סטריליים ל 70% אתנול.
8. הכינו פתרונות להזרקה, בארון בטיחות ביולוגית כדי לשמור על סטריליות. בפרוטוקול המוצג, נעשה שימוש ברכב סטרילי (1x פוספט חוצץ מלוחים) כדי להזריק את שתי הברכיים. ניתן לשנות פתרונות בהתבסס על מטרות המחקר.
   הערה: יש להקפיד לדלל תמיסות טריות להזרקה מיד לפני ההזרקה כדי להבטיח סטריליות. כל תמיסות שאינן בשימוש יש להשליך בסוף כל מפגש הזרקה.
9. מלאו מזרקי אינסולין סטריליים לשימוש חד פעמי בתמיסות להזרקה. יש להקפיד לנצל את הנפח הקטן ביותר שניתן להשיג כדי למנוע עומס יתר על חלל המפרק בנפח. במחקר הנוכחי נעשה שימוש ב-50 μL.
10. הניחו את השרקן ואת חרוט האף על משטח נקי עם כרית חימום לתמיכה תרמית וריפוד מתחת לראש כדי להגביה אותו מעט.
11. יש ללבוש חלוק כירורגי, רשת לשיער, כפפות סטריליות ומסכה בעת ביצוע הליך ההזרקה.
12. יש לשפוך 10% בטאדין על כדור צמר גפן ולנגב את שני אזורי הברכיים.
13. שפכו 70% אתנול על כדור צמר גפן ונגבו את שני אזורי הברכיים.
14. חזור על 1.12 ו- 1.13 פעמיים נוספות.
    הערה: למטרות הדגמה, הסרטון המתאים מראה ניקוי הברך ואתר ההזרקה פעם אחת עם 10% בטאדין ו-70% אתנול. לאחר מכן נוקה אתר ההזרקה בתנועות מעגליות פעמיים נוספות, לסירוגין בתמיסות אלה. שלושה סקראבים סדרתיים עם תמיסות קרצוף לסירוגין ואלכוהול מומלצים להשגת טכניקה אספטית.

2. הזרקה תוך מפרקית

1. הניחו את השרקן במצב שכיבה למשך כל ההליך.
2. לבשו זוג חדש של כפפות סטריליות ומישוש את מפרק הברך.
   הערה: בפרוטוקול ובסרטון המוצגים נעשה שימוש בכפפות ניטריל אוטומטיות. יש להשתמש בכפפות סטריליות, כולל כפפות ניטריל אוטוקלאביות או כפפות כירורגיות, לטכניקה אספטית.
3. כופפו ידנית את הברך ל-90°.
4. העבר את האצבע הדיסטלית לפטלה כדי לאתר את החריץ של האספקט הדיסטלי של חלל המפרק על ידי כיפוף והארכת הגפה האחורית.
   הערה: ניתן למשש את הפטלה במצב זה כמבנה קטן ומוצק הממוקם ישירות מעל החלל המשותף. ניתן לחוש את השוקה כמבנה גרמי דיסטלי לפטלה. לאחר קביעת מיקום השוקה והפטלה, המפרק, המורגש כחריץ, נמצא ביניהם, דיסטלי לפטלה ופרוקסימלי לשוקה.
5. הכנס את מחט האינסולין בזהירות על קו האמצע הדיסטלי אל הפטלה בתוך חלל המפרק. המחט צריכה להיות מוחדרת 1-2 מ"מ מתחת לעור כדי להיכנס לחלל המשותף.
   הערה: חלון הגישה הגדול ביותר לחלל המפרק בזמן שהברך מכופפת הוא באספקט הקדמי של הגפה בקו האמצע, ישירות דיסטלי לפטלה. הזרקה על קו האמצע בכיוון הקדמי-אחורי תסייע בהזרקה מדויקת לחלל המפרק מבלי לחדור למבני בוני. הזרקה מדויקת לחלל המפרק יכולה להתבצע בגישה צידית-מדיאלית, אם כי חלון הגישה צר יותר במיוחד כאשר הברך מכופפת.
6. להזריק 50 μL של התמיסה לתוך המפרק לאט. ודא שהמחט מוחדרת בקלות, והתוכן מוזרק ללא התנגדות.
   הערה: הקפד לא להחדיר את המחט עמוק מדי מכיוון שהיא עלולה לגרום נזק למפרק או לעצם ולגרום לדלקת ו / או כאב לא רצויים. אם החריץ המתאים לחלל המפרק לא נמצא, המחט עלולה לחדור את עצם הירך, הפטלה או השוקה. לכן, כדאי למשש בביטחון את החריץ המתאים לחלל המפרק כדי למנוע זריקות פרי-מפרקיות או פציעות הקשורות למבני בוני חודרים. אם מתפתחת בועה במקום ההזרקה מתחת לעור, ההזרקה הייתה רדודה מדי והנוזל נכנס לחלל התת עורי. בהתאם לתכונות של הסוכן המשמש, התרופה עשויה להיכנס לחלל המפרק באמצעות דיפוזיה, או ניסיון הזרקה נוסף עשוי להיות נחוץ.
7. לאחר שסיימתם, השליכו את המחט לפח חד.
   הערה: למטרות תרגול ואימון, יש להזריק נוזל המכיל צבע לחלל המשותף של גופה במכרסם או שרקן בגודל דומה. לאחר מכן, לנתח את המפרק כדי לאשר את המיקום של ההזרקה.
8. לעסות את הברך על ידי כיפוף והארכת המפרק מספר פעמים לקדם דיפוזיה של התרופה בתוך חלל המפרק.
9. חזור על שלבים 2.1-2.5 פעם אחת על הגפה הנגדית עם תמיסת PBS 1x.

3. התאוששות מהזרקה תוך מפרקית

1. כבו את האיזופלורן ושמרו על 100% זרימה של חמצן עד שבעל החיים חוזר להכרה.
2. הניחו את בעל החיים על כרית חימום לתמיכה תרמית עד לאמבולטורי.
3. יש למרוח חבילת קרח על הברך למשך 30 שניות עם מגבת נייר כמחסום כדי לסייע בהפחתת הנפיחות מההזרקה.
4. להעריך את הילוך בעלי החיים כאשר הם אמבולטוריים לפני החזרתם לדיור.
   הערה: אם צוינו הפרעות הליכה כלשהן, משככי כאבים וטיפול תומך עשויים להיות מוצדקים. מומלץ להעריך את ההליכה שלהם שוב מספר שעות לאחר ההתאוששות מההרדמה כדי להבטיח ניידות תקינה.

4. סריקת טומוגרפיה ממוחשבת מיקרו (μCT)

1. עבור קציר הרקמות, להקים מטוס כירורגי של הרדמה עם 100% חמצן ו 5% תערובת isoflurane.
2. לאשר מישור כירורגי של הרדמה עם חוסר תגובה לגירוי צביטת בוהן. המתת חסד אנושית של בעל החיים באמצעות מתן של ≥ 150 מ"ג/ק"ג של פנטוברביטל תוך ורידי בהתאם למדיניות המוסדית ופרוטוקול השימוש המאושר בבעלי חיים.
   הערה: בפרוטוקול המוצג, כל אחד מחמשת השרקנים קיבל זריקה אחת בשתי הברכיים. בעלי חיים הורדמו והומתו באופן הומני שבוע לאחר הזריקה.
3. קצרו את שתי הגפיים האחוריות על ידי ניתוח העור הרחק מהשרירים שמסביב.
4. לאחר מכן, לפרק את הגפה האחורית עם Rongeurs באמצע פיר של עצם הירך פרוקסימלי לקרסול.
   הערה: מיטת הסריקה ומחזיק הדגימה שבהם נעשה שימוש לא היו מסוגלים להכיל את כל הגפה האחורית של שרקן בוגר. מחזיקי דגימות גדולים זמינים מסחרית עבור דגימות גדולות יותר.
5. הניחו את הרקמות בתמיסת פורמלין ניטרלית חוצצת למשך 72 שעות לקיבוע לפני ביצוע μCT.
6. פתחו תוכנת סריקת μCT והניחו דגימה עם פורמלין במיכל תואם שיתאים לתיקיית דגימות μCT תוך שמירה על רקמה בשדה הראייה.
7. כיול מכשיר μCT לחשיפות לשדה כהה ושדה אור בהתאם להמלצות היצרן.
8. סרוק את הדגימה עם מסנן Al+Cu בגודל 18 מיקרומטר. השתמש בשלב סיבוב 0.7° עבור 360° עם מצלמת היסט.
   הערה: הסריקה נשמרת באופן אוטומטי.

5. עיבוד תמונה להערכת פרמטרים מיקרו-אדריכליים של עצם

1. הורד והתקן תוכנת שחזור μCT לשחזור תמונות μCT.
2. בחר את תיקיית התוכנה ולחץ פעמיים כדי לפתוח את התוכנה.
3. בחרו פרוסה אחת מתמונות μCT בלחיצה על פרוסת תמונה.
4. בחר את יעד קובץ השחזור. בחר עיון וצור תיקיה חדשה בשם Recon. תבנית הקובץ שנבחרה צריכה להיות BMP(8).
5. בדוק פיצוי אי התאמה.
   הערה: בדרך כלל, ההערכה קרובה לנכונה, אך ניתן לכוונן אותה ידנית כדי להזיז את התמונות החופפות כך שהקצה הימני והשמאלי יתיישרו קרוב ככל האפשר.
6. תחת הגדרות, החל אלגוריתמים של החלקה, הקשחת אלומות, סיבוב CS וארטיפקטים טבעתיים .
   הערה: כדאי לבחור תצוגה מקדימה של התמונה כדי לקבוע את הבהירות לפני הבנייה מחדש. הגדרת הכוונון העדין יכולה גם להיות מועילה כדי לקבוע אילו הגדרות הן הטובות ביותר.
7. בחר התחל כדי להתחיל לעבד את השחזור.

6. איסוף נתונים מיקרו-אדריכליים מתמונות משוחזרות

1. הורד והתקן את Dataviewer.
2. בחר VOI וכוון את הדגימה ליישור אנכי לצורך ניתוח קל יותר במועד מאוחר יותר.
3. שמור VOI ערוך כתיקיה חדשה.
4. הורד והתקן את CTAnalyser לניתוח תכונות העצם של פרמטרים מיקרו-אדריכליים.
   הערה: הגרסה החינמית של CTAnalyser מוגבלת בפונקציונליות, ולכן מומלץ לקבל רישיון מלא.
5. פצל את הניתוח לצלחת סובכונדרלית ולעצם טרבקולרית על ידי שמירתם כטווח נפרד של תמונות.
   הערה: פיצול הניתוח אינו הכרחי, אך מכיוון שללוחית הסובכונדרלית ולעצם הטרבקולרית יש תכונות שונות, ניתוחים נפרדים יכולים לסייע במדידות חזקות והשוואה.
6. בחר את טווח התמונות לניתוח, החל מהלוח הסובכונדרלי על ידי לחיצה על פרוסת התמונה שברצונך להתחיל איתה.
7. בחר את אזור העניין עבור כל תמונה כדי לוודא שהיא מקיפה את העצם על ידי לחיצה על הכרטיסייה אזור עניין.
8. בחר בכרטיסיה בחירה בינארית . התאם את ההיסטוגרמה כך שהרקע והעצם יהיו נפרדים לחלוטין.
9. בחר בכרטיסייה צפיפות מינרלים עצם (BMD). שמור נתונים אלה בתיקיית נתוני ניתוח חדשה.
10. בחר עיבוד מותאם אישית ועבור אל פנימי הכרטיסייה.
11. תחילה בצע סף ובחר Automatic Otsu ולאחר מכן Run.
12. לאחר מכן בחר Despeckle ובחר Remove black speckles ולאחר מכן Run.
13. חזור על Despeckle ובחר Remove white speckles, ולאחר מכן הפעל.
14. בחר ניתוח תלת-ממדי ובחר ערכים בסיסיים וערכים נוספים.
15. חזור על שלבים 6.2.2-6.4.5 כדי לאפס את התמונה לצורך ניתוח עצם טרבקולרית.
    הערה: ודא שקובץ הפלט נמצא בתיקיה חדשה עם אותו קובץ כמו נתוני BMD.

תוצאות

לפני ביצוע הזרקות תוך מפרקיות על בעלי חיים חיים, הפרוטוקול הנ"ל תורגם על שלוש גופות חולדות כדי להבטיח מיקום הזרקה נכון. במהלך התרגול, 50 μL של 70% צבע כחול מתילן חדש הוזרק לשני מפרקי הברך באמצעות המתודולוגיה שתוארה לעיל. זה שווה ערך לשש זריקות תרגול. לאחר ההזרקות, מפרק הברך נותח על ידי חתך דרך האספקט הגולגולתי של חלל המפרק, דיסטלי לפטלה ודרך הרצועה הפטלרית, כדי להמחיש את חלל המפרק ולוודא את מיקום שקיעת הצבע. מכיוון שצבע כחול מתילן חדש הוא תמיסה כחולה בהירה, ניתן להמחיש את מיקום שקיעת הצבע בצורה גסה. תמונות מייצגות מזריקו...

דיון

למרות ההתקדמות האחרונה בטיפול סימפטומטי ב- OA, קיים מחסור מוחלט בחומרים טיפוליים המונעים התפרצות או מעכבים התקדמות של OA²⁴. נכון לעכשיו, התרופה היחידה ל- OA חמור היא החלפת מפרקים, שהיא יקרה, פולשנית, ויכולה לגרום לתחלואה ותמותה של חולים²⁵. כתוצאה מכך, יש צורך עז במחקר מתמשך עם מודלים של בעלי חיים של OA ופיתוח מתמשך של טיפולים חדשניים. מספר מודלים של בעלי חיים זמינים לחקר רכיבים שונים של OA, כולל מודלים ספונטניים ומודלים המושרים כימית או כירורגית. הזרקת כימיקלים, כמו במודל ע...

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
200 הוכחה אתנול	Decon Laboratories	2701	חומר עיקור
תלת מימד. תוכנת SUITE	Bruker		μ-CT תוכנת ניתוח
Betadine Surgical Scrub	Avrio Health	67618-151-16	חומר עיקור
מזרק אינסולין עם מחט	Ulticare	91008	לביצוע זריקות
Isoflurane	Piramal	803249	הרדמה בעלי חיים
ניטרלי חוצץ פורמלין	פישר סיינטיפיק	23-427098	תיקון
רקמות Nrecon תוכנה	Bruker		μ-CT שחזור
תוכנה פוספט חוצץ מלח	Cytiva	SH30258.01	סוכן בקרה ודילול
SkyScan 1176	Bruker		לסריקת דגימות