אנו מתארים מודל מוריני של עומס יתר על לחץ החדר הימני המושרה על ידי רצועות גזע ריאתי. פרוטוקולים מפורטים לאינטובציה, ניתוח ופנוטיפ על ידי אקוקרדיוגרפיה כלולים במאמר. מכשירים בהתאמה אישית משמשים לאינטובציה וניתוח, המאפשרים שכפול מהיר וזול של הדגם.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
מודל מורין של היפרטרופיה של חדר ימין הנגרמת על ידי עומס יתר וכישלון על ידי רצועות גזע ריאתי
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
כשל בחדר ימין (RV) הנגרם כתוצאה מעומס יתר קשור קשר הדוק לתחלואה ותמותה במספר מחלות לב וכלי דם וריאות. הפתוגנזה של כשל RV היא מורכבת ואינה מובנת כראוי. כדי לזהות אסטרטגיות טיפוליות חדשות לטיפול בכשל קרוואנים, מודלים חזקים וניתנים לשחזור של בעלי חיים הם חיוניים. מודלים של רצועת גזע ריאתי (PTB) צברו פופולריות, שכן ניתן להעריך את תפקוד RV ללא תלות בשינויים בכלי הדם הריאתיים.
במאמר זה, אנו מציגים מודל מורין של עומס יתר בלחץ RV המושרה על ידי PTB בעכברים בני 5 שבועות. ניתן להשתמש במודל כדי לגרום לדרגות שונות של פתולוגיה של RV, החל מהיפרטרופיה קלה של RV ועד לכישלון RV מפוצל. פרוטוקולים מפורטים עבור אינטובציה, ניתוח PTB ופנוטיפ על ידי אקוקרדיוגרפיה כלולים במאמר. כמו כן, ניתנות הוראות להתאמה אישית של מכשירים לאינטובציה ולניתוחי PTB, המאפשרים שכפול מהיר וזול של מודל ה-PTB.
אטבי קשירת טיטניום שימשו כדי לכווץ את תא המטען הריאתי, מה שהבטיח רמה מאוד ניתנת לשחזור ובלתי תלויה במפעיל של התכווצות גזע ריאתי. חומרת ה-PTB דורגה על ידי שימוש בקטרים שונים של קליפס קשירה פנימי (קל: 450 מיקרומטר וחמור: 250 מיקרומטר). זה הביא לפתולוגיה של RV החל מהיפרטרופיה עם תפקוד RV שמור ועד כשל RV מפוצל עם תפוקת לב מופחתת וביטויים חוץ-לבביים. תפקוד RV הוערך על ידי אקוקרדיוגרפיה שבוע ושלושה שבועות לאחר הניתוח. דוגמאות לתמונות ותוצאות אקוקרדיוגרפיות מוצגות כאן. כמו כן, מוצגות תוצאות של צנתור לב ימין וניתוחים היסטולוגיים של רקמת הלב.
מבוא
אי ספיקת חדר ימין (RV) היא תסמונת קלינית עם תסמינים של אי ספיקת לב וסימנים של גודש מערכתי כתוצאה מתפקוד לקוי של RV1. תפקוד לקוי של RV קשור קשר הדוק לתחלואה ותמותה במספר מחלות לב וכלי דם וריאות2. האטיולוגיה של תפקוד לקוי של RV היא מורכבת, ומסלולי האיתות והוויסות הבסיסיים שלה עדיין לא הובהרו כראוי.
תצפיות מהטיפולים הנוכחיים מראות כי תפקוד RV משופר נמצא בקורלציה קרובה להפחתת עומס לאחר מכן, מה שמרמז על כלי דם ריאתיים כיעד הטיפול העיקרי3. זה מצביע על כך שלטיפולים הנוכחיים יש רק השפעה ישירה מינימלית על תפקוד RV, אשר יכול להידרדר גם לאחר שיפור בהתנגדות כלי הדם הריאתיים
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
המחקר אושר על ידי המפקח הדני על ניסויים בבעלי חיים (מספר הרשאה: 2021-15-0201-00928) ובוצע בהתאם לחקיקה הלאומית בנושא חיות מעבדה. במחקר זה נעשה שימוש בעכברי C57BL/6N זכרים בני 5 שבועות.
1. התאמה אישית של מכשירים לאינטובציה ולניתוח (איור 1)
הערה: סעיף זה מפרט את השלבים החשובים ביותר בהכנת מכשירים בהתאמה אישית לאינטובציה וניתוחי PTB מחומרים זולים וזמינים.
- הכינו את הצינור האנדוטרכאלי (איור 1A).
ניתן להשתמש בצנתרים תוך-ורידיים נפוצים (IV) לאינטובציה ואוורור של עכברים.- בחר את הגודל המתאים של קטטר תוך כלי המ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
עכברי C57BL/6N (זכר, בני 5 שבועות, 17-20 גרם) חולקו באקראי ל-PTB חמור (sPTB, 250 מיקרומטר, n = 12), PTB קל (mPTB, 450 מיקרומטר, n = 9), או ניתוח דמה (דמה, n = 15). הערכת תפקוד הלב בוצעה על ידי אקוקרדיוגרפיה שבוע ושלושה שבועות לאחר הניתוח. צנתור לב ימין עם המתת חסד לאחר מכן בוצע 3 שבועות לאחר הניתוח. איברים נשקלו, ורקמת לב הוכנה לניתוחים היסטולוגיים.
אקוקרדיוגרפיה שבוע לאחר הניתוח גילתה סימנים של לחץ RV מוגבר ותפקוד לקוי של RV ב- sPTB בהשוואה לקבוצות mPTB ודמה. תפקוד לקוי של RV התבטא בירידה בתפ.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
במאמר זה, אנו מציגים מודל מורין של היפרטרופיה וכישלון של RV הנגרמים על ידי עומס יתר. אנו מראים כי: (i) PTB בעכברים צעירים יכול לגרום לדרגות שונות של פתולוגיה של RV, החל מהיפרטרופיה קלה של RV ועד כשל RV עם סימנים חוץ-לבביים של פירוק ופיברוזיס RV מאושר היסטולוגית. (ii) סימנים של תפקוד לקוי של RV ניתן לראות ולכמת על ידי אקוקרדיוגרפיה 1 ו 3 שבועות לאחר ניתוח PTB. (iii) מידת ההיפרטרופיה של RV פרופורציונלית לחומרת ה-PTB ולעלייה בלחץ ה-RV כתוצאה מכך. מודל זה עשוי לעזור להבהיר את הפתוגנזה של כשל RV משני לעומס יתר של לחץ RV, שכן .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין מה לחשוף.
תודות
עבודה זו נתמכה על ידי Snedkermester Sophus Jacobsen og Hustru Astrid Jacobsens Fond, Helge Peetz og Verner Peetz og hustru Vilma Peetz Legat, Grosserer A.V. Lykfeldt og Hustrus Legat. יתר על כן, המחברים מבקשים להודות לצוות מתקני בעלי החיים במחלקה לרפואה קלינית, אוניברסיטת ארהוס, על תמיכתם במהלך ביצוע העבודה הניסויית.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| Biosyn 6-0, מונופילמנט, תפר נספג | Covidien | UM-986 | |
| צינורית קהה, 27G 0.4x0.25, | Sterican | 292832 | |
| Bupaq Multidose vet 0,3 מ"ג/מ"ל (בופרנורפינום) | עכברי Salfarm Danmark | VNR 472318 | |
| C57BL/6NTac | Taconic Biosciences | C57BL/6NTac | |
| Dagrofil 1, תפר קלוע, לא נספג | B Braun | C0842273 | |
| קרם אפילציה | Veet | 3132000 | |
| ספוגיות חיטוי (82% אתנול + 0.5% כלורהקסידין) | Mediq | 3340122 | |
| אזמלים חד פעמיים, גודל 11 | Swann-Morton | 11708353 | |
| Drä ger Vapor 2000 Sevoflurane | Drä ger | M35054 | |
| עין ניטרלית, "Ophta" | Actavis | MTnr.: 07586 Vnr: 53 96 68 | |
| קליפס קשירת אופק | טלפלקס רפואי | 5200 (IPN914931) | |
| Horizon Open Ligating Clips applier, מעוקל, 6 אינץ' (15 ס"מ) | Teleflex Medical | 537061 | |
| מחזיק גליל מטבח | n.a.n.a.חוט | ||
| מתכת של סט | |||
| תומפסון | n.a.MiniVent | ||
| מאוורר | הוגו סאקס | סוג 845 | |
| MS505S מתמר | קולות חזותיים | n.a.Rimadyl | |
| Bovis וטרינר 50 מ"ג/מ"ל (קרפרופן) | Zoetis | MTnr: 34547, Vnr: 10 27 99, | |
| Sevoflurane Baxter 100 | Baxter Medical | MTnr: 35015 | |
| צינורות סיליקון | n.a.n.a.יריעת | ||
| , "Opmi Pico" | Carl Zeiss Surgicals GmbH | n.a.מחזיק | |
| בדיקה אולטרסאונד / מסילה | Visual Sonics | 11277 | |
| צלחת ורמינג | קולות חזותיים | 11437 | |
| Venflon ProSafety, 22G, 0,9 x 25 מ"מ | בקטון דיקינסון | 393222 |
מקורות
- Voelkel, N. F., et al. Right ventricular function and failure: Report of a national heart, lung, and blood institute working group on cellular and molecular mechanisms of right heart failure. Circulation. 114 (17), 1883-1891 (2006).
- Haddad, F., Doyle, R., Murphy, D. J., Hunt, S. A.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
