אוסטאופורוזיס לאחר גיל המעבר הפכה לבעיה עולמית של בריאות הציבור. מטרת מחקר זה היא לחקור את ההשפעות הטיפוליות ואת המנגנונים הקשורים של הרפואה הסינית המסורתית Xiaoyao גלולות על מצב זה.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
מחקרים על ההשפעה האנטי דלקתית של גלולות Xiaoyao בטיפול באוסטאופורוזיס לאחר גיל המעבר בעכברים
במאמר זה
סיכום
תקציר
אוסטאופורוזיס היא מחלה מטבולית נפוצה בקרב נשים מבוגרות ולאחר גיל המעבר, ללא תסמינים ברורים בשלביה המוקדמים. בשלבים האחרונים של מצב זה, החולים נוטים לשברים, וזה יכול להשפיע ברצינות על בריאותם ואיכות חייהם. העלייה העולמית בתוחלת החיים הפכה את אוסטאופורוזיס לדאגה עולמית. גלולות Xiaoyao היו בעבר
משמש לטיפול בדיכאון. בנוסף, נראה כי התרופה הייתה בעלת פעילות דמוית אסטרוגן, אשר השפיעה על ביטוי ALP, סמן מוקדם ספציפי לאוסטאובלסטים, ו- COL-1, מרכיב עיקרי של מטריצה חוץ-תאית בעצמות. גלולות Xiaoyao הוערכו על השפעתן על אוסטאופורוזיס לאחר גיל המעבר (PMOM) בעכברים. מידע היעד של כל רכיב צמחי של גלולות Xiaoyao היה נגיש באמצעות מסד הנתונים של מערכות רפואה סינית מסורתית (TCMSP). מידע מ- GeneCards, OMIM, PharmGkb, TTD, DrugBank ואתרים אחרים שימש לבניית הרשת הרגולטורית של קומפלקס הצמחים באמצעות רשת Cytoscape ו- String כדי להעריך את אינטראקציות החלבון. עכברים עברו כריתת שחלות, וטופלו במינונים גבוהים ונמוכים של גלולות Xiaoyao ואלה הושוו לקבוצת הביקורת. הסימפטומים שלהם הוערכו על ידי אימונוציטוכימיה של רקמות העצם. התוצאות הצביעו על כך שלגלולות Xiaoyao הייתה היכולת להקל על הסימפטומים של PMOM בעכברות שעברו כריתת שחלות דרך מסלול האיתות IL-17. תרופה זו יש פוטנציאל להיות סוכן טיפולי חדשני לטיפול אוסטאופורוזיס.
מבוא
ארגון הבריאות העולמי (WHO) מגדיר אוסטאופורוזיס (OP) כמחלה המאופיינת בירידה במסת העצם ובהידרדרות המיקרוארכיטקטורה של רקמת העצם, מה שמוביל לעלייה בשבירות העצם, ובכך לסיכון מוגבר לשבר1. המשמעות הקלינית של אוסטאופורוזיס היא שהיא עלולה להוביל לשברים, הקשורים לתמותה גבוהה, לתחלואה ולעלויות כלכליותגבוהות 2. אוסטאופורוזיס לאחר גיל המעבר (PMOP) נגרמת על ידי ירידה ברמות האסטרוגן אצל נשים לאחר גיל המעבר, מה שמוביל לעלייה בפעילות אוסטאוקלסט, וכתוצאה מכך אובדן עצם והרס של מיקרו-מבנה העצם. זה גורם לעתים קרובות אוסטאופורוזיס עם השפעה חמורה על הבריאות3. הטיפולים הנוכחיים עבור PMOP כוללים טיפול בתחליפי אסטרוגן, בי....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
ועדת האתיקה של חיות מעבדה באוניברסיטה הרפואית ללאומים של יוג'יאנג אישרה את פרוטוקול המחקר (מספר אישור: 2022101502). נקבות עכברי C57BL/6, בגילאי 10-12 שבועות, בדרגת SPF ומשקל גוף (22 ± 2) גרם, שוכנו במרכז לניסויים בבעלי חיים מסוג SPF של האוניברסיטה הרפואית יוג'יאנג ללאומים. חיות הניסוי נשמרו בטמפרטורה של 24-26 מעלות צלזיוס ולחות יחסית של 55% עד 60%.
1. מערכות רפואה סינית מסורתית, בסיס נתונים פרמקולוגי ופלטפורמת ניתוח
הערה: מסד נתונים וניתוח פרמקולוגיה של מערכות רפואה סינית מסורתית (TCMSP; https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php) הן פלטפורמות פרמקולוגיה של רפואה סינית המכילות מידע על מרכיבי TCM, תכונות הקש....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
חומרים פעילים ומטרות פעולה של גלולות Xiaoyao
על ידי חיפוש במסד הנתונים של TCMSP וסינון על פי הקריטריונים של זמינות ביולוגית אוראלית (OB) ≥ 30% ותכונות דמויות תרופות (DL) ≥ 0.18, נמצאו 125 חומרים פעילים קיימים בגלולות Xiaoyao. ביניהם, מרכיבים 6, 4, 9, 13, 2, 6, 83 ו -2 היו מ Paeonia lactiflora לבן, Atractylodes macrocephala, Menthae herba, Chaihu, Angelica sinensis, פוריה קוקוס, ליקוריץ וג'ינג'ר, בהתאמה. חלק מהחומרים הפעילים מוצגים בטבלה 1. .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
על פי הסטטיסטיקה, אוסטאופורוזיס גורם 1.5 מיליון שברים מדי שנה בארצות הברית, ואת רובם המכריע להתרחש אצל נשים לאחר גיל המעבר27. עם הגידול באוכלוסייה המזדקנת, צפוי כי רוב שברי הירך העתידיים בעולם יתרחשו באסיה וכי עד שנת 2050, המספר הכולל של אלה ברחבי העולם יגיע ל -8.2 מיליון28. עלות מניעת השברים כמעט שווה לזו של הטיפול בהם, ולשימוש בתרופות יהיו בהכרח כמה תופעות לוואי29. לכן, יש צורך דחוף בדרך חסכונית יותר לטפל בבעיה זו בחברה אחראית.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים מצהירים כי אין ניגוד עניינים.
תודות
תוכנית המחקר המדעי ופיתוח הטכנולוגיה של Baise City (20224128) תמכה בעבודה זו. המחברים מודים לד"ר דב סוראנה מאימפריאל קולג' בלונדון ומ-YMUN על עריכת כתב היד. YYX ו-ZYW תרמו באופן שווה למחקר זה.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 1 מ"ל דגימה | גואנגשי Beilunhe רפואי תעשייתי קבוצה ושות' | JYQ001 | להרדמה בעכברים |
| 4% פוליפורמלדהיד | בייג'ינג Solarbio מדע & טכנולוגיה ושות', בע"מ | P1110 | לקיבוע רקמות |
| 6-0 תפר נספג (מחט זוויתית) | שנחאי פודונג ג'ינהואן אספקה רפואית ושות'. | HZX-06 | לתפירה לאחר ניתוח |
| מנצח | כדור כותנה סופג | MIANQIU-500 גרם | לעיקור והמוסטזיס |
| שקופיות דבק | ג'יאנגסו שיטאי ציוד ניסיוני ושות'. | 188105 | לחיתוך רקמות |
| Amobarbital | Sigma Aldrich (Shanghai) Trading Co. | A-020-1ML | להרדמה בעכברים |
| תמיסת כחול | בייג'ינג Solarbio מדע & טכנולוגיה ושות', בע"מ | G1866 | צבע כחול של גרעיני התאים לאחר פעולת תמיסת התמיינות המטוקסילין |
| C57BL/6 עכברים | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. | (SCXK 2033-0063) | לשימוש בניסויים בבעלי חיים |
| להבים כירורגיים מפלדת פחמן | Premier Medical Equipment Co. | SP239 | לניתוח עכברים |
| CIKS/TRAF3IP2 ארנב pAb | BIOSS נוגדנים | bs-6202R | נקשר ל-Act1 ברקמות |
| תמיסת ההמטוקסילין של קול (לכתם קונבנציונאלי) | בייג'ינג Solarbio מדע & טכנולוגיה ושות', בע"מ | G1140 | לצביעת קטעי פרפין |
| קולגן מסוג I נוגדן פוליקלונלי | פרוטאינטק | 14695-1-AP | נקשר ל-COL-1 ברקמות |
| ערכת מצע DAB, 20x | בייג'ינג Solarbio מדע & טכנולוגיה ושות', בע"מ | DA1010 | לפיתוח צבע רקמות |
| גיליון כירורגי חד פעמי 50*60 ס"מ | Nanchang Xuhui ציוד רפואי ושות'. | SP4529777 | לניתוחי עכברים |
| תמיסת הסרת אבדן EDTA (pH 7.2) | בייג'ינג Solarbio מדע & טכנולוגיה ושות', בע"מ | E1171-500 מ" | ל להסרת אבדן |
| מאגר פרוקסידאז אנדוגני משופר | ביוטיים ביוטכנולוגיה | P0100B | קיבוע של רקמות או פרוקסידאזות אנדוגניות תאיות |
| לסביבה להסרת שעווה נוזל שקוף | Servicebio | G1128-1L | להסרת שעווה קטעי פרפין |
| אתיל אלכוהול | CHRON כימיקלים | 64-17-5 (CAS) | לייבוש של קטעי פרפין |
| נוגדנים לשימוש כללי | Epizyme Biotech | PS119L | לדילול נוגדנים |
| תמיסת התמיינות המטוקסילין | Servicebio | G1039-500ML | להתמיינות לאחר צביעת המטוקסילין והסרת צבע קשור יתר על המידה ולא נספג במיוחד מרקמות |
| ערכת צביעה Hematoxylin Eosin (HE) Beijing | Solarbio Science & טכנולוגיה ושות', בע"מ | G1120-3*100 מ"ל | להכתמת רקמות |
| ידית סכין כירורגית נירוסטה באיכות גבוהה Premier | Medical Equipment Co. | SP0088 | לניתוח עכברים |
| מצומד HRP Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) | proteintech | SA00001-2 | נקשר לנוגדנים ראשוניים ומגביר את האות |
| IL-17A נוגדן פוליקלונלי | proteintech | 13082-1-AP | נקשר ל-IL-17 ברקמות |
| IL-6 נוגדן פוליקלונלי | proteintech | 21865-1-AP | נקשר ל-IL-6 ברקמות |
| עט אימונוהיסטוכימיה | בייג'ינג ג'ונגשאן ג'ינצ'יאו ביוטכנולוגיה ושות' | ZLI-9305 (YA0310) | לציור מעגלים באימונוהיסטוכימיה |
| תפר כירורגי רפואי לא סופג (כדור) 5-0 3.5 מ' | Yangzhou Yuanlikang ציוד רפואי ושות'. | FHX-5-2 | לתפירה לאחר ניתוח |
| מחטי תפר רפואי מחטי זווית 4*10 3/8 | Chaohu Binxiong ציוד רפואי ושות ' | FHZ612-4 | לתפירה לאחר הניתוח |
| בלזם ניטרלי | בייג'ינג Solarbio Science & טכנולוגיה ושות', בע"מ | G8590 | כאוטם פרוסות |
| PBS (1X) | Shenzhen Mohong Technology Co., Ltd | B0015 | מאגר לשטיפת שקופיות ודילול תמיסה חלקית |
| מאגר חסימה מהירה ללא חלבון (1X) | Epizyme Biotech | PS108P | הימנעות מקשירה לא ספציפית של חלבונים |
| ארנב אנטי עצם אלקליין פוספטאז נוגדן | BIOSS נוגדנים | bs-6292R | נקשר לפוספטאז אלקליין ברקמות |
| בית חולים מסונפים מלוחים האוניברסיטה הרפואית Youjiang ללאומים | LHN500 | לבעלי חיים על ידי גילוח | |
| / קוצץ חשמלי | HANGZHOU HUAYUAN PET PRODUCTS CO., LTD. | DTJ-002 | לגילוח עכברים |
| מחזיק מחט רפואית מנירוסטה 14 ס"מ מחט גסה | פרמייר ציוד רפואי ושות' | SP784 | לניתוח עכברים |
| נירוסטה מלקחיים עיניים 10.5 ס"מ מעוקלים (ללא וו) | Zhuoyouyue | YKNWW-10.5 | לניתוח עכבר |
| מספריים עיניים מנירוסטה / מספריים כירורגיים 10 ס"מ קצה ישר | פרמייר ציוד רפואי ושות' | ZYJD-10-ZJ | לניתוח עכבר |
| נירוסטה קצה מחט קיבה 12 מד 55 מ"מ מרפק | GWJ-12-55W | לשימוש בעכברים על ידי gavage | |
| Tris-EDTA אנטיגן תיקון נוזל (50x) | proteintech | PR30002 | לתיקון אנטיגן של קטעי פרפין |
| לוח חיתוך עץ 25*16 ס"מ | JP16*24 | לניתוח עכבר | |
| כדורי Xiaoyao | Jiuzhitang Co., Ltd. | YPG-041 | לאספקת תרופות לבעלי חיים |
| Others | |||
| R 4.3.1 | עיבוד נתונים | ||
| Cytoscape3.9.1 | משאב לאומי לביולוגיה | בניית רשת רגולטורית לרפואה סינית מסורתית | |
| ImageJ 1.54f | המכונים הלאומיים לבריאות | עיבוד תמונה עבור תוצאות אימונוהיסטוכימיה | |
| Adobe Photoshop 24.0.0 | Adobe | לשילוב תמונות | |
| GraphpadPrism 9.5 | תוכנת | ניתוח סטטיסטי של | |
| תאי נתונים Dimension | OLYMPUS | לחיתוך וצילום | |
| OLYMPUS BX53 | OLYMPUS | לצילום HE וצילום חתך אימונוהיסטוכימי |
מקורות
- Kanis, J. A., Melton, L. J. 3rd, Christiansen, C., Johnston, C. C., Khaltaev, N. The diagnosis of osteoporosis. J Bone Miner Res. 9 (8), 1137-1141 (1994).
- Amin, U., Mcpartland, A., O'sullivan, M., Silke, C. An overview of the management of osteoporosis in the aging female population. Wom....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
