מאמר שיטה

כימות מיקרו-פלסטיק וננו-פלסטיק מבוססי פוליבוטילן אדיפט טרפתלט מהקרקע באמצעות ספקטרוסקופיה של תהודה מגנטית גרעינית של פרוטון

DOI:

10.3791/67471

⸱

6 ביוני 2025

 ,  ,  , 
1Department of Biosystems Engineering and Soil Science, University of Tennessee-Knoxville, 2Department of Chemistry, University of Tennessee-Knoxville

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מתוארת כאן שיטה לכימות מיקרו וננו-פלסטיק שמקורו בפוליבוטילן אדיפט טרפתלט בקרקע באמצעות ספקטרוסקופיה של תהודה מגנטית גרעינית. טכניקה זו משפרת את המתודולוגיה הקיימת מכיוון שהיא משתרעת על כימות של ננו-פלסטיק וניתן להתאים אותה בקלות לעיבוד דגימות סביבתיות בכמויות גדולות.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

יש צורך בשיטה לשחזור וכימות מיקרו-פלסטיק וננו-פלסטיק (MPS ו-NPs) שנוצרו בקרקע במהלך פירוק ביולוגי כדי להעריך במדויק את הפירוק וההשפעה הסביבתית של מוצרי פלסטיק מתכלים. נוכחותם של MPS ו-NPs באדמה עשויה לשנות את תכונות הקרקע כמו התנהגות צבירה או להשפיע על ביוטה בקרקע. שיטות התאוששות MP קיימות לא תמיד מתאימות למדידת פולימרים מתכלים כמו פוליבוטילן אדיפט טרפתלט (PBAT); כמה הליכי עיכול נפוצים עם חומצות או מחמצנים יכולים להרוס MPS מתכלים מבוססי PBAT. שיטות זיהוי כמו ספקטרוסקופיה של מיקרו-FTIR ומיקרו-ראמאן מוגבלות גם על ידי הגודל המינימלי של חלקיקים שניתן לשחזר ולנתח. לכן, שיטה זו פותחה כדי לחלץ ולכמת PBAT מהקרקע כדי להעריך את חלק המסה של MPS ו-NPs בקרקע מבלי לשנות כימית PBAT. בפרוטוקול משתמשים בתמיסת כלורופורם-מתנול למיצוי סלקטיבי של PBAT מהאדמה. הממס מתאדה מהתמצית, ולאחר מכן התמצית מומסת מחדש בכלורופורם דוטראט. התמצית מנותחת על ידי ספקטרוסקופיה של תהודה מגנטית גרעינית של פרוטון (1H-QNMR) תחת פרמטרים כמותיים כדי לכמת את כמות ה-PBAT בכל דגימה. יעילות מיצוי הממסים עבור PBAT נעה בין 76% באדמת טיט מוצלת ל-45% באדמת טיט חולית של אלקהורן. התאוששות PBAT עשויה להיות מופחתת עבור חומרים מחומצנים בהשוואה לחומרים בתוליים ועשויה להיות מופחתת בקרקעות עם תכולת חרסית גבוהה. יעילות המיצוי אינה תלויה בריכוז PBAT בטווח הבדיקה, אך נצפתה יעילות מיצוי נמוכה יותר עבור NPs מאשר עבור MPS. תוצאות כימות PBAT היו דומות לכימות פירוק הפלסטיק על ידי מדידת נשימת קרקע מצטברת במחקר דגירה במעבדה.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שיטות למדידת זיהום MP בקרקע נחוצות כדי להבין את היקף זיהום הפלסטיק בקרקעות גלובליות1, מקורות זיהום פלסטיק2 ופתרונות פוטנציאליים3. קרקעות חקלאיות חשופות באופן ייחודי לזיהום פלסטיק: יותר מ-15 מיליון טון מטרי של פלסטיק משמשים בחקלאות מדי שנה נכון לשנת 20214, כולל 2.5 מיליון טון חיפוי פלסטיק5. חיפוי פלסטיק משמש במגע הדוק עם אדמה, מוחל מחדש פעם אחת או יותר בשנה6, ויכול להיות קשה להסרה מלאה מהאדמה לאחר חייהם השימושיים7. תחום מרכזי אחד שבו יש צורך בשיטות מדידת MP הוא בהערכת מוצרי פלסטיק מתכלים כמו חיפויי פלסטיק מתכלים לשימוש במערכות צמחיות8.

מוצרי פלסטיק מתכלים באדמה הם חלופות מבטיחות לפלסטיק חקלאי קונבנציונאלי מכיוון שהם יכולים למנוע זיהום פלסטי של הקרקע על ידי חיפוי פלסטיק אם הם פועלים כמתוכנן. בשנת 2022 יוצרו ברחבי העולם פחות ממיליון טון מטרי של פלסטיק מתכלה, עם צמיחה מהירה צפויה לתעשייה9. ארבעת הפולימרים המתכלים הנפוצים ביותר, חומצה פולילקטית (PLA), עמילן פולימר, פוליהידרוקסיאלקנואטים (PHA) ופוליבוטילן אדיפט טרפתלט (PBAT), כולם משמשים באופן מסחרי או ניסיוני בחיפויי פלסטיק מתכלים חקלאיים10. למרות הבטחתם, הפירוק של מוצרי פלסטיק מתכלים אלה בתנאי שטח משתנה11. בעוד שכמה מחקרים על פירוק חיפוי פלסטיק מתכלה בשטח התמקדו בשברי מקרופלסטיק11, הערכת הפירוק המוחלט של חומרים פלסטיים דורשת יכולת לשחזר MPS ו-NPs מהאדמה. כימות מיקרופלסטיק מהקרקע חשוב גם כדי להעריך את הפוטנציאל להשפעות שליליות על מערכות אקולוגיות בקרקע מזיהום MP12.

כמה טכניקות נפוצות לזיהוי וכימות MP כוללות ניתוח חזותי, ספקטרוסקופיה אינפרא אדום מותמרת מיקרו-פורייה (μFTIR), ספקטרוסקופיה מיקרו-רמאן (μRaman), כרומטוגרפיה של גז-ספקטרוסקופיה מסה (GCMS כולל פירוליזה GCMS וספיחת מיצוי תרמי GCMS), וניתוח תרמוגרבימטרי13. טכניקות פיתוח אחרות כוללות ספקטרוסקופיה קרובה לאינפרא אדום למדידת MP באתרה בקרקעות14, מיצוי מתיל אסטריפיקציה של חומצות שומן לניתוח GCMS15 וספקטרוסקופיה של תהודה מגנטית גרעינית16. עד 90% מהמחקרים שכימתו MPS בקרקע השתמשו בניתוח חזותי (לבד או בשילוב עם טכניקות אחרות) כדי לזהות חלקיקי פלסטיק, בעוד ש-77% השתמשו בטכניקות ספקטרוסקופיה FTIR, Raman או GCMS17. פיתוח והרמוניה של מגוון רחב של טכניקות כימות MP יכול לעזור להרחיב את יכולתה של הקהילה המדעית לענות על שאלות מחקר מיקרופלסטיק מגוונות18. קיימות שלוש גישות גנריות להכנת דגימות קרקע לכימות מיקרופלסטיק: 1) הפרדת חלקיקי מיקרופלסטיק בודדים ללא שינוי מהקרקע (למשל על ידי הפרדת צפיפות), 2) מיצוי חומר פלסטי או פולימרי שעבר טרנספורמציה (למשל על ידי פירוק), או 3) ניתוח אדמה בתפזורת. גם ספקטרוסקופיה μFTIR וגם μRaman דורשות הפרדה של MPS בודדים מהאדמה לפני שניתן יהיה לזהות אותם כימית19 בעוד ש-pyro-GCMS עשוי להתבצע על חלקיקי פלסטיק מבודדים המופרדים מאדמה או אדמה בתפזורת20. הפרדת MPS מתכלים מהאדמה יכולה להיות קשה מכיוון שחלק מהעיכול המשמש להסרת חומר אורגני בקרקע יכול לפרק או לשנות כימית פולימרים מתכלים, כולל PBAT21. לספקטרוסקופיה של מיקרו-ראמאן ו-μFTIR יש גם מגבלת רזולוציה מרחבית: חלקיקים חייבים להיות גדולים מ-10-20 מיקרומטר עבור μFTIR ו-1 מיקרומטר עבור μRaman (אם ניתן להכין חלקיקים בודדים כה קטנים לניתוח)19,22. טכניקות אלו יכולות לספק זיהוי כימי של פולימרים MP, וניתן להשתמש בהדמיה ספקטרוסקופית כדי למדוד גודלMP 22. כל סוגי הפירו-GCMS מוגבלים בכך שהדגימות נהרסות במהלך הניתוח.

תמ"ג שימש בהצלחה לאפיון מרכיבי קרקע ומזהמים23, לכימות MPS 16,24,25,26, ולהערכת הפירוק של PBAT ופולימר אחר, פוליסטירן27,28. כאשר היא מופעלת תחת פרמטרים כמותיים, ספקטרוסקופיה של1 H-NMR מייצרת ספקטרום שבו השטח של כל שיא ספקטרלי עומד ביחס ישר למספר המימנים התורמים בדגימה; זה מאפשר לכמת את המרכיבים המרכיבים במדגם29. תמ"ג היא טכניקה אנליטית רבת ערך לכימות חלק מחברי הפרלמנט, כולל PBAT, בתוך הקרקע מכיוון שהיא מאפשרת כימות וזיהוי בו זמנית, היא מתאימה לתערובות מורכבות וטהורות, ואינה דורשת תקני ייחוס זהים מבחינה כימית30,31. ספקטרוסקופיה NMR של תמצית ממס יכולה לכמת MPS או NPs קטנים מאלה שניתן לעבד עבור כימות μFTIR, μRaman או GCMS. למרות יתרונות אלה, גישות NMR כמותיות עדיין מספקות רגישויות נמוכות יותר מאשר גישות מבוססות ספקטרוסקופיה מסה הרסנית32.

השיטה המוצעת, המשורטטת באיור 1, מתארת זרימת עבודה לעיבוד וניתוח דגימות קרקע המכילות PBAT - כולל פלסטיק PBAT בגודל ננו. בשיטה מופק פולימר PBAT מדגימות קרקע על ידי ניעור האדמה בתערובת של כלורופורם ומתנול. תמציות הממס המכילות PBAT מיובשות ולאחר מכן מומסות מחדש בכלורופורם דוטראט בתוספת קליברנט פנימי. ספקטרוסקופיה של תמ"ג מתבצעת על התמציות באמצעות פרמטרים כמותיים. הספקטרום המתקבל מנותח כדי לכמת PBAT על ידי השוואת שטח הפסגות המותאמות לאטומי מימן של ה-PBAT ומולקולות הקליברנט. שיטה זו מיישמת את גישת מיצוי הממס וספקטרוסקופיית התהודה המגנטית הגרעינית של פרוטון (1H-NMR) שהודגמה על ידי נלסון ואחרים.33. המטרה הייתה להשתמש בשיטה המתאימה לעיבוד דגימות בקנה מידה סביבתי (~100 גרם אדמה) ולעבד מספר דגימות במקביל ללא ציוד מיצוי מיוחד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. איסוף והכנת אדמה

הערה: ציוד דגימה ועיבוד לא אמור להכיל את הפולימר PBAT או מרכיביו כדי למנוע זיהום דגימה. חומרים פולימריים אחרים אינם בהכרח מפריעים לכימות PBAT מהאדמה. לדוגמה, פוליאתילן ופוליפרופילן אינם מייצרים פסגות ספקטרליות בכלורופורם 1H-NMR המפריעות לכימות של PBAT34, אך פוליאתילן טרפתלט, עם קבוצת הטרפתלט שלו, ככל הנראה יפריעל-35, כמו גם פוליאסטרים אחרים. ניתן להשתמש בטקסטים כמו ברנדוליני והילס34 כדי לקבוע את ספקטרום ה-H-NMR של פולימריםשונים ולסנן פסגות חופפות עם פסגות ה-PBAT המשמשות לכימות (מתואר להלן).

  1. אסוף לפחות 100 גרם משקל יבש שווה ערך של אדמה עבור כל דגימה. קבע את גודל דגימת הקרקע על סמך הריכוז הצפוי של פלסטיק על מנת לאסוף דגימה מייצגת ולהומוגניזציה של האדמה לאיסוף תת-דגימה במידת הצורך36.
    הערה: מערכות קרקע הן הטרוגניות מטבען37, וכך גם התפלגויות מזהמים (למשל, MPS) בתוכם38. קיימת גם שונות הקשורה לשיטות המשמשות למדידת ריכוזי מזהמים39. לכן, מומלץ ליצור עיצוב דגימה או עיצוב ניסיוני הכולל דגימות משוכפלות ככלי להערכת אי הוודאות ואיסוף נפחי דגימה מייצגים על סמך ריכוז הפלסטיק40. ריכוזי MP בקרקע תועדו כנעים בין קרוב לאפס ל-1 x 107 פריטים לק"ג אדמה, כאשר רוב האתרים מכילים פחות מ-10,000 פריטים לק"ג אדמה41. נפח יסודי מייצג תיאורטי יכול לנוע בין 23 מ"ר בריכוז MP של 10 פריטים למ"ר ל-0.02 מ"ר כאשר ריכוזי MP הם 10,000 פריטים למ"ר36.
    1. כדי להגדיל את שטח הדגימה האפקטיבי מאתר שדה תוך מזעור כמות האדמה שיש לעבד, אסוף אדמה משטח גדול (למשל, 1 מ"ר), ולאחר מכן השתמש בשיטת הרבעים כדי להומוגניזציה ואיחוד הדגימה (למשל, ל-500 גרם אדמה)36.
    2. בשיטת הרביעון, עורמים אדמה משטח גדול על ברזנט או משטח אחר, מערבבים היטב בעזרת חפירה ואז מחלקים לרבעים. שמור רבע מהדגימה והשליך את שלושת הרבעים האחרים. חזור על תהליך זה עד שהדגימה תהיה בגודל הרצוי.
  2. מסננים את האדמה דרך מסננת רשת של 2 מ"מ. נקו לחלוטין את המסננת ותפסו את התבנית בין דגימות אדמה.
  3. יבש אדמה באוויר, ולאחר מכן אחסן בשקיות דגימה אטומות. אדמה יבשה עשויה להיות מאוחסנת במצב זה לפני מיצוי PBAT.

2. מיצוי PBAT מקרקעות

זהירות: כלורופורם נדיף ורעיל. אחסן אותו בחושך בזכוכית ענבר, הרחק ממחמצנים. בזמן העבודה איתו, יש ללבוש כפפות מתאימות, מגן עיניים וביגוד מגן. טפל בזה רק במכסה אדים. מתנול הוא דליק, נדיף ורעיל. אחסן מתנול בארון חסין אש. בזמן העבודה עם מתנול, יש ללבוש כפפות מתאימות, הגנה על העיניים וביגוד מגן. טפל במתנול רק במכסה אדים. כלי זכוכית עלולים להישבר ולגרום לפציעה. ללבוש מגן עיניים בעת טיפול בכלי זכוכית. הימנע מלגעת בזכוכית שבורה בידיים חשופות. במקום זאת, נקה זכוכית שבורה עם כפפות עמידות בפני חיתוך, מלקחיים, מטאטא או כלי אחר.

הערה: כלורופורם אינו תואם לרוב הפלסטיק או המתכות. ודא שכל החומרים תואמים (למשל, זכוכית או פוליטטרפלואורואתילן, פלסטיק PTFE).

  1. במכסה אדים, הכינו 100 מ"ל של תערובת 90:10 v/v של כלורופורם (טריכלורו-מתאן; CHCl3) ומתנול (CH3OH) לכל דגימה שיש לחלץ. לדוגמה, כדי לחלץ מ-5 דגימות, מערבבים 450 מ"ל כלורופורם עם 50 מ"ל מתנול.
  2. הוסף 100 גרם אדמה יבשה, 100 מ"ל תמיסת כלורופורם-מתנול ו -20 חרוזי זכוכית לצנצנת מיצוי זכוכית. אטמו היטב צנצנות מיצוי עם מכסים מרופדים ב-PTFE כך שאף אדי ממס לא יוכלו לצאת מהצנצנות.
    הערה: PBAT מסיס מאוד בכלורופורם; נעשה שימוש בתערובת כלורופורם-מתנול מכיוון שמתנול יכול ליצור קשרי מימן עם מומסים, להתחרות במרכיבים מינרליים ואורגניים בקרקע ולהגביר את ההתאוששות של PBAT מהקרקע33.
  3. השתמשו בשולחן שייקר כדי לנער את צנצנות החילוץ למשך 8 שעות ב-200 סל"ד. לאחר הטלטול, הניחו לאדמה בצנצנות החילוץ להתיישב לפחות 4 שעות.
  4. יש להפריד את התמצית מהאדמה. במכסה האדים, פתחו את צנצנת המיצוי והעבירו את הנוזל באמצעות פיפט דרך מסנן נייר איכותי בגודל נקבוביות של 11 מיקרומטר לצנצנת זכוכית נקייה עם תווית. רשום את נפח הממס שהוחזר מצנצנת החילוץ. הימנע מהעברת מוצקי אדמה עם התמצית; השאירו כמה מ"ל ממס מאחור במידת הצורך.
    הערה: נייר הסינון נועד להסיר חתיכות גדולות של חומר אורגני מתמיסת הממס.
  5. יבש את התמציות על ידי השארתן במכסה האדים עד לאידוי מלא של הממס. פעולה זו עשויה להימשך עד 24 שעות. יבש את האדמה גם במכסה האדים. לאחר שהאדמה יבשה לחלוטין, השליכו אותה.
  6. לאחר שהתמציות יבשות, מכסים כל צנצנת דגימה ומאחסנים אותן באזור קריר, חשוך ויבש עד לצורך.

3. אוסף ספקטרום NMR

זהירות: כלורופורם נטול סיכונים מהווה את אותם סיכונים ודורש את אותם אמצעי זהירות כמו כלורופורם פרוטוני שתואר לעיל.

  1. הוסף קליברנטפנימי 42 לדגימה. השתמש ביתרה כדי לשקול 1.00 מ"ג של 1,4-דימתוקסי בנזן (DMB; C6H14O) לכל צנצנת דגימה המכילה תמצית מיובשת.
  2. השעו מחדש את הדגימה בכלורופורם דוטראט (CDCl3; trichloro(deutero)methane). במכסה האדים, השתמש במיקרופיפטה כדי להוסיף 500 מיקרוליטר של כלורופורם דוטראט לצנצנת עם תמצית דגימה מיובשת.
  3. יש לסגור את הצנצנת ולנער כדי להמיס את התמצית המיובשת על ידי טפיחה עדינה של הצנצנת על יד או ספסל, בערך פי 10 מכל צד. לאחר מכן השתמש בקצה פיפט נקי כדי להעביר את הנוזל לתוך צינור NMR.
  4. חזור על שלבים 3.2 ו-3.3 עם 500 מיקרוליטר נוספים של כלורופורם דוטראט, והוסף את החלק השני של הדגימה לאותו צינור NMR כמו הראשון. השטיפה השנייה נועדה להבטיח פירוק מלא והתאוששות של התמצית המיובשת מהמיכל.
  5. מכסה את צינור ה-NMR ואחסן אותו למשך 3 ימים לפני איסוף ספקטרום ה-NMR. זמן האחסון המתאים יהיה תלוי בקצב האידוי של הממס מצינור ה-NMR. נתח דגימות זמן קצר לאחר הכנתן עם כלורופורם דוטראט.
  6. כדי להעביר צינורות NMR לספקטרומטר, השתמש במחזיק המיועד לתמוך בצינורות הארוכים והעדינים. לאלה יש בדרך כלל תמיכה ליד הבסיס והחלק העליון של הצינור. שמור את הצינורות במצב זקוף במהלך ההובלה.
  7. באמצעות ספקטרומטר NMR של 500 מגה-הרץ, אסוף ספקטרום פרוטונים של 1H עם זווית דופק של 90°29, רוחב דופק של 8 מיקרון33, זמן עיכוב של 25 שניות (נקבע על ידי ניסוי התאוששות ההיפוך29,43), 262K נקודות לסריקה, ו-32 סריקות מרוכבות29,44 מ-12 עד -2 עמודים לדקה למשך זמן ריצה כולל של 25 דקות.
    הערה: השתמשנו בספקטרומטר Bruker Neo 500 מגה-הרץ עם בדיקה מותאמת לפס רחב ודגימה אוטומטית בטמפרטורה מבוקרת של 300 K. ניתן להשתמש בספקטרומטרים דומים אחרים. אם משתמשים במכשיר בעל עוצמת שדה מגנטי שונה, ניתן לחשב את זמן ההשהיה המתאים על סמך זמן ההרפיה T1 עבור PBAT ו-1,4-dimethoxybenzene באמצעות ניסוי התאוששות היפוך29,43.
  8. לאחר הפעלת הדגימה, שמור, העבר או גש לנתונים הספקטרליים לפי הצורך.
    בדוק נתונים ספקטרליים. בדוק שכל שיאי ה-PBAT המשמשים לכימות נפתרים בבירור אם קיימים. השתמש בשיאי PBAT 5 (8.10 ppm), 6 (4.44 ppm), 6' (4.38 ppm), 3' (4.15 ppm) ו-3 (4.09 ppm) לכימות (פרטים בטבלה 1). השתמש בפסגות DMB A (6.84 ppm) ו-B (3.77 ppm) גם לכימות (פרטים בטבלה 2). שימו לב במיוחד לפסגות 6, 6', 3' ו-3 של PBAT, שנראות קרובות מאוד זו לזו ועשויות לחפוף.
  9. אם חלק מהפסגות אינן נפתרות בבירור, יש לדלל את הדגימה. שלב 100 מיקרוליטר של דגימה ו-500 מיקרוליטר של כלורופורם דוטראט בצינור NMR נקי והפעל מחדש את הדגימה תחת אותם פרמטרים שהוגדרו בשלב 3.7.

4. ניתוח ספקטרום NMR לכימות PBAT

הערה: ניתן לבצע ניתוח ספקטרלי בכל עת לאחר האיסוף. ניתוח נתונים באותו יום שבו מיוצרים ספקטרום עדיף כדי להבטיח שהדגימות עדיין זמינות להפעלה חוזרת במקרה של בעיות כלשהן.

  1. פתח את קובץ ה-FID שנוצר על ידי הספקטרומטר בתוכנת עיבוד ה-NMR FID (השתמשנו ב-MestreNova מבית MestreLab, אפשרויות אחרות אך קיימות אפשרויות אחרות).
  2. החלת הרחבת קו על הספקטרום: בתוכנת עיבוד FID, בחר תבנית עיבוד בתפריט עיבוד, ולאחר מכן נווט למקטע Apodization. בחר מודל מעריכי בגודל של 0.5 הרץ ונקודה ראשונה של 0.5 הרץ.
  3. החילו תיקון פאזה אוטומטי בלחיצה על הלחצן Auto Phase Correction בתפריט Processing. החילו תיקון קווי בסיס אוטומטי בלחיצה על הלחצן Auto Baseline Correction בתפריט Processing.
  4. השתמש בדה-קונבולוציה של שיא כדי להתאים לפסגות הספקטרליות הנמדדות: בכרטיסייה ניתוח של תוכנת עיבוד הספקטרה, במקטע התאמה, לחץ על כפתור התאמה חדשה . השתמש בסמן כדי ללחוץ על הספקטרום בהזזה של 8.5 עמודים לדקה, ולאחר מכן גרור את הסמן להזזה של 3.0 ושחרר.
  5. לחץ על טבלת התאמת קו מתחת לקטע התאמה כדי להציג את כל הפסגות המותאמות.
  6. שמור על הפסגות המשמשות לכימות כמתואר בטבלה 1 ובטבלה 2 ומסומנות באיור 2. השתמש ב-PBAT Peaks 5 (8.10 ppm), 6 (4.44 ppm), 6' (4.38 ppm), 3' (4.15 ppm) ו-3 (4.09 ppm) בכימות (פרטים בטבלה 1), כמו גם בשיאי DMB A (6.84 ppm) ו-B (3.77 ppm). אטומי המימן התואמים לכל שיא המפורט בטבלה 1 ובטבלה 2 מסומנים בתרשימים המבניים באיור 3, כאשר איור 3A מראה את המבנה של שני הדימרים PBAT, איור 3B מראה כיצד מיקום הדימרים בפולימר מקיים אינטראקציה כדי לשנות את שינוי שיא המימן מהמונומר 1,4-בוטנדיול, ואיור 3C המציג את המבנה של DMB.
  7. מחק את כל הפסגות האחרות מההתאמה על-ידי בחירת הפסגות הלא רצויות ולחיצה על Delete Peak.
  8. השתמש בטבלת ההתאמה כדי להעתיק את השטח של כל פסגה ליישום גיליון אלקטרוני לחישובים (בחרנו להשתמש בגיליון אלקטרוני).
  9. להעתקת אזורי שיא לגיליון אלקטרוני, בחר תחילה את כל נתוני השיא בטבלת התאמת הקו. לאחר מכן לחץ לחיצה ימנית ובחר העתק מהתפריט הנפתח. הדבק את הנתונים בגיליון האלקטרוני.
  10. חשב את מספר השומות של DMB שנוספו לדגימה, nDMB, באמצעות המשוואה
    figure-protocol-1
    כאשר mDMB היא המסה של DMB שנוספה לדגימה בגרמים (מומלץ 1.00 מ"ג) ו-MMDMB היא המסה המולרית של DMB (138.17 גרם/מול).
  11. חשב את מספר השומות של דימר בוטילן טרפתלט של PBAT במדגם, nBT, באמצעות המשוואה
    figure-protocol-2
    כאשר A5 הוא השטח הנמדד של שיא PBAT 5, AA הוא השטח הנמדד של שיא DMB A, ו - AB הוא השטח הנמדד של שיא DMB B. יחידות השטח המיוצרות על ידי תוכנת הניתוח הספקטרלי הן שרירותיות.
  12. חשב את מספר השומות של דימר בוטילן אדיפט של PBAT במדגם, nBA, באמצעות המשוואה
    figure-protocol-3
    כאשר A3 הוא השטח הנמדד של שיא PBAT 3, A3' הוא השטח הנמדד של שיא PBAT 3', A6 הוא השטח הנמדד של שיא PBAT 6, ו-A 6' הוא השטח הנמדד של שיא PBAT 6'. יחידות השטח המיוצרות על ידי תוכנת הניתוח הספקטרלי הן שרירותיות.
  13. חשב את המסה של PBAT במדגם, mPBAT, משוחזר, באמצעות המשוואה
    figure-protocol-4
    כאשר MMBA היא המסה המולרית של דימר BA מ-PBAT (200 גרם/מול), ו-MMBT היא המסה המולרית של דימר BT מ-PBAT (220 גרם/מול).
  14. אם הייתה כמות ידועה של PBAT במדגם, ניתן לחשב את אחוז ההתאוששות, η, עבור המדגם כמדד ליעילות המיצוי לפי המשוואה
    figure-protocol-5
  15. חשב את ריכוז ה-PBAT במדגם, CPBAT, באמצעות המשוואה
    figure-protocol-6
    כאשר mאדמה יבשה היא מסת האדמה היבשה המשמשת לייצור התמצית (0.1 ק"ג),ממס V ששוחזר הוא נפח הממס שהוחזר מהאדמה בשלב 2.4,ו-V sovlent נוסף הוא הכמות הראשונית של ממס שנוספה לדגימת האדמה (100 מ"ל).

5. הכנת עקומת כיול לכימות PBAT מקרקע מסוימת

הערה: עקומת כיול שנוצרה על סמך דגימות קרקע עם כמויות ידועות של PBAT שנוספו תספק מידע שימושי על אופן ההפקה וההתאוששות של PBAT מקרקע מסוימת. המיצוי אינו זהה עבור כל הקרקעות או כל צורות ה-PBAT. אנו חושדים שיעילות המיצוי תלויה בחימר הקרקע ובתכולת החומר האורגני33, וממליצים ליצור עקומת כיול עבור כל סדרת קרקע ואופק מעניין. ניתן ליצור את עקומת הכיול לפני או אחרי עיבוד דגימות לא ידועות בשיטה זו.

  1. אוספים ומכינים שווה ערך ל -2.5 ק"ג אדמה יבשה כמתואר בשלבים 1.1-1.3.
  2. קבע את הטווח שיכוסה על ידי עקומת הכיול; הריכוז המרבי של PBAT המשמש בעקומת הכיול צריך להיות גבוה מריכוז ה-PBAT הגבוה ביותר בקרב דגימות לא ידועות.
  3. הכן או השג מספיק פלסטיק PBAT ליצירת 5 דגימות דוקרניות של 100 גרם אדמה עם 0%, 25%, 50%, 75% ו-100% מהריכוז המרבי (25 דגימות בסך הכל). לדוגמה, אם 40 מ"ג/ק"ג הוא הריכוז המקסימלי הרצוי, יהיה צורך בסך הכל ב-50 מ"ג PBAT כדי ליצור את הדגימות הדוקרניות.
  4. הכינו 25 דגימות של 100 גרם אדמה כל אחת. הגדל את הדגימות על ידי שקילת פלסטיק מבוסס PBAT והוספתו לדגימות קרקע בשיעורים שנקבעו. לדוגמה, אם 40 מ"ג/ק"ג PBAT הוא הריכוז המקסימלי הרצוי, צור 5 דגימות ללא PBAT, 5 דגימות עם 1 מ"ג PBAT, 5 דגימות עם 2 מ"ג PBAT, 5 דגימות עם 3 מ"ג PBAT ו-5 דגימות עם 4 מ"ג PBAT. לאחר הוספת PBAT לאדמה, מערבבים היטב.
  5. חלץ PBAT מ-25 הדגימות הדוקרניות, ולאחר מכן אסוף ספקטרום NMR מהתמציות ונתח את הספקטרום המתקבל כמתואר בשלבים 2.1 עד 4.16.
  6. זהה את המשוואה של עקומת כיול עבור PBAT בקרקע זו על ידי ביצוע רגרסיה ליניארית בין כמות ה-PBAT הנמדדת בכל דגימה דוקרנית לבין הכמות בפועל של PBAT שנוספה בכלי ניתוח סטטיסטי. השתמשנו בגיליון אלקטרוני. אם לא מתגלה PBAT בדגימות הדוקרניות ללא תוספת PBAT, אז כוח b = 0 ברגרסיה.
    הערה: מבחן רגרסיה ליניארית מעריך את חוזק הקשר הליניארי בין שני משתנים מספריים רציפים x ו-y, על פי הקשר y = mx + b. הערכים של m ו-b המתאימים ביותר לנתונים מחושבים על ידי הבדיקה. מקדם r2 של מבחן הרגרסיה מתאר עד כמה שני המשתנים קשורים זה לזה.
  7. בדוק קשר מובהק בין יעילות המיצוי לריכוז PBAT באמצעות כלי הניתוח הסטטיסטי. חשב את יעילות החילוץ של PBAT מהדגימות הדוקרניות כ
    figure-protocol-7
  8. השתמש בכלי הניתוח הסטטיסטי כדי לחשב את ההסתברות שהנתונים הנצפים יכולים להתרחש באופן אקראי ללא מתאם בין יעילות המיצוי לריכוז PBAT. אם ערך p זה גדול מסף המובהקות שנקבע מראש, α, אז הוא לא מצליח לדחות את השערת האפס שאין קשר בין שני המשתנים. אם זה המקרה, ניתן להניח שיעילות המיצוי קבועה עבור כל ריכוזי ה-PBAT בטווח הנבדק. אם השערת האפס נדחית, ייתכן שהמודל הליניארי המתואר כאן לא יהיה הדרך הטובה ביותר למדל את הנתונים.
  9. השתמש במשוואת הרגרסיה הליניארית של עקומת הכיול כדי להעריך את כמות ה-PBAT בדגימות לא ידועות שעובדו בשיטה זו. אם משתנה הרגרסיה x היה הכמות בפועל של PBAT בדגימות דוקרניות של עקומת כיול, המשתנה y היה הכמות הנמדדת של PBAT, ו-b הוגדר ל-0, אז
    figure-protocol-8
    הערה: ניתן להשתמש בתכולת ה-PBAT של דגימות משוכפלות המוערכות באמצעות משוואת עקומת כיול כדי ליצור מרווח סמך עבור כמות ה-PBAT בקרקע מסוימת, או אם ניתן לחשב ממוצע ומרווח סמך עבור ריכוזי ה-PBAT בתמציות משוכפלות, ניתן ליישם את עקומת הכיול כדי להעריך את ריכוז ה-PBAT באדמה. כל אחד מסדר הפעולות מייצר את אותו מרווח בר-סמך לתכולת PBAT באדמה. לדוגמה, שקול תמציות מ-10 דגימות משוכפלות בעלות ריכוזי PBAT של 10, 5, 2, 4, 10, 11, 2, 6, 8 ו-5 מ"ג/ק"ג ואת משוואת עקומת הכיול y (PBAT נמדד בתמצית) = 0.75 x (PBAT אמיתי באדמה). ניתן להעריך את ריכוזי PBAT בקרקע בכל שכפול כ-13, 7, 3, 5, 13, 15, 3, 8, 11 ו-7 מ"ג/ק"ג. אז ריכוז ה-PBAT הממוצע בקרקע יוערך כ-8.4 מ"ג/ק"ג עם סטיית תקן של 4.4 מ"ג/ק"ג. אם מחושבים תחילה ממוצע וסטיית תקן עבור ריכוזי PBAT של תמצית (10, 5, 2, 4, 10, 11, 2, 6, 8 ו-5), יחושב ממוצע של 6.3 מ"ג/ק"ג וסטיית תקן של 3.3 מ"ג/ק"ג. לאחר מכן, ניתן ליישם את עקומת הכיול הן על ממוצע והן על סטיית תקן כדי להעריך את ריכוז ה-PBAT בקרקע: ממוצע של 8.4 מ"ג/ק"ג, סטיית תקן של 4.4 מ"ג/ק"ג.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כדי להעריך את היעילות של שיטה זו בכימות פולימר PBAT מהאדמה, נבנו עקומות כיול על ידי חילוץ PBAT מדגימות דוקרניות שנוצרו משלוש קרקעות שונות. עבור כל אחת משלוש הקרקעות (פרטים בטבלה 3), האדמה הועברה דרך מסננת של 2 מ"מ ולאחר מכן יובשה באוויר. דגימות דוקרניות נוצרו על ידי הוספת 0, 9, 18, 27 או 36 מ"ג של MP מבוסס PBAT ל-100 גרם אדמה יבשה (5 שכפולים של כל אחד). זה שווה ערך ל-0, 63, 126, 189 או 252 מ"ג/ק"ג של פולימר PBAT. MPS היו עשויים מחיפוי פלסטיק עם 70% PBAT במסה ועובי 50 מיקרומטר על פי הליך הטחינה המתואר ב-A...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מציעים שיטה למיצוי ממס של PBAT מהאדמה יחד עם 1H-NMR כדי לכמת PBAT בתמצית. מרכיבי המפתח של תהליך המיצוי כוללים את טכניקת המיצוי והציוד, הממס המשמש למיצוי ודרישות הזמן. בחרנו להשתמש בטכניקת מיצוי הדורשת ציוד פשוט וזול יחסית (צנצנות זכוכית, חרוזי זכוכית ושולחן שייקר) בהשוואה למיצוי סוקסלט ומיצוי ממס מואץ (ASE) שהודגמו על ידי נלסון ואחרים.33. המטרה של שיטה זו היא שניתן יהיה לחלץ דגימות רבות במקביל למהירות בעיבוד דגימות קרקע בתפזורת. יתרון נוסף של מיצוי ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים כי לא ידוע על אינטרסים פיננסיים מתחרים או קשרים אישיים שיכולים היו להשפיע על העבודה המדווחת במאמר זה.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תודה ל-USDA-NIFA על מימון פרויקט זה באמצעות פרס מספר 2020-67019-31167 ל-SMS ולתוכנית יוזמות המחקר לתכנון אסטרטגי של אוניברסיטת טנסי (SPRINT) למענק פנימי DGH ו-SMS. למממנים לא היה כל תפקיד בעיצוב המחקר, איסוף הנתונים, הניתוח, הפרשנות, כתיבת הדו"ח או ההחלטה להגיש את המאמר לפרסום.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
1,4-דימתוקסיבנזןארקוס אורגניקס 99%+AC115411000 1 מ"ג לדגימה
בקבוק זכוכית ענבר עם מכסה מרופד PTFE (1 ליטר)Kimble5223253C-26
כלורופורם לשימוש חוזר; טריכלורומתאןפישר כימיקלAA43685M6 90 מ"ל לדגימה; Fisher Optima
Deuterated chlorform; טריכלורו (דאוטריו)מתאןסיגמא אולדריץ'10342000251 מ"ל לדגימה; מינימום 99.8% דאוטראט; מיוצב עם חרוזי זכוכית כסופים
(קוטר 3 מ"מ)Propper Manufacturing300060020 לדגימה
צנצנות מיצוי זכוכית עם מכסה מרופד PTFE (נפח ~250 מ"ל)Kimble5510858B2 לכל דגימה, לשימוש חוזר
צילינדר מדורג, 1 ליטר, פוליפרופילןNalgene3662-1000לשימוש חוזר
צילינדר מדורג, 500 מ"ל, פוליפרופילןNalgene3662-0500לשימוש חוזר
מתנולפישר כימיקלA412-4 20 מ"ל לדגימה; ACS מוסמך
Micropipette עם טווח של 0.5 - 1 מ"לFisher Scientific3123000063
ספקטרומטר NMRBrukern/a500 MHz
מכשיר צינור NMR (גובה 7 אינץ', תפוקה גבוהה)WilmadWG-1000-71 לכל דגימה
שייקר פלטפורמהEppendorf, Excella E5 M1355-0000
קצה פיפטה פוליאתילן לשימוש חוזר (נפח 10 מ"ל)Eppendorf224920981 לכל דגימה,
קצות מיקרופיפטה פוליפרופילן לשימוש חד פעמי (נפח 1 מ"ל)Fisher Scientific02-707-5103 לכל דגימה, לשימוש חד פעמי
מיקרו-איזוןמטלר טולדו30532226 לשימוש חוזר
לשימוש חוזר חצי

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Andrady, A. L. The plastic in microplastics: A review. Mar Pollut Bull. 119 (1), 12-22 (2017).
  2. Fakour, H., et al. Quantification and analysis of microplastics in farmland soils: Characterization, sources, and pathways. Agriculture. 11 (4), 330(2021).
  3. Wang, K., et al. Impact of long-term conventional and biodegradable film mulching on microplastic abundance, soil structure and organic carbon in a cotton field. Environ Pollut. 356, 124367(2024).
  4. Plastics Europe Plastics - the Facts. , Plastics Europe. Available from: https://plasticseurope.org/knowledge-hub/plastics-the-facts-2022/ (2022).
  5. Assessment of agricultural plastics and their sustainability: A call for action. , Food Agriculture Organization. Rome. (2021).
  6. Beriot, N., et al. Intensive vegetable production under plastic mulch: A field study on soil plastic and pesticide residues and their effects on the soil microbiome. Sci Total Environ. 900, 165179(2023).
  7. Liu, E. K., He, W. Q., Yan, C. R. White revolution to white pollution - Agricultural plastic film mulch in China. Environ Res Lett. 9 (9), 091001(2014).
  8. Sintim, H. Y., et al. Release of micro- and nanoparticles from biodegradable plastic during in situ composting. Sci Total Environ. 675, 686-693 (2019).
  9. Skoczinski, P., et al. Bio-based building blocks and polymers - Global capacities, production and trends 2023-2028. Indust Biotech. 20 (2), 52-59 (2024).
  10. Hayes, D. G., et al. Effect of diverse weathering conditions on the physicochemical properties of biodegradable plastic mulches. Polymer Testing. 62, 454-467 (2017).
  11. Li, C., et al. Effects of biodegradable mulch on soil quality. Appl Soil Ecol. 79, 59-69 (2014).
  12. Wang, F., Wang, Q., Adams, C. A., Sun, Y., Zhang, S. Effects of microplastics on soil properties: Current knowledge and future perspectives. J Hazardous Mater. 424, 127531(2021).
  13. Möller, J. N., Löder, M. G. J., Laforsch, C. Finding microplastics in soils: A review of analytical methods. Environ Sci Technol. 54 (4), 2078-2090 (2020).
  14. Paul, A., Wander, L., Becker, R., Goedecke, C., Braun, U. High-throughput NIR spectroscopic (NIRS) detection of microplastics in soil. Environ Sci Pollut Res. 26 (8), 7364-7374 (2019).
  15. Wortman, S. E., Jeske, E., Samuelson, M. B., Drijber, R. A new method for detecting micro-fragments of biodegradable mulch films containing poly(butylene adipate-co-terephthalate) (PBAT) in soil. J Environ Quality. 51 (1), 123-128 (2021).
  16. Peez, N., et al. Quantitative analysis of PET microplastics in environmental model samples using quantitative 1H-NMR spectroscopy: Validation of an optimized and consistent sample clean-up method. Anal Bioanal Chem. 411 (28), 7409-7418 (2019).
  17. Praveena, S. M., Aris, A. Z., Singh, V. Quality assessment for methodological aspects of microplastics analysis in soil. Trend Environ Anal Chem. 34, e00159(2022).
  18. Primpke, S., et al. Critical assessment of analytical methods for the harmonized and cost-efficient analysis of microplastics. Appl Spectro. 74 (9), 1012-1047 (2020).
  19. Käppler, A., et al. Analysis of environmental microplastics by vibrational microspectroscopy: FTIR, Raman or both. Anal Bioanal Chem. 408 (29), 8377-8391 (2016).
  20. Watteau, F., Dignac, M. F., Bouchard, A., Revallier, A., Houot, S. Microplastic detection in soil amended with municipal solid waste composts as revealed by transmission electronic microscopy and pyrolysis/GC/MS. Front Sustainable Food Syst. 2, 407866(2018).
  21. Pfohl, P., et al. Microplastic extraction protocols can impact the polymer structure. Microplastics Nanoplastics. 1 (1), 1-13 (2021).
  22. Xu, J. L., Thomas, K. V., Luo, Z., Gowen, A. A. FTIR and Raman imaging for microplastics analysis: State of the art, challenges and prospects. Trend Anal Chem. 119, 115629(2019).
  23. Cardoza, L. A., Korir, A. K., Otto, W. H., Wurrey, C. J., Larive, C. K. Applications of NMR spectroscopy in environmental science. Prog Nucl Magnetic Resonance Spectr. 45 (3-4), 209-238 (2004).
  24. Peez, N., Rinesch, T., Kolz, J., Imhof, W. Applicable and cost-efficient microplastic analysis by quantitative 1H-NMR spectroscopy using benchtop NMR and NoD methods. Magnetic Resonance Chem. 60 (1), 172-183 (2022).
  25. Günther, M., Imhof, W. Simultaneous quantification of microplastic particles by non-deuterated (NoD) 1 H-qNMR from samples comprising different polymer types. Analyst. 148 (5), 1151-1161 (2023).
  26. Papini, G., Petrella, G., Cicero, D. O., Boglione, C., Rakaj, A. Identification and quantification of polystyrene microplastics in marine sediments facing a river mouth through NMR spectroscopy. Marine Pollut Bull. 198, 115784(2024).
  27. Herrera, R., Franco, L., Rodríguez-Galán, A., Puiggalí, J. Characterization and degradation behavior of poly(butylene adipate-co-terephthalate)s. J Polymer Sci Part A. 40 (23), 4141-4157 (2002).
  28. Mauel, A., Pötzschner, B., Meides, N., Siegel, R., Strohriegl, P., Senker, J. Quantification of photooxidative defects in weathered microplastics using 13 C multiCP NMR spectroscopy. RSC Adv. 12 (18), 10875-10885 (2022).
  29. Bharti, S. K., Roy, R. Quantitative 1H NMR spectroscopy. Trend Anal Chem. 35, 5-26 (2012).
  30. Li, X., Hu, K. Quantitative NMR Studies of Multiple Compound Mixtures. Ann Rep NMR Spectro. 90, 85-143 (2017).
  31. Simmler, C., Napolitano, J. G., McAlpine, J. B., Chen, S. N., Pauli, G. F. Universal quantitative NMR analysis of complex natural samples. Curr Opinion Biotechnol. 25, 51-59 (2014).
  32. Giraudeau, P. Challenges and perspectives in quantitative NMR. Magnetic Reason Chem. 55 (1), 61-69 (2017).
  33. Nelson, T. F., Remke, S. C., Kohler, H. P. E., McNeill, K., Sander, M. Quantification of Synthetic Polyesters from Biodegradable Mulch Films in Soils. Environ Sci Technol. 54, 266-275 (2020).
  34. Brandolini, A. J., Hills, D. D. NMR spectra of polymers and polymer additives. , CRC Press. Boca Raton. (2000).
  35. Matsuda, H., Asakura, T., Miki, T. Triad sequence analysis of poly(ethylene/butylene terephthalate) copolymer using 1H NMR. Macromolecules. 35 (12), 4664-4668 (2002).
  36. Yu, Y., Flury, M. How to take representative samples to quantify microplastic particles in soil. Sci Total Environ. 784, 147166(2021).
  37. Cambardella, C. A., et al. Field-scale variability of soil properties in central Iowa soils. Soil Sci Soc Am J. 58, 1501-1511 (1994).
  38. Ramsey, M. H., Argyraki, A. Estimation of measurement uncertainty from field sampling: Implications for the classification of contaminated land. Sci Total Environ. 198 (3), 243-257 (1997).
  39. Desaules, A. Critical evaluation of soil contamination assessment methods for trace metals. Sci Total Environ. 426, 120-131 (2012).
  40. Pennock, D., Yates, T., Braidek, J. Soil Sampling Designs. Soil Sampl Meth Anal. , 25-38 (2006).
  41. Büks, F., Kaupenjohann, M. Global concentrations of microplastics in soils - A review. SOIL. 6 (2), 649-662 (2020).
  42. Bowen, M., O'Neill, I., Pringuer, M. Quantitiative Applications of Nuclear Magnetic Resonance in Pharmaceutical Analysis. Proc Soc Anal Chem. , 294-297 (1974).
  43. Frank, O., Kreissl, J. K., Daschner, A., Hofmann, T. Accurate determination of reference materials and natural isolates by means of quantitative 1H NMR spectroscopy. J Agri Food Chem. 62 (12), 2506-2515 (2014).
  44. Malz, F., Jancke, H. Validation of quantitative NMR. J Pharma Biomed Anal. 38 (5), 813-823 (2005).
  45. Astner, A. F., et al. Forming micro-and nano-plastics from agricultural plastic films for employment in fundamental research studies. J Vis Exp. (185), e641112(2022).
  46. Anunciado, M. B., et al. Effect of environmental weathering on biodegradation of biodegradable plastic mulch films under ambient soil and composting conditions. J Polymer Environ. 29 (9), 2916-2931 (2021).
  47. Deshoulles, Q., et al. Hydrolytic degradation of biodegradable poly(butylene adipate-co-terephthalate) (PBAT) - Towards an understanding of microplastics fragmentation. Polymer Degrad Stability. 205, 110122(2022).
  48. Zhang, Y., et al. Aging significantly increases the interaction between polystyrene nanoplastic and minerals. Water Res. 219, 118544(2022).
  49. Peez, N., Janiska, M. C., Imhof, W. The first application of quantitative 1H NMR spectroscopy as a simple and fast method of identification and quantification of microplastic particles (PE, PET, and PS). Anal Bioanal Chem. 411 (4), 823-833 (2019).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Microplastic QuantificationNano plastic QuantificationPBAT ExtractionSoil BiodegradationProton NMR SpectroscopySolvent ExtractionChloroform MethanolSoil MicroplasticsBiodegradable PlasticsEnvironmental Monitoring

מאמרים קשורים