מאמר שיטה

הקמה ואימות של מודל חולדה של יתר לחץ דם עורקי ריאתי הקשור לפיברוזיס ריאתי

DOI:

10.3791/67747

⸱

23 במאי 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Respiratory Diseases, National Center for Respiratory Medicine, Guangdong Key Laboratory of Vascular Diseases, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Guangzhou Institute of Respiratory Health, the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 2Department of Critical Care Medicine, The Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 3GMU-GIBH Joint School of Life Sciences, Guangzhou Medical University, 4Guangzhou laboratory, Guangzhou International Bio Island

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן, מוצגת השיטה להשראת יתר לחץ דם עורקי ריאתי הקשור לפיברוזיס ריאתי (PF-PH) מודל חולדה על ידי הזרקת בלאומיצין לדרכי הנשימה. אנו מספקים גם גישה צעד אחר צעד לאימות מודל בעלי חיים זה.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

חולים עם פיברוזיס ריאתי נמצאים בסיכון גבוה יותר לפתח יתר לחץ דם ריאתי, סיבוך עם פרוגנוזה גרועה. נכון לעכשיו, המנגנון של קישור זה עדיין לא מובן היטב. מכשול מרכזי להתקדמות בתחום זה הוא היעדר מודל בעל חיים אמין לשכפול PF-PH. מחקר זה נועד לבסס מודל עכברוש PF-PH יציב. חולדות צמו לילה לפני ההתערבות. בהרדמת נתרן פנטוברביטל (45 מ"ג/ק"ג), קנה הנשימה הוחדר עם צינור PE50 שהוחדר לעומק של 3 ס"מ (המרחק מהגלוטיס לצינורת). בלאומיצין (BLM) ניתן תוך קנה הנשימה כמנה בודדת (5 מ"ג/ק"ג, מומס ב-0.2 מ"ל של 0.9% NaCl). לאחר ההזרקה, החולדות סובבו מיד כדי להבטיח פיזור אחיד של ה-BLM. לאחר 35 יום לאחר הזרקת ה-BLM, החולדות הראו פגיעה מתקדמת בתפקוד הריאות ולחץ סיסטולי מוגבר בחדר ימין והיפרטרופיה של החדר הימני, וחשפו את המאפיינים הפתולוגיים של יתר לחץ דם ריאתי. אנו מספקים שיטה כללית ואמינה להקמת מודל חולדות של PF-PH.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

יתר לחץ דם ריאתי (PH) עקב מחלת ריאות אינטרסטיציאלית (ILD) שכיח מבחינה קלינית, עם שכיחות מוערכת של 10% עד 80% בחולים עם פיברוזיס ריאתי אידיופטי (IPF), והוא נראה לעתים קרובות גם במחלות פיברוטיות אחרות 1,2. מחקרים רבים הראו כי התפתחות PH קשורה לתחלואה משמעותית ולהפחתת הישרדות 3,4,5. בהשוואה ליתר לחץ דם עורקי ריאתי (PAH) מקבוצה 1, הפתוגנזה של יתר לחץ דם עורקי ריאתי הקשורה לפיברוזיס ריאתי (PF-PH) נותרה לא מובנת היטב6. מטרת הקמת מודל בעלי חיים של PF-PH בחולדות היא לספק מסגרת אמינה למחקר מדעי על פיברוזיס ריאתי הקשור ליתר לחץ דם ריאתי ולחקור דרכים פוטנציאליות ליישומים טיפוליים קליניים.

בלאומיצין הוא גורם קלאסי לפיברוזיס ריאתי הנמצא בשימוש נרחב במודלים של בעלי חיים7. מחקר נוסף של בלקברן ואחרים ומעבדתנו9 גילה כי בלאומיצין יכול גם לעורר מאפיינים פתולוגיים אופייניים של יתר לחץ דם ריאתי, כגון לחץ סיסטולי מוגבר בחדר ימין (RVSP) והיפרטרופיה של החדר הימני. מבחינה מכנית, בלאומיצין גורם לפיברוזיס פרנכימלי ריאתי, התכווצות כלי דם היפוקסית והפחתה בצפיפות מיטת כלי הדם הריאתיים, ובכך מוביל להתפתחות יתר לחץ דם ריאתי6. בנוסף, ראינו אובדן משמעותי של תאי אנדותל כלי דם ריאתיים החל מהיום השביעי של הטיפול בבלאומיצין, כאשר אובדן זה החמיר בהדרגה במהלך הניסוי9. תופעה זו מצביעה על כך שתפקוד לקוי של אנדותל כלי הדם הריאתיים הנגרמת על ידי בלאומיצין עשוי למלא תפקיד פוטנציאלי בהתחלה והתקדמות של יתר לחץ דם ריאתי.

עקב פיברוזיס אינטרסטיציאלי ריאתי, חולי IPF נמצאים במצב של היפוקסיה במשך זמן רב, ושינויים מפצים מתרחשים בכלי הלב והריאה, מה שמוביל ליתר לחץ דם ריאתי6. השימוש במודלים של בעלי חיים יכול לעזור לנו להבין עוד יותר את המנגנונים הבסיסיים של פיברוזיס ריאתי אידיופטי אנושי הקשור ליתר לחץ דם ריאתי. למרות שמודל זה אינו יכול לדמות באופן מלא את המאפיינים הפתולוגיים של מחלות אנושיות, מודל זה עדיין יכול לספק תובנות חשובות. ישנם מודלים ניסיוניים רבים המדמים פיברוזיס ריאתי, כגון עירוי בדרכי הנשימה במינון יחיד של בלאומיצין, העברת וקטור ויראלי של גורמי גדילה משתנים וחשיפה לסיליקה 8,10. נכון לעכשיו, מודל ה-BLM הוא המודל הנפוץ והמאופיין ביותר מכיוון שניתן להשרות אותו בקלות תוך זמן קצר ובעל יכולת שחזור גבוהה. בנוסף, שינויים זמניים בפיברוזיס ריאתי הוערכו במודל עכבר בלאומיצין, שבו נצפו ביטוי מוגבר של סמני פיברוזיס וגנים הקשורים לפתולוגיה של מחלה, כגון Col1A1 ו-Col1A2, בין הימים 15-218. שינויים קרדיווסקולריים, כגון היפרטרופיה של החדר הימני ועלייה משמעותית ב-RVSP, זוהו ביום 3311 או אחריו. במקביל, המעבדה שלנו העריכה בעבר את השינויים בפרמטרים של PH ו-PF של מודלים של חולדות המושרים על ידי בלאומיצין9. מצאנו כי בנוסף למאפייני פיברוזיס ריאתי (PF) כגון פגיעה מתקדמת בתפקוד הריאות ושקיעת קולגן בחולדות, מאפיינים אופייניים ליתר לחץ דם ריאתי (PH) הופיעו בהדרגה תוך 7 עד 35 ימים לאחר החדרת בלאומיצין בדרכי הנשימה. מדד RVSP ופולטון הראו עלייה בתלות בזמן. נכון לעכשיו, בעלי חיים שונים עם פיברוזיס ריאתי דווחו בספרות. כמה מומחים הציעו כי מודלים של חולדות הפגינו תגובה פיברוטית בולטת יותר מאשר דגמי העכברים12. לכן, על מנת לחקור טוב יותר את התקדמות פיברוזיס ריאתי בשילוב עם יתר לחץ דם ריאתי, מודל חולדות המושרה על ידי בלאומיצין הוא המפתח.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הניסויים בבעלי חיים המתוארים במחקר זה אושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית החולים המסונף הראשון של האוניברסיטה הרפואית גואנגג'ואו (מספר אישור אתי: 2018-456).

1. רכש חולדות ניסוי

  1. חלקו את החולדות לשתי קבוצות: קבוצת הביקורת הרגילה וקבוצת המודל, עם 7 חולדות בכל קבוצה. השתמש בחולדות Sprague-Dawley (SD) זכרות בנות 10 שבועות במשקל 200 ±-20 גרם למחקר

2. אינדוקציה של מודל חולדות PF-PH

  1. על מנת למנוע שאיפות חוזרות במהלך ההליך, צום את החולדות למשך הלילה לפני הדוגמנות.
  2. להרדים חולדות על ידי הזרקה תוך-צפקית של נתרן פנטוברביטל (45 מ"ג/ק"ג) כדי להבטיח דיוק ובטיחות פרוצדורלית ולמזער כאב ולחץ של בעלי חיים. אשר את רמות ההרדמה הכירורגית על ידי חוסר תגובה לצביטה בבוהן. במקביל, מרחו משחה על עיני החולדות למניעת יובש.
  3. צנרור קנה הנשימה של החולדה עם צינור PE50 המוחדר לעומק של 3 ס"מ (המרחק מהגלוטיס לצינור).
  4. בעזרת מזרק של 1 מ"ל (26 גרם), שאבו 0.2 מ"ל של בלאומיצין (5 מ"ג/ק"ג, מומס ב-0.2 מ"ל של 0.9% NaCl). הזריק את המזרק המכיל BLM לדרכי הנשימה דרך צינורית כמנה אחת. עבור חולדות בקבוצת הביקורת, בצע מתן תוך קנה הנשימה של מי מלח רגילים סטריליים (0.2 מ"ל). במהלך תהליך זה, חולדות אינן זקוקות לשיכוך כאבים.
  5. כדי להבטיח פיזור אחיד של בלאומיצין, הניחו את החולדה במצב שכיבה, החזיקו בעדינות וסובבו לאט. זווית הסיבוב המומלצת היא 30°-45°, לסירוגין בין הצדדים. יש לשמור על כל סיבוב במשך 10-15 שניות, לחזור על עצמו 3x-4x.
  6. הניחו את החולדות על כריות חימום כדי לסייע בשמירה על טמפרטורת הגוף ולעקוב מקרוב אחר מצבן. שימו לב מתי החולדות מתחילות לנוע בעצמן והעבירו את החיות מכרית החימום לכלוב נפרד להתאוששות.
  7. לאחר 5 שבועות של הזרקת BLM, העריכו את החולדות כדי לקבוע אם ניתן לבסס בהצלחה את מודל ה-PF-PH באמצעות שיטות כגון ניטור אקו לב, מדידות המודינמיות וניתוח היסטולוגי.

3. ניטור אקו לב

  1. להרדים חולדות באמצעות איזופלורן 4%. הסר את פרוות החולדה בעזרת קרם להסרת שיער ומרח ג'ל קולי על חזהו.
  2. העריכו את הפרמטרים התפקודיים והמבניים של הלב הימני בחולדות בעזרת בדיקה קולית של 250 מגה-הרץ. כדי להשיג את תצוגת הציר הארוך הטובה ביותר של החדר, הנח את הגשושית בצד שמאל של הקו החציוני של חזה החיה.
  3. על פי האנטומיה האישית, סובב את הגשושית 15° נגד כיוון השעון ביחס לקו הפרסטרנל השמאלי, כאשר החותכת מצביעה לכיוון כתפה הימנית, והתאם את צירי x ו-y במצב B כך שכל הלב יהיה במרכז שדה הראייה.
  4. בחר צבע כדי להציג את צבע זרימת הדם כדי להבחין בעורק הריאה (אות זרימת הדם של עורק הריאה במצב זה הוא כחול).
  5. בחר במצב PW (PW Doppler), הנח את קו הדגימה מתחת לשסתום הריאה, וסובב את כפתור הזווית PW כדי להתאים את כיוון קו הדגימה כך שכיוון הדגימה יהיה מקביל לכיוון זרימת הדם בעורק הריאה (כ-25°). לחץ שוב על מקש PW וקבל את זמן האצת זרימת הדם בעורק הריאה / זמן פליטה (PAT/PET). מדוד לפחות חמישה מחזורי לב וממוצע. השתמש ב-Cine כדי לשמור את התמונה.
  6. התאם את החיה לראש נמוך וכף רגל גבוהה, הנח את הגשושית האולטראסונית בקודקוד הלב של החיה, והניע את האולטרסאונד לאורך קודקוד הלב כדי להשיג את משטח החתך בן ארבעת החדרים. כוונן את צירי x ו-y במצב B כדי להבטיח שארבעת חדרי הלב נראים לעין.
  7. הצג את קו המדידה פי 2 על ידי לחיצה ממושכת על מצב M והנח אותו בצומת של טבעת המסתם התלת-שפתית והקיר החופשי של החדר הימני. מדוד את מרחק תזוזה של המסתם התלת-שפתי (TAPSE) תוך שלושה מחזורי לב לפחות ושמר אותו ב-Cine.
  8. הנח את הגשושית בקו האמצע של עצם הבריח הימנית של החזה והתאם את הזווית בין הגשושית לחריץ החזה של החיה לכ-45°. התאם את התמונה במצב B כך שהחדר הימני והמחיצה הבין-חדרית יהיו גלויים.
  9. בחר M-Mode כדי להציג את קו המדידה פי 2 ולמקם את קו המדידה באמצע המחיצה הבין חדרית. קו הדגימה היה בניצב לדופן החופשית של החדר הימני. שמור את התמונה כדי לקבל את עובי הדופן החופשית של החדר הימני.

4. הערכת תפקוד הריאות

  1. פתח את תוכנת PFT ובדוק שהמכשיר מזוהה. כיול לפי הוראות הציוד כדי להבטיח את הדיוק של חיישני זרימה וחיישני לחץ. הגדר פרמטרי בדיקה בתוכנת PFT, כגון קצב נשימה, נפח גאות, משך בדיקה וכו'.
  2. מצב זיהוי בעלי חיים הוא המצב למחקרי חולדות. הפעל את המתג של מכשיר הבקרה הראשי וודא שהמתג של כל אות ampחיים יותר נמצא במצב כבוי.
  3. הגדר את זרימת האוויר בהתאם למשקל הגוף של החיה. הפעל את אום ויסות זרימת האוויר היניקה והגדר את ההשראה ל-5. הפעל את אום ויסות זרימת האוויר הנשיפה והגדר את התפוגה האיטית ל-4. הגדר את ערך הלחץ ל-60 ס"מ H2O ולאחר מכן כייל את המכשיר לפי סדר זרימת FRC, זרימה, זרימה גבוהה ולחץ ריאות עם שגיאה של פחות מ-0.5%.
  4. להרדים חולדות על ידי הזרקה תוך צפקית עם נתרן פנטוברביטל (45 מ"ג/ק"ג) כמו בשלב 2.2. חותכים את העור לאורך מרכז הצוואר ומסירים את השריר שכבה אחר שכבה.
  5. בחלק העליון החשוף של קנה הנשימה הצווארי, בצע חתך אופקי בין טבעות הסחוס של קנה הנשימה. הכנס במהירות את צינורית המתכת לחתך קנה הנשימה, וודא שהצינורית ממוקמת ומאובטחת כהלכה. השתמש בתפרי חוט משי 4-0 כדי לקבע את הצינורית לקנה הנשימה, ולמנוע ממנה להחליק או לעקור. הנח את החולדה בתא החיות PFT וחבר את צינורית קנה הנשימה לממשק תעלת זרימת האוויר מחוץ למכשיר.
  6. לחץ על כפתור התחל ובדוק את הקיבולת החיונית הכפויה (FVC) ואת תאימות הריאות הדינמית. כדי להבטיח עקביות נתונים, רשום כל מחוון לפחות פי 3.
  7. לאחר השלמת הבדיקה, הנתונים נשמרים ומיוצאים לתוכנת הניתוח. להשתמש בתוכנות סטטיסטיות כדי לנתח את הנתונים ולהשוות את הפרמטרים של תפקודי הריאות של קבוצות שונות.

5. מדידות המודינמיות והיסטולוגיות

  1. זיהוי לחץ סיסטולי בחדר ימין (RVSP)
    1. להרדים חולדות על ידי הזרקה תוך צפקית עם נתרן פנטוברביטל (45 מ"ג/ק"ג) כמו בשלב 2.2. ודא שהחולדה הורדמה כראוי על ידי צביטה של הבוהן כדי להבטיח שהחולדה לא תגיב. קבעו את בטן החולדה כלפי מעלה על ספסל הניסוי ומרחו קרם עיניים על עיני החולדה כדי למנוע יובש.
    2. לבצע חתך (כ-4 ס"מ) בצד ימין של הצוואר באמצעות מספריים כירורגיים ולהפריד את וריד הצוואר החיצוני באמצעות מלקחיים מיקרו-כירורגיים. הפרד את הוורידים באורך של כ -1 ס"מ בעדינות בעזרת מיקרו מלקחיים והכנס שני קווי ניתוח בקצה הדיסטלי והפרוקסימלי.
    3. לפני האינטובציה, יש להשרות את שפופרת PE50 במי מלח רגילים המכילים 1% נתרן הפרין או EDTA למשך 30 דקות לפחות. כוונן את המקליט הפיזיולוגי כדי להחזיר את הלחץ לקו 0 והתאם את טווח הלחץ ל-0-150 מ"מ כספית.
    4. קשרו את הקצה הדיסטלי של וריד הצוואר החיצוני בחוט משי 4-0, הרם בעדינות את קו הניתוח הפרוקסימלי והנח אותו על דופן הווריד הדיסטלי. השתמש במספריים קטנים כדי לבצע חתך קטן (כ- 0.3 מ"מ). לאחר החדרת צינור PE50 לווריד הצוואר החיצוני, השתמש בחוט משי 4-0 כדי לקשור את הקטטר יחד עם וריד הצוואר החיצוני כדי למנוע דליפת דם.
    5. התבונן בצורת גל הלחץ הוורידי על המקליט. דחוף את הקטטר לאט לתוך האטריום הימני, וצורת הגל של האטריום הימני נראית לעין, עם משרעת של כ-0-5 מ"מ כספית. לאחר שהקטטר ממשיך להתקדם מהאטריום הימני לחדר הימני, ניתן לראות את צורת הגל של לחץ החדר הימני. כאשר הלחץ יציב, הקלט RVP למשך 5 דקות והנתונים נשמרים ומנותחים באמצעות תוכנת ניתוח.
  2. איתור אינדקס פולטון
    1. לאחר גילוי RVSP, לאחר הרדמה איזופלורן (5%, 2 ליטר/דקה O2), המתת חסד של החולדות באמצעות אקסנגווינציה.
    2. לאחר כריתת בית החזה, הסר את הלב השלם של החולדה בעזרת פינצטה. חותכים את האפרכסת ואת רקמת החיבור ליד הלב בעזרת מספריים.
    3. חותכים את הקיר החופשי של החדר הימני לאורך עורק הריאה. רקמה זו היא החדר הימני (RV). הרקמות הנותרות הן החדר השמאלי בתוספת מחיצה בין-חדרית (LV+S). לאחר ההפרדה, יש לנקז את פני החדר הימני (RV) והחדר השמאלי בתוספת מחיצה בין-חדרית (LV+S) עם נייר סינון ולשקול בנפרד באמצעות איזון אנליטי. לאחר רישום משקל החדר הימני (RV) והחדר השמאלי בתוספת מחיצת החדר (LV+S), חשב את יחס המשקל של החדר הימני לחדר השמאלי בתוספת מחיצת החדר (RV/(LV+S)).
  3. צביעה היסטולוגית
    1. לאחר פתיחת חלל בית החזה, השתמש במזרק של 10 מ"ל כדי לשאוב 3 מ"ל מי מלח. הכנס את המזרק לעורק הריאה והזריק לאט את מי המלח כדי לשטוף את הריאות, להסיר דם ושאריות אחרות.
    2. השתמש במספריים כדי לנתח את אונת האביזר הימנית ואת האונה הקדמית הימנית של הריאה. הנח את שתי אונות הריאה הללו לפורמלין 4% לקיבוע כדי לשמר את המורפולוגיה והמבנה של הרקמות. הנח במהירות את שלוש האונות הנותרות של הריאה (כגון הריאה השמאלית, האונה האמצעית הימנית והאונה האחורית הימנית) לתוך חנקן נוזלי לאחסון קפוא, מוכן לניסויים הבאים.
    3. הסר עודפי שומן ורקמת חיבור מפני השטח של רקמת הריאה כדי להבטיח שגושי הרקמות נקיים ומסודרים. חתוך את אונות הריאה לבלוקים קטנים בגודל 5 מ"מ x 5 מ"מ x 3 מ"מ. הכניסו את גושי הרקמה הגזומים לתוך המייבש וייבשו אותם בהדרגה באמצעות סדרת אלכוהול שיפוע (60%, 70%, 80%, 90%, 100%).
    4. טבלו את רקמת הריאה בקסילן למשך שעתיים כדי להשיג שקיפות. לאחר ההסרה, יש להשרות אותו בפרפין מומס בטמפרטורה של 56-58 מעלות צלזיוס למשך שעתיים כדי להבטיח חדירה מלאה. לאחר מכן, הניחו את הרקמה בתבנית, ומקמו אותה כשמשטח החיתוך פונה כלפי מטה לחיתוך שלאחר מכן.
    5. פורסים את גוש השעווה על המיקרוטום בעובי של 4-8 מיקרומטר13, ושומרים אותו בטמפרטורת החדר לצביעה פתולוגית.
    6. בצע את צביעת הטריכרום של אאוזין ומאסון14.

6. איתור הידרוקסיפרולין (HYP)

  1. שוקלים 30-100 מ"ג רקמת ריאה בצינור זכוכית. מוסיפים 2 מ"ל תמיסת חומצה הידרוכלורית (6 מול/ליטר) ומעכלים ב-110 מעלות צלזיוס בתנור למשך 2-6 שעות עד שלא נראים גושים גדולים.
  2. לאחר הקירור, התאם את ערך ה-pH לטווח של 6-8 באמצעות 1 מ"ל של תמיסת NaOH (10 מול/ליטר), ולאחר מכן דחס את המים המזוקקים לתמיסה של 4 מ"ל. לבסוף, צנטריפוגה ב-28,620 x גרם ב-25 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות וקח את הסופרנטנט להיות.
  3. מחממים מראש את קורא המיקרו-פלטות למשך 30 דקות, מכוונים את אורך הגל ל-560 ננומטר ואפס את המכשיר באמצעות מים מזוקקים.
  4. יש לדלל את התמיסה הסטנדרטית במים מזוקקים להכנת תמיסות סטנדרטיות בריכוזים של 30, 15, 7.5, 3.75, 1.875, 0.938, 0.469 ו-0.234 מיקרוגרם/מ"ל.
  5. קחו 60 מיקרוליטר מחומר העל של הדגימה וערבבו אותו עם 60 מיקרוליטר של מגיב A, ואז הניחו לו לעמוד בטמפרטורת החדר למשך 20 דקות.
  6. הוסף 60 מיקרוליטר מגיב B ו -120 מיקרוליטר מים מזוקקים. מניחים את התמיסה המעורבת באמבט מים של 60 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. בצע את אותם שלבים עבור כל ריכוז של התמיסות הסטנדרטיות (למשל, 30, 15, 7.5, 3.75, 1.875, 0.938, 0.469, 0.234 מיקרוגרם/מ"ל) ובצע את הפעולות בהתאם.
  7. לאחר עמידה בטמפרטורת החדר למשך 15 דקות, קח 200 מיקרוליטר מהתמיסה בצלחת 96 הבארות כדי לזהות את ערך ספיגת האור ב-560 ננומטר. שרטט את העקומה הסטנדרטית עם ריכוז הפתרונות הסטנדרטיים כציר x והערכים הנמדדים כציר y, וקבל את המשוואה y=kx+b. החלף את הערך הנמדד של הדגימה במשוואה כדי לקבוע את ריכוז הדגימה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פיברוזיס ריאתי הנגרמת על ידי בלאומיצין בחולדות
בלאומיצין דווח כגורם קלאסי לפיברוזיס ריאתי במודלים של בעלי חיים7. כאן, מדדים של פיברוזיס ריאתי הוערכו בעקבות גירוי BLM. ראשית, לאחר 35 ימים של טיפול ב-BLM, ערכנו בדיקות תפקודי ריאות ומצאנו שגם FVC (איור 1E) וגם היענות ריאות דינמית (איור 1F) בקבוצת המודל הופחתו באופן משמעותי. תוצאות אלה מצביעות בבירור על כך שתפקוד הריאות נפגע באופן ניכר. שנית, כדי להעריך שקיעת קולגן ברקמת ה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פיברוזיס ריאתי אידיופטי היא מחלה מתקדמת וקטלנית עם הישרדות חציונית של 2-3 שנים מהאבחנה, מה שמרמז על פרוגנוזה עגומה9. יתר לחץ דם ריאתי הוא תחלואה נלווית שכיחה של IPF, אשר מתדרדר במהירות IPF עם פרוגנוזה מחמירה15. יתרה מכך, היו אפשרויות טיפוליות מוגבלות ל-IPF-PH7. לפיכך, חיוני להשיג הבנה מעמיקה יותר של המנגנונים המולקולריים הבסיסיים של PF-PH, שעשויים לספק גישה טיפולית פוטנציאלית למחלה.

הפרוט...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין גילויים פיננסיים רלוונטיים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי המענקים בין היתר על ידי המענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82370063, 82170069, 82120108001, 82241012), תוכנית המו"פ של המעבדה הלאומית של גואנגג'ואו (GZNl2023A02013), תוכנית המו"פ הלאומית של סין (2022YFE0131500), המחלקה למדע וטכנולוגיה של גואנגדונג (2024A1515011208, 2022A1515012052, 2024A1515013104, 202102020019, 202201020538, 202201010069, 2023A03J0334), הפרויקט העצמאי של מעבדת המפתח הממלכתית למחלות נשימה (SKlRD-Z-202513), קרן המחקר הרפואי של גואנגדונג (A2023379) האוניברסיטה הרפואית של גואנגג'ואו ותוכנית לשיפור המחקר המדעי ב-GMU וקרנות מחקר פתוחות מבית החולים המסונף השישי של האוניברסיטה הרפואית של גואנגג'ואו (בית החולים העממי צ'ינגיואן) (202201-101).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
BleomycinMedChemExpressHY-17565A
חומר צימודHYNAUTBX-CSRH
FORMALIN FIXATIVEBiosharp)BL401B
קרם להסרת שיערLUSENLS-B-TMG-50
ערכת צביעה המטוקסילין אאוזין (HE)BeyotimeC0189S
IsofluraneRWD Life Science( סין)R510-22-10
ערכת צביעה תלת צבעונית MassonBeyotimeC0189S
מלח רגילKERONGSLYS-001
BeyotimeFS701-50pcs
מזרק

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Sm, N., et al. Clinical significance of pulmonary hypertension in interstitial lung disease: A consensus statement from the Pulmonary Vascular Research Institute's innovative drug development initiative-Group 3 pulmonary hypertension. Pulm Circ. 12 (3), e12127(2022).
  2. Nathan, S. D., et al. Pulmonary hypertension in chronic lung disease and hypoxia. Eur Resp J. 53 (1), 1801914(2019).
  3. King, C. S., Shlobin, O. A. The Trouble With Group 3 Pulmonary Hypertension in Interstitial Lung Disease. Chest. 158 (4), 1651-1664 (2020).
  4. Meyer, K. C. Pulmonary fibrosis, part I: epidemiology, pathogenesis, and diagnosis. Expert Rev Respir Med. 11 (5), 343-359 (2017).
  5. Raghu, G., et al. Idiopathic Pulmonary Fibrosis (an Update) and Progressive Pulmonary Fibrosis in Adults: An Official ATS/ERS/JRS/ALAT Clinical Practice Guideline. Am J Respir Critic Care Med. 205 (9), e18-e47 (2022).
  6. Ruffenach, G., Hong, J., Vaillancourt, M., Medzikovic, L., Eghbali, M. Pulmonary hypertension secondary to pulmonary fibrosis: clinical data, histopathology and molecular insights. Respir Res. 21 (1), 303(2020).
  7. Li, S., Shi, J., Tang, H. Animal models of drug-induced pulmonary fibrosis: an overview of molecular mechanisms and characteristics. Cell Biol Toxicol. 38 (5), 699-723 (2022).
  8. Karmouty-Quintana, H., et al. Deletion of ADORA2B from myeloid cells dampens lung fibrosis and pulmonary hypertension. FASEB J. 29 (1), 50-60 (2015).
  9. Jiang, Q., et al. Dysregulation of BMP9/BMPR2/SMAD signalling pathway contributes to pulmonary fibrosis and pulmonary hypertension induced by bleomycin in rats. Br J Pharmacol. 178 (1), 203-216 (2021).
  10. Degryse, A. L., Lawson, W. E. Progress toward improving animal models for idiopathic pulmonary fibrosis. Am J Med Sci. 341 (6), 444-449 (2011).
  11. Collum, S. D., et al. Inhibition of hyaluronan synthesis attenuates pulmonary hypertension associated with lung fibrosis. Br J Pharmacol. 174 (19), 3284-3301 (2017).
  12. Ye, X., et al. Animal models of acute exacerbation of pulmonary fibrosis. Respir Res. 24 (1), 296(2023).
  13. León-Mancilla, B., et al. Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy. J Vis Exp. (172), e62697(2021).
  14. Oldham, S., Rivera, C., Boland, M. L., Trevaskis, J. L. Incorporation of a Survivable Liver Biopsy Procedure in Mice to Assess Non-alcoholic Steatohepatitis (NASH) Resolution. J Vis Exp. (146), e59130(2019).
  15. Jiang, Q., et al. Nephrectomy and high-salt diet inducing pulmonary hypertension and kidney damage by increasing Ang II concentration in rats. Respir Res. 25 (1), 288(2024).
  16. Moore, B. B., Hogaboam, C. M. Murine models of pulmonary fibrosis. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 294 (2), L152-L160 (2008).
  17. Jenkins, R. G., et al. An Official American Thoracic Society Workshop Report: Use of Animal Models for the Preclinical Assessment of Potential Therapies for Pulmonary Fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol. 56 (5), 667-679 (2017).
  18. Lahm, T., et al. The effects of estrogen on pulmonary artery vasoreactivity and hypoxic pulmonary vasoconstriction: Potential new clinical implications for an old hormone. Crit Care Med. 36 (7), 2174-2183 (2008).
  19. Chen, Y., et al. Tetramethylpyrazine: A promising drug for the treatment of pulmonary hypertension. Br J Pharmacol. 177 (12), 2743-2764 (2020).
  20. Zheng, Q., et al. Established pulmonary hypertension in rats was reversed by a combination of a HIF-2α antagonist and a p53 agonist. Br J Pharmacol. 179 (5), 1065-1081 (2022).
  21. Chen, J., et al. Upregulation of mechanosensitive channel Piezo1 involved in high shear stress-induced pulmonary hypertension. Thrombo Res. 218, 52-63 (2022).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים