מאמר שיטה

הערכת תכונות נוגדות חמצון ואנטלמינטיות של תמציות Tithonia diversifolia כנגד ביצי נמטודות במערכת העיכול באמצעות מבחני מבחנה

847 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/67760

⸱

1 באוגוסט 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Multidisciplinary Center for Technological Research, National University of Asunción (CEMIT - UNA), 2Centre of Marine Sciences (CCMAR/CIMAR LA), University of Algarve, 3Department of Food Biochemistry, Biodiversity, Food and Health Group (BIOALSA), Faculty of Chemical Sciences, National University of Asunción (FCQ - UNA), 4Carleton College

במאמר זה

סיכום

מחקר זה העריך את הפעילות הביולוגית של תמציות Tithonia diversifolia באמצעות שיטות מבוססות רדיקלים ובדיקת בקיעת ביצים במבחנה (EHA) כדי להעריך את השפעותיהן על נמטודות במערכת העיכול במעלי גירה קטנים. המתודולוגיה והממצאים העיקריים מתוארים, ומדגישים את הפוטנציאל של תמציות אלה להדברת טפילים.

תקציר

מחלות טפיליות הנגרמות על ידי נמטודות במערכת העיכול (GIN) נחשבות לגורמים מגבילים חשובים לייצור בעלי חיים ברחבי העולם, מכיוון שהן פוגעות משמעותית ברווחת בעלי החיים ומגדילות את עלויות הייצור. במשך שנים, הדברת טפילים הסתמכה אך ורק על שימוש בתרופות סינתטיות. עמידות של GIN לתרופות תרופות מסחריות מדווחת יותר ויותר ברחבי העולם. לכן, צצו גישות חלופיות לשליטה ב-GIN בחיות משק, כולל חקר צמחים בעלי פוטנציאל ביו-אקטיבי. ניתן לקצור את Tithonia diversifolia כל השנה, וכל חלקי הצמח שימשו ברפואה העממית למגוון רחב של מחלות. מחקר זה העריך את התכונות נוגדות החמצון במבחנה של מים ו-70% תמציות אצטון מימיות של חלקים על-אדמתיים של T. diversifolia , כולל עלים, ענפים ופרחים, בשיטות מבוססות רדיקליות, והעריך את הפוטנציאל האנטילמינטי שלו באמצעות מודל טפילים, תוך שימוש בבדיקת בקיעת הביצים (EHA) עם תמציות מים. בנוסף, נקבע התוכן הפוליפנולי הכולל של התמציות. ממצאים אלה מדגישים את T. diversifolia כמקור טבעי מבטיח לתרכובות נוגדות חמצון ואנטלמינטיות.

מבוא

מחלות טפיליות הנגרמות על ידי נמטודות במערכת העיכול (GIN) נחשבות לגורמים מגבילים חשובים לייצור בעלי חיים ברחבי העולם, מכיוון שהן פוגעות משמעותית ברווחת בעלי החיים ומגדילות את עלויות הייצור1. הקשר בין הטפיל לבעלי החיים מושפע ממספר גורמים הקשורים לפונדקאי, כלומר המאפיינים הגנטיים של עמידות ועמידות של בעלי החיים, המצב התזונתי של בעלי החיים, רמת הטפילים והפתוגניות של אוכלוסיות הטפילים המעורבות2.

במשך שנים, הדברת טפילים הסתמכה אך ורק על תרופות אנטי-פרזיטיות סינתטיות. עם זאת, שימוש ממושך ובלעדי הוביל להופעת עמידות, הפחתת יעילותן ודחיפה לחיפוש אחר אסטרטגיות חלופיות3. עמידות של נמטודות לתרופות תרופות שונות תוארה יותר ויותר ברחבי העולם, ומציגה תרחיש מדאיג, במיוחד באזורים טרופיים4. בנוסף, הצרכנים מודעים יותר ויותר לצורך להפחית את שאריות התרופות האנטי-פרזיטיות בבשר בעלי חיים והסביבה5. לכן, צצו גישות חלופיות להדברת טפילי נמטודות בחיות משק6.

Tithonia diversifolia הוא שיח טרופי שמקורו במרכז אמריקה, בעל מאפיינים ייחודיים שהופכים אותו לבעל ערך עבור מערכות ייצור מעלי גירה. ניתן לקצור אותו כל השנה, וכל חלקי הצמח שימשו באופן מסורתי ברפואה העממית על ידי קהילות ילידיות לטיפול במגוון רחב של מחלות. באופן מקומי, הוא יושם כדי להקל על כאבי בטן, פצעים, דרמטוזיס והפרעות שרירים, בעוד שמתן דרך הפה שימש לניהול זיהומים, מלריה, חום, דלקת כבד וסוכרת. יישומים טיפוליים מגוונים אלה מדגישים את הפוטנציאל הרפואי הרחב שלו7.

עקה חמצונית ממלאת תפקיד חשוב בהתפתחות והתקדמות של זיהומים טפיליים, הן באורגניזם המארח והן באורגניזם הטפילי הנאבק לשרוד8. מסיבה זו, איתור פעילות נוגדת חמצון הוא חיוני להערכת הפעילות הביולוגית של תמציות צמחי מרפא בעלות פוטנציאל אנטלמינטי. עקב זיהום טפילי, ריכוז נוגדי החמצון במארח פוחת, ואילו ריכוז תוצרי החמצון של רכיבים סלולריים עולה. במקרה של טפילים, שמירה על איזון חמצוני חיונית כדי להאריך את האינטראקציה שלהם עם המארח ולהגן מפני הלחץ החמצוני שנוצר באורגניזם המארח9.

עדויות להתפתחות והתפשטות מהירה של עמידות לתרופות נגד תרופות תולעים מעלות חשש שטיפולים נפוצים עלולים להפוך ללא יעילים. לכן, בדיקת מבחנה הנקראת בדיקת בקיעת הביצה (EHA) משמשת להערכת רגישות או עמידות לבנזמידזול (BZ) בנמטודות במערכת העיכול. בדיקה זו משמשת בדרך כלל להערכת הפעילות האנטלמינטית של תמציות צמחים על ביצים ולהשוואת פעילותן כפונקציה של מינון. אחת המגבלות העיקריות של בדיקה זו היא השונות בבקיעת הביצים בין הבדיקות. כדאיות הביציות מוגבלת למקסימום של 3 שעות, מה שדורש התאוששות מהירה והתחלה מהירה. למרות זאת, אחוז הבקיעה עשוי להשתנות. מסיבה זו, נקבע כי לפחות 70% מהביצים חייבות לבקוע בקבוצת הביקורת כדי שהתוצאה תיחשב תקפה10,11. זהו מבחן זול, מהיר, קל וניתן לשחזור 12,13,14.

השימוש בתמציות צמחים לבחינת חלופות לבקרת GIN מבוסס על נוכחותם של מטבוליטים משניים והפוטנציאל הביו-אקטיבי שלהם. אחד האתגרים בתחום מחקר זה הוא הכמות והיציבות של מטבוליטים משניים, שכן אלה משתנים בהתאם לגורמים ביוטיים וא-ביוטיים, כמו גם בשל הלחץ הכימי הנגרם על ידי תהליך המיצוי 15,16,17.

מחקר זה שיער כי הבדלים בפעילות הביולוגית (השפעות נוגדות חמצון ואנטלמינטיות) יכולים להתרחש בהתאם לסוג הממס המשמש למיצוי, מה שעשוי להשפיע על הרכב הפוליפנולים וכתוצאה מכך על הפעילות הביולוגית שלהם. מטרת כתב היד הזה הייתה לתאר את הצעדים שננקטו בהערכת תמציות באמצעות מודל מבחנה שניתן לשכפל בקלות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

ועדת האתיקה של בעלי חיים של CEMIT מאשרת את כל הניסויים הכרוכים במניפולציה של בעלי חיים. בעלי החיים תורמי הביציות שייכים לחוות המשתפות פעולה עם CEMIT על ידי מתן דגימות צואה למטרות אבחון מונע. בעלי חיים אלה הם כבשים או עזים (ללא גזע ספציפי), משני המינים, מעל גיל שנה, ואסור להם לעבור תילוע תוך 15 יום לפני איסוף הדגימה. כל החוות המשתתפות מקבלות מידע על השימוש בדגימות למטרות מחקר ומספקות את הסכמתן להיות חלק מהמחקר. לאיסוף ביצים, המפעלים הסמוכים מקבלים תחילה הודעה, ועם קבלת האישור, מאורגנים ביקורי שטח לאיסוף דגימות צואה טריות, מה שמבטיח עיבוד תוך שלוש שעות. הריאגנטים והציוד המשמשים במחקר זה מפורטים בטבלת החומרים.

1. הכנת חומר צמחי

  1. בחר מיקום מתאים לאיסוף מיני הצמחים.
  2. אסוף לפחות שתי דגימות של Tithonia diversifolia לזיהוי טקסונומי והכנת עשביה.
  3. אסוף מינימום 1000 גרם של חלקים על-אדמתיים של T. diversifolia .
  4. יבש את הביומסה שנאספה בטמפרטורת החדר (כ-26 מעלות צלזיוס; ראה איור 1).
  5. טוחנים את הביומסה המיובשת בעזרת מטחנה חשמלית.
  6. אחסן את החומר הטחון במקרר בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.

2. הכנת תמציות

  1. מכינים את תמצית המים:
    1. מערבבים 10 גרם ביומסה מיובשת עם 100 מ"ל מים מזוקקים ב-100 מעלות צלזיוס.
    2. הניחו לתערובת להתבשל במשך 24 שעות תחת ניעור מתמשך ב-120 סל"ד.
    3. סנן את התמצית דרך נייר סינון (Whatman מס' 5 או שווה ערך).
    4. יש לייבש בהקפאה את התמצית המסוננת.
  2. הכן את תמצית האצטון:
    1. מערבבים 10 גרם חומר צמחי מיובש עם 70% אצטון מימי ביחס של 1:3.
    2. הניחו לתערובת להתבשל במשך 24 שעות תחת ניעור מתמשך ב-120 סל"ד.
    3. סנן את התמצית דרך נייר סינון (Whatman מס' 5 או שווה ערך).
    4. יש לייבש בהקפאה את התמצית המסוננת.
      הערה: אחסן את התמציות הליופיליות בטמפרטורה של -20 מעלות צלזיוס לשימור טוב יותר (ראה איור 2). ודא שמתקבלים לפחות 5 גרם של תמציות ליופיליות.

3. הכנת תמיסת מלאי

  1. לבדיקת נוגדי חמצון:
    1. יש להמיס את התמציות המיובשות בממיסים המתאימים (מים מזוקקים או 70% אצטון מימי) לריכוז סופי של 10 מ"ג/מ"ל.
  2. לבדיקת בקיעת הביצים:
    1. יש לדלל 12 מ"ג של תמציות ליופיליזציה ב-5 מ"ל מים מזוקקים לקבלת תמיסת מלאי של 2.4 מ"ג/מ"ל.
    2. הכן חמישה ריכוזים: 1.2 מ"ג/מ"ל, 0.6 מ"ג/מ"ל, 0.3 מ"ג/מ"ל ו-0.15 מ"ג/מ"ל (ראה איור 3).
      הערה: התאם את נפח תמיסת המלאי על סמך מספר הבארות והצלחות המשמשות. לדוגמה, אם משתמשים ב-48 בארות במקום 12, הפחת את הנפח בהתאם; הכינו 6 מ"ג ב -2.5 מ"ל במקום 12 מ"ג ב -5 מ"ל.

4. הרכב פיטוכימי

  1. סה"כ תכולה פנולית של תמציות (TPC)
    1. מערבבים 5 מיקרוליטר מהדגימות עם 100 מיקרוליטר של מגיב Folin-Ciocalteu (FC) מדולל 10× במים מזוקקים בלוחות פלסטיק שקופים של 96 בארות.
    2. דגירה בטמפרטורת החדר (RT) למשך 10 דקות.
    3. הוסף 100 מיקרוליטר תמיסת נתרן פחמתי (75 גרם/ליטר במים).
    4. דגירה ב- RT למשך 90 דקות.
    5. מדוד את הספיגה ב 650 ננומטר.
      הערה: בטא TPC כשווה ערך לחומצה גאלית (GAE). בנה עקומת כיול באמצעות לפחות חמישה ריכוזים של חומצה גאלית.
  2. סה"כ תכולת פלבנואידים (TFC)
    1. מערבבים 50 מיקרוליטר מהתמציות עם 50 מיקרוליטר של 2% אלומיניום כלוריד במתנול בלוחות פלסטיק שקופים של 96 בארות.
    2. דגירה למשך 10 דקות ב-RT.
    3. מדוד את הספיגה ב-405 ננומטר.
      הערה: בטא TFC כשווה ערך לקוורצטין (QE). בנו עקומת כיול באמצעות לפחות חמישה ריכוזים של קוורצטין.
  3. תכולת טאנין כוללת (TTC)
    1. מערבבים 10 מיקרוליטר מהתמציות עם 200 מיקרוליטר של 1% DMACA במתנול ו-100 מיקרוליטר של 37% HCl בלוחות פלסטיק שקופים של 96 בארות.
    2. דגירה למשך 15 דקות ב-RT.
    3. מדוד את הספיגה ב-640 ננומטר.
      הערה: בטא TTC במונחים של מ"ג/מ"ל של קטכין.

5. בדיקת נוגדי חמצון - ABTS

  1. הוסף 0.003514 גרם אשלגן פרסולפט ו- 0.0203 גרם ABTS ל -5 מ"ל מים מזוקקים.
  2. עוטפים את התמיסה בנייר אלומיניום ודוגרים בחום של 4 מעלות במקרר למשך 12-16 שעות.
  3. מדוד את הספיגה ב-734 ננומטר והתאם אותה לכ-0.7 על ידי הוספת אתנול. כנקודת התחלה, מערבבים 5 מיקרוליטר של תמיסת ABTS עם 195 מיקרוליטר אתנול.
  4. בצלחות פלסטיק שקופות של 96 בארות, מערבבים 10 מיקרוליטר מהתמציות עם 190 מיקרוליטר של תמיסת ABTS.
  5. עבור הבקרה החיובית (C+), מערבבים 10 מיקרוליטר של Trolox (קובעים את הריכוז באמצעות עקומה סטנדרטית המבוססת על ספיגת הדגימה) עם 190 μL של תמיסת ABTS.
  6. לבקרה השלילית (C-), מערבבים 10 מיקרוליטר מהממס המשמש להמסת התמציות (מים או אצטון מימי) עם 190 מיקרוליטר של תמיסת ABTS.
  7. דגרו את הצלחות למשך 6 דקות בטמפרטורת החדר (RT).
  8. מדוד את הספיגה ב-734 ננומטר.
    הערה: איור 4 מציג דוגמה לבדיקת ABTS.

6. פרוצדורות פרזיטולוגיות

  1. אסוף דגימות צואה ישירות מפי הטבעת של עזים נגועות באופן טבעי.
    הערה: אסוף דגימות צואה ישירות מפי הטבעת של עזים וכבשים נגועות באופן טבעי כדי להבטיח טריות ולמנוע זיהום סביבתי. לרסן בעדינות בעלי חיים באמצעות צוות מיומן כדי למזער לחץ. בעזרת כפפות חד פעמיות נקיות, הכנס אצבע משומנת ועטויה כפפה לתוך פי הטבעת והוציא כ-5-10 גרם חומר צואה. יש להניח דגימות במיכלי פלסטיק נקיים ומסומנים ולאחסן בטמפרטורה של 4-8 מעלות צלזיוס. עבדו את כל הדגימות תוך 3 שעות מהאיסוף כדי לשמר את הכדאיות של ביצי הלמינת'ס. עקוב אחר הנחיות רווחת בעלי חיים מוסדיות וקבל הסכמה מדעת מבעלי החוות.
  2. זהה את מיני בעלי החיים הקשורים לכל דגימה.
  3. מערבבים 30 גרם מכל דגימת צואה עם 50 מ"ל תמיסת מלח רוויה (צפיפות = 1.2) כדי להתכונן לבדיקות קופרולוגיה.
  4. השתמש בשקופית מקמאסטר כדי לספור את הביצים.
    1. הומוגניזציה של 3 גרם דגימת צואה ב-50 מ"ל של תמיסת NaCl רוויה. מסננים את התערובת דרך בד גבינה, ממלאים את שני תאי השקופית ומניחים לה לעמוד במשך 5 דקות.
    2. בחנו את השקופית במיקרוסקופ בהגדלה של 10× וספרו ביצים מסוג סטרונגיל. חשב ביצים לגרם (EPG) באמצעות הנוסחה: EPG = (ספירת ביצים) × 50. שיטה זו מתקננת את הכימות של נמטודות במערכת העיכול במעלי גירה קטנים.
  5. בטא את ספירת הביצים כביצים לגרם (EPG).
  6. בחר דגימות צואה עם EPG של לפחות 800 להכנת תרבית צואה.
  7. השג זחלי L3 מתרביות צואה וזהה את הסוגים או המינים שלהם.
    הערה: ביצי נמטודות במערכת העיכול מופקדות בעשב במהלך מחזור החיים (ראה איור 5). מעלי גירה קטנים של בעלי חיים מפגינים בדרך כלל פוליפרזיטיזם. איור 6 מתאר את השלבים לביצוע אנאליזה קופרולוגית.

7. בדיקות חוץ גופיות - בדיקת בקיעת ביצה (EHA)

  1. אסוף דגימות צואה טריות.
  2. מסננים את הצואה פעמיים בעזרת גזה סטרילית.
  3. מסננים את המתלה שנוצר ומעבירים אותו למסננת.
  4. שוטפים את החומר על המסננת במים מזוקקים.
  5. אוספים את המתלה השטוף לצינורות של 15 מ"ל.
  6. צנטריפוגה את הדגימות ב-~4800 × גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר באמצעות צנטריפוגה שולחנית המצוידת ברוטור דלי מתנדנד. צנטריפוגה פעמיים עם מים מזוקקים ופעם אחת עם תמיסת מלח רוויה כדי לרכז את הביצים בתחתית (ראה איור 7 למורפולוגיה של ביצים).
  7. השעו מחדש את הביצים ב-PBS.
  8. התאם את ריכוז הביצים ל-100 ביצים/מ"ל להגדרת הבדיקה.
  9. הכן את הבקרה החיובית על ידי המסת תיאבנדזול (TBZ) ב-PBS ב-0.025 מ"ג/מ"ל.
  10. הכן את הבקרה השלילית באמצעות תרחיף הביצים ב- PBS.
  11. השתמש בצלחות מרובות בארות 48 לבדיקה.
  12. מכינים נפח סופי של 250 מיקרוליטר בכל באר בעזרת תערובת של 50/50 (v/v) של תמצית ותרחיף ביצים.
  13. מוסיפים כ-100 ביצים/מ"ל לכל באר.
  14. בדוק כל ריכוז בריבוע (ארבעה שכפולים).
  15. ספרו את הביצים במיקרוסקופ הפוך בהגדלה של 40×.
  16. השתמש רק בצלחות עם שיעור בקיעה של ≥70%.
  17. ספרו זחלים (L1), ביצים שלא בקעו (UnE), ביצים המכילות זחלים (LFE) וביצים מורולציות (ME) לכל ריכוז.
    הערה: סיכום מייצג של פרוטוקול בדיקת בקיעת הביצים מוצג באיור 8.

8. אנליזה סטטיסטית

  1. ביצוע ניתוח סטטיסטי תיאורי באמצעות Excel.
  2. השתמש בניתוח שונות חד כיווני (ANOVA) ומבחני t כדי להעריך הבדלים בין ריכוזים ברמת מובהקות של 0.05.
  3. חשב את הריכוז האפקטיבי של 50% (EC50) באמצעות ניתוח פרוביט המבוסס על נתוני ריכוז שעברו טרנספורמציה של לוג10 (ראה קובץ משלים 1).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

התוכן הפנולי הכולל (TPC), תכולת הפלבנואידים הכוללת (TFC) ותכולת הטאנין הכוללת (TTC)
תוצאות של TPC, TTC, TFC ו-ABTS על Tithonia diversifolia מוצגות בטבלה 1. הערכים מבוטאים כמ"ג שווה ערך לחומצה גאלית לגרם חומר יבש (מ"ג GAE/g DM) עבור TPC, מ"ג שווה ערך לקוורצטין לגרם חומר יבש (מ"ג QE/g DM) עבור TFC, ומ"ג שווה ערך לקטכין לגרם חומר יבש (מ"ג CE/g DM) עבור TTC. יכולת נוגדת חמצון מתבטאת בריכוז המעכב החצי מקסימלי (IC50, μg/mL) בבדיקת ABTS.<...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מאמר זה מתאר מספר צעדים חיוניים לקידום המחקר על צמחי מרפא. בדיקות מבחנה, כגון בדיקת בקיעת ביצים (EHA), אטרקטיביות במיוחד מכיוון שניתן לבצע אותן בתנאי מעבדה מבוקרים. ה-EHA נועד להעריך את הפעילות של תמציות צמחים בריכוזים שונים על ביצי נמטודות, ולהשוות את התוצאות מול בקרות חיוביות ושליליות כאחד. התוצאות שהתקבלו מציעות תובנות חשובות לגבי הפוטנציאל של תרכובות שמקורן בצמחים לפיתוח טיפולים אנטילמינטיים חדשים, במיוחד לאור העמידות הגוברת לתרופות קונבנציונליות בקרב נמטודות במערכת העיכול (...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין ניגוד עניינים.

תודות

לכל היצרנים שסומכים עלינו שנבצע את הדגימה עם בעלי החיים שלהם. לואיסה קוסטודיו קיבלה כספים לאומיים פורטוגזיים מהקרן למדע וטכנולוגיה (FCT) באמצעות פרויקטים UIDB/04326/2020 ( D O I: 1 0 . 5 4 4 9 9 / U I D B / 0 4 3 2 6 / 2 0 2 0 ), U I D P / 0 4 3 2 6 / 2 0 2 0 0 (DOI:10.54499/UIDP/04326/2020), LA/P/0101/2020 (DOI:10.54499/LA/P/0101/2020) ו-CEECIND/00425/2017. רוסיו אבילה קיבלה את קרן ההתמחות של ניני על כך שאפשרה לי את הפרויקט הזה על ידי מתן תמיכה כספית ולמרכז הקריירה של קרלטון להכוונה ותמיכה מקצועית. Griselda Meza קיבלה Beca de Investigacion BINV02 -52 CONACYT - 2nd convocatoria כדי לנסוע לפורטוגל ולבצע בדיקות פיטוכימיות. איסמעיל לאנו קיבל את טופס Beca Movility PINV01 -306, CONACYT, כדי לבצע את בדיקת בקיעת הביצים בברזיל.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
צינורות 15 מ"לבאתר
לוח 48 חוריםבאתר
96 לוחות בארVWR 734-0126
ABTSאנזימטיA1088.0005באתר
מיקרוסקופ אופטי אקדמי ומיקרוסקופ הפוךבאתר
אצטוןאנזימטיA/0600/17
כלוריד אלומיניום סיגמא אולדריץ'6911
תגובת DMACAסיגמא אולדריץ'49825
אתנול 96%אנזימטיVR11202
צואה מבעלי חייםנאסף בחוות סמוכות לאוניברסיטה
פולין צ'יוקלטוסיגמא אולדריץ'F9252
חומצה גאליתסיגמא אולדריץ'91215
HClסיגמא אולדריץ'258148
מצלמת מקמאסטרבאתר
מתנולאנזימטיM/4000/17
PBSבאתר
תמציות צמחיםבאתר
אשלגן פרסולפט  סיגמא אולדריץ'216224
קוורצטיןסיגמא אולדריץ'Q4951
מלחבאתר
פחמת נתרן  סיגמא אולדריץ'1063920500
תיאבנדזולבאתר
טרולוקססיגמא אולדריץ'648471באתר
מיםבאתר
ווטמן מס' 5VWR WHAT97039654

מקורות

  1. Vineer, H. R., et al. Increasing importance of anthelmintic resistance in European livestock: Creation and meta-analysis of an open database. Parasite. 27, 69(2020).
  2. Ribeiro, W. L. C., Vilela, V. L. R. Editorial: Alternatives for the control of parasites to promote sustainable livestock. Front Vet Sci. 9, 1097432(2023).
  3. Hodgkinson, J. E., et al. Refugia and anthelmintic resistance: Concepts and challenges. Int J Parasitol Drugs Drug Resist. 10, 51-57 (2019).
  4. Molento, M. B. Parasite control in the age of drug resistance and changing agricultural practices. Vet Parasitol. 163 (3), 229-234 (2009).
  5. Morgan, E. R., van Dijk, J. Climate and the epidemiology of gastrointestinal nematode infections of sheep in Europe. Vet Parasitol. 189 (1), 8-14 (2012).
  6. Hoste, H., Torres-Acosta, J. F. J. Non-chemical control of helminths in ruminants: Adapting solutions for changing worms in a changing world. Vet Parasitol. 180 (1-2), 144-154 (2011).
  7. Mabou Tagne, A., Marino, F., Cosentino, M. Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gray as a medicinal plant: A comprehensive review of its ethnopharmacology, phytochemistry, pharmacotoxicology and clinical relevance. J Ethnopharmacol. 220, 94-116 (2018).
  8. Pawłowska, M., Mila-Kierzenkowska, C., Szczegielniak, J., Woźniak, A. Oxidative stress in parasitic diseases-reactive oxygen species as mediators of interactions between the host and the parasites. Antioxidants. 13 (1), 38(2024).
  9. Maldonado, E., Rojas, D. A., Morales, S., Miralles, V., Solari, A. Dual and opposite roles of reactive oxygen species (ROS) in Chagas disease: Beneficial on the pathogen and harmful on the host. Oxid Med Cell Longev. 2020, 8867701(2020).
  10. Adamu, M., Naidoo, V., Eloff, J. N. Efficacy and toxicity of thirteen plant leaf acetone extracts used in ethnoveterinary medicine in South Africa on egg hatching and larval development of Haemonchus contortus. BMC Vet Res. 9, 38(2013).
  11. Molan, A. L. Effect of purified condensed tannins from pine bark on larval motility, egg hatching and larval development of Teladorsagia circumcincta and Trichostrongylus colubriformis (Nematoda: Trichostrongylidae). Folia Parasitol. 61 (4), 371-376 (2014).
  12. Eguale, T., Tadesse, D., Giday, M. In vitro anthelmintic activity of crude extracts of five medicinal plants against egg-hatching and larval development of Haemonchus contortus. J Ethnopharmacol. 137 (1), 108-113 (2011).
  13. von Samson-Himmelstjerna, G., et al. Standardization of the egg hatch test for the detection of benzimidazole resistance in parasitic nematodes. Parasitol. Res. 105, 825-834 (2009).
  14. Robles-Pérez, D., Martínez-Pérez, J. M., Rojo-Vázquez, F. A., Martínez-Valladares, M. Screening anthelmintic resistance to triclabendazole in Fasciola hepatica isolated from sheep by means of an egg hatch assay. BMC Vet Res. 11, 5(2015).
  15. War, A. R., Paulraj, M. G., War, M. Y., Ignacimuthu, S., Sharma, H. C. Mechanisms of plant defense against insect herbivores. Plant Signal Behav. 7, 1306-1320 (2012).
  16. Veeresham, C. Natural products derived from plants as a source of drugs. J Adv Pharm Technol Res. 3, 200-201 (2012).
  17. Barthwal, R., Mahar, R. Exploring the significance, extraction, and characterization of plant-derived secondary metabolites in complex mixtures. Metabolites. 14, 119(2024).
  18. Vargas-Magaña, J. J., et al. Anthelmintic activity of acetone-water extracts against Haemonchus contortus eggs: Interactions between tannins and other plant secondary compounds. Vet Parasitol. 206, 199-206 (2014).
  19. Gertrude, M., et al. In vitro anthelmintic activity of Bidens pilosa Linn. (Asteraceae) leaf extracts against Haemonchus contortus eggs and larvae. Eur J Med Plants. 4, 1325-1333 (2014).
  20. Castañeda-Ramírez, G. S., et al. Bio-guided fractionation to identify Senegalia gaumeri leaf extract compounds with anthelmintic activity against Haemonchus contortus eggs and larvae. Vet Parasitol. 270, 13-19 (2019).
  21. Chan-Pérez, J. I., et al. In vitro susceptibility of ten Haemonchus contortus isolates from different geographical origins towards acetone:water extracts of two tannin-rich plants. Vet Parasitol. 217, 53-60 (2016).
  22. Alonso-Díaz, M. A., Torres-Acosta, J. F. J., Sandoval-Castro, C. A., Hoste, H. Comparing the sensitivity of two in vitro assays to evaluate the anthelmintic activity of tropical tannin-rich plant extracts against Haemonchus contortus. Vet Parasitol. 181 (2-4), 360-364 (2011).
  23. Meza Ocampos, G., et al. Two in vitro anthelmintic assays of four Paraguayan medicinal plants for proof of concept of the role of polyphenols in their biological activities and LC-HRMS analysis. J Ethnopharmacol. 312, 116453(2023).
  24. Babják, M., Königová, A., Urda Dolinská, M., Vadlejch, J., Várady, M. Anthelmintic resistance in goat herds-In vivo versus in vitro detection methods. Vet Parasitol. 254, 10-14 (2018).
  25. Elfawal, M. A., et al. High-throughput screening of more than 30,000 compounds for anthelmintics against gastrointestinal nematode parasites. ACS Infect Dis. 11 (1), 1-11 (2025).
  26. de Araújo Sanchez, C., et al. In vivo anthelmintic activity of hydroethanolic extract of Piper cubeba fruits in sheep naturally infected with gastrointestinal nematodes. Vet Parasitol. 333, 110348(2025).
  27. Hördegen, P., Cabaret, J., Hertzberg, H., Langhans, W., Maurer, V. In vitro screening of six anthelmintic plant products against larval Haemonchus contortus with a modified methyl-thiazolyl-tetrazolium reduction assay. J Ethnopharmacol. 108 (1), 85-89 (2006).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Strongyle

מאמרים קשורים