הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הכלאות מיניות עם Mucoromycete Phycomyces blakesleeanus

839 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/67790

⸱

6 ביוני 2025

 , 
1Organismal Biology and Ecology Department, Colorado College

במאמר זה

סיכום

כאן אנו מציגים פרוטוקול בסיסי לאינדוקציה של הזדווגות P. blakesleeanus .

תקציר

Phycomyces blakesleeanus, פטרייה חוטית בתוך פילום Mucoromycota, נבדלת ביכולתה המדהימה לתפיסה סביבתית ותגובות אדפטיביות. בעוד שעבודות קודמות הראו כי גירויים סביבתיים, כולל כוח משיכה, אור, לחות וזמינות חומרים מזינים, משפיעים על דינמיקת הצמיחה ואסטרטגיות הרבייה שלו, המנגנונים הבסיסיים נותרו תחום מחקר מרכזי. רמזים סביבתיים מעוררים רבייה מינית או א-מינית. רבייה מינית מתחילה באיתות פרומון, המעורר משיכה כימית היפאלית, ובסופו של דבר מוביל למעברים מורפולוגיים סדרתיים שמגיעים לשיאם בהיווצרות זיגוספור.

בסביבת מעבדה, הכלאות של P. blakesleeanus גורמות לתפטיר משלים לעבור את המחזור המיני בשלבים שונים. מטרת העבודה שלנו היא לבדוק אם רמזים סביבתיים יכולים לעורר הזדווגות על פני התפטיר של P. blakesleeanus. הכלאות של P. blakesleeanuהגדלות על מדיה מוגבלת בחומרים מזינים יהיו חשופות לאגר מוגבל בחומרים מזינים כדי לעורר תגובה מינית בהתאם למחסור בחומרים מזינים. הפעלה מוצלחת של הזדווגות ב-P. blakesleeanus תקל על מחקרים עתידיים הדורשים כמות גדולה של תפטירים המתרבים מינית בשלבים ספציפיים. תוצאות מחקר זה ישפרו עוד יותר את הבנתנו כיצד מנגנוני הרבייה של P. blakesleeanus מושפעים מגורמים סביבתיים, ויתרמו לבסיס הידע הרחב יותר על רבייה מינית של פטריות חוטיות.

מבוא

השראת הזדווגות במערכות פטרייתיות בתנאי מעבדה קידמה את ההבנה של גנטיקה אאוקריוטית, ביולוגיה של התא, ביולוגיה אבולוציונית וביוטכנולוגיה. פטריות הדיקריאניות, במיוחד ה-Ascomycota, מציגות את הידע הנרחב ביותר על אינדוקציה של הזדווגות בסביבת מעבדה1. מעניין שהפטרייה הראשונה שבה הוצעה רבייה מינית, Syzygites megalocarpus, אינה חברה ב-Ascomycota, אלא חברה בפילום Mucoromycota2. הפילום Mucoromycota היא קבוצה מוקדמת שסווגה בעבר כ-"Zygomycota" אך נחשבת כיום לאחות לשושלות דיקריות 3,4. ה-Mucoromycota, יחד עם Zoopagomycota, הם בעלי משמעות אבולוציונית מכיוון שפילות אלה מייצגות את המעבר של פטריות למערכות אקולוגיות יבשתיות 4,5. כמו פטריות אחרות, ה-Mucoromycetes משתמשים באסטרטגיות רבייה א-מיניות ומיניות בתגובה לסביבתם 3,6. בתנאים מוגבלים בחומרים מזינים, מוקורומיצטים יתחילו את המחזור המיני6. מוקורומיצטים מציגים מנגנוני הזדווגות הומוטליים והטרוטליים כאחד, כאשר התאימות נקבעת על ידי הגנים מסוג ההזדווגות sexM ו-sexP, המסומנים כ-(-) ו-(+) בהתאמה 7,8,9.

Blakeslee10 הדגיש את הרגישות של המחזור המיני של mucoromycete לתנאים חיצוניים, וציין כי לחות היא קריטית להיווצרותם וכי זמינות החומרים המזינים במצע ממלאת תפקיד משמעותי. סוגי הזדווגות משלימים מתחילים את המחזור המיני באמצעות סינתזה שיתופית של חומצות טריספוריות (TA) תוך שימוש בבטא-קרוטן כקודמן 11,12,13. לאחר גילוי TA, הקורים הצמחיים המגיבים מתעבים והופכים לזיגופורים מסועפים מאוד 14,15,16. הזיגופורים ממשיכים לייצר TA ומשיכה כימית הדדית. ב-P. blakesleeanus, זיגופורים מתמיינים בתוך המצע ואינם נראים בקלות על מצע אגר מוצק17. ביצירת מגע, הזיגופורים משתלבים זה בזה והופכים לזיגופורים אוויריים.

ככל שהמחזור המיני נמשך, קצות הזיגופורים מתחברים, ומרכז התאים נדחף החוצה ליצירת מבנה דמוי טבעת עם נפיחות אלמוגית בבסיס, ומשלימה את המעבר לפרוגמטנגיום. קצות התאים היוצרים את הפרוגמטנגיום מתחילים להתמזג ולהתפתח לגמטנגיום. בשלב הגמטנגיה, הזיגופורים מציגים קישוטים דמויי קוצים. דופן התא בקצוות מתמוססת ומופיעות מחיצות הרפתקניות, התוחמות את האזור שבו ייווצר הזיגוספור, והזיגופורים פועלים כמתלים דמויי מלקחיים18. הזיגוספור יהפוך לפיגמנטי ככל שדופן התא שלו מתעבה והוא מקבל קישוט נוסף דמוי קוץ17,18. לאחר היווצרותו, הזיגוספור ייכנס לתקופה של תרדמה לפני שיתחיל מחדש את מחזור הגדילה.

Phycomyces blakesleeanus הוא רירית הטרותאלית הבולטת בתאים הגדולים שלה ובספורנגיופורים המגיבים לסביבה 6,8,18. אורגניזם זה מעובד בקלות במעבדה וניתן לראות את חלקי המחזור המיני המובילים להיווצרות זיגוספורים בטווח של 8-10 ימים. כמודל, P. blakesleeanus נבדק על יכולתו לחוש אור בסביבתו17,19. קלות הטיפוח והיכולת לגרום להזדווגות הפכו אותו גם למודל אידיאלי לחקר המנגנון שמאחורי יכולתו לקלוט אור20; ממצאים אלה הדגישו גם את השימור האבולוציוני של מנגנוני חישת אור בפטריות. ב-P. blakesleeanus, הוכח כי האור מעכב רבייה מינית באמצעות חלבוני חישת אור משומריםאלה 21. מחקרים התפתחותיים אבולוציוניים אחרונים ביקשו להבין אילו גנים תורמים להתמיינות תאים במהלך המחזור המיני P. blakesleeanus 6. מתאם מורפוגנזה לגנים ספציפיים ידרוש בידוד מספיק רקמה מאותם סוגי תאים לביצוע מחקרי ביטוי גנים.

בעוד שפרוטוקולים להשראת הזדווגות של P. blakesleeanus בסביבת מעבדה תוארו בעבר, חלקם מזכירים רק את סוג המדיום לשימוש ואת הזנים הרלוונטיים18. חלק מתיאורי הפרוטוקול אינם כוללים ניסוח מדיה ספציפי אך מתארים היכן למקם סוגי הזדווגות משלימים משוערים על לוח10. פרוטוקולים עדכניים יותר מאפשרים ייצור מוגבר של זיגוספורים על ידי ערבוב נבגים מכל סוג הזדווגות וחיסון בתרחיף נבגים מעורב21 או על ידי הצבת סוגי הזדווגות במרחק מה זה מזה ומתן אפשרות לתרבית לדגור במשך 20 יום22. גישות אלו שימושיות ליצירת תאים ממוינים בשפע, במיוחד זיגוספורים, אך ייתכן שלא יתאימו לתצפית על מהלך זמן התפתחותי או לבחירת מבנים מיניים הנוצרים לפני זיגוספורים עבור טרנסקריפטומיקה של תא בודד. עבודות אחרות התייחסו לכך על ידי הצבת סוגי הזדווגות משלימים במרחק זה מזה על מצע מוצק כדי לאפשר תצפית על מעברים מורפולוגיים סדרתיים עם תחילת המחזור המיני 6,22,23. כמו במקרה של פטריות אחרות, תפטיר P. blakesleeanus מתרחב רדיאלית24,25. לכן, כאשר מגדלים סוגי הזדווגות משלימים על אותה צלחת, חלקים שונים של התפטיר שלהם יבואו במגע בזמנים שונים. מכיוון שמגע בין תפטירים הוא אחד הצעדים הראשונים במחזור המיני של P. blakesleeanus, המשמעות היא שחלקים שונים של תפטיר אינטראקציה יהיו בשלבים שונים במחזור המין. אסינכרוני זה יכול להשפיע על התוצאה של מחקר ביטוי גנים, כך שאם סוגי תאים מובחנים מעורבבים ואם יש להם תוכניות ביטוי גנים מובהקות, יהיה קשה לייחס את תפקידו של גן למבנה מסוים אחד.

בנוסף לערכו של P. blakesleeanus כמודל לבחינת גנים המעורבים במורפוגנזה במהלך המחזור המיני, צמיחתו הנמרצת ויכולתו להתמיין בטווח של מספר ימים הופכים אותו לפטרייה אידיאלית להכשרת סטודנטים המעוניינים בפטריות חוטיות מתפצלות מוקדמות ולשימוש במסגרת כיתה לתואר ראשון כדי ללמוד על מגוון הפטריות ותהליכי ההתפתחות שלהן. הפרוטוקול המוצג כאן עושה שימוש בשלושה ריכוזים של שני סוגים שונים של מדיה כדי להדגים את ההשפעה של זמינות חומרים מזינים על מראה התפטיר, השראת הזדווגות והעשרה למבנים מיניים מסוימים, בין אם לכימות או תצפית או טרנסקריפטומיקה פוטנציאלית של תא בודד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

1. הכנת מדיה

  1. השעו אבקת אגר קמח תירס (CMA) או אגר דקסטרוז תפוחי אדמה (PDA) במים נטולי יונים. עבור 100% CMA או PDA, עקוב אחר הוראות היצרן והשהה 17 גרם CMA ב-1 ליטר מים נטולי יונים או 39 גרם PDA ב-1 ליטר מים נטולי יונים. עבור N% CMA או PDA, יש להשעות 1/N מהכמות המומלצת על ידי היצרן ולהוסיף אגר נוסף כדי להשיג ריכוז אגר של 7.5% (w/v).
    הערה: שלב אופציונלי: לפני החיטוי, הוסף 25 מיקרוגרם/מ"ל של כלורמפניקול אם יש חשש לזיהום חיידקי.
  2. יש לעקר מדיה בחיטוי, בטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.
  3. יש לקרר את המדיה ל-~60 מעלות צלזיוס על ידי הנחתה למשך 30 דקות באמבט מים המוגדר ל-60 מעלות צלזיוס.
    הערה: אם ניתן להחזיק את בקבוק המדיה החם במשך 6 שניות עם מעט או ללא אי נוחות, אז הוא מוכן למזיגה.
  4. יוצקים צלחות בתנאים אספטיים בקולט אדים או בארון בטיחות ביולוגי. הטו את בקבוק המדיה על צלחת פטרי פתוחה וריקה ומזגו רק מספיק כדי לכסות לחלוטין את התחתית.
    1. לחלופין, השתמש בפיפטה סרולוגית מזכוכית והכניס פיפטה של 20 מ"ל מדיה לכל צלחת.
      הערה: גישה זו מגדילה את הזמן שבו בקבוק המדיה נמצא בטמפרטורה נמוכה יותר ומעלה את הסיכון להתמצקות מוקדמת של האגר.
  5. אפשר למדיה להתאחד מחדש. אחסן את הצלחות בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס אם לא משתמשים בהן מיד.

2. הכנת נבגים פטרייתיים או רקמות

  1. השג תרביות מכל סוג הזדווגות של P. blakesleeanus (למשל, NRRL 1555 (-), NRRL 1554 (+), NRRL 1464 (-) ו-NRRL 1465 (+)). כדי לחסן הכלאות עם נבגים, יש לגדל תחילה כל סוג הזדווגות בתרבית טהורה על 100% CMA או PDA
  2. חותכים חלק מהתפטיר המובילים מתרביות קיימות ומניחים את התפטיר שנכרת על צלחת 100% CMA/PDA. דגרו על תרביות טהורות למשך שבוע בטמפרטורה של 27 מעלות צלזיוס במחזור אור של 12 שעות.
  3. ברגע שספורנגיופורים נוכחים, הציפו תרבית טהורה נבגית עם 0.01% טווין 20 במים מעוקרים ונטולי יונים בטכניקה אספטית. בעזרת מיקרופיפטה P1000, שואבים 1.0 מ"ל מתערובת 20 הנבגים מהצלחת לתוך צינור מיקרו-צנטריפוגה.
  4. צנטריפוגה במיני צנטריפוגה למשך 30 שניות, ואז שפכו את הסופרנטנט.
    1. אם יש צורך בנבגים נוספים, המשך להוסיף 1.0 מ"ל מתערובת הנבגים Tween 20 לאותו צינור מיקרו-צנטריפוגה וחזור על שלב 2.4. לאחר השגת כמות מתאימה של נבגים, יש לשפוך את הסופרנטנט ולהחליף אותו ב-500 מיקרוליטר של מים סטריליים נטולי יונים.
    2. אופציונלי: השתמש בהמציטומטר כדי להעריך את ריכוז הנבגים, שיודיע אם יש צורך להוסיף עוד מים או אם יש צורך בצנטריפוגה מחדש של הנבגים.
  5. לחלופין, חסנו את הצלבים בתפטירים מובילים מהתרביות הטהורות.
    1. השתמש בסכין גילוח מעוקר או בחור חור שעם כדי לכרות את הרקמה ולצלחת את החיסון מיד.
  6. הגדירו את הצלבים כצלבים דו-כיווניים, צלבים ארבע-כיווניים או צלבים שמונים כיווניים (איור 1).
    הערה: אם מוגדרים צלבים לעבודת תעתיק, מומלץ להגדיר 1-2 לוחות נוספים לכל מצב/מדיה שישמשו כלוחות חיווי. לוחות חיווי מאפשרים לחוקרים להגביל את החשיפה לאור ללוחות ניסוי, מכיוון שאור מעכב רבייה מינית ב-P. blakesleeanus.
    1. עבור חצייה דו-כיוונית, הניחו סוגי הזדווגות משלימים זה מול זה (איור 1A).
      1. הנח את התפטיר מסוג ההזדווגות (-), NRRL 1555 או NRRL 1464, במרחק של לפחות 1 ס"מ מקצה צלחת פטרי על מחשב כף יד או CMA.
      2. על אותה צלחת, מול המקום שבו הוצב סוג ההזדווגות (-) ובמרחק של סנטימטר אחד מקצה צלחת הפטרי, הניחו את סוג ההזדווגות (+), NRRL 1554 או NRRL1465 (איור 1A).
        הערה: המרחק בין סוגי הזדווגות משלימים ישפיע על גודל הרקמה המשתתפת במחזור המין. סוגי הזדווגות רחוקים יותר זה מזה מאפשרים לתפטיר להתרחב יותר, מה שיגדיל את מספר האינטראקציות המיניות בין שני בני הזוג.
    2. עבור חצייה ארבע-כיוונית, מקמו כמו טיפוסי הזדווגות זה מול זה, אך שכנים לסוג הזדווגות משלים (איור 1B).
      1. הניחו את הנבגים או התפטירים של סוגי ההזדווגות (-), NRRL 1555 ו-NRRL 1464, זה מול זה במרחק של לפחות 1 ס"מ מקצה צלחת פטרי על מחשב כף יד או CMA.
      2. באותה צלחת, בחר מיקום בין שני סוגי ההזדווגות (-) ובמרחק של לפחות 1 ס"מ מקצה הצלחת וחסן את האתר בנבגים או בתפטירים מסוג ההזדווגות (+), NRRL 1554 או 1465.
      3. על אותה צלחת, מול המקום שבו חוסן סוג ההזדווגות הראשון (+) ובמרחק של לפחות 1 ס"מ מהצלחת, הניחו את סוג ההזדווגות השני (+).
    3. עבור הצלבה של 8 כיוונים, סוגי הזדווגות לסירוגין לאורך ההיקף של צלחת הפטרי, הכוללים ארבעה מכל סוג הזדווגות (איור 1C).
  7. לאחר החיסון, אטמו את הצלחות עם פרפילם או (השאירו אותן לא אטומות) והניחו אותן בכלי משני לפני הדגירה ב-22 מעלות צלזיוס בחושך. התבוננו בצלחות מדי יום בחיפוש אחר עדויות להזדווגות ובמהלכו צלמו תמונות מתחת לצלחת ועקבו אחר התפטיר ככל שהתרביות גדלות.
    הערה: לאחר 24 שעות לאחר החיסון, צפו לראות את התפטיר מתפשט בכל סוגי המדיה אך לא סביר שאנשים יהיו במגע בשלב זה.
  8. בהתאם לסוג המדיה (PDA או CMA) והניסוח (25%, 50%, 100%), אם התפטיר מתחיל ליצור מגע, בדוק תפטירים של סוגי הזדווגות משלימים הנמצאים במגע תחת היקף ניתוח לעדויות להזדווגות. צלם תמונות של תפטירים באינטראקציה עם מצלמה או סמארטפון המותקן על טווח הניתוח.
    1. רכוש תמונות של תפטיר ותפור אותן יחד (למשל, באמצעות אפליקציית Panorama Stitcher). השתמש ב-ImageJ כדי להעריך את שטח התפטיר (ראה מדריכים מקוונים).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

לאחר הכלאה של 4 כיוונים, כל זן השתנה מעט בקצב הגדילה שלו כפי שנקבע על ידי השינוי בשטח התפטיר (איור 2). למרות שלא היה מובהק סטטיסטית, ל-NRRL 1555 היה שינוי מהיר יותר בשטח כאשר הוא מצופה על 25% CMA, 25% PDA או 100% PDA. באופן דומה, ל-NRRL 1465 היה שינוי גבוה יותר בשטח כאשר גדל על 50% PDA או CMA. ל-NRRL 1464 הייתה העלייה המהירה ביותר בשטח כאשר גדל על 100% CMA. לאחר 24 שעות (1 DPI), זנים הגדלים על PDA נראו צהובים יותר ביחס לזנים שגדלו על CMA (איור 3)-PDA הוכח בעבר כ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

פרוטוקול פשוט להשראת רבייה מינית ב-P. blakesleeanus בתנאי מעבדה מוצג כאן. אחד השיקולים הקריטיים ביותר לפרוטוקול זה הוא הגבלת חומרים מזינים. ההשערה היא שפטריות בחרו ברבייה מינית כתגובה לתנאים סביבתיים קשים כגון הגבלת חומרים מזינים 6,28,29,30,31,32. שינוי רמת החומרים המזינים יכול להודי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי אינטרסים להצהיר עליהם.

תודות

אנו רוצים להודות לוועד המנהל של מדעי הטבע של קולורדו קולג', למחלקה לביולוגיה ואקולוגיה של אורגניזמים ולקרן משפחת Hevey למחקר סטודנטים על מימון העבודה הזו. אנו גם מודים לאליס קלר וטיה האצ'נס על התמיכה הטכנית שלהן.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אבקת אגרThermoFisher3453PK
chloramphenicolFisherSciBP904-100
אגר קמח תירסקרולינה742460
Panorama StitcherApple App Store
Phycomyces blakesleeanus (-) NRRL 1555משרד החקלאות של ארצות הברית - שירות מחקר חקלאי1555USDA-ARS יישלח רק לחוקרים אקדמיים; ראה להלן חלופות
Phycomyces blakesleeanus (-) NRRL 1564משרד החקלאות של ארצות הברית - שירות המחקר החקלאי1564USDA-ARS ישלח רק לחוקרים אקדמיים; ראה להלן חלופות
Phycomyces blakesleeanus (-) Tube CultureCarolina Biological Supply 156183תרבות ברמת חינוך זמינה לרכישה; NRRL 1555
Phycomyces blakesleeanus (+) NRRL 1554משרד החקלאות של ארצות הברית - שירות המחקר החקלאי1554USDA-ARS ישלח רק לחוקרים אקדמיים; ראה להלן חלופות
Phycomyces blakesleeanus (+) NRRL 1565משרד החקלאות של ארצות הברית - שירות המחקר החקלאי1565USDA-ARS ישלח רק לחוקרים אקדמיים; ראה להלן חלופות
Phycomyces blakesleeanus (+) תרבות צינורותקרולינה156182תרבות חינוך זמינה לרכישה; NRRL 1554
תפוחי אדמה דקסטרוז אגרFisherSciDF0013-17-6
נבט פלוס מיני צנטריפוגההית'רו סיינטיפיקמק"ט 120610
טווין 20סיגמא-אולדריץ'P6585-10 מ"ל

מקורות

  1. NaranjoOrtiz, M. A., Gabaldón, T. Fungal evolution: diversity, taxonomy and phylogeny of the fungi. Biol Rev Camb Philos Soc. 94 (6), 2101-2137 (2019).
  2. Idnurm, A. Sex determination in the firstdescribed sexual fungus. Eukaryot Cell. 10 (11), 1485-1491 (2011).
  3. Spatafora, J. W., et al. A phylumlevel phylogenetic classification of zygomycete fungi based on genomescale data. Mycologia. 108 (5), 1028-1046 (2016).
  4. Wang, Y., et al. Divergent evolution of early terrestrial fungi reveals the evolution of mucormycosis pathogenicity factors. Genome Biol Evol. 15 (4), evad046(2023).
  5. Gryganskyi, A. P., et al. Sequencing the genomes of the first terrestrial fungal lineages: what have we learned. Microorganisms. 11 (7), 1830(2023).
  6. Peña, J. F. The evolutionary developmental biology of Mucoromycotina [Doctoral dissertation]. , University of California, Riverside. (2022).
  7. Wetzel, J., Burmester, A., Kolbe, M., Wöstemeyer, J. The matingrelated loci sexM and sexP of the zygomycetous fungus Mucor mucedo and their transcriptional regulation by trisporoid pheromones. Microbiology (Reading). 158 (Pt 4), 1016-1021 (2012).
  8. Camino, L. P., Idnurm, A., CerdáOlmedo, E. Diversity, ecology, and evolution in Phycomyces. Fungal Biol. 119 (11), 1007-1021 (2015).
  9. Gryganskyi, A. P., et al. Structure, function, and phylogeny of the mating locus in the Rhizopus oryzae complex. PLoS One. 5 (12), e15273(2010).
  10. Blakeslee, A. F. Sexual reproduction in the Mucorineae. Proc Am Acad Arts Sci. 40, 205-319 (1904).
  11. Sutter, R. P., Grandin, A. B., Dye, B. D., Moore, W. R. (-) mating typespecific mutants of Phycomyces defective in sex pheromone biosynthesis. Fungal Genet Biol. 20 (4), 268-279 (1996).
  12. Sahadevan, Y., RichterFecken, M., Kaerger, K., Voigt, K., Boland, W. Early and late trisporoids differentially regulate βcarotene production and gene transcript levels in the mucoralean fungi Blakeslea trispora and Mucor mucedo. Appl Environ Microbiol. 79 (23), 7466-7475 (2013).
  13. Gooday, G. W., Carlile, M. J. The discovery of fungal sex hormones: III. Trisporic acid and its precursors. Mycologist. 11 (3), 126-130 (1997).
  14. Banbury, G. H. Processes controlling zygophore formation and zygotropism in Mucor mucedo Brefeld. Nature. 173, 499-500 (1954).
  15. Sutter, R. P., Whitaker, J. P. Zygophorestimulating precursors (pheromones) of trisporic acids active in (-)Phycomyces blakesleeanus. Acidcatalyzed anhydro derivatives of methyl 4dihydrotrisporateC and 4dihydrotrisporateC. J Biol Chem. 256 (5), 2334-2341 (1981).
  16. Gooday, G. W. Functions of trisporic acid. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 284, 509-520 (1978).
  17. Bergman, K., et al. Phycomyces. Bacteriol Rev. 33 (1), 99-157 (1969).
  18. O'Donnell, K. L., Hooper, G. R., Fields, W. G. Zygosporogenesis in Phycomyces blakesleeanus. Can J Bot. 54, 2573-2586 (1976).
  19. Delbrück, M., Reichardt, W. I. System analysis for the light growth reactions of Phycomyces. Cellular Mechanics in Differentiation and Growth. Rudnick, D. , Princeton University Press. 3-44 (1957).
  20. Idnurm, A., et al. The Phycomyces madA gene encodes a bluelight photoreceptor for phototropism and other light responses. Proc Natl Acad Sci USA. 103 (12), 4546-4551 (2006).
  21. Shakya, V. P. S., Idnurm, A. The inhibition of mating in Phycomyces blakesleeanus by light is dependent on the MadAMadB complex that acts in a sexspecific manner. Fungal Genet Biol. 101, 20-30 (2017).
  22. Yamazaki, Y., Miyazaki, A., Kataoka, H., Ootaki, T. Effects of chemical components and nitrogen sources on zygospore development in Phycomyces blakesleeanus. Mycoscience. 42 (1), 11-17 (2001).
  23. Idnurm, A., Walton, F. J., Floyd, A., Heitman, J. Identification of the sex genes in an early diverged fungus. Nature. 451 (7175), 193-196 (2008).
  24. Agrios, G. N. Plant pathogens and disease: general introduction. Encyclopedia of Microbiology. Schaecter, M. , Elsevier. 613-646 (2009).
  25. Valle, M., et al. Impact of water activity on the radial growth of fungi in a dairy environment. Food Res Int. 157, 111247(2022).
  26. Heo, Y. M., et al. Investigation of filamentous fungi producing safe, functional watersoluble pigments. Mycobiology. 46 (3), 269-277 (2018).
  27. Wickham, H. ggplot2 elegant graphics for data analysis. , Springer International Publishing. Cham, Switzerland. (2016).
  28. Lubkowitz, M. A., et al. Schizosaccharomyces pombe isp4 encodes a transporter representing a novel family of oligopeptide transporters. Mol Microbiol. 28 (4), 729-741 (1998).
  29. Nelson, M. A., Metzenberg, R. L. Sexual development genes of Neurospora crassa. Genetics. 132 (1), 149-162 (1992).
  30. Sato, S., Suzuki, H., Widyastuti, U., Hotta, Y., Tabata, S. Identification and characterization of genes induced during sexual differentiation in Schizosaccharomyces pombe. Curr Genet. 26 (1), 31-37 (1994).
  31. Grishkan, I., Korol, A. B., Nevo, E., Wasser, S. P. Ecological stress and sex evolution in soil microfungi. Proc Biol Sci. 270 (1510), 13-18 (2003).
  32. Bernstein, H., Byers, G. S., Michod, R. E. Evolution of sexual reproduction: importance of DNA repair, complementation, and variation. Am Nat. 117 (4), 537-549 (1981).
  33. Heitman, J., et al. The fungal kingdom. , ASM Press. (2017).
  34. Heitman, J., et al. Sex in fungi molecular determination and evolutionary implications. , ASM Press. (2007).
  35. Wang, Z., LópezGiráldez, F., Wang, J., Trail, F., Townsend, J. P. Integrative activity of mating loci, environmentally responsive genes, and secondary metabolism pathways during sexual development of Chaetomium globosum. mBio. 10, (2019).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

פטריות Filamentousרבייה מיניתטיפוס הזיווגיצירת זיגוספורהמצע דל בתוספי תזונהכימואטרקציה של היפותאגר תפוח אדמה-דקסטרוזביטוי גנים
הכלאות מיניות עם Mucoromycete Phycomyces blakesleeanus
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.