מאמר שיטה

ניתוח נפח ריאות חד צדדי באמצעות מיקרו-CT להערכה משופרת של פיברוזיס ריאתי במודלים פרה-קליניים

DOI:

10.3791/67837

⸱

20 ביוני 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Respiratory Diseases, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Guangzhou Institute of Respiratory Health, the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 2Guangzhou National Laboratory, 3Second Department of Elderly Respiratory, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University, Guangdong Provincial Geriatric Institute

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לשימוש בטומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT) כדי לכמת אזורים מאווררים במודל פיברוזיס ריאתי חד צדדי המושרה על ידי בלאומיצין באמצעות החדרה תוך קנה הנשימה בצד הנגע.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פיברוזיס ריאתי (PF) היא מחלת ריאות אינטרסטיציאלית מתקדמת ובלתי הפיכה המאופיינת בפרוגנוזה גרועה ואפשרויות טיפול מוגבלות. המודל העכברי המסורתי של פיברוזיס ריאתי המושרה על ידי החדרה תוך-קנה של בלאומיצין יכול לגרום להפצה לא אחידה של תרופות ולשיעורי תמותה גבוהים. שיטת ההחדרה התוך-קנה החד-צדדית המעודנת למתן בלאומיצין בעכברים מאפשרת יצירת מודל פיברוזיס ריאתי אחיד ומבוקר יותר, המספק סימולציה טובה יותר של המחלה בבני אדם. כאן אנו מציגים פרוטוקול לשימוש בטומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT) כדי לכמת אזורים מאווררים במודל פיברוזיס ריאתי חד צדדי המושרה על ידי בלאומיצין באמצעות החדרה תוך-קנה בצד הנגע. גישה זו מאפשרת לכמת את נפח הריאות הכולל ואזורי הריאה המאווררים, ומספקת מדד רגיש ומדויק של התקדמות המחלה והתגובה לטיפול. מחקר זה כולל הרדמה, מתן תרופות מדויק, סריקת מיקרו-CT ועיבוד לאחר שימוש בתוכנת 3D Slicer לניתוח תמונה. ניתוח נפח הריאות החד-צדדי לאחר הטיפול בבלאומיצין הראה ירידה משמעותית בנפח הריאות בהשוואה לביקורת. צביעת הטריכרום של מאסון אישרה את הנוכחות והשקיעה המוגברת של קולגן בעכברים שטופלו ב-BLM. כאן, הערכנו פיברוזיס ריאתי במודלים פרה-קליניים על ידי ביצוע ניתוח נפחי ריאות חד צדדי באמצעות מיקרו-CT, וסיפקנו לחוקרים שיטת הערכה מדויקת ויסודית להערכת התערבויות טיפוליות במחקרי PF.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פיברוזיס ריאתי (PF) היא מחלת ריאות הרסנית ובלתי הפיכה עם שיטות טיפול מוגבלות. השכיחות העולמית של PF נעה בין 1 ל-13 לכל 100,000 אנשים, עם עלייה משמעותית בשכיחות שנצפתה עם גיל1 מתקדם. למרות מאמצים משמעותיים בעשורים האחרונים, הנוף הטיפולי ב-PF נותר מוגבל, כאשר רק שני תרופות אנטי-פיברוטיות, נינטדניב ופירפנידון, מאושרות כיום לטיפול ב-PF2. הפתוגנזה הבסיסית של פיברוזיס ריאתי היא מורכבת ביותר, ומקיפה היבטים שונים של פיזיולוגיה מולקולרית ותאית3. מודלים ניסיוניים של בעלי חיים, המושרים על ידי גורמים שונים, הם כיום כלים חיוניים לחקירת מנגנונים פתוגניים ופנוטיפים של מחלות.

מודל עכברי פיברוזיס ריאתי המושרה על ידי בלאומיצין, הניתן באמצעות החדרה תוך-קנה הנשימה, מוכר באופן נרחב להבהרת המנגנונים התאיים והמולקולריים הבסיסיים ולזיהוי מטרות טיפוליות פוטנציאליות4. עם זאת, התפלגות אסימטרית ולא סלקטיבית של בלאומיצין המוחדר תוך קנה הנשימה עלולה להוביל לשיעורי תמותה גבוהים, בעיקר עקב פיברוזיס לא הומוגני ופגיעה ריאתית דו-צדדית 5,6. כדי לטפל בבעיה זו, הצענו גישת מתן תוך-קנה חד צדדית כדי להבטיח אספקה אחידה של חומרים ניסיוניים בתוך הריאה השמאלית וכדי לחקות טוב יותר את התהליך הפתולוגי שנצפה בחולי PF 7,8,9. חוץ מזה, ניתן להשתמש בטכניקת הניהול החד-צדדי גם כדי להעריך תרופות הדורשות הפצה מקומית או להתערבויות ניסיוניות אחרות המכוונות לריאה ספציפית.

במודלים פרה-קליניים, טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT) הפכה לבעלת ערך הולך וגובר לחקירת פתולוגיות ריאתיות והוכיחה את עצמה ככלי רב עוצמה למחקרי אורך, המסוגל לספק נתונים איכותיים וכמותיים לניטור התקדמות המחלה כמו גם תגובה להתערבויות טיפוליות10. מיקרו-CT שימש להערכת נפח כולל, אזורים מאווררים ולא מאווררים, מורפולוגיה של הסימפונות וצפיפות רקמות. בהתבסס על המחקרים הקודמים שלנו, פיתחנו שיטת הדמיה חדשה שבה נעשה שימוש במיקרו-CT כדי לנתח את נפח הריאה החד-צדדי ולהעריך את רמות הפיברוזיס במודל עכברי של פיברוזיס ריאתי 7,8,9. שיטה זו מאפשרת לכמת אזורי ריאה מוגזים, ומספקת מדד מדויק ורגיש יותר של התקדמות המחלה והתגובה לטיפול.

מחקר זה מציג שיטת ניתוח נפח ריאות מאווררת חד צדדית הנגזרת מסריקות מיקרו-CT בעכברים שטופלו בבלאומיצין. שיטה חדשנית זו מציעה הערכה מדויקת ומקיפה יותר של פיברוזיס ריאתי, ועשויה לשנות את האופן שבו אנו מעריכים את יעילות ההתערבויות הטיפוליות במחקרים פרה-קליניים. מחקר זה תורם חידוד מצוין בניתוח מודלים פרה-קליניים של פיברוזיס ריאתי, ומספק שיטת ניתוח כמותית רבת עוצמה להערכת השפעות הטיפול לצד התקדמות המחלה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית של גואנגג'ואו. הניסויים נערכו על עכברים זכרים בני 6-8 שבועות, 25-30 גרם C57BL/6. העכברים שוכנו במחזור אור/חושך של 12 שעות (אור: 25 לוקס) עם גישה אד-ליביטום למזון ומים והוקצו באופן אקראי לקבוצות ביקורת ו-BLM.

1. החדרה תוך-קנה ריאתית חד צדדית

  1. להרדים עכברים זכרים C57BL/6 (בני 6-8 שבועות, 25-30 גרם) עם הזרקה תוך-צפקית של 1% נתרן פנטוברביטל (50 מ"ג/ק"ג).
  2. עקוב אחר רמת ההרדמה על ידי התבוננות בקצב הנשימה ורפלקס נסיגת הגפיים.
  3. אבטח את העכבר במצב שכיבה על לוח פלסטיק בזווית של 70°-90°, מרוסן על ידי החותכות והגפיים.
  4. השתמש במלקחיים סטריליים קהים כדי למשוך בעדינות את הלשון.
  5. הכנס מחט קהה מותאמת אישית של 22 גרם לקנה הנשימה באמצעות לרינגוסקופ של בעלי חיים קטנים כדי לדמיין את מבני האפיגלוטיס והלוע. סובב את הלוח נגד כיוון השעון ל -70 ° כדי ליישר את הסימפונות הראשיים השמאליים במקביל לסמפונות הראשיים. מקדמים את המחט עד שמורגשת התנגדות.
    הערה: מדוד מראש את אורך הצנתר באמצעות עכבר תרגול בגודל דומה כדי להבטיח אורך החדרה אופטימלי.
  6. סובב במהירות לזווית של 30 מעלות והחדיר 40 מיקרוליטר של תמיסת בלאומיצין (0.02 מ"ג). הסר את המחט.
  7. החזק את העכבר במקומו למשך 30 שניות לפחות כדי להבטיח חלוקה נכונה של תרופות.
  8. אפשר לעכבר להתאושש בשכיבה על שמיכה מחממת.

2. סריקת טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT)

הערה: העכברים נסרקו באמצעות מערכת המיקרו-CT בהתאם להוראות היצרן.

  1. בצע סריקת מיקרו-CT בעכברים במשך 3 שבועות לאחר החדרת בלאומיצין.
  2. הוסיפו כמות מתאימה של איזופלורן למכשיר האידוי של מכונת ההרדמה בגז של בעלי חיים קטנים, הפעילו את הוופורייזר, התאימו את ריכוז האינדוקציה ל-3%, והניחו את העכברים בקופסת האינדוקציה עד שהם מאבדים את רפלקס הפליפ-פלופ ומפגינים נשימה איטית ועמוקה.
  3. הוציאו את העכברים מקופסת האינדוקציה והניחו אותם בשכיבה על שולחן הסריקה כך שהעכברים יאריכו את גפיהם וגופם יהיה מיושר לאורך קו האמצע.
  4. הגדר את ריכוז התחזוקה של איזופלורן בטבלת הסריקה ל-1%.
  5. הגדר את מצב הסריקה של Micro-CT: שדה רוחבי של view 43 מ"מ, רזולוציה 2K x 2K, גודל פיקסל 0.042 מ"מ, עובי פרוסה 0.042 מ"מ.
  6. לאחר הסריקה, הניחו את העכברים על שמיכה מחממת עד שהם מתעוררים.

3. עיבוד לאחר מיקרו-CT: פילוח ריאות סלקטיבי חד צדדי וניתוח נפח

הערה: עיבוד תמונה וניתוח כמותי בוצעו באמצעות תוכנת הקוד הפתוח החינמית 3D Slicer (http://www.slicer.org), בהתאם להוראות היצרן. טווחי יחידת הונספילד קלינית (HU) עבור חלון הריאה יושמו כדי לנרמל תמונות HU, תוך פילוח פרנכימת הריאה לאזורים מאווררים נורמו ([-1000, -350] HU) כפי שדווח בעבר 8,9,11. הליך עיבוד התמונה מתואר כדלקמן:

  1. פתח את כלי הפריסה התלת-ממדיים. הממשק התפעולי מתואר באיור 1.
  2. לחצו על 'טען ' כדי לייבא נתוני הדמיה בתבנית DICOM. תמונות ציריות, קורונליות וסגיטליות יוצגו בממשק הראשי (איור 2).
  3. התאם את הפרמטרים הקשורים לסגיטלי view כפי שמוצג באיור 3 (אופציונלי). (1: הצג אפשרויות מוסתרות; 2: בחר לשנות את שם אמצעי האחסון הנוכחי; 3: הזן שם חדש).
  4. במודול עורך המקטעים , לחץ על הוסף כדי ליצור פילוח לניתוח ריאות סלקטיבי (ריאה ימנית) (איור 4) (1: נפחים; 2: עורך פלחים; 3: הוסף מקטע; 4: הגדר סף; 5: התאם טווח סף; 6: השתמש למסיכה; 7: הגדר מברשת כדור).
  5. כוונן את טווח הסף ל-[-1000, -350] HU והפעל את האפשרות Use for Masking .
  6. השתמשו בכלי צביעה עם מברשת כדור כדי לפלח את אזורי הריאות הרצויים.
  7. בחרו בכלי Island ובחרו Keep Selected Island. סמן את הריאה הימנית ולאחר מכן לחץ על הצג תלת-ממד כדי להציג את המודל התלת-ממדי בלוח ההדמיה (איור 5) (1: עריכת איים (רכיבים מחוברים); 2: בחר 'שמור על האי הנבחר'; 3: הצג דגם תלת-ממד).
  8. בחלונית Terminology , שנו את צבע הדגם התלת-ממדי לכחול (אופציונלי).
  9. חזור על שלבים 3.4-3.6 עבור הריאה השמאלית. עבדו את תמונות ה-CT של החזה הצירי שכבה אחר שכבה כדי לחשב את נפח הריאה השמאלית המאווררת וליצור מודל תלת-ממדי (איור 6).
  10. שנה את צבע מודל הריאה השמאלית התלת-ממדית לצהוב (אופציונלי).
  11. הגדר את האטימות של פילוח הריאה הימני ל-0.2.
  12. ייצא את המודל התלת-ממדי כנדרש (איור 7).
  13. צלמו צילומי מסך של התצוגה התלת-ממדית או תמונות הפרוסות ושמרו אותן (איור 8) (1: צילום מסך של הערות; 2: בחרו את הפורמט של התמונה; 3: שנו את נתיב השמירה).
  14. השתמש במודול סטטיסטיקת המקטעים כדי לחשב את נפח הריאות (מ"מ3) עבור כל מקטע ולבצע ניתוח כמותי של אזורים מאווררים נורמו (איור 9).

figure-protocol-1
איור 1: הממשק של תוכנת 3D Slicer. האיור מציג את הממשק התפעולי הראשי של תוכנת 3D Slicer. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-protocol-2
איור 2: תמונות CT של פיברוזיס ריאתי הנגרמת על ידי החדרה תוך-קנה נשימה חד צדדית בעכברים. תצוגות ציריות, עטרתיות וסגיטליות, יחד עם שחזור ריאות תלת מימד לאחר החדרת בלאומיצין. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-protocol-3
איור 3: התאמת פרמטר תצוגה קשתית. האיור ממחיש את התאמת הפרמטרים, המאפשרת הדמיה וניתוח מדויקים. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-protocol-4
איור 4: עריכת סגמנטציה והתאמות פרמטרים. האיור מדגים את תהליך עריכת הפילוח ואת התאמות הפרמטרים המתאימות. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-protocol-5
איור 5: סגמנטציה תלת-ממדית של ריאה ימין. התהליך כולל שלושה שלבים עוקבים: עריכת רכיבים מחוברים לפילוח ריאות (שלב 1), בחירה באפשרות שמור את האי שנבחר כדי לבודד את הריאה הימנית (שלב 2) ולחיצה על הצג תלת-ממד כדי לעבד את המודל בלוח התצוגה החזותית (שלב 3). אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-protocol-6
איור 6: שחזור תלת מימדי של הריאה השמאלית על בסיס ניתוח מיקרו-CT. תמונות CT חזה ציריות עובדו שכבה אחר שכבה כדי לפלח אזורים מאווררים, לכמת נפח מאוורר ולשחזר מודל תלת מימדי. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-protocol-7
איור 7: שחזור ריאות תלת מימדי המבוסס על ניתוח מיקרו-CT של נפח ריאות מאוורר במודל פיברוזיס ריאתי חד צדדי. מודלים משוחזרים יוצאו בפורמטים מוגדרים לספריות מוגדרות מראש. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-protocol-8
איור 8: מדריך לשמירת תמונות. האיור מתאר שלבים רציפים לשמירת תמונות, החל מהפעלת פונקציית השמירה דרך תפריט צילום מסך הערות ועד לבחירת פורמטים והגדרת נתיבי אחסון. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-protocol-9
איור 9: ניתוח סטטיסטי המבוסס על מיקרו-CT במודל פיברוזיס ריאתי חד צדדי. נותחו נתונים כמותיים שמקורם באזורים נורמו-אוורריים. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

4. צביעת הטריכומות של מאסון

  1. יש לתקן את דגימת הריאה עם 4% פרפורמלדהיד בטמפרטורת החדר (RT) למשך הלילה, לייבש באמצעות סדרת אתנול מדורגת ולהטמיע בפרפין. מכינים פרוסות בעובי של 5 מיקרומטר עם מיקרוטום סיבובי.
  2. בצע את צביעת הטריכרום של מאסון על החלקים באופן הבא.
    1. שטפו את החלקים נטולי הנוזל וההתייבשות במים מזוקקים, ולאחר מכן טיפול מורדנט בנוזל בואין שחומם מראש בטמפרטורה של 56-60 מעלות צלזיוס למשך שעה אחת או לילה ב-RT.
    2. לאחר הכביסה יש לצבוע את החלקים בתמיסת ההמטוקסילין מברזל של Weigert למשך 10 דקות, לשטוף תחת מי ברז חמים זורמים למשך 10 דקות, ולטבול בתמיסת פוקסין חומצה ארגמנית של ביבריך למשך 10-15 דקות.
    3. השג בידול באמצעות תמיסת חומצה פוספומוליבדית-פוספוטונגסטית למשך 10-15 דקות, ונטר עד שאזורים עשירים בקולגן יעברו מאדום לצלול.
    4. לאחר מכן, העבירו ישירות את השקופיות לתמיסה כחולה אנילין למשך 5-10 דקות, שטפו במים מזוקקים והבדילו בתמיסת חומצה אצטית 1% למשך 2-5 דקות.
    5. לאחר התייבשות באמצעות אתנול מדורג (95% לאלכוהול מוחלט) ופינוי קסילן, הרכיבו את החלקים עם מדיום שרף.

5. ניתוח למידת מכונה של צביעת טריכרום של מאסון

  1. להעריך באופן היסטופתולוגי את ניתוח הרכב הקולגן בריאות בקרה וטיפול בבלאומיצין באמצעות צביעת טריכרום של מאסון.
  2. כדי להפחית הטיות תלויות בצופה, רכוש תמונות דיגיטליות ברזולוציה גבוהה של קטעי ריאות מוכתמים באמצעות סורק תמונות שקופיות שלמות.
  3. לאחר מכן, נתח כמותית את אזורי הקולגן באמצעות תוכנה אוטומטית ניתוח תמונת מסלול 8,9,12. תהליך ההכשרה מתואר בקצרה להלן.
    1. תוחם ידנית מספר הערות מייצגות עבור כל קטגוריית רקמות (למשל, קולגן, רקמה תקינה ורקמה פיברוטית). השתמש בתכונות הפיקסלים שחולצו מאזורי אימון מבוארים כדי לבנות את ערכת האימון עבור מכונת וקטור התמיכה (SVM).
    2. עבור קטעים מוכתמים במאסון, הגדר את סיווג הרקמות לשלוש קטגוריות: קולגן, רקמה רגילה ורקע.
      הערה: מודל למידת המכונה עובר הכשרה איטרטיבית על תמונות שקופיות שלמות (WSI) באמצעות הערות וליטוש חוזרים ונשנים עד שהערכות מאומתות על ידי פתולוג מאשרות סיווג רקמות מדויק. לאחר השגת דיוק סיווג משביע רצון, התהליך הופך לאוטומטי לחלוטין: תכונות מופקות מכל פיקסל בתוך אזורי עניין חוקיים (ROI), ולאחר מכן ה-SVM חוזה את קטגוריית הרקמות המתאימה בדיוק גבוה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

איור 10A-D מציג את התוצאות של השינויים בנפח הריאות וניתוח הצביעה.

כדי להעריך את ההשפעה של בלאומיצין (BLM) על רקמת הריאה, ערכנו ניתוח השוואתי של נפחי הריאות בין קבוצות שטופלו במי מלח (Ctrl) וקבוצות שטופלו ב-BLM באמצעות טכניקות הדמיה תלת מימדיות. נפח הריאה השמאלית מופחת באופן משמעותי בקבוצת ה-BLM בהשוואה ל-Ctrl. כימות נפח הריאה השמאלית (מ"מ3) מראה ירידה משמעותית בקבוצת ה-BLM (איור 10A,C

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פיברוזיס ריאתי היא מחלה הרסנית המאופיינת בהצטלקות מתקדמת של רקמת הריאה, מה שמוביל לירידה בתפקוד הריאות ובסופו של דבר לאי ספיקת נשימה1. מודל עכברי פיברוזיס ריאתי, המושרה על ידי חומרים פרמקולוגיים ושיטות מתן שונות, הוא כלי חיוני להבנת התקדמות המחלה ולהערכת היעילות של טיפולים פוטנציאליים, במיוחד בהחדרה תוך-קנה של בלאומיצין13. עם זאת, למודל ההחדרה התוך-קנה של בלאומיצין יש מגבלות, כולל פיזור לא אחיד של בלאומיצין ברחבי הריאות ופוטנציאל לשיעורי תמ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים שאין ניגודי אינטרסים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82300092) ומחקר עצמאי של מעבדת המפתח הממלכתית למחלות נשימה (SKLRD-Z-202302) ומימון לפרויקט בניית יכולת חדשנות של מכוני המחקר המחוזיים של גואנגדונג (KD032024001).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
0.9% מי מלחהופביוHBPP008-100
מחט קהה 22 גרםב.ד.383922
פורס תלת-ממד  פלטפורמת מחשוב תמונהפורס תלת-ממד https://www.slicer.org/
בלאומיציןMCEHY-17565
איזופלורןRWDR510-22
ערכת כתמים מאסוןיאסןברקוד 60532ES58
מיקרו-CTפינסנגSNC-100
מסלולניתוח תמונת מסלולhttps://www.orbit.bio/
פנטוברביטל נתרןסיגמאעמ' 3761
לרינגוסקופ של בעלי חיים קטניםיויאן אינסטרומנטסCG-02M
אס.פי.אס.אסיבמגרסה 19.0 
שמיכה חמהמעבדת אנים טקקו רוחב -16-0323

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Podolanczuk, A. J., et al. Idiopathic pulmonary fibrosis: state of the art for 2023. Eur Respir J. 61 (4), 2200957(2023).
  2. Raghu, G., Selman, M. Nintedanib and pirfenidone: new antifibrotic treatments indicated for idiopathic pulmonary fibrosis offer hopes and raises questions. Am J Respir Crit Care Med. 191 (3), 252-254 (2015).
  3. Moss, B. J., Ryter, S. W., Rosas, I. O. Pathogenic mechanisms underlying idiopathic pulmonary fibrosis. Annu Rev Pathol. 17, 515-546 (2022).
  4. Kolb, P., et al. The importance of interventional timing in the bleomycin model of pulmonary fibrosis. Eur Respir J. 55 (6), 1901105(2020).
  5. Jenkins, R. G., et al. An official American Thoracic Society workshop report: use of animal models for the preclinical assessment of potential therapies for pulmonary fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol. 56 (5), 667-679 (2017).
  6. Wu, Z., et al. Integrating network pharmacology, experimental validation and molecular docking to reveal the alleviation of Yinhuang granule on idiopathic pulmonary fibrosis. Phytomedicine. 128, 155368(2024).
  7. Liao, S., et al. Direct intrabronchial administration to improve the selective agent deposition within the mouse lung. J Vis Exp. (147), e59450(2019).
  8. Fu, Z., et al. Therapeutic effects of fatty acid binding protein 1 in mice with pulmonary fibrosis by regulating alveolar epithelial regeneration. BMJ Open Respir Res. 10 (1), e001568(2023).
  9. Song, S., et al. Intracellular hydroxyproline imprinting following resolution of bleomycin-induced pulmonary fibrosis. Eur Respir J. 59 (5), 2100864(2022).
  10. Pennati, F., et al. Micro-CT-derived ventilation biomarkers for the longitudinal assessment of pathology and response to therapy in a mouse model of lung fibrosis. Sci Rep. 13 (1), 4462(2023).
  11. Choi, E. J., et al. Serial micro-CT assessment of the therapeutic effects of rosiglitazone in a bleomycin-induced lung fibrosis mouse model. Korean J Radiol. 15 (4), 448-455 (2014).
  12. Yang, P., et al. Comprehensive analysis of fibroblast activation protein expression in interstitial lung diseases. Am J Respir Crit Care Med. 207 (2), 160-172 (2023).
  13. Liu, T., De Los, S. F., Phan, S. H. The bleomycin model of pulmonary fibrosis. Methods Mol Biol. 1627, 27-42 (2017).
  14. Ruscitti, F., et al. Longitudinal assessment of bleomycin-induced lung fibrosis by micro-CT correlates with histological evaluation in mice. Multidiscip Respir Med. 12, 8(2017).
  15. Vande, V. G., et al. Longitudinal micro-CT provides biomarkers of lung disease that can be used to assess the effect of therapy in preclinical mouse models, and reveal compensatory changes in lung volume. Dis Model Mech. 9 (1), 91-98 (2016).
  16. Buccardi, M., et al. A fully automated microCT deep learning approach for precision preclinical investigation of lung fibrosis progression and response to therapy. Respir Res. 24 (1), 126(2023).
  17. Ferrini, E., et al. A new anesthesia protocol enabling longitudinal lungfunction measurements in neonatal rabbits by microCT. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 321 (6), L1206-L1214 (2021).
  18. Jensen, M., et al. 3D whole body preclinical microCT database of subcutaneous tumors in mice with annotations from 3 annotators. Sci Data. 11 (1), 1021(2024).
  19. Lai, R., et al. The longitudinal and regional analysis of bleomycininduced pulmonary fibrosis in mice by microcomputed tomography. Heliyon. 9 (5), e15681(2023).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Micro CT3D SlicerMasson s Trichrome

מאמרים קשורים