מאמר שיטה

טכניקת קשר חי כפול זעיר פולשנית למידול פציעות איסכמיה-רפרפוזיה בחולדות

789 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/68430

⸱

25 ביולי 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Shaanxi Key Laboratory of Chinese Medicine Fundamentals and New Drugs Research, School of Pharmacy, Shaanxi University of Chinese Medicine, 2People's Hospital of Ningxia Hui Autonomous Region, Ningxia Medical University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

כאן, אנו מציעים תוכנית לגרימת פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה של שריר הלב על ידי קשירת סליל קשר פעיל כפול ממוקד בעורק הכלילי הקדמי היורד השמאלי (LAD), שניתן לשחרר במבחנה לצורך רפרפוזיה לפי דרישה ללא כריתת בית חזה משנית והיא זעיר פולשנית.

תקציר

למודל פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה של שריר הלב (MI/RI) יש חשיבות רבה בחקר המנגנונים הפתופיזיולוגיים של אוטם שריר הלב והקלה על פיתוח תרופות רלוונטיות. עם זאת, בין שיטות הדוגמנות הנפוצות, לשיטת קשירת העורקים הכליליים המסורתית בסיוע צינור פוליאתילן יש חסרונות משמעותיים. זה דורש פתיחה מחדש של החזה כדי לשחרר את הקשירה, מה שלא רק גוזל זמן אלא גם גורם נזק משמעותי לחיות הניסוי ויכול בקלות להוביל למותם. מטרת מחקר זה היא להציג שיטה משופרת להכנת מודל. בשיטה זו, העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי (LAD) נקשר באמצעות סליל קשר חי כפול, וניתן לפתוח את הקשר החי במבחנה כדי להשיג רפרפוזיה, ובכך להימנע מהליך פולשני שני. שיטות הערכה כגון ניטור אלקטרוקרדיוגרמה (ECG), קביעת אקו לב במצב M (ME), אוונס בלו וצביעה של 2,3,5-טריפניט-טרזוליום כלוריד (EB-TTC) הראו כי שיטה זו יכולה לגרום ל-MI/RI יציב. ערכת מודל MI/RI משופרת זו מאופיינת בפשטות ובמהירות שלה, ושיעור ההצלחה של המידול משביע רצון ביותר. בסך הכל, הוא מציע הדרכה מעשית ובעלת ערך לחוקרים העוסקים בתחום מחקר MI/RI.

מבוא

על פי ארגון הבריאות העולמי, מחלת לב כלילית תופסת מקום משמעותי בנטל העולמי של מחלות לב וכלי דם, המאופיינות בשכיחות גבוהה, תמותה גבוהה ושיעור גבוה של סיבוכים. יתר על כן, המחלה מראה מגמה צעירה יותר ויותר. נתונים סטטיסטיים מכמה מדינות מפותחות מצביעים על כך ששכיחות מחלת לב כלילית בקבוצת הגיל 35 עד 40 עלתה בכ-15%-20% בעשור האחרון. שיטות Reperfusion כגון פקקת תרופות, טיפול התערבותי והשתלת מעקף עורקים כליליים בטוחות, יעילות ונמצאות בשימוש נרחב. עם זאת, השחזור הפתאומי של זרימת הדם מחמיר לעתים קרובות את הנזק המבני והתפקודי לשריר הלב האיסכמי, ומוביל למפל של תוצאות שליליות. אלה כוללים אפופטוזיס ונמק של קרדיומיוציטים, הפרעות קצב ותפקוד לקוי של הסיסטולי, שבסופו של דבר מגיעים לשיאם בפגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה של שריר הלב (MI/RI)1,2. השכיחות של פגיעה ב-MI/RI היא עד 25%-30%, והמנגנון שלה לא הובהר במלואו3. לכן, בחינת אסטרטגיות מניעה וטיפול יעילות הפכה לנושא מרכזי שיש להתמודד איתו בתחום הלב וכלי הדם.

למודלים של בעלי חיים יש חשיבות עליונה בחקר מחלות לב וכלי דם. הם משמשים ככלים חיוניים להבהרת המנגנונים הפתולוגיים של MI/RI ולפיתוחאסטרטגיות טיפוליות חדשות. האמינות והיציבות של מודל בעלי החיים של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה בשריר הלב משפיעים ישירות על התרגום והיישום המוצלח של אסטרטגיות טיפול בפרקטיקה הקלינית. העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי (LAD) הוא כלי דם נפוץ המושפע מאיסכמיה של שריר הלב5. מודל ה-MI/RI שנבנה על ידי קשירת ה-LAD דומה מאוד לפתוגנזה ולתהליך הפתולוגי של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה של שריר הלב האנושי6. בין מודלים אלה, שיטת קשירת העורקים הכליליים המסורתית בסיוע צינור פוליאתילן שימשה באופן נרחב במחקרים קודמים. ניתן לייחס את השימוש הנרחב בו ליתרונות כמו חלוקה אחידה של כוח הקשירה ומידת הגנה על אנדותל כלי הדם7. עם זאת, למרות יתרונותיו הרבים, הפרטים המבצעיים נותרו מוקד לוויכוח בקרב חוקרים רבים.

בשיטת קשירת העורקים הכליליים המסורתית בסיוע צינור פוליאתילן, יש לפתוח מחדש את החזה כדי לשחרר את הקשירה במהלך רפרפוזיה. נכון לעכשיו, ישנן שתי שיטות פעולה עיקריות: שיטת קשירת בית החזה הקלאסית ושיטת קשירה זעיר פולשנית שונה. שיטת קשירת בית החזה הקלאסית דורשת חתך בקנה מידה גדול של החזה כדי לחשוף את הלב במלואו לקשירה6. שיטת הקשירה הזעיר פולשנית המותאמת משתמשת במכשירים מיוחדים להשלמת הקשירה דרך חתך קטן יותר8. בשלב הרפרפוזיה, שיטת קשירת בית החזה הקלאסית דורשת פתיחה מחדש של בית החזה כדי לשחרר את הקשירה, מה שלא רק גוזל זמן אלא גם גורם לטראומה קשה לחיות הניסוי ועלול להוביל למותם. בנוסף, כריתת בית חזה חוזרת עלולה לעורר סיבוכים כגון זיהום, ולהפריע לדיוק של תוצאות הניסוי 7,9. יתר על כן, מכיוון שקשה להיות עקבי לחלוטין בדרגה של כל פעולת כריתת בית החזה, זה יגדיל את השונות של נתוני הניסוי. לגבי יישום שיטת הקשירה הזעיר פולשנית המותאמת, למרות החתך הקטן יותר, ההליך מציב אתגרים טכניים משמעותיים. הוא דורש מהנסיינים להיות בעלי מיומנות טכנית מתקדמת ביותר ולהסתמך על מכשירים מדויקים מתקדמים, כגון סטריאומיקרוסקופ. כאשר מנסים בחלל סגור ללא סיוע של מכשירים כאלה, קיים סיכון מוגבר לפגיעה לא מכוונת ברקמות הסובבות. זה, בתורו, יכול לערער את היציבות והאמינות של תוצאות הניסוי.

כתוצאה מכך, קיימת דרישה דחופה לגישת הכנה משופרת של מודל להתמודדות עם אתגרים אלה. מחקר זה מציג שיטה משופרת למידול MI/RI. השיטה כוללת שימוש בסליל קשר חי כפול כדי לקשור את ה-LAD ומאפשרת שחרור חוץ גופי של הקשר החי כדי להשיג רפרפוזיה, ובכך מייתר את הצורך בכריתת בית חזה שנייה. שיטה זו, המאופיינת בפשטות הפעולה שלה וקלות השליטה, יכולה לגרום באופן עקבי לפגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה בשריר הלב, ומציעה התייחסות והשראה חשובה לחוקרים בתחום MI/RI.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

פרוטוקול הניסוי נערך בהתאם להנחיות השימוש בחיות מעבדה והוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת שאאן-שי לרפואה סינית מסורתית (מספר רשומה: SUCML20240820006). כל נתוני המחקר בבעלי חיים תועדו בהתאם להנחיות ARRIVE (מחקר בבעלי חיים: דיווח בניסויים in vivo ). חולדות זכר Sprague Dawley (SD) במשקל 250 גרם ± 20 גרם ובגילאי 6-8 שבועות שימשו למחקר זה. הפרטים הנוגעים לבעלי החיים, הריאגנטים והציוד המשמשים מפורטים בטבלת החומרים.

1. הכנה טרום ניתוחית

  1. 1.1. בצע צום: הכניסו את החולדות לתקופת צום של 8 שעות עם גישה חופשית למים
  2. כיול ושקילה: מדוד במדויק את משקל הגוף באמצעות איזון אלקטרוני (דיוק של 0.1 גרם) לחישוב מינון ההרדמה.
  3. השראת הרדמה: מתן תמיסת אורטן 20% באמצעות הזרקה תוך צפקית במינון של 0.4 מ"ל לכל 100 גרם משקל גוף באמצעות מזרק סטרילי של 2.5 מ"ל; להזריק 1 ס"מ לרוחב לקו האמצע הגחוני.
  4. אישור הרדמה: מהדקים את הכפה האחורית בעזרת מלקחיים סטריליים; היעדר רפלקס נסיגת גפיים מאשר הרדמה עמוקה.

2. ניטור אלקטרוקרדיוגרמה (א.ק.ג) (איור 1, שלב 1)

  1. שיתוק החולדה במצב שכיבה: אבטח את פלג הגוף העליון והגפיים ב"תנוחת גפיים מורחבת" באמצעות סרט דבק רפואי על שולחן הניתוחים.
  2. חבר אלקטרודות: הכנס תת עורית מחטי אלקטרודה מעוקרות ברצף הבא: הגפה הקדמית הימנית (המחוברת לאלקטרודה הלבנה), הגפה האחורית הימנית (המחוברת לאלקטרודה השחורה) והגפה האחורית השמאלית (המחוברת לאלקטרודה האדומה). לאחר מכן, חבר את האלקטרודות הללו לצג א.ק.ג Lead II. ודא שנוצר קו בסיס יציב ושמתחמי QRS נראים בבירור על הצג.
    הערה: שמור על ניטור א.ק.ג רציף לאורך כל ההליך. הערכת עומק ההרדמה ומצב החולדה בזמן אמת באמצעות חריגות בצורת הגל.

3. אפילציה וחיטוי באתר הניתוח (איור 1, שלב 2)

  1. הסרת שיער מכנית: השתמש בקוצץ חשמלי כדי להסיר פרווה מהצוואר ובית החזה השמאלי (אורך שיורי ≤0.5 מ"מ).
    הערה: החזק את הלהב בזווית של 30 מעלות וזז נגד כיוון צמיחת השיער.
  2. אפילציה כימית: יש למרוח קרם אפילציה באופן שווה על עור חשוף למשך 2 דקות. יש להסיר היטב בעזרת מגרד סטרילי, ולאחר מכן שטיפה פועמת באמצעות מזרק של 2.5 מ"ל עם מי מלח של 37 מעלות צלזיוס. חזור על הפעולה 3 פעמים עד שלא יישארו שאריות.
  3. חיטוי מדורג: יש לחטא את העור שלוש פעמים במעגלים קונצנטריים (פנימי לחיצוני) עם תערובת אתנול-יודופור של 75% (1:1) באמצעות כדורי צמר גפן סטריליים.

4. הגדרת פרמטר מאוורר

  1. בדיקת ציוד לפני הניתוח: חבר את מעגל ההנשמה למתאם צינור קנה הנשימה בצורת Y.
  2. התאמת פרמטרים ( איור 1, שלב 3): הגדר פרמטרים ספציפיים למין: נפח גאות 3.0 מ"ל, קצב נשימה 80 נשימות לדקה ויחס שאיפה-נשיפה (I:E) 2:1.
  3. ודא את סבלנות המעגל: הפעל את המאוורר וטבל את קצה המעגל במי מלח. התבונן בהיווצרות בועות קצביות. אם נעדר, בדוק באופן שיטתי אם יש נזילות ופתור בעיות.

5. אינטובציה של קנה הנשימה

  1. מיקום חתך: עטוף את שדה הניתוח בבד סטרילי. הרם את עור הסחוס של תת בלוטת התריס בעזרת מלקחיים חדים ובצע חתך אורכי של 2.5 ס"מ לאורך קנה הנשימה בעזרת מספריים ישרים.
  2. דיסקציה שכבה אחר שכבה: מושכים את העור בעזרת מלקחיים סטריליים (יד שמאל) ומבצעים דיסקציה פרוגרסיבית שטחית עם מיקרומספריים (יד ימין).
    הערה: הגבל את השכבה הראשונה לאפידרמיס ודרמיס; הימנע מנזק לשכבת השרירים.
  3. חשיפה לקנה הנשימה (איור 1, שלב 4): השתמש במלקחיים המוסטטיים לדיסקציה קהה של שרירי הפלטיזמה והרצועה כדי לחשוף 4-5 סחוסים של קנה הנשימה. גייסו את קנה הנשימה בעזרת מלקחיים והניחו תחתיו צינור סיליקון לייצוב.
    הערה: ניתן לראות את עורק הצוואר ועצב הנרתיק משני צידי קנה הנשימה, לכן הימנע מפגיעה במבנים אלה במהלך הפעולה.
  4. אינטובציה של קנה הנשימה ( איור 1, שלב 5): צור חתך רוחבי בצורת Ω (בערך 1/3 היקף) בין טבעות הסחוס של קנה הנשימה השלישי והרביעי באמצעות מיקרומספריים. הכנס צינור אנדוטרכאלי סיליקון 14 גרם במהירות, תוך יישור סמן העומק עם קצה החתך.
    הערה: לאחר אינטובציה, סנכרן את תנועת בית החזה עם קצב מכונת ההנשמה. עקוב אחר לחץ דרכי הנשימה ותדירות הנשימה לאיתור חריגות. התאם את הגדרות מכונת ההנשמה או בדוק את סבלנות הצינור אם מתרחשות חריגות.

6. הכנת חתך בין-צלעי

  1. סמן את מקום החתך: השתמש בטוש כירורגי סטרילי כדי לתחום את גבול החזה השמאלי בחלל הבין-צלעי 3-4 (מזוהה על ידי מישוש נקודת הדחף האפיקלי המקסימלי). צייר קו אורך של 3.0 ס"מ.
  2. דיסקציה שכבה אחר שכבה: הרם את העור בעזרת מלקחיים סטריליים וחתך לאורך הקו המסומן באמצעות מספריים סטריליים. הכנס מלקחיים המוסטטיים תת עורית בזווית של 30 מעלות ובצע דיסקציה קהה במקביל לחלל הבין-צלעי כדי להפריד את שכבת השריר.
  3. חתך צלעות: חצה את הצלעות השלישית והרביעית ואת השרירים הבין-צלעיים באמצעות מספריים. הערה: אם מתרחש דימום בעורק הבין-צלעי, יש למרוח מיד צמר גפן סטרילי בלחץ יציב למשך 60 שניות כדי להשיג המוסטזיס10.

7. לוקליזציה וקשירה של העורק היורד הקדמי השמאלי (LAD)

  1. אשר את אתר הקשירה (איור 1, שלב 6): הרחיבו את החלל הבין-צלעי ל-4 ס"מ באמצעות מפסק עצם החזה כדי לחשוף את הלב. נתח בעדינות את קרום הלב (זהה את רקמת התימוס כמבנה הלבן מעל הלב). אתר את ה- LAD 2 מ"מ נחות מנקודת האמצע של ה- "V" שנוצר על ידי קונוס הריאות (בליטה חרוטית אפרכסת ימנית) ואפרכסת שמאלית (מבנה מסתמי משולש).
  2. כיול מחט (איור 1, שלב 7-1): מהדקים תפר פוליפרופילן 6-0 (עם מחט) באמצעות מיקרו-מלקחיים. היכנס לשריר הלב 1 מ"מ לרוחב צומת ה-LAD האמצעי הדיסטלי בזווית של 15 מעלות ביחס למשטח שריר הלב (עומק: 1 מ"מ; רוחב: 2 מ"מ), והתקדם מימין לשמאל.
  3. טכניקת החלקה כפולה (איור 1, שלב 7-1 - 7-5): לאחר שחוט הקשירה הועבר דרך שריר הלב, גלגלו קצה אחד של חוט הקשירה עם קצה המחט לסליל עם מלקחיים מיקרוסקופיים, והשחילו את הקצה השני לתוך הסליל ומשכו אותו בעדינות כדי להדק את הקיבוע. קשרו שוב את הקצה השני של חוט הקשירה על ידי חזרה על הפעולה לעיל ליצירת מבנה קשר כפול, וודאו ששני הקצוות של חוט הקשירה נשארים מקבילים זה לזה מחוץ לחלל בית החזה.
    הערה: במהלך תהליך ההידוק, נעשה שימוש במיקרו-פינצטה כדי להידוק בהדרגה בכוח עדין ואחיד, בעוד שנצפו שינויים בצבע שריר הלב כדי לקבוע את מידת האיסכמיה, כדי למנוע מאמץ יתר המוביל לקרע בכלי הדם או קשירה לא בטוחה. ההקמה המוצלחת של המודל אושרה על ידי התבוננות בחיוורון האיסכמי של הדופן הקדמית/האזור האפיקלי של החדר השמאלי והגבהה המתמשכת של מקטע ST ≥ 0.2 mV באלקטרוקרדיוגרמה, והטיימר האיסכמי של 30 דקות החל מיד לאחר אישור הקשירה המוצלחת.

8. שיקום לחץ שלילי תפר ובית החזה

  1. סגירת צלעות: הסר את מפסק החזה. סגור את השרירים הבין-צלעיים סביב צלעות 3-4 באמצעות תפר נספג 4-0 בתבנית נעילה רציפה (מרווחי תפרים של 2 מ"מ).
    הערה: הימנע ממגע בין תפר הקשירה לתפרי הסגירה כדי למנוע הפרעה לרפרפוזיה.
  2. סגירת שכבת השריר ופינוי אוויר: העריכו את שרירי החזה השטחיים והמינוריים עם תפר 4-0. לפני ההידוק הסופי, הכנס מזרק 2.5 מ"ל ללא מחט לחור התפר האחרון כדי לשאוב אוויר תוך חזה בזמן שעוזר מאבטח את התפר.
    הערה: עקוב אחר תנועת בית החזה לנשימה ספונטנית (כפי שמצוין על ידי קצב אסינכרוני ביחס למכונת ההנשמה).
  3. סגירת עור וחיטוי: לתפור את העור ברציפות עם תפר 4-0. יש לחטא שלוש פעמים בהתאם להנחיות פרוטוקול 3.3.

9. ניתוק מכונת ההנשמה

  1. הוצאת צינורות: משוך את הצינור האנדוטרכיאלי לאט תוך התבוננות בנשימה ספונטנית.
  2. סגירת קנה הנשימה והשרירים: טבעות סחוס קנה הנשימה תפר לאורך באמצעות תפר 4-0 כדי להבטיח אטימה אטומה. להעריך מחדש את שרירי הצוואר.
  3. סגירת עור וחיטוי (איור 1, שלב 8): סגרו את עור הצוואר עם תפר 4-0. חיטוי באמצעות ספוגיות סטריליות ספוגות אתנול ופובידון יוד. הסר את הווילונות והעביר את החולדה לכרית חימום של 38 מעלות צלזיוס לזלוף.
    הערה: אם הנשימה הספונטנית נכשלת, הכנס מחדש את הצינור האנדוטרכיאלי וחזור על שלבים 8.1-8.3 לפני שתנסה שוב להוציא צינור.

10. איסכמיה-רפרפוזיה

  1. שחרר את הקשירה (איור 1, שלב 9): לאחר 30 דקות של איסכמיה, שחרר את הקשר הראשון על ידי משיכה אופקית על חוט הקשירה בקצה אחד של מחט הרצועה, ואז שחרר את הקשר השני על ידי משיכת חוט הקשירה בקצה השני, ולאחר מכן משיכה אופקית מצד לצד כדי להבטיח שאין התנגדות המוכיחה שהקשר הכפול התיר בהצלחה.
    הערה: אם נדרשת צביעה כפולה של EB-TTC, לא ניתן לשלוף את קו הקשירה.
  2. אימות רפרפוזיה: אשר את רזולוציית מקטע ST באק"ג כעדות לרפרפוזיה מוצלחת12.

11. קביעת אקו לב במצב M (ME) 10

  1. הכנה לפני ההליך: שעתיים לאחר הרפרפוזיה, העריכו את עומק ההרדמה והוסיפו במידת הצורך. לשתק את החולדה בשכיבה ולמרוח 2 מ"מ של ג'ל אולטרסאונד 37 מעלות צלזיוס על אזור הפרקורדיאל.
  2. רכישת נתונים: הפעל את מערכת האולטרסאונד. בחר את הפרוטוקול המוגדר מראש, הגדר את בדיקת ה-MX250 ל-18 מגה-הרץ והקלט תמונות במצב M של תנועת החדר השמאלי. שמור תמונות בהתאם.
  3. ניתוח נתונים: חישוב מקטע פליטה של החדר השמאלי (LVEF), קיצור חלקי (LVFS), קוטר קצה סיסטולי (LVIDs), קוטר קצה דיאסטולי (LVIDd) ונפח שבץ (SV) באמצעות תוכנה משולבת מערכת.
    הערה: לכידת נתונים מ-≥3 מחזורי לב רצופים; דווח על ערכים ממוצעים לקפדנות סטטיסטית.

12. צביעת אוונס כחול ו-2,3,5-Triphenyte-trazoliumchloride (EB-TTC)

  1. אינטובציה מחדש: הסר ברצף תפרים מעור הצוואר, השרירים וקנה הנשימה. הכנס צינור אנדוטרכיאלי וחבר אותו למכונת ההנשמה כדי לשמור על הנשימה.
  2. כריתת בית החזה: הסר תפרים מעור החזה, השרירים והצלעות. השתמש במחזיר בית החזה כדי להרחיב את החלל הבין-צלעי ולחשוף את הלב במלואו.
  3. לשחרר את עורק ה-LAD: לחבר מחדש את עורק ה-LAD; לאשר קשירה מוצלחת על ידי התבוננות בחיוורון אפיקלי והגבהה מתמשכת של מקטע ST באק"ג.
  4. הזרקת EB: באמצעות מזרק אינסולין של 0.5 מ"ל, יש לשאוב 0.3 מ"ל של תמיסת 1.5% Evans Blue. לאחר מכן, נתח במהירות את קשת אבי העורקים, הכנס את מחט המזרק לתוך אבי העורקים ואבטח אותה בעזרת מהדק מיקרו-המוסטטי. לאחר מכן, הזריקו את תמיסת Evans Blue והתבוננו בלב לצביעה כחולה אחידה.
  5. כריתת הלב: לאחר 30 שניות לאחר ההזרקה, כרתו את הלב במספריים סטריליים. טבלו אותו מיד במי מלח ושטפו שוב ושוב כדי להסיר שאריות דם וכחול אוונס. הקפיאו את הלב בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס.
  6. חתך את הלב: לאחר 20 דקות של הקפאה, יש להוציא את הלב. בעזרת להב כירורגי, חותכים חמש פרוסות רוחביות בעובי 1 מ"מ בניצב לציר הארוך של הלב מהקודקוד לבסיס.
  7. מכתים עם TTC: הניחו לפרוסות להתייצב לטמפרטורת החדר. העבירו אותם לצינור צנטריפוגה ענבר בנפח 50 מ"ל המכיל תמיסת TTC של 1.5%. דגרו את הצינור בשייקר תרמוסטטי שחומם מראש ב-37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות בתנאים מוגנים מאור.
  8. רכישת תמונה וניתוח: לאחר הצביעה, יש לתקן את הפרוסות בפרפורמלדהיד למשך 12 שעות. צלם תמונות ברזולוציה גבוהה וכימת את אזור האוטם (IA), האזור בסיכון (AAR) ושטח החדר השמאלי הכולל (LV) באמצעות תוכנת Image J. חשב את יחס אוטם שריר הלב כ-IA/(AAR+IA) ואת יחס הסיכון לאיסכמיה כ-(AAR+IA)/LV, בהתאם למתודולוגיה שתוארה על ידי Cai et al12.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

א.ק.ג
האלקטרוקרדיוגרמה נרשמה לאורך כל התהליך מלפני קשירת לב החולדה ועד 120 דקות לאחר איסכמיה-רפרפוזיה. השינויים באלקטרוקרדיוגרמה מוצגים באיור 2A. במהלך איסכמיה, קטע ה-ST הראה גובה מקושת כלפי מעלה, וגל ה-T היה גבוה והגיע לשיא. לאחר רפרפוזיה, הגובה של מקטע ה-ST ירד בהדרגה לאחור.

לי
בעקבות פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה של שריר הלב, מתרחשת בדרך כלל הרחבת החדר השמאלי. בא...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

קשירת עורקים כליליים, שיטה קלאסית לביסוס מודל הפגיעה באיסכמיה של שריר הלב, היא בעלת משמעות רבה במחקר מחלות לבוכלי דם 12. מאז שנות השמונים, שיטת קשירת העורקים הכליליים בסיוע צינור פוליאתילן, שפותחה על ידי ימאמוטו ואחרים, אומצה באופן נרחב במעבדות מחקר מדעיות ברחבי העולם. שיטה זו מציעה מספר יתרונות, כולל כוח קשירה נשלט, פעולה ויזואלית וויסות מדויק של זמן איסכמיה. מאפיינים אלה סיפקו בסיס איתן לחקירות של המנגנונים הפתולוגיים של אוטם שריר הלב ואפשרו תוצאות מחקר משמעותיו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי תוכנית הכישרונות החדשניים למדע וטכנולוגיה של אוניברסיטת שאאנשי לרפואה סינית (מס' 2024-CXTD-03), המינהל המחוזי של שאאנשי לפרויקטים מחקריים ברפואה סינית מסורתית (מס. SZY-KJCYC-2025-JC-043), ותוכנית המחקר והפיתוח של המחלקה המחוזית למדע וטכנולוגיה של שאאנשי (מס' 2024CY-JJQ-36).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מזרק אינסולין 0.5 מ"ל וושי יושו ציוד רפואי ושות 'https://e.tb.cn/h.6NJ9o4dBdpXt4bT?tk=YobMVflhtgI משמש לספיגת EB והזרקה דרך קשת אבי העורקים 
2,3,5-triphenyte-trazoliumchlorideשנחאי Yuanye ביוטכנולוגיה ושות', בע"מS19026לכתמי לב 
2.5 מ"ל מזרק סטרילי חד פעמיRobust Ping An Medical Technology Co., Ltd.20231230משמש לשאיבת חומרי הרדמה והרדמה של חולדות על ידי הזרקה תוך-צפקית; משמש להוצאת אוויר מחלל בית החזה של חולדות במהלך ניתוחים בחזה סגור.
4% פרפורמלדהידגואנגג'ואו ויגס ביוטכנולוגיה ושות', בע"מSW002משמש לתיקון הלב לאחר צביעת תפר
4-0שאנדונג Haidike מוצרים רפואיים ושות 'בע"מלתפירת צלעות, שרירים ועור 
6-0 תפרג'יאנגסו Beiyueshen מכשור רפואי ושות', בע"מhttps://e.tb.cn/h.6NKQ9XNVD1J56np?tk=R8NKVfPJIUMלקשירת LAD 
מחט לדיקור סיני בייג'ינג לויה שנצ'ואן ציוד רפואי ושות'https://e.tb.cn/h.6NQZzrSfBLQ9OYZ?tk=yW5aVfPuXP3משמש לניקוב עור גפיים של חולדה ולחיבור קו האלקטרודות של אלקטרוקרדיוגרמה.
מסיר שיער לבעלי חייםJinyun קונספט חדש מוצרים ביתיים ושות 'https://e.tb.cn/h.6NJe67IEMgxPfUt?tk=9boIVflb6mm להסרת שיער 
קרם אפילציהגואנגג'ואו Miyanshe ניהול מותג ושות', בע"מhttps://3.cn/2fP-knZw להסרת שיער עמוק 
אתנולטיאנג'ין טיאנלי מגיב כימי ושות', בע"מhttps://e.tb.cn/h.6NnxsK8EAvBV1Zu?tk=ja1XVflVhfM לחיטוי 
אוונס כחולסיגמאE2129לצביעת לב 
מלקחיים המוסטטיים שנחאי עוזר מכשיר רפואי ושות 'https://e.tb.cn/h.6NQkHWD25dxnsv4?tk=xA1VVflTXjWמשמש לקיבוע מזרק האינסולין ולעצירת הדם של קשת אבי העורקים 
מספריים מיקרו רפואייםנאנג'ינג ג'י Xiaobao מסחר ושות'https://e.tb.cn/h.6NJu33PgNRJCO1L?tk=smZjVflr730משמש לחיתוך קנה הנשימה והצלעות 
פינצטה מיקרוסקופית רפואיתNanjing Ji Xiaobao Trading Co.https://e.tb.cn/h.6Nqn2dyJIUjUN6n?tk=MEMaVflGK0bעבור צביטה של תפר 6-0 לקשירת LAD
אזמל רפואישאנדונג בוריוידה מכשיר אנליטי ושות'.https://e.tb.cn/h.6NJyfb9CWH5Sj32?tk=HW0kVflEyOL לחיתוך הלב במהלך צביעת EB-TTC
מספריים רפואייםשאנדונג בוריוידה מכשיר אנליטי ושות'https://e.tb.cn/h.6NJCLzckQnXXEPe?tk=CtcTVflFJQw משמש לחיתוך עור ותפרים של חולדות.
בד כירורגי רפואיHenan Meideqi ציוד רפואי ושות'https://e.tb.cn/h.6NqItN9yA0xttr9?tk=cCCIVflzFjr משמש לספק אזור כירורגי סטרילי 
קלטת רפואיתZhejiang Aotai Medical Technology Co.https://e.tb.cn/h.6N93etxLPPlJ9ZQ?tk=DfblVflAo5dמשמש לתיקון חולדות 
פינצטה רפואיתג'יאנגסו וידאו-קון טכנולוגיה רפואית ושות'https://e.tb.cn/h.6NreHXQv2YTJkIl?tk=S1imVfO17QVמשמש כדי לשפוט את מידת ההרדמה בחולדות, להדק עור, צלעות ורקמות אחרות, ולקלף שרירים תת עוריים וקרום הלב.
חומר צימוד אולטראסוני רפואי צ'ינגדאו Hainuo הנדסה ביולוגית ושות', בע"מhttps://3.cn/2fPpwB-j משמש לשיפור היעילות של שידור קולי
תמיסת מלח רגילה שאנדונג צ'ידו פרמצבטיקה ושות', בע"מhttps://e.tb.cn/h.6NMCUFJIti2EsiU?tk=FXBBVfOV1iNמשמש לשטיפת שאריות קרם אפילציה 
אולטרסאונד דופלר צבעוני ניידVINNO טכנולוגיה ושות', בע"מוינו 6 משמש לקביעת אקו לב במצב M בחולדות 
פובידון יודשאנדונג אנג'י היי-טק חיטוי טכנולוגיה ושות', בע"מhttps://e.tb.cn/h.6NqAb4WsT3xjMb9?tk=mhFxVfO4G1Gלחיטוי 
צלחת כירורגית עכברוששאנדונג בוריוידה מכשיר אנליטי ושות'https://e.tb.cn/h.6NQyjjGNGInF3Eu?tk=qgQwVflHilH משמש לתיקון חולדות 
מקרר קירור Zhejiang Zhixing טכנולוגיה בטמפרטורה נמוכה במיוחד ושות 'DL-78להקפאת הלב 
צינורות סיליקה ג'לשאנדונג צ'נגוו סנו ציוד רפואי ושות 'https://e.tb.cn/h.6N9L82XWNGlgDDG?tk=pWzCVfOQIgNמשמש לתמיכה בקנה הנשימה 
מכונת נשימה מלאכותית של בעלי חיים קטניםAnhui Zhenghua ציוד ביולוגי ושות', בע"מDW-3000Hמשמש לסיוע לחולדות לנשום לאחר כריתת בית החזה 
צמר גפן סטרילי צ'ינגדאו Hainuo הנדסה ביולוגית ושות', בע"מhttps://e.tb.cn/h.6NJbKVmD0b7QhTf?tk=wMceVfOTrBX לטבילת אתנול וחיטוי יוד פובידון 
צמר גפן סטריליצ'ינגדאו Hainuo הנדסה ביולוגית ושות', בע"מhttps://e.tb.cn/h.6NMAQz1252EJHSM?tk=nyfLVfOUSBi משמש לניקוי שאריות הדם בחלל החזה 
שמיכת בידוד תרמיגואנגדונג ז'ונגקה מדעי החיים & טכנולוגיה ושותhttps://e.tb.cn/h.6N9OyBVWuSXTUDy?tk=d6OqVfOSTlIלבידוד גוף לאחר ניתוח בחולדות 
מפסק כריתת בית החזהגואנגדונג ז'ונגקה מדעי החיים & טכנולוגיה ושותhttps://e.tb.cn/h.6NQra4Z9UG8dnvo?tk=6eFUVfllCFWמשמש לחשיפת שדה הראייה הכירורגי
מוניטור אלקטרוקרדיוגרמה עופרת מסוג IIצ'נגדו Taimeng Technology Co., Ltd.BL-420Nלניטור אלקטרוקרדיוגרמה 
Urethaneשאנדונג Keyuan ביוכימיה ושות', בע"מU820333משמש בחולדות מורדמות 
מתנד טמפרטורה קבוע מיםשנחאי Boxun מכשיר ביולוגי רפואי ושות', בע"מSHZ-Bלצביעת לב 
' '

מקורות

  1. Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. Myocardial ischemia-reperfusion injury: a neglected therapeutic target. J Clin Invest. 123 (1), 92-100 (2013).
  2. Ibáñez, B., Heusch, G., Ovize, M., Van de Werf, F. Evolving therapies for myocardial ischemia/reperfusion injury. J Am Coll Cardiol. 65 (14), 1454-1471 (2015).
  3. Algoet, M., et al. Myocardial ischemia-reperfusion injury and the influence of inflammation. Trends Cardiovasc Med. 33 (6), 357-366 (2023).
  4. Rahman, A., et al. Large animal models of cardiac ischemia-reperfusion injury: Where are we now. Zool Res. 44 (3), 591-603 (2023).
  5. Luan, F., et al. Cardioprotective effect of cinnamaldehyde pretreatment on ischemia/ reperfusion injury via inhibiting NLRP3 inflammasome activation and gasdermin D mediated cardiomyocyte pyroptosis. Chem Biol Interact. 368, 110245(2022).
  6. Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery. J Vis Exp. (86), e51329(2014).
  7. Xu, Z., McElhanon, K. E., Beck, E. X., Weisleder, N. A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury. Methods Mol Biol. 1717, 145-153 (2018).
  8. Marek-Iannucci, S., Thomas, A., Gottlieb, R. A. Minimal invasive pericardial perfusion model in swine: A translational model for cardiac remodeling after ischemia/reperfusion injury. Front Physiol. 11, 346(2020).
  9. Xiong, Y., et al. Decreased MFN2 activates the cGAS-STING pathway in diabetic myocardial ischaemia-reperfusion by triggering the release of mitochondrial DNA. Cell Commun Signal. 21 (1), 192(2023).
  10. Peng, L., et al. Cardioprotective activity of ethyl acetate extract of Cinnamomi Ramulus against myocardial ischemia/reperfusion injury in rats via inhibiting NLRP3 inflammasome activation and pyroptosis. Phytomedicine. 93, 153798(2021).
  11. Xu, H., et al. Resveratrol pretreatment alleviates myocardial ischemia/reperfusion injury by inhibiting STIM1-mediated intracellular calcium accumulation. J Physiol Biochem. 75 (4), 607-618 (2019).
  12. Cai, W., et al. Alox15/15-HpETE aggravates myocardial ischemia-reperfusion injury by promoting cardiomyocyte ferroptosis. Circulation. 147 (19), 1444-1460 (2023).
  13. Zhao, G., et al. A novel anti-inflammatory strategy for myocardial ischemia-reperfusion in rats with cinnamamide derivative compound 7. Int Immunopharmacol. 136, 112370(2024).
  14. Chen, L. Q., Wang, W. S., Li, S. Q., Liu, J. H. Minocycline relieves myocardial ischemia-reperfusion injury in rats by inhibiting inflammation, oxidative stress and apoptosis. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 26 (8), 3001-3009 (2022).
  15. Liu, Z., et al. Shuangshen ningxin formula attenuates cardiac microvascular ischemia/reperfusion injury through improving mitochondrial function. J Ethnopharmacol. 323, 117690(2024).
  16. J'Undra, N., Pegues, M. M., et al. Disparities in 180-day infection rates following coronary artery bypass grafting and aortic valve replacement. J Thorac Cardiovasc Surg. S0022-5223 (25), 00017-00020 (2025).
  17. Peng, J. -F., et al. Targeted mitochondrial drugs for treatment of myocardial ischaemia-reperfusion injury. J Drug Target. 30 (8), 833-844 (2022).
  18. Sun, Q., et al. A minimally invasive approach to induce myocardial infarction in mice without thoracotomy. J Cell Mol Med. 22 (11), 5208-5219 (2018).
  19. Olatoye, O., Yasir, A. -O., Gregory, D. R. Initial experience of left atrial appendage ligation using penditure in a minimally invasive cardiac surgical approach. Innovations. 20 (1), 19-21 (2025).
  20. Wagenaar, A., Wiegerinck, R. F., Heijnen, V. V. T., Post, M. J. Percutaneous microembolization of the left coronary artery to model ischemic heart disease in rats. Lab Animal. 45 (1), 20-27 (2016).
  21. Kainuma, S., et al. Influence of coronary architecture on the variability in myocardial infarction induced by coronary ligation in rats. PLoS One. 2 (8), e0183323(2017).
  22. Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Hajjar, R. Abstract 130: The Diversity of Coronary Artery and Myocardial Infarction in Mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 37 (Suppl_1), A130(2021).
  23. Lysenko, A. V., Salagaev, G. I., Lednev, P. V., Belov, Y. V. The results of coronary artery bypass grafting by using of surgical microscope. Pirogov J Surg. 6, 5-10 (2019).
  24. Guo, Y., et al. Genetic background, gender, age, body temperature, and arterial blood pH have a major impact on myocardial infarct size in the mouse and need to be carefully measured and/or taken into account: results of a comprehensive analysis of determinants of infarct size in 1,074 mice. Basic Res Cardiol. 107 (5), 288(2012).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Evans Blue
הסרטון יגיע בקרוב

מאמרים קשורים