מחקר זה מתמקד באינדוקציה תת עורית in vivo של תאי סרטן המעי הגס הזוהרים במודל עכברי ובמדידת הזוהר שלאחר מכן באמצעות מערכת הדמיה. ההליך נועד לבסס מודל גידול הניתן לשחזור לניטור והערכה טיפולית בזמן אמת.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
הזרקה תת עורית של תאי סרטן המעי הגס האנושיים בעכברים עירומים אתימיים להערכת יעילות אנטי-גידולית
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
סרטן המעי הגס (CRC) הוא אחד הגורמים המובילים למקרי מוות הקשורים לסרטן ברחבי העולם, מה שמדגיש את הצורך הדחוף במודלים פרה-קליניים משופרים להערכת טיפולים פוטנציאליים. מודלים של בעלי חיים חיוניים להבהרת הביולוגיה של הגידול ולהערכת התערבויות טיפוליות חדשות. מודלים של עכברים מציעים יתרונות מרכזיים על פני מודלים קיימים, כולל מניפולציה גנטית, רבייה מהירה, עלות-תועלת וזמינות של זנים בעלי יכולת חיסונית וחסרי חיסון, המאפשרים מידול מדויק של סרטן אנושי.
פרוטוקול זה מתמקד באינדוקציה תת עורית של קו תאי סרטן המעי הגס HCT-116 במודל עכברי חסר חיסון, ואחריו הדמיה ביולומינסנציה לא פולשנית באמצעות מערכת IVIS וקליפר לניטור התקדמות הגידול וצמיחתו. שימוש בתאים זוהרים מספק גישה בזמן אמת וניתנת לכימות למעקב אחר התפתחות הגידול ותגובה להתערבויות טיפוליות, ומפחית את הצורך בפרוצדורות פולשניות. עוקבה של עכברים (n = 12) נדרשת להשתלת תאי גידול, ועוצמת הזוהר נמדדת כדי לבסס מודל סטנדרטי לבדיקות טיפוליות. נפח הגידול מחושב בדרך כלל באמצעות מדידות אורך ורוחב או רוחב בלבד.
המתודולוגיה הנוכחית מבטיחה הקמה עקבית של הגידול תוך מזעור השונות, ובסופו של דבר משפרת את האמינות של ההערכה הפרה-קלינית. ממצאי מחקר זה יתרמו לחידוד מודלים של גידולים לבדיקת תרופות ולשיפור פוטנציאל התרגום של מחקר פרה-קליני ביישומים קליניים. על ידי שימוש בטכניקות הדמיה מתקדמות ותכנון ניסיוני הניתן לשחזור, מחקר זה נועד לשפר את הדיוק והיעילות של הערכת תרופות in vivo לטיפול בסרטן המעי הגס.
מבוא
סרטן המעי הגס (CRC) הוא נטל בריאותי עולמי גדול, המדורג בין הגידולים הממאירים השכיחים והקטלניים ביותר1. פיתוח מודלים פרה-קליניים אמינים חיוני להערכת גישות טיפוליות חדשות, שכן בדיקות מבחנה מסורתיות אינן מצליחות ללכוד באופן מלא את המורכבות של צמיחת הגידול והתגובה לתרופות במערכת חיה. מודלים in vivo , במיוחד מודלים של עכברים, שימשו כדי לספק תובנות חשובות לגבי הביולוגיה של הגידול, מה שמאפשר לחוקרים להעריך את היעילות של טיפולים פוטנציאליים בסביבה מבוקרת.
השימוש בתאי CRC זוהרים במודלים של עכברים מייצג התקדמות משמעותית במחקר הפרה-קליני, המאפשר ניטור בזמן אמת ולא פולשני של התקדמות הגידול2. מחקר זה נועד לבסס פרוטוקול סטנדרטי להשראת גידול תת עורי והדמיית IVIS כדי לעקוב אחר צמיחת הגידול באופן דינמי. דגם הזרקה תת עורית נבחר בגלל הפשטות הטכנית שלו, יכולת השחזור וקלות ניטור הגידול האורכי. על ידי מינוף הדמיית ביולומינסנציה, חוקרים יכולים להשיג נתונים מדויקים וניתנים לכימות על התפתחות הגידול והתגובות הטיפוליות ללא צורך בהמתת חסד של בעלי חיים במספר נקודות זמן3.
מערכת ההדמיה IVIS היא כלי רב עוצמה להערכת עומס הגידול עם רגישות וסגוליות גבוהות, המשפרת את יכולת השחזור והדיוק של מחקרי in vivo . מחקר זה ישמש בסיס להערכות טיפוליות עתידיות, ויספק גישה סטנדרטית ויעילה לבדיקת תרופות פרה-קליניות לטיפול בסרטן המעי הגס. על ידי חידוד שיטות אינדוקציה של גידולים ויישום טכניקות הדמיה מתקדמות, מחקר זה תורם לגישור על הפער בין יישומים פרה-קליניים וקליניים באונקולוגיה4.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
בעלי החיים הוחזקו בתנאים ספציפיים ללא פתוגנים בהתאם להנחיות שנקבעו על ידי ועדת האתיקה של Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria (IMIB, Murcia) (מס' A13240502). הבדיקות נערכו מדי שבוע על ידי צוות מוסמך בהתאם ל-R.D. 1201/2005.
1. בעלי חיים
הערה: יש לרסן את כל בעלי החיים בצורה מאובטחת ובטוחה לפני ההזרקה. אם עובדים עם עכברים חסרי חיסון (כלומר, עכברים אתימיים עירומים כגון Crl: NU(NCr)-Foxn1nu), חיוני לשמור על סטריליות. המחקר הנוכחי השתמש ב-12 עכברים עירומים אתימיים, בני 5 שבועות (20-22 גרם לנקבות ו-22-26 גרם לזכרים) בתחילת הניסוי (50% זכרים). כל ההרדמות וההליכים הניסיוניים נערכו ב-Guía de Ética y Buena Práctica en Investigación של המרכז, באישור ועדת האתיקה המוסדית (פרוטוקול מס' A13240502) ובהתאם לחקיקה הספרדית (R.D. 1201/2005).
- לפני תחילת הבדיקה, אקלום את העכברים, בני 4 שבועות, למרכז בעלי החיים למשך כשבוע. לאחר מכן, בצע את ההליכים הבאים.
2. הכנת ציר D-לוציפרין
- הכן תמיסת עבודה של 15 מ"ג/מ"ל של מצע ביו-לומינסנט מלח אשלגן D-Luciferin במי מלח חוצץ פוספט (PBS) מחומם מראש בצינור חרוטי בתוך ארון בטיחות ביולוגית. הפוך את הצינור מספר פעמים כדי להומוגניזציה של התמיסה היטב.
- העבירו את התמיסה דרך מסנן מזרק של 0.2 מיקרומטר לעיקור.
- יש להציע את התמיסה המעוקרת במיקרו-צינורות אטומים של 1 מ"ל ולאחסן בטמפרטורה של -20 מעלות צלזיוס.
הערה: לוציפרין רגיש לאור.
3. הכנת מטריצה חוץ-תאית
- הפשירו הידרוג'ל מטריצה חוץ-תאית מסחרית נטולת פנול אדום (ECM) למשך הלילה על קרח בתוך מקרר בין 2 מעלות צלזיוס ל-8 מעלות צלזיוס5.
- ביום ההזרקה, שמור את ה-ECM על קרח, ובעזרת מיקרו-פיפטה P1000 מקוררת מראש, הוציא 200 מיקרוליטר של ECM לצינורות סטריליים.
הערה: מומלץ להשתמש במיקרו-צינורות רחבים. צמצם את שינויי הטמפרטורה והימנע ממחזורי הקפאה-הפשרה חוזרים ונשנים. - יש לקרר את המזרקים והמחטים על קרח לפני הכנת הזריקות כדי למנוע שינויי טמפרטורה פתאומיים של ה-ECM.
4. ניתוק תאים וספירה
- צלחת HCT-116 תאים ביולומינסנט (קו תאי ATCC CCL-247-LUC2) בצלוחיות T75 מספר ימים לפני השראת הגידול כדי להבטיח מספר תאים מספיק. שמור על תרבית תאים ב-37 מעלות צלזיוס, 5% CO2, והחלף מדיום במידת הצורך6.
- ביום הניסוי, שאפו את מדיום התרבות בזהירות כדי למנוע הפרעה לתאים דבקים.
- שטפו את התאים עם 8 מ"ל PBS סטרילי (שחומם מראש ב-30 מעלות צלזיוס באמבט מים) כדי להסיר שאריות סרום.
- יש להוסיף 2 מ"ל לכל בקבוק טריפסין-EDTA חם (0.05%) ולדגור בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 4-5 דקות. עקוב אחר ניתוק תאים תחת מיקרוסקופ הפוך. אם התאים נשארים מחוברים, הקש בעדינות על צד הבקבוק כדי לסייע בניתוק.
- לנטרל טריפסין על ידי הוספת 10 מ"ל של מצע גידול מלא המכיל סרום בקר עוברי (FBS).
- מעבירים תאים לצינור חרוטי של 15 מ"ל באמצעות פיפטה סרולוגית של 10 מ"ל. שוטפים צלוחיות עם 2 מ"ל נוספים של מדיום טרי כדי לאסוף את התאים שנותרו ולהוסיף את השטיפות לצינור של 15 מ"ל.
- צנטריפוגה את תרחיף התא בטמפרטורה של 200 × גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר. שאפו בזהירות את הסופרנטנט מבלי להפריע לכדור התא.
- השעו בעדינות את כדור התא ב-3 מ"ל של מדיום זריעה כדי להשיג תרחיף הומוגני.
- ספרו את התאים בתא נויבאואר או במונה תאים אוטומטי. קבע את כדאיות התא על ידי ערבוב של 10 מיקרוליטר של תרחיף התא עם 10 מיקרוליטר של טריפן כחול וספירת תאים ברי קיימא תחת מיקרוסקופ הפוך.
הערה: הכינו מספר מספיק של תאים למחקר: לפחות 3 × 106 תאים ברי קיימא לכל עכבר. - השעו מחדש את התאים ב-PBS סטרילי (מחומם מראש ב-30 מעלות צלזיוס באמבט מים) ושנה את ריכוז התאים ברי הקיימא לריכוז סופי של 2 ×-107 תאים/מ"ל עם PBS. הכן מכסות של 200 מיקרוליטר.
5. הגדר פריטי ציוד והרדמת בעלי חיים.
- הפעל את מערכת ההדמיה לפחות 4 שעות לפני ההדמיה.
הערה: עקוב אחר הוראות המערכת כדי לאפשר את שלב האתחול, כולל התאמת הגדרות לעוצמת האור וזמן החשיפה של המצלמה בהתאם ליחס האות לרעש. יש להגדיר הגדרה זו באופן ידני בהתבסס על תנאי הניסוי. - שקלו את בעלי החיים וחשבו את נפח ה-D-לוציפרין שיש לתת (200 מיקרוליטר של תמיסה של 15 מ"ג/מ"ל לכל 20 גרם של החיה).
- נקה וחטא את תאי ההדמיה והארון.
- זהה ורסן בבטחה כל עכבר להרדמה.
הערה: ללבוש שני זוגות כפפות כדי להגן על הידיים מפני דקירות מחט בשוגג במהלך ההזרקה התת עורית. - להרדים עכברים עם 2% איזופלורן בחמצן בזרימה של 1.8-2.0 ליטר לדקה. הפעל את משאבת היניקה במקביל למשאבת ההרדמה.
6. הכנת התאים להזרקה
- מערבבים 200 מיקרוליטר של 2 × 107 תאי CRC ביולומינסנטים/מ"ל עם 200 מיקרוליטר של ECM בקריוביאל בתוך ארון בטיחות ביולוגית. פיפטה בעדינות עם פיפטה P1000 כדי למנוע היווצרות בועות אוויר ודיסוציאציה.
- מעבירים את תערובת ה-400 מיקרוליטר למזרק של 1 מ"ל, מסירים בועות אוויר וממשיכים מיד להזרקה.
- פתח את מכסה המחט בבטחה, ותמיד שמור על סטריליות המחט.
הערה: מומלץ להשתמש במחטים בודדות לכל בעל חיים כדי למזער את הזיהום. מחט חדשה משמשת לכל עכבר כדי למנוע הדבקה בין עכברים. - חבר מחט של 25 גרם והתאם את תכולת המזרק ל-200 מיקרוליטר, והסר בועות אוויר.
הערה: הזרקות נעשות בדרך כלל עם 200 מיקרוליטר, מה שמוביל ל-2 ×-106 תאים בכל זריקה. - החלק את המחט בחזרה לתוך המכסה בצורה רופפת מבלי לטפל במכסה או במחט בזמן שהחיה מרוסנת.
7. אינדוקציה של גידול תת עורי
- הוציאו את העכבר מהתא לאחר ההרדמה והניחו את חוטמו של בעל החיים בשקע המספק את אותו חומר הרדמה.
הערה: במקרה שלנו, הזרבובית נעשתה באמצעות כפפה. - הניחו את החיה על צדה הימני על משטח ישר. בעזרת קצות האצבעות של היד הלא דומיננטית, צבטו בעדינות והרימו את עור החיה ברבע השמאלי התחתון.
- לפני ההזרקה, יש לשאוף תחילה כדי להבטיח את המיקום המתאים של המחט. הכנס את שיפוע המחט ביד הדומיננטית, שני שליש לתוך העור המורם, במקביל לגוף, היזהר מאוד לא לדקור אצבעות או לנקב דרך הכפפות הכפולות.
הערה: מיקום נכון אמור להניב לחץ שלילי וללא שאיפה ברכזת המחט. - הזרקו את תכולת המזרק (200 מיקרוליטר) לתוך העור המורם, ממש בין שתי האצבעות. החזק לזמן קצר לפני שתמשוך את המחט לאט. הסר את המחט לאחר ההזרקה התת עורית והשליך אותה בבטחה למיכל Sharps.
8. הזרקה תוך צפקית של D-לוציפרין
- לפני החזרת בעל החיים לתא ההרדמה, יש לתת D-לוציפרין תוך צפקי (IP) בריכוז של 150 מ"ג/ק"ג משקל גוף עם תמיסת מלאי של 15 מ"ג/מ"ל במזרק אינסולין 30 גרם (200 מיקרוליטר לכל 20 גרם של החיה).
הערה: הזרקה של עד 0.5 מ"ל נסבלת היטב. - ריסון ידני, שכיבה גבית (צד הבטן כלפי מעלה), כאשר קצה הגולגולת (הראש) של החיה מופנה כלפי מטה. אפשר לתוכן המעי לנוע כלפי מטה.
- תוך שמירה על צד המחט המשופע כלפי מעלה וזווית קלה ב-15-20°, דחף את המחט לתוך חלל הבטן כך שקצה המחט פשוט יחדור לדופן הבטן של רבע הבטן התחתון השמאלי של החיה.
- הזרקו לאט את ה-D-לוציפרין לחלל התוך צפק, הסירו את המחט והשליכו אותה בבטחה.
- הנח את העכבר בתא ההרדמה ואפשר לו להתייצב למשך כ-5 דקות. לאחר 15 דקות, המשך בהדמיה in vivo .
הערה: בנה עקומה קינטית D-luciferin עבור כל מודל בעל חיים חדש כדי לקבוע את זמן אות השיא. במקרה שלנו, פליטת האור הגיעה לשיא של כ-15 דקות בהדמיה in vivo .
9. ניתוח הדמיה in vivo
- הנח את החיה המורדמת לחלוטין בתא של מערכת ההדמיה, בצד ימין. ודא שהחיה מיושרת כהלכה עם המצלמה ומקור האור כדי ללכוד את אזור הגידול.
- פתח את התוכנה המקושרת. בחר את מצב ההדמיה החזותית או הצילומית כדי לאשר את מיקום החיה. שמור את הנתונים ושנה את שם התיקיה.
- בחר את מצב ההדמיה הביולוגית והגדר אותו לאוטומטי. צלם תמונות ביולומינסנציה ונטר את אור הגידול על מסך המחשב.
- לאחר השלמת ההדמיה, החזר את החיה לכלוב שלה וצפה בסיבוכים.
- בצע עיבוד לאחר מכן, קנה מידה תחילה את האור הביולוגי כך שכל גידולי העכברים יראו את אותו קנה מידה, בדרך כלל בין 1e6 ל-1e8.
- הגדר אזור עניין (ROI) סביב הגידול לניתוח והעתק אותו לניתוחים נוספים. מדוד את אור ההחזר על ההשקעה וייצא תוצאות אלה לניתוח נוסף. הדבק החזר ROI שנוצר והועתק בעבר באותו גודל עבור גידולים עוקבים.
- כבה את המערכת בהתאם להוראות היצרן ונקה את תא ההדמיה. כבה את משאבות העקירה וההרדמה, יחד עם זרימת החמצן.
10. מדידת נפח הגידול
- להרדים בעלי חיים עם איזופלורן למדידת גידולים. הניחו את החיה במצב יציב וכסו את ראשה. משתק במהירות את החיה.
- מדוד את אורך, רוחב ועומק הגידול באמצעות קליפר דיגיטלי מכויל.
הערה: בצע את המדידות במהירות, מכיוון שהחיה תתחיל להתעורר כדקה אחת לאחר הוצאתה מתא ההרדמה. - חזור על מדידות וחשב ממוצע.
- חשב את הנפח על פי הנוסחה לגידולים כדוריים או אליפטיים:
לגידולים כדוריים 7
(1)
לגידולים אליפסואידים 8
(2)
הערה: כדי למזער את הטיית המדידה, כל מדידות הגידול במחקר צריכות להתבצע על ידי אותו מפעיל. בנוסף, יש לציין כי ביום השראת הגידול, מדידה מדויקת היא לרוב מאתגרת מכיוון שמסת הגידול עדיין לא התמצקה במלואה.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
פרוטוקול זה מאפשר הכנסת תאים אנושיים למודל עכברי חסר חיסון, המאפשר צמיחה של תאים גידוליים אלה in vivo, שהיא תמיד רלוונטית יותר מבחינה פיזיולוגית מאשר במבחנה. חיוני להבטיח שתנאי הניסוי ניתנים לשחזור ככל האפשר, שהגידולים מכילים מספר דומה של תאים ברי קיימא, ושהם מושתלים במיקום דומה ונגיש באופן עקבי.
כדי לבדוק את הרגישות של קו התאים HCT-116 in vivo, הוזרקו 2 × 106 תאים תת עוריים לעכברים עירומים (n = 12). הפרוטוקול האופטימלי מא...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
הפרוטוקול לאינדוקציה תת עורית של תאי סרטן המעי הגס הזוהרים במודל עכבר עירום אתימי מציג גישה סטנדרטית וניתנת לשחזור להיווצרות גידול וניטור בזמן אמת. ראשית, חשוב לציין שמחקרים כאלה נערכים בדרך כלל במשך 28 ימים, כאשר מדידות הזוהר מבוצעות ביום השראת הגידול ולאחר מכן מדי שבוע. לעומת זאת, מדידות קליפר של נפח הגידול אינן מבוצעות ביום הראשון, מכיוון שהשעיית התאים עדיין לא עטופה; מדידות הגידול מתחילות מהשבוע הראשון ואילך ולאחר מכן נערכות מדי שבוע. צמיחת הגידול נוטרה באמצעות מדידות קליפר מיום ההזר...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים מצהירים כי לא ידוע על אינטרסים פיננסיים מתחרים או קשרים אישיים שיכולים להשפיע על העבודה המדווחת במחקר זה.
תודות
ACS ו-CNN שייכות ל"תוכנית הדוקטורט במדעי הבריאות, האוניברסיטה הקתולית של מורסיה (UCAM), Campus de los Jerónimos nº 135, Guadalupe 30107, Murcia, Spain" ומחזיקות במענקי דוקטורט מ-UCAM. המחברים אסירי תודה לפלטפורמות מתקן בעלי חיים ב-IMIB (Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria, Murcia), שם נערכה הבדיקה הפרה-קלינית.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| צינורות מיקרו אטומים בנפח 1 מ"ל | אפנדורף | 30125215 | אחסון D-לוסיפרין |
| צינור קוני בקוטר 15 מ"ל | פלקון, תרמופישר סיינטיפיק | 11507411 | חומר תרבית תאים |
| דולבקו המתקדם s Modified Eagle Medium (DMEM) | תרמו פישר סיינטיפיק | 1152046 | תגובת תרבית תאים |
| עכבר עירום אתימי | נהר צ'ארלס | Crl:NU(NCr)-Foxn1nu | עכבר עירום חסר מערכת חיסונית |
| תאי סרטן המעי הגס האנושי HCT116 ביולומינסנטיים | ATCC | CCL-247-LUC2 | HCT 116-Luc2 אידיאלי לביולומינסצנציה בתוך ה-vivo |
| ד-לוסיפרין פירס | תרמו פישר סיינטיפיק | 15215733 | למדידת ביולומינסצנציה |
| מטריצה חוץ-תאית (ECM) | קורנינג | 356231 | מטריצת Matrigel לפלישה לתאים |
| סרום בקר עוברי | תרמו פישר סיינטיפיק | 10500064 | תגובת תרבית תאים |
| קצות פיפט פילטר | פינטיפ, תרמו פישר סיינטיפיק | 94056710 | כדי למנוע היווצרות בועות אוויר |
| מזרק אינסולין 25 G 1 מ"ל | איברומד | JERINRAYS29 | להשתלת קו תאים HCT-116 |
| מזרק אינסולין 30 גרם 0.5 מ"ל | DH חומר רפואי | 9.41652E+15 | לצורך ניהול D-לוסיפרין |
| מערכת תמונות IVIS עם תוכנת Living Image | פרקין אלמר/רבוויטי | 128201 | סורק דימות ביולומינסצנציה ופלואורסצנציה |
| מחט סטריקן הפארין | VWR | 612-0153 10 | מתן D-לוסיפרין והשתלת HCT-116 |
| מלח זרחן (PBS) | VWR | 392-0042P | תמיסת תליית תאים לניתוק והשתלה של HCT-116 |
| טריפסין-אדטה | תרמו פישר סיינטיפיק | 11590626 | תגובת תרבית תאים |
| בקבוק T-75, טופל ב-TC | STARLAB | CC7682-41 | חומר תרבית תאים |
מקורות
- Brough, D., Amos, H., Turley, K., Murkin, J. Trends in subcutaneous tumour height and impact on measurement accuracy. Cancer Inform. 22, 11769351231165181(2023).
- Hossain, M. S., et al. Colorectal cancer: A review of carcinogenesis, global epidemiology, current challenges, risk factors, preventive and treatment strategies. Cancers. 14 (7), 1732(2022).
- Evans, J. P., et al. Development of an orthotopic syngeneic murine model of colorectal cancer for use in translational research. Lab Anim. 53 (6), 598-609 (2019).
- Song, W. -J., et al. Colorectal cancer mouse metastasis model combining bioluminescent and micro-computed tomography imaging for monitoring the effects of 5-fluorouracil treatment. Transl Cancer Res. 12 (10), 2572-2581 (2023).
- Francescone, R. A., Faibish 3rd, M., Shao, R. A. A Matrigel-based tube formation assay to assess the vasculogenic activity of tumor cells. J Vis Exp. (55), e3040(2011).
- Li, C., Lau, H. C. -H., Zhang, X., Yu, J. Mouse models for application in colorectal cancer: Understanding the pathogenesis and relevance to the human condition. Biomedicines. 10 (7), 1710(2022).
- Jensen, M. M., Jørgensen, J. T., Binderup, T., Kjær, A. Tumor volume in subcutaneous mouse xenografts measured by microCT is more accurate and reproducible than determined by 18F-FDG-microPET or external caliper. BMC Med Imaging. 8, 16(2008).
- Faustino-Rocha, A., et al. Estimation of rat mammary tumor volume using caliper and ultrasonography measurements. Lab Anim. 42 (6), 217-224 (2013).
- Jensen, M. M., Jørgensen, J. T., Binderup, T., Kjaer, A. Tumor volume in subcutaneous mouse xenografts measured by microCT is more accurate and reproducible than determined by 18F-FDG-microPET or external caliper. BMC Med Imaging. 8, 16(2008).
- Vedder, A. R., et al. Effects of Corynebacterium bovis on engraftment of patient-derived chronic-myelomonocytic leukemia cells in NSGS mice. Comp Med. 69 (4), 276-282 (2019).
- Evans, M. S., et al. A synthetic luciferin improves bioluminescence imaging in live mice. Nat Methods. 11 (4), 393-395 (2014).
- Jain, S. Kinetic model for designing a cancer therapy. Cancer Cell Int. 2 (1), 13(2002).
- Chiu, W. -C., Ou, D. -L., Tan, C. -T. Mouse models for immune checkpoint blockade therapeutic research in oral cancer. Int J Mol Sci. 23 (16), 9195(2022).
- Peyton, S. R., Platt, M. O., Cukierman, E. Challenges and opportunities in modeling the dynamic tumor matrisome. BME Front. 4, 0006(2023).
- Ravoori, M. K., et al. Magnetic resonance imaging and bioluminescence imaging for evaluating tumor burden in orthotopic colon cancer. Sci Rep. 9 (1), 6100(2019).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
