Method Article

שיטה למניעת שינה סלקטיבית ב-REM באמצעות 'סלקטיבי פליקינג לאף לשכחת REM' (SNiFFer)

DOI:

10.3791/69042

⸱

April 21st, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Humanics, University of Tsukuba, 2International Institute for Integrative Sleep Medicine, Tsukuba Institute for Advanced Research (TIAR), University of Tsukuba, 3Division of Neurophysiology, Department of Physiology and Cell biology, Kobe University School of Medicine, 4Institute of Systems and Information Engineering, University of Tsukuba, 5Institute of Medicine, University of Tsukuba

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מציגים פרוטוקול חדשני למניעת שינת תנועת עיניים מהירה (REM) סלקטיבית אצל מכרסמים.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שינה מסווגת באופן רחב לשלבים של תנועת עיניים מהירה (REM) ושלבים שאינם REM, ופותחו טכניקות שונות למניעת שינה כדי לחקור את תפקידן. שיטות מסורתיות — כמו גירוי מכני או הפלת החיה במהלך שנת REM — מובילות לעיתים קרובות להתרגלות מהירה ולהשפעות לחץ לא מכוונות, מה שמקשה על הפרשנות. כאן אנו מציגים שיטה חדשנית, עדינה ועדינה למניעת שינה REM אצל מכרסמים: SNiFFer. מכרסמים ידועים כרגישים מאוד לגירויים באף. בשיטה זו, מברשת צבע רכה מלטפת בעדינות את אף החיה במהלך שנת REM, ומפעילה באופן אמין עוררות. כדי ליישם טכניקה זו באופן סלקטיבי במהלך שנת REM, השתמשנו במערכת סיווג שלב שינה מבוססת בינה מלאכותית (EEG) בזמן אמת (EEG). ההתערבות הופעלה רק במהלך פרקי REM, וקבוצת ביקורת מחוברת ל-Ey נכללה, שקיבלה את אותו דפוס גירוי ללא קשר למצב השינה. בנוסף, יישמנו את SNiFFer בפרדיגמת Trace Fear Conditioning כדי לבדוק האם חוסר שינה ב-REM בתוך 6 שעות לאחר הלמידה מפריע לחיזוק הזיכרון. בהשוואה לביקורת עם יוק, בעלי חיים שטופלו ב-SNiFER הראו ירידה משמעותית בפרק ה-REM הכולל ובמשך פרק ה-REM, מה שמעיד על הספציפיות והיעילות של השיטה. לסיכום, טכניקת SNiFFer מציעה גישה מישושית סלקטיבית ומינימלית פולשנית למניעת שינה REM בעכברים. הוא מאפשר שליטה מדויקת בתנאי הניסוי ופותח אפשרויות חדשות לחקירת תפקיד שינת REM בזיכרון ובקוגניציה—עם טוויסט מדגדג.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תנועת עיניים מהירה (REM) בשינה ממלאת תפקיד מרכזי בתהליכים קוגניטיביים כמו חיזוק זיכרון 1,2. כדי לחקור את המשמעות התפקודית של שנת REM במוח, נעשה שימוש נפוץ במניעת שינה ב-REM כגישה ניסויית. כיום, ארבע שיטות עיקריות משמשות באופן נרחב לגרימת חוסר שינה REM אצל מכרסמים: שיטת דיסק מסתובב1, שיטת עציץ3, שיטת אייר-פאפ4, וטכניקות גירוי פיזי 5,6. בעוד ששיטות הדיסק המסתובב והעציץ יעילות מאוד בביטול שינת REM, הן לעיתים קרובות מוסיפות לחץ משמעותי לבעל החיים, כמו חשיפה למים או עייפותפיזית, מה שעלול לבלבל את הפרשנות של תוצאות התנהגותיות ופיזיולוגיות. באופן דומה, שיטות ה-air-puff והגירוי הפיזי הקונבנציונלי נוטות לספק גירויים רחבים ולא ספציפיים לגוף, מה שמוביל לשונות בעוצמת הגירוי ולבחירה מוגבלת בקבוצות ביקורת 4,8.

ערכנו השוואת ספרות מקיפה שהתפרסה על פני יותר משישה עשורים של מחקר על מניעת שינה ב-REM, המופיעה בקובץ המשלים 1 ובטבלה משלימה 1. שילבנו מחקרים היסטוריים, מכניים, נוירוכימיים, הורמונליים והתנהגותיים בסיסיים מקווי המחקר המרכזיים, כולל Jouvet, Rechtschaffen, Bergmann, Tufik, Andersen ו-Borbély. טבלה משלימה 1 מארגנת את המאמרים המרכזיים בסדר כרונולוגי. הוא עוקב אחר ההתפתחות המתודולוגית של טכניקות מניעת שינה ב-REM ומסכם את הממצאים הביולוגיים, הנוירוכימיים, ההורמונליים, החיסוניים, התרמורגולטוריים וההתנהגותיים המרכזיים שלהן. מכיוון שכתב היד הנוכחי בנוי כמאמר שיטות ולא כסקירה היסטורית מקיפה, הוא נוסף כמידע משלים.

כדי להתמודד עם מגבלות אלו, פיתחנו שיטה חדשנית המציעה סלקטיביות גבוהה למניעת שינת REM. טכניקה זו נועדה למנוע באופן סלקטיבי ממכרסמים את שינת REM בצורה מבוקרת במדויק. בגישה זו, אנו מגבילים את הגירוי לאף של בעל החיים—אחד האזורים הרגישים ביותר במכרסמים. בנוסף, אנו משתמשים במערכת סיווג שלב שינה בזמן אמת על ידי AI כדי לזהות ולקטוע פרקי שינה REM עם ספציפיות זמן10. מערכת הבינה המלאכותית הזו מתייחסת לאות ה-EEG בארבעת השניות האחרונות מערוץ יחיד ומעריכה את שלבי השינה הנוכחיים בעכבר. מבנה זה מאפשר גם יישום קבוצות ביקורת מחוברות, ומאפשר התערבות תואמת זמנית. למרות שהוא מסווג כטכניקת מניעת שינה מבוססת גירוי פיזי על ידי REM, הפרוטוקול שלנו שונה מהשיטות המסורתיות. ראשית, יישמנו ניתוח שלב שינה בזמן אמת באמצעות בינה מלאכותית להתערבות מדויקת ועקבית ספציפית ל-REM. שנית, הוא מגביל את אזור הגירוי רק לחלק העליון של האף, שהוא אחד האזורים הרגישים ביותר בעכברים6, מה שגורם לשונות מינימלית במשך ובעוצמת הגירוי. לבסוף, הקמנו קבוצת ביקורת מחוברת שקיבלה כמויות גירוי זהות לגורמים מבלבלים. פרוטוקול זה מציע שיטה לחקירת פונקציות ספציפיות לשנת REM.

כדי להעריך את התועלת של שיטה זו, יישמנו אותה כדי לחקור את תפקיד שנת REM באיחוד זיכרון פחד עקבי. מחקרים קודמים דיווחו כי חוסר שינת REM פוגע באיחוד זיכרון הפחד התלוי בהיפוקמפוס, כולל זיכרונות פחד מאוחרים11,12. עם זאת, קיימות ראיות סותרות לגבי השפעת חוסר שינה REM על תהליכי זיכרון המפעילים מעגלי מוח מבוזרים ומורכבים 5,13. קיבוע זיכרון פחד עקבי דורש קישור בין שוק רגליים (גירוי לא מותנה), רמז שמיעתי (גירוי מותנה), ומרווח הזריקה ביניהם — תהליך הידוע כמגייס אזורים מרובים במוח, כולל ההיפוקמפוס, הקורטקס הפרה-פרונטלי המדיאלי ואמיגדלה14. לכן, מנעו מעכברים שינת REM למשך 6 שעות מיד לאחר התניה של פחד זעיר15, חלון זמן הידוע כקריטי לחיזוק זיכרון16. באמצעות פרוטוקול זה, הערכנו את השפעת חוסר שינת REM על איחוד עקבות זיכרון התלויים בפעילות המתואמת של מערכות עצביות מבוזרות. מאמר זה מציג שיטה חדשנית המתארת פרוטוקול ניסויי מפורט הבודק את ההשפעות.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי ועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת צוקובה. עכברים זכרים ונקבות C57BL/6J (בגיל 11–13 שבועות, 20–35 גרם) שימשו במחקר זה. הרשימה המלאה של החומרים והכלים ששימשו במחקר זה מסופקת בטבלת החומרים.

1. השתלה כירורגית של אלקטרודות EEG17

  1. הרדמה והכנת החיה
    1. השרה הרדמה עם 4% איזופלוראן מעורבב עם אוויר תוך 3 דקות. הרדמה מספקת אושרה על ידי היעדר רפלקס גמילה מהפדלים וטונוס השרירים, יחד עם דפוסי נשימה יציבים.
    2. גלח את אזור הראש והצוואר מהעורף ועד לאזור שבין העיניים באמצעות מכונת גילוח חשמלית. כאשר עכבר מצביע על ערנות כמו תנועת שפם, השרו שוב הרדמה.
  2. קיבוע ראש וחשיפת גולגולת
    1. אבטח את החיה במסגרת סטריאוטקסית, תוך שמירה על יישור האף והגולגולת. מתקופה זו ועד לסיום כל ההליך הניתוחי, ההרדמה נשמרה באופן רציף באמצעות מערכת משאבת אידוי איזופלורן.
    2. מרחו משחה עינית על שתי העיניים כדי למנוע ייבוש בקרנית. הסר כל שיער שנותר עם קרם להסרת שיער.
    3. בצע חתך בקרקפת באמצע ומשך בעדינות את העור כדי לחשוף את הגולגולת מקו האוזן האחורי לקו העיניים הקדמי. הסר את רקמת הריר עם מטוש כותנה.
  3. זיהוי ויישור אתרים
    1. זיהוי ברגמה ולמדה; כוון את הזרוע הסטריאוטאקסית כך שהנקודות יהיו ישרות בתוך ±0.05 מ"מ. ודאו שהקואורדינטות הצדדיות ±3.0 מ"מ מברגמה גם הן ישרות (±0.05 מ"מ).
  4. קידוח ומיקום ברגים
    1. סמן את הקואורדינטות הבאות ביחס לברגמה. קדח ארבעה חורי פיילוט לפי הקואורדינטות האלה. קדמי–אחורי / מדיאלי–לטרלי: +1.5 מ"מ / ±1.5 מ"מ, –3.0 מ"מ / ±1.7 מ"מ.
    2. השתל הברגים של הקלטת EEG לכל חור ומאבטחים אותם עם דבק ג'ל מבוסס ציאנואקרילאט. חטפו וכסו את הגולגולת והחוטים החשופים בשכבה דקה של מלט דנטלי.
  5. טיפול לאחר הניתוח
    1. ניתן 0.5 מ"ל של תמיסת גלוקוז 5% ו-0.13 מ"ל איבופרופן (או משכך כאבים שווה ערך).
    2. החזירו את העכבר לכלוב הבית שלו, כלוב פלקסיגלס גלילי (21.9 ס"מ בקוטר, 31.6 ס"מ גובה) המונח בתוך תא מבודד (45.7 x 50.8 x 85.4 ס"מ). החדר נשמר בטמפרטורה של 23.5 ± 2.0 מעלות צלזיוס, לחות יחסית של 50.0% ± 10.0%, ומחזור אור/חושך של 12 שעות (שלב אור: 9:00 בבוקר עד 21:00).
    3. שים את החיה בכלוב התאוששות מחומם. חכה מול הכלוב עד שעכבר יתעורר. לאחר הניתוח, בעלי החיים נשמרו בדיור אישי ולא הוחזרו למגורים קבוצתיים לאורך כל תקופת הניסוי.

2. טיפול והרגלה

  1. לוח זמנים לניסויים
    1. התחל טיפול בשלב הקל 24–48 שעות לאחר הניתוח. המשך במשך ארבעה ימים רצופים.
  2. הליך ניתוחי
    1. ביום הראשון, שים עכבר ל-2 דקות ל-2x. הנח את העכבר על כף היד הפתוחה של הניסוי עם אצבעות מושטות וכף היד פונה כלפי מעלה. מקם את כף היד מעט גבוה יותר מהאמה, שכן עכברים נוטים לטפס באופן טבעי למשטחים מוגבהים. אפשר לעכבר לנוע בחופשיות ללא מגבלות; אם העכבר מנסה לטפס על האמה, החזירו אותה בעדינות לכף היד על ידי אחיזה עדינה בבסיס הזנב. כל מרווח הוא יותר מ-20 דקות. יש לבצע זאת בשלב האור.
      הערה: אם עכבר קופץ מהיד או נושך אותה, השתמש בבד או בנייר טישו כדי לכסות את היד רק ביום הראשון. בגדים ניתנים לשימוש חוזר ויש לנקות אותם כל שבועיים.
    2. ביום 2–4, שים עכבר ל-2 דקות ל-3x. כל מרווח והתקופה שנערכה הם זהים ליום הראשון. הערכו התרגלות התנהגותית: עכברים שאינם רגילים בדרך כלל מנסים לברוח בקפיצה או נשיכה חזקה, בעוד שעכברים רגילים חוקרים את כף היד באופן פעיל עם ניסיונות בריחה מינימליים וכמעט ללא נשיכות כוחיות.
    3. בסוף סשן הטיפול הסופי, חבר את העכבר לכבל ההקלטה EEG.
      הערה: כאשר חומר המצע מופרז כדי להפריע לאף העכבר, יש להסיר חלק מהם ידנית ולהסיר אותם במהלך הטיפול או בזמן החיבור.

3. הקלטת EEG בסיסית

  1. תתחילי מהימים החמישי והשישי לאחר הניתוח. לרשום EEG רציף מ-11:00 עד 17:00 בכל יום. אם חומר המצע חוסם את הגישה לאף של העכבר, הסר בהדרגה את המצע העודף כדי להבטיח גישה נקייה לאף ולהפחית הפרעה לבעל החיים להמשך הטיפול.

4. התניה של פחד 18,19

  1. התחילו ביום השביעי (או השמיני) לאחר הניתוח בין 10:00 ל-11:00. כהכנה, רססו 70% אתנול לתא המיזוג (30 x 25 x 24 ס"מ), הכולל קירות אקריליים שקופים ורצפת רשת מפלדת אל-חלד (מוטות בקוטר 2.0 מ"מ המרוחקים זה מזה 6.0 מ"מ).
  2. פרוטוקול אימון (סה"כ 1,100 שניות)
    1. יש חמישה רמזים שמיעתיים (20 שניות עולה, 5–20 קילוהרץ ב-1.25 הרץ, משך 0.8 שניות) ב-180 שניות, 400 שניות, 620 שניות, 840 שניות ו-1060 שניות. זוג כל צליל עם שוק רגל (1.0 mA, 2 שניות) המסופק ב-218 שניות, 438 שניות, 658 שניות, 878 שניות ו-1098 שניות.

5. חוסר שינה ב-REM

  1. קבוצת מניעת שינה REM (קבוצת RSD)
    1. מיד לאחר תרגיל הפחד (ZT2-ZT8), יש לעקוב אחרי EEG בזמן אמת על ידי הפעלת מערכת סיווג שלב השינה מבוססת בינה מלאכותית לאפשר זיהוי בזמן אמת של שינת REM. בעת זיהוי שנת REM, דגדגו בעדינות את האף של בעל החיים עם מברשת צבע רכה עד שהוא מתעורר מחדש, עם השהיה ממוצעת מהתחלת הגירוי לעוררות של 0.89 ± 0.063 שניות (ממוצע ± SEM).
    2. במהלך הניסוי, עוררות הוגדרה כתגובה התנהגותית לגירוי המישושי, ובמיוחד תנועת השפם לאחר גירוי. רשמו את חותמת הזמן של כל דגדוג לניתוח מאוחר יותר.
      הערה: תנועת הדגדוג בוצעה ללא דפוס כיווני קבוע (למשל, קדימה ואחורה, כלפי מעלה או מעגלי), תוך שמירה על גירוי מגע קל עקבי המוגבל לחלק העליון של האף. אם האף חסום, גירוי ישיר לכיוון אזור הוויבריסל (שפם), שלרוב נחשף. אם העכבר פונה הרחק מהמכחול, סובב את הכלוב לפי הצורך כדי להבטיח גישה חופשית לאזור האף. כאשר משתמשים בכלוב עם גג פתוח, ניתן גם להפעיל גירוי מלמעלה כדי להבטיח גישה עקבית לאף או לוויבריס.
  2. קבוצת הבקרה עם ה-Yoked (קבוצת Yoked)
    1. זווג כל עכבר מחובר למקביל חסר REM. מרחו דגדוג באף לעכבר המחובר בסינכרון עם פרקי ה-REM של בן זוגו, בהתאם להתחלה ולמשך הזמן. כל עכבר משתמש באותו מברשת ייעודית לאורך כל ניסוי חוסר השינה של REM. אחרי כל שימוש, רסס את המברשת במים חלשים ומוחקים עם טישו. יש לאפשר לפחות מרווח של 24 שעות בין השימושים כדי לוודא שהמברשת הנקייה יבשה לחלוטין.

6. בדיקות שחזור זיכרון

  1. מבחן שחזור הקשר (בדיקה א')
    1. תתחיל מ-24 שעות (±3 שעות) אחרי חוסר שינה. החזירו את העכבר לתא המרכך המקורי (עם ריח של 70% אתנול). תעד התנהגות הקפאה למשך 5 דקות.
  2. מבחן שחזור עם קול (ניסוי B)
    1. ערכו את המפגש 3 שעות לאחר מבחן א'.
    2. הכנת הקשר: רסס מים בהקשר B (פריזמה משולשת (30 ס"מ גובה) המורכבת משלושה קירות עם אורכי צדדים של 31 ס"מ, 24 ס"מ ו-24 ס"מ. שניים מהקירות מכוסים בנייר לבן, והקיר השלישי עשוי אקריליק שקוף שדרכו נראה מלבן כחול ברקע. למבנה רצפה מפלסטיק ותקרה אקרילית שקופה.
    3. הקליטה של התנהגות הקפאה למשך 6 דקות. תן אות שמיעתי אחד של 180 שניות, זהה לאימון ב-180 שניות.

7. ניתוח נתונים

  1. ניקוד שלב שינה (איור 1C-G)17
    1. לכל ערות/NREM/REM, יש לחשב את הכמות הכוללת, מספר הפרקים, משך הממוצע של הפרק, ומספר המעבר בשינה בהתבסס על נתוני מומחים אנושיים. הקריטריונים של כל שלב הם עוקבים.
      התעוררות: תדר נמוך בתדר גבוה (β/γ)
      NREM: משרעת גבוהה, תדר נמוך (δ)
      REM: בעל עוצמה נמוכה, דומיננטי תטא
  2. איכות מחסור (איור 1B)
    1. הערך את שלב השינה שבו כל גירוי דגדוג מיושם על ידי השוואת חותמת הזמן שלו עם נתוני EEG שסומנו על ידי מומחה אנושי.
  3. התנהגות הקפאה (איור 1H,J-K)
    1. השתמש ב-FreezeFrame4 (אקטימטריקס) כדי לכמת חוסר תנועה (למעט נשימה) במהלך בדיקות התניה וזיכרון פחד.
      1. הפעל את תוכנת FreezeFrame 4 ובחר במצב Recorder . מתפריט הקבצים (הפינה השמאלית העליונה), ציין את תיקיית היעד לשמירת קבצי ההקלטה. בארבעת שדות הקלט הלבנים בלוח השמאלי, הזן מזהים ייחודיים המתאימים לכל עכבר, כדי להבטיח יישור עם ארבעת חלונות התצוגה בצד ימין של המסך.
      2. לחצו על לוח הפרוטוקול בתחתית הממשק והגדירו את פרמטרי ההקלטה, כולל משך ההקלטה הכולל ותזמון רמזים שמיעתיים וזעזועי רגליים בהתאם לעיצוב הניסוי.
      3. לחץ על Reference במרכז המסך כדי לקבל את תמונת הרקע. הכניס את העכבר לתא המרפא, ואז לחץ על Start כדי להתחיל להקליט.
  4. ניתוח מדד אפליה (איור 1L)
    1. חשב מדד הבחנה לפי הנוסחה הבאה:
      קיפאון ב-5 דקות ממוצע במבחן א' - קיפאון בממוצע של 3 דקות הראשונות במבחן ב')/מקסימום הקפאה בממוצע של 5 דקות במבחן א', קיפאון בממוצע של 3 הדקות הראשונות במבחן ב'.
  5. ניתוח מדד ריאקטיביות הלם (איור 1I)
    1. השתמש בעקבות יד כדי למדוד את התנועה הדו-ממדית של בעלי חיים 2 לפני ואחרי נקודת התחלת הלם במפגש התכנות פחד. חשב את מדד תגובתיות ההלם באמצעות הנוסחה הבאה:
      תנועה בזמן הלם - תנועה מקדימה / תנועה במהלך הלם + קדם-זעזוע תנועה

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

השתלה כירורגית של אלקטרודות EEG
העכברים צריכים להיות מורדמים לחלוטין במהלך הניתוח. אם הם מראים סימני כישלון בהרדמה, כמו מאבק, יש להוציא אותם מהפרוטוקול. באופן דומה, אם הדימום נמשך יותר מ-10 שניות, הוא עלול לגרום לנזק חמור למוח העכבר, ומומלץ להסיר אותו מהניסויים. לאחר הניתוח, רוב העכברים בדרך כלל מתעוררים תוך שעה. תנועות ההליכה והעיניים שלהם אמורות לחזור לנורמליות, בדומה למצבים שלפני הניתוח.

טיפול והרגל
אם עכבר מראה סימני...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה מאפשר מניעת שינת REM סלקטיבית בעכברים עם עכברים עם שליטה מחוברת. בניגוד לשיטות מסורתיות כמו עציץ פרחים וטכניקות דיסק מסתובב, מערכת זו מאפשרת יישום של קבוצות ביקורת תואמות במדויק, שבהן בעלי החיים מקבלים גירוי זהה באותו זמן צירקדי. יתרה מזאת, גישה זו מפחיתה שונות במיקום הגירוי, מגבלה נפוצה בשיטות טיפול עדין מסורתיות ונשיפת אוויר. כתוצאה מכך, טכניקה זו עשויה לאפשר בידוד מדויק יותר של תפקוד שנת REM.

שלב קריטי בפרוטוקול זה הוא הגירוי המדויק והעדין של הא...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים מתחרים.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מודים לי. נקאטה על סיווג שלב השינה. אנו מודים לכל חברי IIIS. עבודה זו נתמכת על ידי מענקים של AMED JP21zf0127005, JP21KM0908001, JP23wm0525003, החברה היפנית לקידום המדע (JSPS) (26H02428, 24H00894, 23H02784, 22H00469, 16H06280 ל-M.S., 23K19393 ו-24K18212 ל-I.K., 25KJ0664 ל-C.K., 24H00893 ל-T.N.), וקרן המדע טאקדה.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
5% גלוקוזאוצוקבה35061410
ראש 6 פיניםהירוזה172-0989
דבקקונישי16351
מכונת הרדמהשינאנו סייסאקושוSN-487-0T
דיור קרימפהירוזה688-9095
שקע קרימפהירוזה688-8982
Freezeflame4מד אסוסיאטסRRID:SCR_014429גרסה 4.104
פריזמת GraphPadGraphPadRRID:SCR_002798גרסה 10.5.0
איבופרופןתעשיית הכימיה של טוקיוI0415
איזופלוראןויאטריס901036504
Loctite454הנקלUFI:  MAK2-7WRP-G202-F235
עכבר (C57BL/6J)מעבדת ג'קסוןRRID: IMSR_JAX:00066411.0 - 13.0 שבועות במפגש תרגיל פחד
מברשת צבענמוראטייסיידו4943668000448SDflat מס' 8, אורך קצה: 8.2 מ"מ; רוחב: 18.8 מ"מ
נוזל פרוביניסשופו21400BZZ00451000250 מ"ל
אבקת פרוביניסשופו21400BZZ00451000250 גרם
SleepSignRecorderקיסיי קומטקRRID:SCR_018200גרסה 1.2.10
בורג נירוסטהימזאקילא זמיןφ 1.0 & 2.0
כלי סטריאוטקס סטנדרטייםALA Scientific68038
שמן חמניותסיגמא-אלדריץ'S5007-250ML
פטרולטום לבןטאיו פארמהK09-TS

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Karni, A., Tanne, D., Rubenstein, B. S., Askenasy, J. J. M., Sagi, D. Dependence on REM Sleep of Overnight Improvement of a Perceptual Skill. Science. 265, 679-682 (1994).
  2. Stickgold, R., James, L., Hobson, J. A. Visual discrimination learning requires sleep after training. Nat Neurosci. 3, 1237-1238 (2000).
  3. Hong Wang, J., van den Buuse, M., Wen Tian, S., Ye Ma, Y. Effect of paradoxical sleep deprivation and stress on passive avoidance behavior. Physiol Behav. 79, 591-596 (2003).
  4. Gross, B. A., et al. Stress-free automatic sleep deprivation using air puffs. J Neurosci Methods. 251, 83-91 (2015).
  5. Kumar, T., Jha, S. K. Sleep Deprivation Impairs Consolidation of Cued Fear Memory in Rats. PLoS One. 7, e47042(2012).
  6. Hagewoud, R., et al. A Time for Learning and a Time for Sleep: The Effect of Sleep Deprivation on Contextual Fear Conditioning at Different Times of the Day. Sleep. 33, 1315-1322 (2010).
  7. Esumi, L. A., Palma, B. D., Gomes, V. L., Tufik, S., Hipólide, D. C. Inflammatory markers are associated with inhibitory avoidance memory deficit induced by sleep deprivation in rats. Behav Brain Res. 221, 7-12 (2011).
  8. Zager, A., Andersen, M. L., Ruiz, F. S., Antunes, I. B., Tufik, S. Effects of acute and chronic sleep loss on immune modulation of rats. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 293, R504-R509 (2007).
  9. Woolsey, T. A., Van der Loos, H. The structural organization of layer IV in the somatosensory region (S I) of mouse cerebral cortex: The description of a cortical field composed of discrete cytoarchitectonic units. Brain Res. 17, 205-242 (1970).
  10. Koyanagi, I., et al. Fully automatic REM sleep stage-specific intervention systems using single EEG in mice. Neurosci Res. 186, 51-58 (2023).
  11. Ishikawa, H., Yamada, K., Pavlides, C., Ichitani, Y. Sleep deprivation impairs spontaneous object-place but not novel-object recognition in rats. Neurosci Lett. 580, 114-118 (2014).
  12. Graves, L. A., Heller, E. A., Pack, A. I., Abel, T. Sleep Deprivation Selectively Impairs Memory Consolidation for Contextual Fear Conditioning. Learn Mem. 10, 168-176 (2003).
  13. Graves, L. A., Heller, E. A., Pack, A. I., Abel, T. Sleep Deprivation Selectively Impairs Memory Consolidation for Contextual Fear Conditioning. Learn Mem. 10, 168-176 (2003).
  14. Guimarais, M., Gregório, A., Cruz, A., Guyon, N., Moita, M. M. Time Determines the Neural Circuit Underlying Associative Fear Learning. Front. Behav Neurosci. 5, 89(2011).
  15. Srinivasan, S., et al. Transient reactivation of small ensembles of adult-born neurons during REM sleep supports memory consolidation in mice. Nat Commun. 16, 7210(2025).
  16. Kumar, D., et al. Sparse Activity of Hippocampal Adult-Born Neurons during REM Sleep Is Necessary for Memory Consolidation. Neuron. 107, 552-565.e10 (2020).
  17. Oishi, Y., et al. Polygraphic Recording Procedure for Measuring Sleep in Mice. J Vis Exp. (107), e53678(2016).
  18. Bouton, M. E., Bolles, R. C. Conditioned fear assessed by freezing and by the suppression of three different baselines. Anim Learn Behav. 8, 429-434 (1980).
  19. LeDoux, J. E. Emotional memory systems in the brain. Behav Brain Res. 58, 69-79 (1993).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

REM Sleep DeprivationSelective REM DeprivationSNiFFer MethodRodent SleepSleep Stage ClassificationEEG MonitoringYoked ControlTrace Fear ConditioningMemory ConsolidationTactile Stimulation

Related Articles