הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הקמת מודל חזירים לחקר שימור והשתלה דינמית של השתלת עיניים שלמה

619 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69179

⸱

25 בנובמבר 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Engineering in Medicine and Surgery, Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, 2Shriners Children's Boston, 3Plastic Surgery Research Laboratory, Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, 4Department of Plastic, Reconstructive and Aesthetic Surgery, Hospices Civils de Lyon, 5Department of Plastic, Reconstructive and Aesthetic Surgery, CHU de Rennes, University of Rennes, 6Faculty of Medicine and Health Sciences, University of Antwerp, 7Bioengineering Research Group, Cardiff Metropolitan University, 8Collaboration for the Advancement of Sustainable Medical Innovation, University College London, 9Division of Plastic Surgery Research, Vascularized Composite Allotransplantation Program Development, Cedars-Sinai Hospital

במאמר זה

סיכום

מתואר מודל מפורט וניתן לשחזור של השתלת עיניים שלמה בחזירים (WET), מהרכישה הכירורגית ועד התחלת פרפוזיה במכונה, המאפשר חקר שימור דינמי של WET בהשתלה.

תקציר

השתלת העין השלמה הראשונה (WET) האנושית הציתה תקווה חדשה למטופלים שאיבדו ראייה עקב פציעה עינית חמורה, אך אתגרים משמעותיים עדיין צריכים להתמודד איתם לפני ששיקום הראייה באמצעות WET יהיה אפשרי. מבין אלה, אחד האתגרים הקריטיים ביותר הוא שימור אקס ויבו. גלגל העין, ובמיוחד מרכיביו העצביים כמו הרשתית ועצב הראייה, עובר התדרדרות מהירה ובלתי הפיכה תוך דקות אלא אם כן מובטחת שימור נכון. אחסון קר סטטי (SCS) נשאר התקן הזהב באלוטרנסטרנסלנטציה של כלי דם מרוכב (VCA), אך אינו מתאים לשימור WET ex vivo בשל חוסר יכולתו לדכא או לתמוך במטבוליזם מספיק, מה שמוביל לאובדן חיוניות ותפקוד השתל. פרפוזיה מכונה תת-נורתרמית (SNMP) הפכה לחלופה מבטיחה ל-SCS, ומציעה פוטנציאל לא רק לשמר שתלים אלא גם לשיקום שלהם. הקבוצה שלנו תרגמה בהצלחה את SNMP מהשתלות איברים מוצקים למספר מודלים של VCA, והדגימה את היתכנותה ויתרונותיה. כאן אנו מדווחים על יישום SNMP לשימור WET בחזירים, תוך פירוט המודל האנטומי ופרוטוקול השימור. גישה זו מהווה צעד משמעותי קדימה באופטימיזציה של טכניקות שימור והשתלת WET.

מבוא

אלוטרנסנסנטלים מורכבים וסקולריים (VCAs) מהווים התקדמות משמעותית בניתוח שחזורי, ומציעים תוצאות אסתטיות ותפקודיות חסרות תקדים למטופלים עם נגעים מורכבים 1,2. עם זאת, אובדן ראייה הקשור לגלגל העין נותר מקור מרכזי לפגיעה בפנים. השתלת העין השלמה הראשונה (WET) לאחרונה הציתה תקווה חדשה למטופלים 3,4. למרות שהראייה לא הוחזרה, הדמיה פונקציונלית הראתה הפעלה קורטיקלית בתגובה לגירוי אור, ואלקטרורטינוגרפיה (ERG) הראתה תגובה קהה אך מוכרת של קולטני האור5. למרות הישגים טכניים יוצאי דופן, אתגרים משמעותיים עדיין יש להתמודד איתם כדי להפוך את WET הפונקציונלי למציאות קלינית. גלגל העין רגיש מאוד לאיסכמיה, והרשתית ועצב הראייה סובלים מהתדרדרות בלתי הפיכה תוך דקות מזמן האיסכמיה החמה (WIT) אלא אם נשמרים רמות חמצון ו-pH תקינות6. לכן, WET מציבה אתגרים ספציפיים בתחום ה-VCA, ויש לקחת בחשבון גורמים רבים, כולל המקטעים האחוריים והקדמיים, וכן רכיבים חוץ-עיניים. במיוחד, השרירים קריטיים להשגת תוצאות תפקודיות מוצלחות, שכן הם רגישים מאוד לפציעות איסכמיה חמה, שמחמירות עוד יותר על ידי איסכמיה-רפווזיה 7,8. מחסור בחמצן מוביל לנזק לתאים ולשחרור דפוסים מולקולריים הקשורים לנזק (DAMPs). בעת ההחזרה, ה-DAMPs הללו מפעילים את מערכת החיסון של המקבל, גורמים לדלקת ולחדירת תאי מערכת החיסון. סביבה דלקתית זו מאיצה את הדחייה על ידי קידום הצגת אנטיגן והפעלת תאי T9. בנוסף להתמודדות עם אתגרים כמו חיבור מחדש של עצב הראייה, WET ידרוש טכניקות פרפוזיה אקס ביבו אופטימליות כדי למנוע נזק הנגרם מ-WIT או אחסון קר סטטי (SCS) ולבסוף להשיג שיקום ראייה 5,7,9,10,11.

פרפוזיה במכונה (MP) מבוססת היטב בהשתלות איברים מוצקים כאמצעי למניעת פגיעות איסכמיה-רפווזיה 12,13,14, כאשר פרפוזיה מכונה תת-נורמתרמית (SNMP) הראתה תוצאות טובות יותר לעומת SCS במודלים שונים 15,16,17. הצלחנו לתרגם SNMP על פני מודלים של בעלי חיים, החל מכרסמים18,19 ועד חזירים 20,21,22, ולפני זמן קצר פרימטים לא-אנושיים23. SNMP לא רק הוכיח את יעילותו בשימור השתלים לתקופות ממושכות, אלא גם הראה פוטנציאל בשיקום השתלים ובהפחתת פגיעות איסכמיות חמות, מה שמאפשר שתילה בטוחה עד 24 שעות לאחר רכישת24,25 שעות. בזכות יכולתו לשמור חלקית על חילוף החומרים של התאים, SNMP פותח גם דרכים חדשות על ידי הפיכת שלב השימור לפלטפורמה אבחנתית, טיפולית והכנה מוקדמת שניתן לשלב בפרוטוקולי השתילה מחדש והשתלות ב-VCA. פיתחנו פרוטוקול SNMP אופטימלי המותאם במיוחד ל-VCAs ויישמנו אותו בתרחיש המאתגר הזה של השתלת עיניים שלמה.

במחקר זה, SNMP משמש לשימור איברים מחומצן ודינמי בטמפרטורת סביבה (כ-20 מעלות צלזיוס). טכניקה זו עושה שימוש במשאבה פריסטלטית וחמצן כדי להזרים ולחמצן את הפרפוזאט. נעשה שימוש במודל חזיר, הרלוונטי מאוד למחקרים על השתלת WET ושימור בשל הדמיון הפיזיולוגי שלו לבני אדם, גודל כלי דומה והיעדר ייחודי של דופן אורביטליתלטרלית 26,27,28. תכונה זו הופכת אותה למתאימה במיוחד לניסויים אקס ויבו ולמחקרים אלוטרנסרפנצ'לנטיים, שכן העורק התרדמי החיצוני והעורק האופתלי מחוברים ישירות, מה שמאפשר לקבל את ה-WET רק דרך העורק הקרוטידי החיצוני והוורידים הג'וגולריים מבלי לדרוש דיסקציה תוך-גולגולתית לניסויים אקס ויבו וב-vivo העתלה אורטופית או הטרוטופית. הרכש מתבצע לאחר מוות במחזור הדם, בהתאם לתרומה לאחר פרוטוקולי מוות לבבי ומאפשר עיכוב ברכישה עד לקטיף איברים מוצקים נוספים. לכן, מודל זה בוחן עוד את הפוטנציאל של SNMP בשיקום שתלים רגישים במיוחד לאחר איסכמיה חמה ותומך בפיתוח טכניקות שימור WET במעבדות השתלות מבוססות שכבר מתמקדות באיברים אחרים, תוך שמירה על עקרונות "3-R" של עידון, הפחתה והחלפה29,30. יתרה מזאת, הוא נשאר רלוונטי לרכש פועם לב בעקבות צעדים דומים. המטרה היא להקים מודל שימור אמין המבוסס על הפדיקולות החיצוניות של הקרוטיד והצוואר היורדי ולהעריך את היתכנותו לשימור דינמי. מסופקים צעדים פרוצדורליים מפורטים, הכוללים רכישת שחיתות, שימור והיבטים מרכזיים של יישום SNMP.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

אישור מוסדי למחקר זה התקבל מהוועדה המקומית לטיפול ושימוש בבעלי חיים מוסדיים (פרוטוקול #2024N000205). כל עבודות בעלי החיים פעלו לפי הנחיות מחקר בעלי חיים: דיווח על ניסויים בחיים 31 והיו בהתאם להמלצות משרד סקירת ושימוש בבעלי חיים של צבא ארה"ב (ACURO)32. כל ה-WETs נרכשו מחזירים שעברו הליכי רכישת איברים סופיים, בהתאם לעקרונות "3-R"33. בעלי חיים במשקל שבין 30 ק"ג ל-50 ק"ג הושמתו באמצעות הפחדת דם לאחר קבלת 100 IU לקילוגרם הפארין, והשתלות WET השמאליות שימשו לניסויים. ה-WETs הנכונים שימשו כבקרים. רכישת האיברים התבצעה לאחר המוות עם פחות מ-180 דקות של איסכמיה חמה. ראו את טבלת החומרים לפרטים על כל החומרים והציוד המשמשים בפרוטוקול.

הערה: הנתונים נרשמו בגיליון אלקטרוני (למשל, אקסל), וניתוחים סטטיסטיים בוצעו באמצעות תוכנה סטטיסטית מתאימה (למשל, GraphPad Prism). סיכון האלפא נקבע על 5% והיה דו-זנב. עבור כל משתנה שנבדק, נקבעו ממוצע ושגיאת תקן של הממוצע. מבחן ספירמן שימש לחקר מתאמים בין פרמטרי הפרפוזיה.

1. הכנת פרפוזיה במכונה (יום לפני הניסוי)

  1. הגדר את מערכת הפרפוזיהבמכונה 34 (ראו איור 1).
    1. הרכיבו את רכיבי מערכת הפרפוזיה: משאבה, חמצן, מלכודת בועות, חיישן לחץ רציף וחיישן משקל.
      הערה: יש לשמור על אורך הצינור למינימום הנדרש להרכבת כל רכיבי ההתקנה. לאחר ההרכבה, יש לזכור שכיול הלחץ מותאם למערכת, במיוחד לאורך הצינורות.
    2. חבר את המערכת כמעגל מחזור חצי-סגור כדי לשאוב את הפרפוזאט מהמאגר אל החמצן, ואז את זרימת השתל (עורק קרוטיד). הזרימה הוורידית מתנקזת חזרה אל המאגר (איור משלים 1 וסרטון משלים 1).
    3. חבר את חיישן הלחץ לצינור הזרימה.
    4. הנח את השתל על פלטפורמת הדפסה תלת-ממדית (תלת-ממדית) הממוקמת על קנה מידה אלקטרוני.
    5. חבר גם את המשקל וגם את חיישן הלחץ למיקרו-בקר.
    6. חבר את המיקרו-בקר למחשב המפעיל לצורך ניטור בזמן אמת והקלטת נתונים רציפה.
    7. הכינו את מצלמת התרמית למעקב טמפרטורה.
      הערה: ניטור משקל, כתחליף להיווצרות בצקת, הוא קריטי שכן הוא משמש כאינדיקטור מוקדם לפציעת השתל במהלך הפרפוזיה35.
  2. נקה היטב את רכיבי המעגל לפני תחילת הפרפוזיה ושים לב מיוחד למכשיר החמצן, במיוחד אם הוא שימש מספר פעמים.
    1. התחילו בשטיפה של כל הצינורות בנפרד עם 70% אתנול, ואז עם מים סטריליים דה-יוניים.
    2. הרכיבו את המערכת וסחררו 2 ליטר מים סטריליים דה-יוניים כדי לשטוף את החמצן בקצב זרימה של 50-100 מ"ל לדקה אם כבר נעשה בו שימוש.
      הערה: למחקרי נטיעה מחדש של בעלי חיים חיים, השתמשו בחמצן סטרילי חדש וחטאו את כל שאר רכיבי הפרפוזיה עם אתילן אוקסיד (ETO)
  3. הכינו את תמיסת הפרפוזאט. לפרפוזיה מכונה תת-נורמתרמית, השתמש בתמיסת Steen+ מותאמת ל-VCA 24,34,36. בסך הכל, יש להשתמש ב-1.5 ליטר לכל שתל, בהתאם להרכב המפורט שדווחקודם לכן ב-34.
  4. הוסיפו תמיסת נתרן הידרוקסידי לפרפוסאט כדי להגיע ל-pH של 7.5-7.6. קבע את הערך ההתחלתי הזה גבוה בכוונה, שכן ה-pH ירד במהלך הסירקולציה כאשר תערובת הקרבוגן (95% חמצן, 5% פחמן דו-חמצני) תתמוסס.
  5. כיול חיישני המשקל והלחץ כדי להבטיח מדידות מדויקות.
    1. הטה את המאזניים כדי להתחשב במשקל הפלטפורמה.
    2. כדי למדוד בדיוק את לחץ כלי הדם הוסקולרי, כיול את המערכת לפי מד הקטטר וקצב הזרימה: מדוד את לחץ המערכת לכל גודל קטטר שניתן להשתמש בו במרווחי זרימה קבועים (כל תוספת של 0.5 מ"ל, מ-0 עד 20 מ"ל לדקה).
    3. במהלך ניסויים, כדי לחשב את לחץ העורק, מחסרים את לחץ הכיול מהלחץ הכולל הנמדד. טבלת הכיול המשמשת בניסויים אלו מוצגת כדוגמה (איור משלים 2).
      הערה: הכיול מותאם לכל הגדרה. חזור על הכיול לאחר כל שינוי בצינור, חמצן או פרפוזאט, שכן שינויים אלו עלולים לשנות את לחץ המערכת.

2. רכישת WET לאחר המוות

הערה: כדי לדמות תרומה לאחר מוות לבבי ו/או רכישה לאחר המוות, יש להמתים את החיה בהתאם להנחיות המקומיות של ה-IACUC. מעדיפים דימום על פני הזרקת פנטוברביטל תוך ורידית כדי למנוע רעילות תרופתית שעלולה להפריע למחקר.

  1. השאירו את החיה שהושמתה במצב שכיבה. תגלח ותשפשף את אזור הראש והצוואר ותשים וילונות סטריליים.
    הערה: המודל האנטומי מוצג באיור 2, ומדריך לניתוח שלב אחר שלב מסופק בקובץ המשלים 1.
  2. צייר את סימני העור של המכבש.
    1. ודאו שהסימנים כוללים קו סביב המסלול, במרחק 2 ס"מ משפת המסלול, וחתך שנמשך 1 ס"מ מתחת לקנתוס הצידי לכיוון הצוואר.
    2. בצע את החתך עם סכין n°23 דרך העור והרקמה התת-עורית עד לעצם בחלקים העליונים והתחתונים של האורביט, כולל הפריוסטאום. בצדדים הקדמיים והאחוריים של הפלאפ, ודאו שהחתך מגיע למישור הפציאלי.
  3. התחל בניתוח עם החלק הקדמי של המסלול באמצעות מספריים של סטיבנס ומלקחי אדסון.
    1. הרימו את תכולת המסלול במישור תת-פריוסטילי לעבר קירות המסלול באמצעות מעלית פריוסטאלית.
    2. זהה וחלק מבנים בקרבת דופן האורביטל באמצעות סכין להב מס' 15, כולל הכנסת השריר האלכסוני והקלקסוס הוורידי האורביטלי, שיוצא מהמסלול ומתחבר לווריד המצחי.
      הערה: הווריד המצחי מתנקז לווריד הפנים, שניתן להקריב אותו כדי לחסוך זמן, בתנאי שהענף האנסטומטי עם הווריד האופתלמי נשמר.
  4. המשך את הניתוח בחלק האחורי של המסלול. באמצעות סכין מנתח, כריתה את שריר המאסטר בהחדרה הזיגומטית שלו, ואחריה את הענף העולה של הלסת התחתונה עם חותך עצם של ליסטון. לפרק את הקונדיל ידנית על ידי סיבוב חיצוני של שבר המנדיבולה.
  5. חלק את הרצועה האורביטלית המשתרעת מהתהליך הזיגומטי לעצם הפרונטלית כדי להגיע לחלק האורביטלי של שריר הטמפורליס. לכרות את שריר הטמפורליס.
  6. עם מעלית פריוסטאלית, יש ליצור מנהרה תת-פריוסטילית מתחת לקשת הזיגומטית לכיוון השוליים הקדמיים של המסלול. השתמש במסור ריסיפרקטיבי כדי לחתוך את העצם. זהה את העורק האופתלמי הממוקם בחלק התחתון הצידי של חרוט האורביטל מתחת לשריר הטמפורליס.
  7. כריתת הקשת הזיגומטית ואת דפנות האורביטל הקדמיות-תחתונות באמצעות רונג'ור.
    הערה: שלבים אלו מספקים גישה לצד התחתון של חרוט האורביטל ולפדיקולה הווסקולרית שלו.
  8. לזהות ולנתח עם מספריים דקים של סטיבנס ומלקחיים-מיקרוכירורגיים את שני הענפים של העורק העין כאשר הם נכנסים לתכולת האורביטל.
    הערה: רוב כלי הדם (עורק הקרוטיד החיצוני והווריד היוגולרי השטחי) ממוקמים מתחת לסת התחתונה, למעט וריד הפנים, שהוא שטחי ללסת התחתונה.
  9. לאחר בידוד האורך הרצוי של עורק הקרוטיד החיצוני והווריד היוגולרי, השלימו את הדיסקציה על ידי חתך עצב הראייה, עצבי האוקולו-מוטורי והפדיקולה הוסקולרית באמצעות סכין מנתח.

3. הכנה לפרפוזיה

  1. על שולחן צד, הרחיב את עורק התרדמה באמצעות מרחיב מיקרוכירורגי והכנס אנגיוקטטר. אבטח את הקנולציה עם קשירות משי 3-0.
    הערה: בפרוטוקול זה, נעשה שימוש באנגיוקטטר 18-G לכל העורקים. אם הפדיקולה העורקית קצרה, יש להיזהר שלא להכניס את הקטטר רחוק מדי כדי למנוע קנולציה סלקטיבית של אחד משני הענפים האופתליים בלבד. הווריד היוגולרי אינו זקוק לניתוח אלא אם כן נעשה שימוש במערכת פרפוזיה סגורה, דבר שלא היה המצב בפרוטוקול זה.
  2. כדי לשטוף את עורק הקרוטיד, השתמשו במזרק של 10 מ"ל המותקן עם חיישן לחץ זהה לזה ששימש למערכת הפרפוזיה. השתמש ב-10 מ"ל הפארין (100 יחידות IU למיליטר) כדי לשטוף את הכלים וכך שהזרימה תהיה נקייה. הישארו מתחת ל-35 ± 5 מ"מ כספית, שכן לחץ גבוה עלול לגרום לפגיעות מיקרווסקולריות וכשל בפרפוזיה.

4. פרפוזיה במכונה תת-נורמתרמית

  1. חבר את העורק הקנולטיבי של השתל לצינור הזרימה של מערכת הפרפוזיה במכונה ומניח את השתל בתוך הקשקשים.
  2. הפעל את המשאבה שמכוונת ל-2-4 מ"ל לדקה.
    הערה: זרימת הפרפוזיה וקצב הלחץ תלויים בפרוטוקול שבו משתמשים. עבור VCA, משטר יציב וזרימה נמוכה משמש למניעת נזק לנימים והיווצרות בצקת.
  3. הערכת פרמטרי הכדאיות בכל נקודת זמן מוגדרת מראש הן בזרימה והן בזרימה היוצאת באמצעות מזרק של 1 מ"ל וניתוח דגימות באמצעות מכונת מערכת גזי הדם (למשל, מדדי גזי דם [pH, pCO2, pO2, לקטטים, עודפי בסיס, ביקרבונט], גלוקוז, נתרן, אשלגן, סידן, כלוריד). זה מאפשר לנו לחשב את מצב המטבוליזם של השתל לפי המשוואות המוצגות בטבלה 1.
    הערה: בפרוטוקול זה, הפרפוזיה נמשכת 18 שעות, ודגימות מהזרימה הנכנסת והיוצאת נלקחות כל שעה במשך 6 השעות הראשונות ואז כל 3 שעות ב-12 השעות הנותרות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

בדיקת היתכנות ראשונית נערכה במשך תקופה של 6 שעות SNMP, ואחריה שעתיים של פרפוזיה נורתורמית (NMP) עם דם מלא כדי להעריך את הרפרפוזיה התקינה של כל השתל ולדמות השתילה מחדש. במהלך שלב SNMP נצפתה יציאה יציבה, וסימולציית ההחזרה הדם המלא שהראתה הצליחה לצבוע מחדש של כל השתל. פרמטרי הפרפוזיה אישרו עוד יותר את היתכנות הטכניקה (איור משלים 3).

בסדרה הבאה של 7 שכפולים, בוצעו ניסויים בקצב זרימה נמוך ויציב, שנע בין 2 מ"ל לדקה ל-3 מ"ל לדקה, מה שהוביל ללחץ עורקי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

יותר משני עשורים לאחר המקרים הקליניים הראשונים, VCA ממשיכה להתמודד עם אתגרים אימונולוגיים ושימור חיצוניים משמעותיים, ומגבילים את זמינותההנרחבת 37. אתגרים אלו בולטים אף יותר במקרה של WET, שמציע הזדמנויות מרגשות לשיקום הראייה אך מציב מכשולים ייחודיים, כגון השגת חיבור מחדש מוצלח של עצב הראייה, שמירה על תפקוד המקטע הקדמי והאחורי, ושמירה על שלמות המבנים הפריאורביטליים. במקרה של VCAs עיניים, חשוב במיוחד למנוע פגיעה איסכמית לעין לפני ההשתלה, שכן הרשתית עלולה לסב...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

חלק מהסופרים מצהירים על תחומי עניין מתחרים. לד"ר אויגון, ללוש וסטרולו יש בקשות פטנט רלוונטיות למחקר זה. לד"ר קורקוט אויגון וד"ר בסאק אויגון יש אינטרס פיננסי והם משרתים במועצה המייעצת המדעית של Sylvatica Biotech Inc., חברה המתמקדת בפיתוח טכנולוגיית שימור איברים בטמפרטורה תת-אפסית גבוהה. אינטרסים מתחרים עבור חוקרי MGH מנוהלים על ידי ה-MGB בהתאם למדיניות ניגוד העניינים שלהם. כל המחברים הנותרים מצהירים שאין ניגוד עניינים.

תודות

עבודה זו מומנה חלקית על ידי המכונים הלאומיים לבריאות תחת מענק מס' R01AR082825 (BEU), R01EB028782 (KU), משרד ההגנה RTRP RT240044 (KU, AGL, CLC), Shriners Children's 84308 (YB), ותת-הפרס ARPA-H לשנת הכספים 25.1065.001 (CLC), ועל ידי הקרן הלאומית למדע במסגרת מענק מס' EEC 1941543 (KU). HO ו-YB קיבלו מימון מקרן הגזים. התמיכה מ-Société Française de Chirurgie Plastique, Reconstructrice et Esthétique (SOFCPRE, צרפת) ל-HO ול-YB מוערכת מאוד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אדסון פורספסכלי המדע המדויק11019-12כלי ניתוחי
מערכת חמצון אפיניטי פיקסימדטרוניקBBP241אוקסיגנטור
אנגיוקת' (24 גרם)בקטון דיקינסון381112קטטר קנולציה
אלבומין סרום בוביןסיגמא-אלדריץ'A9647רכיב הפרפוזאט
סידן כלוריד די-הידראטסיגמא-אלדריץ'223506רכיב הפרפוזאט
פחמן דו-חמצניאיירגזUN3156תערובת חמצן פחמן דו-חמצני   GAS 
קטטר 24 Gדאצ'ר921048קנולציית עורקים
D-(+)-גלוקוז מונוהידראטסיגמא-אלדריץ'49159רכיב הפרפוזאט
דקסמתזוןסיגמא-אלדריץ'D2915רכיב הפרפוזאט
דקסטרןתרמו-מדעי406271000רכיב הפרפוזאט
מלקחי מרחיבAROSurgical11.946.1102כלי ניתוחי
אקסל מיקרוסופטגיליון אלקטרוני
הזרקת נתרן בהפאריןיוג'יה פארמה63739-953-25רכיב הפרפוזאט
הומולין אינסולין רגיל אנושילילי0002-8215-01רכיב הפרפוזאט
הידרוקורטיזון נתרן סוקסינאטפייזר0009-0011-03רכיב הפרפוזאט
ליגקליפאתיקוןMCS20קליפים וסקולריים כירורגיים
חותך עצמות ליסטוןכלי המדע המדויק16104-19כלי ניתוחי
מגנזיום כלוריד הקשה-הידראטסיגמא-אלדריץ'M9272רכיב הפרפוזאט
מאסטרפלקס L/Sקול-פרמר77200-32משאבת גלגלים
מלקחיים מיקרוכירורגייםכלי המדע המדויק11253-20כלי ניתוחי
מעלית פריוסטילAROSurgical46.415.18כלי ניתוחי
פוליאתילן גליקול 35000סיגמא-אלדריץ'25322-68-3רכיב הפרפוזאט
כלוריד אשלגןסיגמא-אלדריץ'7447-40-7רכיב הפרפוזאט
מד לחץ, נייד, PM-P-1מערכות אינסטרומנטציהPM-P-1חיישן לחץ
Prism GraphPadV. 10.1.1תוכנת ניתוח סטטיסטי
רדנוטי  תא עמידה במלכודת בועותרדנוטי130149מלכודת בועות
RAPIDPoint 500סימנס500מערכת גזי הדם
מסור ריפרוקטיטיסטרייקר5100-37כלי ניתוחי
רונג'רכלי המדע המדויק16002-18כלי ניתוחי
להב סכין (n15)כלי המדע המדויק10015-00כלי ניתוחי
להב סכין (n23)כלי המדע המדויק10023-00כלי ניתוחי
תפר משי 3-0אתיקוןP683Hתפר
נתרן ביקרבונטסיגמא-אלדריץ'S5761רכיב הפרפוזאט
כלוריד נתרןסיגמא-אלדריץ'S9888רכיב הפרפוזאט
נתרן הידרוקסידסיגמא-אלדריץ'72068רכיב הפרפוזאט
נתרן פוספט מונובסיק דיהידראט סיגמא-אלדריץ'71505רכיב הפרפוזאט
מספריים של סטיבנסAROSurgical07.367.13כלי ניתוחי
מזרק 1 מ"לBD309659רכישת דגימות
מזרק 10 מ"לדאצ'ר300912שטיפת השתל
מצלמה תרמיתפליר וואןhttps://www.flir.fr/products/flir-one-gen-3/?vertical=condition+monitoring&segment=solutionsניטור טמפרפוזיה
צינורות (n° 16)מאסטרפלקס13-310-282הגדרת פרפוזיה במכונה
ונקומיצין הידרוכלורידתרופות מנוהלות על Slate70436-021-82רכיב הפרפוזאט

מקורות

  1. Lellouch, A. G., Lantieri, L. A second chance at life. Camb Q Healthc Ethics. 28 (3), 463-467 (2019).
  2. Tchiloemba, B., et al. Long-term outcomes after facial allotransplantation: Systematic review of the literature. Transplantation. 105 (8), 1869-1880 (2021).
  3. Nowogrodzki, J. World's first whole-eye transplant: The innovations that made it possible. Nature. 633 (8030), 500-501 (2024).
  4. Lico, M., et al. Swallowing function after pioneering partial face and whole eye transplant: Clinical insights. Am J Speech Lang Pathol. 34 (4), 1921-1930 (2025).
  5. Ceradini, D. J., et al. Combined whole eye and face transplant: Microsurgical strategy and 1-year clinical course. JAMA. 332 (18), 1551-1558 (2024).
  6. Abbas, F., et al. Revival of light signalling in the postmortem mouse and human retina. Nature. 606 (7913), 351-357 (2022).
  7. Paradis, S., et al. Chronology of mitochondrial and cellular events during skeletal muscle ischemia-reperfusion. Am J Physiol Cell Physiol. 310 (11), C968-C982 (2016).
  8. Kruit, A. S., et al. Ex-vivo perfusion as a successful strategy for reduction of ischemia-reperfusion injury in prolonged muscle flap preservation: A gene expression. Gene. 701, 89-97 (2019).
  9. He, J., Khan, U. Z., Qing, L., Wu, P., Tang, J. Improving the ischemia-reperfusion injury in vascularized composite allotransplantation: Clinical experience and experimental implications. Front Immunol. 13, 998952(2022).
  10. Dickey, R. M., et al. Composite tissue preservation. Ann Plast Surg. 84 (6), 711-716 (2020).
  11. Messner, F., Grahammer, J., Hautz, T., Brandacher, G., Schneeberger, S. Ischemia/reperfusion injury in vascularized tissue allotransplantation. Curr Opin Organ Transplant. 21 (5), 503-509 (2016).
  12. Markmann, J. F., et al. Impact of portable normothermic blood-based machine perfusion on outcomes of liver transplant. JAMA Surg. 157 (3), 189(2022).
  13. Van Rijn, R., et al. Hypothermic machine perfusion in liver transplantation: A randomized trial. N Engl J Med. 384 (15), 1391-1401 (2021).
  14. Pitchaimuthu, M., Crochet, C., Battula, N. R., Faria, I., Martins, P. N. Machine perfusion organ preservation: Highlights from the American Transplant Congress 2024. Artif Organs. 49 (2), 326-331 (2025).
  15. Berendsen, T. A., et al. A simplified subnormothermic machine perfusion system restores ischemically damaged liver grafts in a rat model of orthotopic liver transplantation. Transplant Res. 1 (1), 6(2012).
  16. Karangwa, S. A., et al. Machine perfusion of donor livers for transplantation: A proposal for standardized nomenclature and reporting guidelines. Am J Transplant. 16 (10), 2932-2942 (2016).
  17. Agius, T., et al. Subnormothermic ex vivo porcine kidney perfusion improves energy metabolism: Analysis using 31P magnetic resonance spectroscopic imaging. Transplant Direct. 8 (10), e1354(2022).
  18. Goutard, M., et al. Exceeding the limits of static cold storage in limb transplantation using subnormothermic machine perfusion. J Reconstr Microsurg. 39 (5), 350-360 (2023).
  19. Burlage, L. C., et al. Optimization of ex vivo machine perfusion and transplantation of vascularized composite allografts. J Surg Res. 270, 151-161 (2022).
  20. Berkane, Y., et al. Towards optimizing sub-normothermic machine perfusion in fasciocutaneous flaps: A large animal study. Bioeng (Basel). 10 (12), 1415(2023).
  21. Berkane, Y., et al. Continuous oxygen monitoring to enhance ex-vivo organ machine perfusion and reconstructive surgery. Biosens Bioelectron. 262, 116549(2024).
  22. Tawa, P., et al. Continuous versus pulsatile flow in 24-hour vascularized composite allograft machine perfusion in swine: A pilot study. J Surg Res. 283, 1145-1153 (2023).
  23. Oubari, H., et al. Development of a 24-h preservation protocol of forearm vascularized composite allotransplants in nonhuman primates using subnormothermic machine perfusion. Transplant Direct. 11 (9), e1849(2025).
  24. Goutard, M., et al. Machine perfusion enables 24-h preservation of vascularized composite allografts in a swine model of allotransplantation. Transpl Int. 37, e100(2024).
  25. Charlès, L., et al. Effect of subnormothermic machine perfusion on the preservation of vascularized composite allografts after prolonged warm ischemia. Transplantation. 108 (11), 2222-2232 (2024).
  26. Kyllar, M., et al. A porcine model: Surgical anatomy of the orbit for maxillofacial surgery. Lab Anim. 50 (2), 125-136 (2016).
  27. Rousou, C., et al. A technical protocol for an experimental ex vivo model using arterially perfused porcine eyes. Exp Eye Res. 181, 171-177 (2019).
  28. Bravo, M. G., Granoff, M. D., Johnson, A. R., Lee, B. T. Development of a new large-animal model for composite face and whole-eye transplantation: A novel application for anatomical mapping using indocyanine green and liquid latex. Plast Reconstr Surg. 145 (1), 67e-75e (2020).
  29. Dickens, B. M. Legal and ethical issues of uterus transplantation. Int J Gynaecol Obstet. 133 (1), 125-128 (2016).
  30. Díaz, L., et al. Ethical considerations in animal research: The principle of 3Rs. Rev Invest Clin. 73 (4), 199-209 (2021).
  31. ARRIVE guidelines. , https://arriveguidelines.org (2024).
  32. MRDC research protections. , https://mrdc.health.mil/index.cfm/collaborate/research_protections/acuro (2024).
  33. NCBI PMC. , https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6826930 (2024).
  34. Cabanel, L., et al. Establishing a swine model to study uterus dynamic preservation and transplantation. J Vis Exp. (214), e67357(2024).
  35. Meyers, A., et al. Weight gain is an early indicator of injury in ex vivo normothermic limb perfusion (EVNLP). Artif Organs. 47 (2), 290-301 (2023).
  36. Berkane, Y., et al. Towards optimizing sub-normothermic machine perfusion in fasciocutaneous flaps: A large animal study. Bioeng (Basel). 10 (12), 1415(2023).
  37. Berkane, Y., et al. Avancées et perspectives en préservation d'allotransplantations de tissus composites. Bull Acad Natl Med. 208 (9), 1299-1308 (2024).
  38. Brouwers, K., et al. 24-hour perfusion of porcine myocutaneous flaps mitigates reperfusion injury: A 7-day follow-up study. Plast Reconstr Surg Glob Open. 10 (2), e4123(2022).
  39. Cypel, M., et al. Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation. N Engl J Med. 364 (15), 1431-1440 (2011).
  40. Agarwal, A., et al. Clinicopathological analysis of uterine allografts including proposed scoring of ischemia reperfusion injury and T-cell-mediated rejection: Dallas uterus transplant study. Transplantation. 106 (1), 167-177 (2022).
  41. Ponticelli, C. Ischaemia-reperfusion injury: A major protagonist in kidney transplantation. Nephrol Dial Transplant. 29 (6), 1134-1140 (2014).
  42. Berkane, Y., et al. VCA supercooling in a swine partial hindlimb model. Sci Rep. 14 (1), 12618(2024).
  43. Filz von Reiterdank, I., et al. Subzero non-freezing of vascularized composite allografts in a rodent partial hindlimb model. Cryobiology. 116, 104950(2024).
  44. Berkane, Y., et al. Supercooling: A promising technique for prolonged preservation in solid organ transplantation, and early perspectives in vascularized composite allografts. Front Transplant. 2, 1269706(2023).
  45. De Vries, R. J., et al. Subzero non-frozen preservation of human livers in the supercooled state. Nat Protoc. 15 (6), 2024-2040 (2020).
  46. De Vries, R. J., et al. Supercooling extends preservation time of human livers. Nat Biotechnol. 37 (10), 1131-1136 (2019).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

Ex Vivov
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.