הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר מחקר

RNA PVT1 ארוך שאינו מקודד משפר את הגליקוליזה בקרצינומה של בלוטת התריס על ידי ייצוב HIF-1α והפעלת שעתוק גנים גליקוליטיים

423 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69294

⸱

17 באוקטובר 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Nuclear Medicine, The Second Affiliated Hospital of Fujian Medical University, 2Department of Gastroenterology, The Second Affiliated Hospital of Fujian Medical University, 3Department of Pathology, The Second Affiliated Hospital of Fujian Medical University

במאמר זה

סיכום

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לבחינת האופן שבו lncPVT1 מווסת את יציבות HIF-1α וביטוי גנים גליקוליטיים בתאי סרטן בלוטת התריס, ומאפשר לחקור ויסות מטבולי ומטרות טיפוליות פוטנציאליות.

תקציר

כסרטן המערכת האנדוקרינית הראשון, קרצינומה של בלוטת התריס מציגה מגמה אפידמיולוגית מואצת בין אוכלוסיות. למרות ההתקדמות בשיטות הטיפול, הישנות וגרורות נותרו אתגרים. ה-RNA PVT1 הארוך שאינו מקודד (lncPVT1) התגלה כמווסת אונקוגני משומר בסוגי סרטן מרובים, אך תפקידו הספציפי ב-TC דורש חקירה נוספת. המחקר שלנו התמקד בבחינת האופן שבו lncPVT1 משפיע על גליקוליזה בתנאים נורמוקסיים והיפוקסיים כאחד באמצעות קווי תאי TC TPC-1 ו-K1. ביטוי יתר של lncPVT1 שיפר משמעותית את צריכת הגלוקוז ואת ייצור הלקטט תחת היפוקסיה, ואישש את יכולתו להגדיל את הגליקוליזה. יתר על כן, lncPVT1 ויסות גנים גליקוליטיים מרכזיים כגון GLUT1, HK1, HK2 ו-PGK1, והקל על התפשטות תאי TC. מבחינה מכנית, lncPVT1 ייצב את גורם השראת היפוקסיה 1α (HIF-1α) על ידי עיכוב פירוקו והובלת הצטברותו. זה הצטבר HIF-1α לאחר מכן לרצפים רגולטוריים ספציפיים השולטים בביטוי הגנים המעורבים בגליקוליזה, ובסופו של דבר מפעילים גנים אלה ומגבירים את הפעילות הגליקוליטית. הממצאים שלנו מראים כי lncPVT1 מווסת את יציבות HIF-1α וביטוי גנים גליקוליטיים, מקדם את ההבנה שלנו לגבי חילוף החומרים של TC ועשוי לחשוף מטרות טיפוליות חדשות.

מבוא

סרטן בלוטת התריס (TC), ממאירות אנדוקרינית שכיחה מאוד, חווה עלייה מהירה בשיעורי ההיארעות1. למרות ההתקדמות באסטרטגיות טיפוליות, כולל פרוצדורות כירורגיות, טיפול בקרינה וטיפול בדיכוי הורמונלי של בלוטת התריס, חלק ניכר מחולי TC עדיין מתמודדים עם הסיכון להישנות הגידול וגרורות, מה שמדגיש את הצורך בהבנה מעמיקה יותר של הפתוגנזה המולקולרית שלו 2,3. התפתחות TC קשורה למספר גורמי סיכון מבוססים, כולל חשיפה לקרינה מייננת, מגע עם חומרים מסרטנים כימיים, שימוש בטבק והשמנת יתר; עם זאת, המנגנונים הבסיסיים המורכבים נותרו חמקמקים4. בהתחשב בהבנה המוגבלת של המנגנונים המולקולריים של TC, תשומת לב הולכת וגוברת הוקדשה ל-RNA שאינם מקודדים, במיוחד lncRNAs, בשל תפקידיהם הרגולטוריים בסרטן.

ראיות מתפתחות מבססות lncRNAs כמווסתים מרכזיים של תהליכים ביולוגיים רב-פנים, במיוחד בהתפתחות גידולים, באמצעות מנגנונים כגון שחבור חלופי, ויסות שעתוק ומיקרו-RNA (miRNA) ספוג 5,6,7. טרנסלוקציה 1 של וריאנט פלסמציטומה (PVT1) ממוקמת במורד הזרם של כרומוזום 8q24.21 והאונקוגן C-myc8. בין אלה, lncPVT1, lncRNA הממוקם במורד הזרם של האונקוגן C-myc בכרומוזום 8q24.21, זכה לתשומת לב משמעותית בשל תפקידיו האונקוגניים במספר ממאירויות, כולל סרטן כבד9 וקרצינומה של תאי כליה10. עם זאת, ההשלכות התפקודיות של lncPVT1 ב-TC נותרו ברובן לא נחקרו.

תאים סרטניים עוברים תכנות מחדש מטבולי, מאפיין מרכזי של גידול, שבו הם מציגים פעילות גליקוליטית מוגברת יחד עם זרחון חמצוני מופחת, כלומר אפקט ורבורג11. היפוקסיה, תכונה מיקרו-סביבתית נפוצה בגידולים מוצקים, משפיעה עמוקות על התנהגות הגידול, מקדמת גליקוליזה ואגרסיביות, ומעניקה פרוגנוזה גרועה12. גורם 1 המעורר היפוקסיה (HIF-1), גורם מפתח המווסת את תגובת התא לרמות חמצן נמוכות, מתזמר שפע של שינויים אדפטיביים התומכים בהישרדות הגידול והתקדמותו13. מחקרים קודמים הראו כי lncPVT1 מווסת גליקוליזה בגידולים ממאירים מרובים, כולל סרטן השד14, אדנוקרצינומה של צינור הלבלב15 ואוסטאוסרקומה16. בנוסף, הוכח כי lncPVT1 משפר את התפשטות התאים על ידי ייצוב HIF-1α בקרצינומה של הלוע17. עם זאת, המתאם בין ביטוי lncPVT1 לפרמטרים קליניים לא דווח בסרטן. בנוסף, התפקוד והמנגנונים הספציפיים או ההשלכות הקליניות הייחודיות של lncPVT1 נותרו לא ברורים ב-TC. לכן, מטרת מחקר זה הייתה לחקור כיצד lncPVT1 משפיע על חילוף החומרים של גלוקוז בשורות תאי TC TPC-1 ו-K1 שנחשפו לנורמוקסיה והיפוקסיה. בחנו את ההשפעה של ביטוי יתר של lncPVT1 על צריכת גלוקוז, ייצור לקטט והתפשטות תאים. פענחנו עוד יותר את מנגנוני הייצוב של HIF-1α הנשלטים על ידי lncPVT1 ואת השפעותיהם הנובעות מכך על תכנות שעתוק הקשור לגליקוליזה. מחקר מקיף זה מציע נקודות מבט חדשות על האופן שבו lncPVT1 תורם לגידול, במיוחד בהקשר של תכנות מחדש מטבולי והסתגלות היפוקסית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

תרבית תאים וטרנספקציה

קווי התאים של קרצינומה של בלוטת התריס (TC) האנושיים TPC-1 ו-K1 תורבו במדיום הנשר המותאם (DMEM) של Dulbecco המכיל 4.5 גרם/ליטר גלוקוז, בתוספת 10% סרום בקר עוברי ו-100 מיקרוגרם/מ"ל פניצילין-סטרפטומיצין. התאים נשמרו בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באינקובטור לח עם 5% CO2. לטיפול בהיפוקסיה, 1 x 105 תאים הועברו לתא היפוקסי אטום מאוזן עם 1% O2, 5% CO2 ו-94% N2 ב-37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות, אלא אם צוין אחרת. ביטוי יתר יציב של lncPVT1 (lncPVT1 OE) והבקרה השלילית המתאימה (NC) נוצרו בתאי TPC-1 ו-K1 באמצעות מערכת ביטוי לנטי-ויראלי, בהתאם להוראות היצרן.

הערכת רמות הגלוקוז

כדי להעריך את צריכת הגלוקוז, שורות תאי קרצינומה של בלוטת התריס תורבבו בתנאים נורמוקסיים (21% O2) ותנאים היפוקסיים (1% O2) למשך 24 שעות. ריכוזי הגלוקוז במדיום התרבית נמדדו באמצעות ערכת בדיקת גלוקוז על פי פרוטוקול היצרן. בקצרה, 2 מיקרוליטר של מדיום מותנה עורבב עם מגיב עובד גלוקוז טרי והודגר ב-37 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות. הספיגה נמדדה ב-530 ננומטר באמצעות קורא מיקרו-פלטות כדי לכמת את רמות הגלוקוז.

הערכת רמות לקטט

קווי תאי קרצינומה של בלוטת התריס TPC-1 ו-K1 (2 x 104 תאים לבאר) תורבו בתנאים נורמוקסיים (21% O2, 5% CO2, 37 °C) ובתנאים היפוקסיים (1% O2, 5% CO2, 37 °C) למשך 24 שעות. לאחר הדגירה, צלחות התרבית צנטריפוגות ב-300 x גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר כדי לגלול תאי גלולה ופסולת. לאחר מכן, 2 מיקרוליטר של הסופרנטנט המובהר נאספו מכל באר ועורבבו עם 200 מיקרוליטר של מגיב בדיקת לקטט בצלחת של 96 בארות. תערובת התגובה הודגרה ב-37 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות, ולאחר מכן נוספה תמיסת עצירה כדי לסיים את התגובה. הספיגה נמדדה ב-530 ננומטר באמצעות קורא מיקרו-פלטות. ריכוזי הלקטט נקבעו על ידי השוואת ערכי הספיגה לעקומה סטנדרטית שנוצרה מתקני לקטט ידועים (בדרך כלל נעים בין 0 ל-20 ננומול). כל המדידות בוצעו בשלוש עותקים.

בדיקת התפשטות תאים

תאי קרצינומה של בלוטת התריס נזרעו לתוך צלחות של 96 בארות בצפיפות של 3 x 103 תאים לבאר ב-100 מיקרוליטר של מדיום תרבית. לאחר מכן התאים הודגרו בתנאים נורמוקסיים (21% O2, 5% CO2, 37 °C) או היפוקסיים (1% O2, 5% CO2, 37 °C) למשך 0 שעות, 24 שעות או 48 שעות. בכל נקודת זמן, 10 מיקרוליטר של מגיב התפשטות תאים נוספו לכל באר של צלחת של 96 בארות. לאחר מכן הודגרה הצלחת בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 40 דקות. לאחר הדגירה, הצפיפות האופטית ב-450 ננומטר (OD450) נמדדה באמצעות קורא מיקרו-פלטות כדי לכמת את התפשטות התאים. כל המדידות בוצעו בשלושה שכפולים טכניים לפחות.

ניתוח qRT-PCR

סה"כ RNA הופק מ-1 x 106 תאי קרצינומה של בלוטת התריס בתנאים נורמוקסיים (21% O2, 5% CO2, 37 °C) ותנאים היפוקסיים (1% O2, 5% CO2, 37 °C) באמצעות מגיב מיצוי גואנידיניום תיוציאנט-פנול-כלורופורם בהתאם לפרוטוקול היצרן. טוהר וריכוז ה-RNA הוערכו באופן ספקטרופוטומטרי על ידי מדידת יחסי ספיגה ב-260/280 ננומטר. עבור סינתזת DNA משלימה (cDNA), 500 ננוגרם של RNA כולל תומלל הפוך בנפח תגובה של 20 מיקרוליטר המכיל טרנסקריפטאז הפוך, פריימרים הקסמרים אקראיים, dNTPs, מעכב RNase ומאגר תגובה. השעתוק ההפוך בוצע ב-25 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות, ולאחר מכן 42 מעלות צלזיוס למשך 50 דקות, והסתיים בחימום ב-70 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות.

PCR כמותי בוצע באמצעות מערכת זיהוי מבוססת SYBR Green בנפח תגובה כולל של 20 מיקרוליטר המכילה תבנית cDNA (דילול של 1:5 עד 1:20 של סינתזת ה-cDNA המקורית), תערובת מאסטר SYBR Green PCR, פריימרים קדימה ואחורה (כל אחד ב-0.2 מיקרומטר) ומים נטולי נוקלאז. הגברת PCR בוצעה על תרמו-סייקלר בתנאי הרכיבה הבאים: דנטורציה ראשונית ב-95 מעלות צלזיוס למשך 3 דקות; 40 מחזורי דנטורציה ב-95 מעלות צלזיוס למשך 15 שניות, חישול ב-60 מעלות צלזיוס למשך 30 שניות, והארכה ב-72 מעלות צלזיוס למשך 30 שניות; ואחריו ניתוח עקומת התכה כדי לאמת את הספציפיות של ההגברה.

רצפי פריימר עבור GLUT1, HK1, HK2, PGK1 ו-GAPDH (טבלה 1) תוכננו על סמך רצפים18 שפורסמו וסינתזו באופן מסחרי. רמות הביטוי של גני המטרה נורמלו ל-GAPDH וחושבו בשיטת 2-ΔΔCt 19.

כתם מערבי

לאחר הטיפול, תאי קרצינומה של בלוטת התריס נשטפו פעמיים עם מי מלח קרים עם פוספט (PBS) ועברו ליזה באמצעות מאגר בדיקת רדיו-אימונומשקעים (RIPA) בתוספת קוקטייל מעכב פרוטאז. ליזאטים של תאים הודגרו על קרח למשך 30 דקות עם ערבוב לסירוגין ולאחר מכן צנטריפוגה ב-12,000 x גרם למשך 15 דקות ב-4 מעלות צלזיוס כדי להסיר פסולת בלתי מסיסה. ריכוז החלבון של הסופרנטנט נקבע באמצעות בדיקת חומצה ביסינכונית (BCA) בהתאם להוראות היצרן. כמויות שוות של חלבון (30 מיקרוגרם לדגימה) עורבבו עם מאגר טעינה פי 5, הורתחו ב-95 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות, והועמסו על ג'ל SDS-פוליאקרילאמיד 10% להפרדה אלקטרופורטית. חלבונים הופרדו על ידי אלקטרופורזה ב-120 וולט למשך כ-90 דקות ולאחר מכן הועברו לממברנות פלואוריד פוליווינילידן (PVDF) באמצעות מערכת העברה רטובה ב-100 וולט למשך 90 דקות ב-4 מעלות צלזיוס. הממברנות נחסמו עם 5% חלב נטול שומן בתמיסת מלח Tris-buffered המכילה 0.1% Tween-20 (TBST) למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר כדי למנוע קשירה לא ספציפית. לאחר מכן, הממברנות הודגרו במהלך הלילה בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס עם נוגדנים ראשוניים מדוללים במאגר חוסם: נוגדן נגד HIF-1α (1:3,000) ונוגדנים נגד בטא-אקטין (1:8,000). לאחר שטיפה 3 פעמים עם TBST (כל אחד למשך 10 דקות), הממברנות הודגרו עם נוגדנים משניים מתאימים מצומדים לחזרת פרוקסידאז מדוללים 1:5,000 במאגר חוסם למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר. לאחר שלוש שטיפות נוספות של TBST, רצועות החלבון הודגמו באמצעות מערכת זיהוי כימילומינסנציה משופרת (ECL) וצולמו עם מערכת תיעוד ג'ל.

בדיקת לוציפראז כפולה

כדי לחקור את ויסות השעתוק של גנים הקשורים לגליקוליזה על ידי lncPVT1, תאי TPC-1 נזרעו בצלחות של 24 בארות בצפיפות של 1 x 105 תאים לבאר ותרבית ב-DMEM המכיל 4.5 גרם/ליטר גלוקוז, בתוספת 10% סרום בקר עוברי ו-100 מיקרוגרם/מ"ל פניצילין-סטרפטומיצין בן לילה. התאים הועברו במשותף עם 500 ננוגרם של פלסמיד מדווח לוציפראז מונע על ידי אלמנט תגובת היפוקסיה (HRE) ו-50 ננוגרם של פלסמיד בקרת רנילה לוציפראז באמצעות מגיב טרנספקציה מבוסס ליפידים בריכוז סופי של 2 מיקרוליטר לבאר, על פי הוראות היצרן. יעילות הטרנספקציה אושרה על ידי הכללת טרנספקציה מקבילה עם פלסמיד המבטא GFP והערכת ביטוי GFP תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי 24 שעות לאחר הטרנספקציה. לאחר דגירה של 24 שעות בתנאים נורמוקסיים (21% O2) או היפוקסיים (1% O2), נמדדו פעילויות לוציפראז באמצעות מערכת בדיקת מדווח לוציפראז כפולה. פעילות לוציפראז גחלילית נורמלה לפעילות לוציפראז רנילה, והיחס שימש לניתוח השוואתי בין דגימות.

ניתוח נתונים

כל הנתונים הוצגו כממוצע ± SD. הערכות סטטיסטיות בוצעו בתוכנת ניתוח סטטיסטי. השוואות בין הקבוצות נערכו באמצעות מבחני t בלתי תלויים, ומובהקות סטטיסטית נקבעה על סמך סף ערך p של פחות מ-0.05.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

גליקוליזה משופרת בשורות תאי TC בתיווך lncPVT1

בתחילה הקמנו lncPVT1 OE ו-NC בתאי TPC-1 ו-K1 באמצעות מערכת ביטוי לנטי-ויראלי. ביטוי יתר מוצלח של lncPVT1 אושר על ידי qRT-PCR (איור 1A-B). כדי להעריך את ההשפעה על הגליקוליזה, תאים תורבבו תחת נורמוקסיה והיפוקסיה למשך 24 שעות. הממצאים שלנו הצביעו על כך שהיפוקסיה שיפרה באופן משמעותי את צריכת הגלוקוז וייצור הלקטט של תאי TPC-1...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

כממאירות האנדוקרינית הנפוצה ביותר, TC מציב אתגרים משמעותיים מבחינת הישנותה וגרורות22. הנוף המכניסטי של סרטן בלוטת התריס נותר לא מוגדר לחלוטין, במיוחד בכל הנוגע לוויסות בתיווך lncRNA של תכנות מחדש מטבולי אונקוגני והתנהגויות תאיות בסיסיות23 . במחקר זה התמקדנו ב-lncPVT1 האונקוגני ובהשפעתו על גליקוליזה ויציבות HIF-1α בתאי TC.

אפקט ורבורג מייצג חתימה מטבולית בסיסית בממאירות, במיוחד בתנאים היפוקסיים, המאופיינת בדרך כלל...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים אינם טוענים לניגודי אינטרסים, בין אם כספיים או לא פיננסיים.

תודות

מימון המחקר ניתן באמצעות פרויקט תוכנית המדע והטכנולוגיה של פוג'יאן (2022J01784).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
ערכת בדיקת חלבון BCAמיילונביוMA0082-2בדיקת כימות חלבון WB
ארון בטיחות ביולוגיתלישןHFsafe-1200LCמעבר תאים והתרחבות
צנטריפוגהבאיאנגB320אתאי צנטריפוגה
מערכת הדמיה כימילומינסנציהBIO-RAD (ארה"ב)ChemiDoc Touchפיתוח WB
חממת CO2תרמו (ארה"ב)311תרבית תאים
ערכת זיהוי כימילומינסנציה ECLמיילונביוMA0186-1פיתוח WB
ציטומטר זרימהב.ד.FACSCalburבדיקת אפופטוזיס ציטומטריית זרימה
מיקרוסקופ הפוך פלואורסצנטיNIKON (יפן)TS2-FLתצפית תאים
מכשיר PCR כמותי פלואורסצנטיABI (ארה"ב)7300ניסוי PCR
GAPDHחלבון טק60004-1-IGנוגדן ייחוס פנימי WB
ערכת בדיקת גלוקוזג'יאנצ'נגא154-1-1בדיקה ביוכימית
HIF1Aבאסטרא00013נוגדן WB
Affinipure Goat Anti-Mouse IgG מצומד HRP (H+L)חלבון טקSA00001-1ניסוי אימונוהיסטוכימיה (IHC)
Affinipure Goat Anti-Rabbit מצומד HRP IgG (H+L)חלבון טקSA00001-2ניסוי אימונוהיסטוכימיה (IHC)
שורת תאים K1בנק תאים של האקדמיה הסינית למדעים (שנחאי, סין)נהקו תאי קרצינומה פפילרית של בלוטת התריס האנושית
ערכת בדיקת חומצה לקטיתג'יאנצ'נגא019-2-1בדיקה ביוכימית
קורא מיקרופלייטתרמו (ארה"ב)K3זיהוי ELISA
PAGE ג'ל ערכת הכנה מהירה במיוחד (15%)מיילונביוMA0384אלקטרופורזה של WB
מכשיר PCRBIO-RAD (ארה"ב)PTC100ניסוי PCR
סמן חלבון קשת צבוע מראשמיילונביוMA0342אלקטרופורזה של WB
מערכת אלקטרופורזה אנכית של חלבוןBIO-RAD (ארה"ב)פאוור פאק 200אלקטרופורזה של WB
מאגר טעינת חלבון SDS-PAGE (פי 5)ביוטייםP0015Lאלקטרופורזה של WB
נתרן דודציל סולפט (SDS)סיגמא151-21-3אלקטרופורזה של WB
קו תאים TPC-1בנק תאים של האקדמיה הסינית למדעים (שנחאי, סין)נהקו תאי קרצינומה של בלוטת התריס האנושית

מקורות

  1. Chen, D. W., Lang, B. H. H., McLeod, D. S. A., Newbold, K., Haymart, M. R. Thyroid cancer. Lancet. 401 (10387), 1531-1544 (2023).
  2. Laha, D., Nilubol, N., Boufraqech, M. New Therapies for Advanced Thyroid Cancer. Front Endocrinol. 11, 82(2020).
  3. Cabanillas, M. E., McFadden, D. G., Durante, C. Thyroid cancer. Lancet. 388 (10061), 2783-2795 (2016).
  4. Seib, C. D., Sosa, J. A. Evolving Understanding of the Epidemiology of Thyroid Cancer. Endocrinol Metab Clin North Am. 48 (1), 23-35 (2019).
  5. Bridges, M. C., Daulagala, A. C., Kourtidis, A. LNCcation: lncRNA localization and function. J Cell Biol. 220 (2), e202009045(2021).
  6. Tan, Y. T., et al. LncRNA-mediated posttranslational modifications and reprogramming of energy metabolism in cancer. Cancer Commun (Lond). 41 (2), 109-120 (2021).
  7. Herman, A. B., Tsitsipatis, D., Gorospe, M. Integrated lncRNA function upon genomic and epigenomic regulation. Mol Cell. 82 (12), 2252-2266 (2022).
  8. Baljon, K. J., et al. LncRNA PVT1: as a therapeutic target for breast cancer. Pathol Res Pract. 248, 154675(2023).
  9. He, G. N., et al. Ketamine Induces Ferroptosis of Liver Cancer Cells by Targeting lncRNA PVT1/miR-214-3p/GPX4. Drug Des Dev Ther. 15, 3965-3978 (2021).
  10. Ren, Y., et al. LncRNA PVT1 promotes proliferation, invasion and epithelial-mesenchymal transition of renal cell carcinoma cells through downregulation of miR-16-5p. OncoTargets Ther. 12, 2563-2575 (2019).
  11. Liberti, M. V., Locasale, J. W. The Warburg Effect: How Does it Benefit Cancer Cells. Trends Biochem Sci. 41 (3), 211-218 (2016).
  12. Liao, C., Liu, X., Zhang, C., Zhang, Q. Tumor hypoxia: From basic knowledge to therapeutic implications. Semin Cancer Biol. 88, 172-186 (2023).
  13. Harada, H. Hypoxia-inducible factor 1-mediated characteristic features of cancer cells for tumor radioresistance. J Radiat Res. 57 (Suppl 1), i99-i105 (2016).
  14. Qu, H., et al. LncRNA PVT1 influences breast cancer cells glycolysis through sponging miR-145-5p. Genes Genom. 45 (5), 581-592 (2023).
  15. Sun, J., Zhang, P., Yin, T., Zhang, F., Wang, W. Upregulation of LncRNA PVT1 Facilitates Pancreatic Ductal Adenocarcinoma Cell Progression and Glycolysis by Regulating MiR-519d-3p and HIF-1A. J Cancer. 11 (9), 2572-2579 (2020).
  16. Song, J., et al. Long non-coding RNA PVT1 promotes glycolysis and tumor progression by regulating miR-497/HK2 axis in osteosarcoma. Biochem Bioph Res Co. 490 (2), 217-224 (2017).
  17. Wang, Y., et al. The lncRNA PVT1 regulates nasopharyngeal carcinoma cell proliferation via activating the KAT2A acetyltransferase and stabilizing HIF-1α. Cell Death Differ. 27 (2), 695-710 (2020).
  18. Zhang, D., Zou, X., Song, Y., Wu, D. Long non-coding RNA UPK1A-AS1 promotes glycolysis in hepatocellular carcinoma cells via stabilization of HIF-1α. J South Med Uni. 41 (2), 193-199 (2021).
  19. Livak, K. J., Schmittgen, T. D. Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2−ΔΔCT method. Methods. 25 (4), 402-408 (2001).
  20. Yao, W., et al. Long non-coding RNA PVT1: A promising chemotherapy and radiotherapy sensitizer. Front Oncol. 12, 959208(2022).
  21. Lin, Z., et al. Hypoxia-induced HIF-1α/lncRNA-PMAN inhibits ferroptosis by promoting the cytoplasmic translocation of ELAVL1 in peritoneal dissemination from gastric cancer. Redox Biol. 52, 102312(2022).
  22. Filetti, S., et al. Thyroid cancer: ESMO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and follow-up. Ann Oncol. 30 (12), 1856-1883 (2019).
  23. Grimm, D. Recent Advances in Thyroid Cancer Research. Int J Mol Sci. 23 (9), 4631(2022).
  24. Vaupel, P., Multhoff, G. Revisiting the Warburg effect: historical dogma versus current understanding. J Physiol. 599 (6), 1745-1757 (2021).
  25. Kopecka, J., et al. Hypoxia as a driver of resistance to immunotherapy. Drug Resist Update. 59, 100787(2021).
  26. Zhang, Q., et al. Hypoxia-Induced lncRNA-NEAT1 Sustains the Growth of Hepatocellular Carcinoma via Regulation of miR-199a-3p/UCK2. Front Oncol. 10, 998(2020).
  27. Yang, H., et al. Hypoxia inducible lncRNA-CBSLR modulates ferroptosis through m6A-YTHDF2-dependent modulation of CBS in gastric cancer. J Adv Res. 37, 91-106 (2021).
  28. Ma, Y., et al. lncRNA BSG-AS1 is hypoxia-responsive and promotes hepatocellular carcinoma by enhancing BSG mRNA stability. Biochem Bioph Res Co. 566, 101-107 (2021).
  29. Zhu, Y., et al. A positive feedback regulatory loop involving the lncRNA PVT1 and HIF-1α in pancreatic cancer. J Mol Cell Biol. 13 (9), 676-689 (2021).
  30. Wu, M., et al. PVT1/miR-145-5p/HK2 modulates vascular smooth muscle cells phenotype switch via glycolysis: The new perspective on the spiral artery remodeling. Placenta. 130, 25-33 (2022).
  31. Huang, S. mTOR Signaling in Metabolism and Cancer. Cells. 9 (10), 2278(2020).
  32. Riesco-Eizaguirre, G., et al. Telomerase-driven expression of the sodium iodide symporter (NIS) for in vivo radioiodide treatment of cancer: a new broad-spectrum NIS-mediated antitumor approach. J Clin Endocrinol Metab. 96 (9), E1435-E1443 (2011).
  33. Shen, H., et al. Radioiodine-refractory differentiated thyroid cancer: Molecular mechanisms and therapeutic strategies for radioiodine resistance. Drug Resist Updat. 72, 101013(2024).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

HIF 1 Alpha
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.