מחקר זה קבע הליך אלקטרואקפונקטורה סטנדרטי שמטרתו לטפל בליקויים קוגניטיביים לאחר פגיעה בחוט השדרה. יתרה מזאת, הפרוטוקול לביצוע מבוך Y וניסויי זיהוי אובייקטים חדשניים להערכת יעילות הדיקור החשמלי בשיפור ליקויים קוגניטיביים תואר בפירוט.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
* These authors contributed equally
מחקר זה קבע הליך אלקטרואקפונקטורה סטנדרטי שמטרתו לטפל בליקויים קוגניטיביים לאחר פגיעה בחוט השדרה. יתרה מזאת, הפרוטוקול לביצוע מבוך Y וניסויי זיהוי אובייקטים חדשניים להערכת יעילות הדיקור החשמלי בשיפור ליקויים קוגניטיביים תואר בפירוט.
פגיעת חוט השדרה (SCI) היא מחלה משתקת והרסנית מאוד של מערכת העצבים המרכזית (CNS), אשר לא רק גורמת להפרעות מוטוריות וחושיות בגפיים, אלא גם משבשת את המבנה והתפקוד של ההיפוקמפוס והקורטקס, מה שמוביל לפגיעה קוגניטיבית המשפיעה קשות על איכות חייהם של המטופלים. לכן, חיוני לבחון גישות טיפול יעילות ושיטות הערכה. אלקטרואקפונקטורה (EA) היא טיפול חדשני המשלב דיקור מסורתי עם טכנולוגיית אלקטרותרפיה עכשווית, שיש לה יתרונות של בטיחות גבוהה ותופעות לוואי מועטות, והיא שימשה רבות בניהול SCI. לפי התיאוריה של הרפואה הסינית המסורתית (TCM), כלי המושל מחבר בין המוח לחוט השדרה. לכן, EA בנקודות האדוק הממוקמות על כלי השליטה יכול לשקם ביעילות את תפקודי המוח וחוט השדרה. בפרוטוקול זה השתמשנו בשיטת אלן לבניית מודל ה-SCI. הצגנו פרוצדורת EA שמטרתה לטפל בליקויים קוגניטיביים אצל חולדות עם SCI. יתרה מזאת, תיארנו בפירוט את תהליך הפעולה של מבוך Y וניסוי זיהוי אובייקטים חדשים (NOR) להערכת יעילות EA בשיפור ליקויים קוגניטיביים בעכברים. מחקר זה לא רק מספק פרוטוקול טיפול המשמש כהפניה לפגיעה קוגניטיבית לאחר דלקת נציגות, אלא גם מספק תמיכה ניסויית ראשונית לאימות אסטרטגיות טיפוליות למצב זה ולחקירת מחקר לאחר מכן.
פגיעה בחוט השדרה (SCI) היא הפרעה נפוצה במערכת העצבים המרכזית (CNS), הנגרמת בדרך כלל מנזק לחוט השדרה או למבנים הסובבים אותו כתוצאה מכוחות חיצוניים. מצב זה עלול להוביל לתפקוד חושי, מוטורי ועצבי אוטונומי מתחת לרמת הפציעה1. חשוב מכך, SCI עלול גם לגרום לסיבוכים משניים כגון חרדה, דיכאון וליקוי קוגניטיבי 2,3, המזיקים לשיקום המטופלים ומפחיתים משמעותית את איכות חייהם. מחקרים אפידמיולוגיים רבים מצאו כי הסיכון למחלת אלצהיימר (AD) אצל חולי SCI גבוה משמעותית מזה שבאוכלוסייה הכללית 4,5,6. מחקר נוסף אישר כי שכיחות הפגיעה הקוגניטיבית בקרב חולי SCI עשויה להגיע עד 60%5,7. SCI לא רק מוביל לאטרופיה של הקורטקס המוטורי, אלא גם מפחית פעילות עצבית באזורים המוחיים הקשורים לתפקוד קוגניטיבי8. העלייה בדלקת בהיפוקמפוס, בתלמוס ובקורטקס לאחר SCI נחשבת לתורמת משמעותית לפגיעה קוגניטיבית 9,10,11. שיפור סיבוכים הקשורים ל-SCI, כגון פגיעה קוגניטיבית, הוא חיוני לשיפור השיקום של המטופלים ולהקלה על שילובם מחדש בחברה.
דיקור הוא מרכיב משמעותי ברפואה הסינית המסורתית (TCM), הידוע ביעילותו הקלינית יוצאת הדופן. אלקטרואקפונקטורה (EA) מייצגת טיפול חדשני המשלב דיקור מסורתיעם טכניקות אלקטרותרפיה עכשוויות. הוא מגרה עצבים ושרירים על ידי הפעלת זרם מתח נמוך לנקודות דיקור ספציפיות, ומציע יתרונות טיפוליים להחלמה תפקודית לאחר כאב כרוני ופגיעות במערכת העצבים 13,14,15. מחקרים רבים הראו כי EA יכול לקדם התאוששות נוירולוגית פונקציונלית לאחר SCI ולהפחית סיבוכים כגון כאב נוירופתי, שלפוחית השתן הנוירוגנית וספסטיות 16,17,18,19. לפי תיאוריית ה-TCM, כלי המושל מחובר למוח ולחוט השדרה, ומשפיע על תפקודיהם20. מצאנו כי EA המיושם בנקודות הדקירה Dazhui (GV14) ו-Mingmen (GV4) על כלי השליטה יכול להקל על דלקת עצבית ולעכב את היווצרות צלקות גליאליות, ובכך להקל על התאוששות תפקוד מוטורי לאחר SCI21. יתרה מזאת, המחקרים שלנו קבעו כי EA בנקודות ה-Baihui (GV20) ו-Yintang (GV29) על כלי ה-Governor יכול לשפר את היכולות הקוגניטיביות בעכברי מודל AD22,23. עם זאת, הפוטנציאל של EA בהתמודדות עם ליקוי קוגניטיבי בעקבות SCI עדיין לא נחקר כראוי.
במחקר זה אנו מתארים את שיטות התפעול של EA לטיפול בפגיעה קוגניטיבית בעכברי SCI הכוללים בחירת נקודות דיקור, זווית הדיקור, משך הטיפול ופרטים נוספים. בנוסף, השתמשנו במבחני Y-maze ו-NOR, יחד עם הערכות פתולוגיות, כדי להעריך את יעילות EA בטיפול בפגיעה קוגניטיבית. מחקר זה נועד לספק נקודת ייחוס לטיפול הקליני במצב זה.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל ההליכים הניסיוניים בוצעו בהתאם באופן קפדני להנחיות המכון הלאומי לבריאות לטיפול ושימוש בבעלי חיים במעבדה, ואושרו על ידי ועדת האתיקה לבעלי חיים של אוניברסיטת הרפואה הסינית בבייג'ינג (מזהה אישור: BUCM-2024042505-2065).
1. הכנת בעלי חיים
2. הקמת מודל ה-SCI
הערה: חולדות נמנעו ממים ומזון במשך 8 שעות לפני הניתוח, וכלי הניתוח עוברו עיקור באמצעות אדים בטמפרטורה גבוהה. מודל SCI נבנה באמצעות שינוי של שיטתאלן 24.
3. טיפול ב-EA
4. הערכת תפקוד מוטורי (איור 4)
הערה:בימים ה-1, 7, 14, 21 ו-28 לאחר הניתוח, הוערך תפקוד המוטורי של העכברים בכל קבוצה לפי ציון Basso, Beattie and Bresnahan (BBB).
5. ביצוע ניסוי מבוך ה-Y (איור 5)
הערה: ביום הראשון לאחר התערבות ה-EA(היום ה-29 לניסוי), בוצע ניסוי מבוך Y, שכלל מבחן חילופי ספונטניות ומבחן חקר זרוע חדשני. הליך ניסוי מבוך ה-Y מוצג באיור 5A.
6. ביצוע ניסוי זיהוי אובייקטים חדש (NOR) (איור 6)
הערה: ביום השני לאחר התערבות EA(היום ה-30 לניסוי), בוצע ניסוי NOR. הליך הניסוי של NOR מוצג באיור 6A.
7. ביצוע בדיקת העדפת סוכרוז
הערה: מגורים בכלוב יחיד משמשים למניעת תחרות חברתית על מים, שעלולה לבלבל את התנהגות השתייה.
8. כתמים HE בהיפוקמפוס
9. ניתוח ELISA
10. ניתוח סטטיסטי
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
EA משפרת את תפקוד המוטורי של חולדות SCI
ביום הראשון לאחר הפעלת SCI, ציוני BBB של קבוצת הדגם נרשמו על 0, מה שמעיד על הקמת מודל SCI בהצלחה. במהלךהימים הראשונים, ה-7, ה-14, ה-21 וה-28 לאחר הפעולה, ציוני BBB של קבוצת הדגם היו נמוכים משמעותית מאלו של קבוצת שאם (P < 0.01). ראוי לציין כיבימים ה-7, ה-14 וה-28 לאחר הניתוח, ציוני BBB של קבוצת EA היו גבוהים משמעותית מאלו ש...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
SCI הוא אירוע מלחיץ שגורם לטראומה קשה לפיזיולוגיה ולפסיכולוגיה של המטופלים, מה שמוביל לא רק ללקויות מוטוריות וחושיות אלא גם לפגיעה קוגניטיבית3. כפי שדווח4, הסיכון לירידה קוגניטיבית לאחר SCI גבוה פי 13 מאשר אצל אנשים בריאים. חולים בגיל העמידה ומבוגרים עם SCI מראים רגישות גבוהה יותר ל-AD בהשוואה לעמיתיהם שלא חוו SCI6. לאחר פציעה, מטופלי SCI חייבים להסתגל לאורח חיים חדש ולהשתלב מחדש בחברה. עם זאת, פגיעה קוגניטיבית עלולה...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל המחברים הצהירו על ניגודי עניינים פוטנציאליים.
מחקר זה נתמך על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס' 82374593, 82305381), קרן בניית בתי חולים ברמה גבוהה של שנזן (מס' 24275G1001), הפרויקט הנתמך של תוכנית מדעי הרפואה והבריאות של צ'אנגשו (מס' CSWSQ202302), ופרויקט המחקר העצמאי של סטודנטים לתארים מתקדמים באוניברסיטת הרפואה הסינית בבייג'ינג (מס' ZJKT2025016).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 0.9% תמלח | בייג'ינג סולאיבאו טכנולוגיה בע"מ. | IN9000, עמ' 1022-10 | |
| 4% פאראפורמלדהיד | ביוטיים | P0099 | |
| 75% אלכוהול רפואי, יודופור | בייג'ינג אוביי ביולוגיה מדע וטכנולוגיה בע"מ | OB40126-1, HX0098A | משמש לחיטוי |
| מחטי דיקור | ג'ונגיאן טאיהה בע"מ | ZY500 | |
| מכונת הרדמה לבעלי חיים קטנים | שנגחאי יויאן אינסטרומנטס בע"מ | ABM | |
| מערכת ניתוח התנהגות בעלי חיים | בייג'ינג ג'ונג שי די צ'ואנג טכנולוגיה בע"מ | ZS-XWT-II | |
| מכונה צנטריפוגלית | אפנדורף, גרמניה | 5811FR080384 | |
| מכשיר אלקטרואקופונקטורה | מפעל הכלים הרפואיים שנטו בע"מ | 6805-D | משומש לטיפול באלקטרוקפונקטורה |
| ערכות ELISA | חברת המדע והטכנולוגיה לביולוגיה של ג'יאנגלאי בע"מ | JL18365, JL20896 | משמש לזיהוי רמות IL-1 ו-IL-6 |
| ספוג ג'לטין | חברת פיתוח טכנולוגיה רפואית של ג'יאנגשי שיאנג'ן בע"מ | 24092901 | |
| תמיסת המטוקסילין, תמיסת אאוזין | סיגמא-אלדריץ' | 03971 | משמש לצביעת HE |
| פוגע האופק האינסופי | לקסינגטון, קנטקי, ארצות הברית | IH-0400 | משמש לבניית מודל לפגיעת חוט השדרה |
| איזופלוראן | שנזן רויוודה למדעי החיים וטכנולוגיה בע"מ | R510-22-10 | |
| מיקרוסקופ | אולימפוס | ||
| פניצילין נתרן | קולייבר | CP8271-5g | |
| נתרן פנוברביטלי | סיגמא-אלדריץ' | P3761 | |
| חולדות SD | חברת טכנולוגיית ביולוגיה סיבייפו (בייג'ינג) בע"מ | SCXK2019-0010 | |
| SPSS | יבמ | גרסה 26.0 | תוכנה סטטיסטית |
| סוקרוזה | Beijing Solarbio Technology Co., Ltd | S8271 | |
| קסילן | שנגחאי אלאדין ביוכימיה טכנולוגיה בע"מ | X112050 |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.