פרוטוקול זה מתאר את הקמת מודל עכברוש לדיכאון לאחר שבץ (PSD) על ידי שילוב חסימת עורק המוח האמצעי (MCAO) עם לחץ כרוני קל, ריסון התנהגותי ומגורים בידוד, והערכת ההשפעות הטיפוליות של מרשם Yi-nao-jie-yu (YNJYP) באמצעות בדיקות התנהגות.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
השפעת מרשם Yi-Nao-Jie-Yu על דיכאון לאחר שבץ בעכברים המשתמשים בחסימת עורק המוח האמצעי בשילוב עם ריסון התנהגותי
במאמר זה
סיכום
תקציר
דיכאון לאחר שבץ (PSD) הוא סיבוך נפוץ וניתן לטיפול בשבץ, המאופיין בתסמינים דיכאוניים וסומטיים הפוגעים בהחלמה ובאיכות החיים של המטופל. מחקר זה מתאר פרוטוקול המשלב חסימת עורק מוחי אמצעי (MCAO) עם ריסון התנהגותי ובידוד ליצירת מודל PSD לעכברים, ומעריך את ההשפעה הטיפולית של Yi-nao-jie-yu Prescription (YNJYP) על נוירוגנזה בוגרת בעכברי PSD. לצורך הקמת המודל, חולדות בקבוצות שבץ, PSD, פלואוקסטין הידרוכלוריד (FXT) ו-YNJYP עברו MCAO: תפר מונופילמנט הוקדם מהעורק הקרוטיד הפנימי לעורק המוחי האמצעי (MCA) למשך שעתיים של איסכמיה, ואחריו רפרפוזיה. מהיום השביעי שלאחר MCAO, חולדות בקבוצות PSD, FXT ו-YNJYP הושבו ליחיד ומוגבלות בפלטפורמה מותאמת בצורת T למשך שעתיים ביום במשך 7 ימים. הערכות ההתנהגות כללו את מבחן השחייה הכפויה (FST, לייאוש), מבחן צריכת סוכרוז (SCT, לאנהדוניה), ובדיקת שדה פתוח (OFT, להתנהגות חקרנית). בשבועות 4 ו-8 לאחר השבץ, חולדות PSD הראו זמן אי-ניידות ארוך יותר ב-FST והעדפת סוכרוז נמוכה יותר ב-SCT מאשר חולדות שבץ (P < 0.01). YNJYP הפך את ההתנהגויות הדמויות-דיכאון הללו (P < 0.01), עם יעילות דומה ל-FXT. פרוטוקול זה מאשר את תקפות מודל PSD ואת הפוטנציאל הטיפולי של YNJYP, הנתמך בניסויים קפדניים וניתוח נתונים.
מבוא
דיכאון לאחר שבץ (PSD) הוא סיבוך נפוץ וניתן לטיפול בשבץ, המשפיע באופן משמעותי על תהליך השיקום ואיכות החיים של המטופלים. חולי PSD לא רק סובלים מליקויים תפקודיים פיזיים, אלא גם מתמודדים עם הפרעות נפשיות כמו מצב רוח ירוד ואובדן עניין. דבר זה מעכב מאוד את התאוששות התפקודים הנוירולוגיים ואף מעלה את שיעור התמותה. נכון להיום, הפתוגנזה של PSD מורכבת וכוללת היבטים רבים כגון נוירוביולוגיה, חוסר איזון בנוירוטרנסמיטרים ותגובה דלקתית. יש צורך דחוף לחקור לעומק שיטות התערבות יעילות.
המטרה הכוללת של שיטה זו היא להקים מודל עכברוש אמין וניתן לשחזור של PSD, המדמה מקרוב את המצב האנושי על ידי שילוב של חסימת עורק מוחי אמצעי (MCAO....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
פרוטוקול מחקר בעלי החיים אושר על ידי ועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת הרפואה הסינית בבייג'ינג. החומרים והציוד בהם משתמשים מופיעים בטבלת החומרים.
1. הכנה
- יש להשיג 216 חולדות זכרים ללא פתוגן ספציפי (SPF) מסוג Sprague-Dawley (SD), במשקל 300-320 גרם.
- הסתגל העכברים לסביבת המגורים למשך שבוע לפני הניסוי.
- שמרו על תנאי מגורים בטמפרטורה של 23 ± 3°C, 45% ± 5% לחות, ומחזור אור/חושך של 12 שעות (אורות דלוקים ב-8:00 בבוקר, כיבוי ב-20:00).
- יש חמישה חולדות בכל כלוב עם גישה חופשית למזון ומים סטנדרטיים סטריליים.
הערה: יש לצמצם את מספר ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
בסך הכל הוקמו 5 קבוצות ניסוי במחקר זה לצורך גילוי רלוונטי. לאחר ניתוח סטטיסטי של נתוני ההתנהגות של כל קבוצת חולדות, נמצא כי בשבוע הרביעי של הניסוי, זמן חוסר התנועה של חולדות קבוצת PSD ב-FST עלה משמעותית בהשוואה לעכברי קבוצת השבץ, וההבדל בין שתי הקבוצות היה מובהק סטטיסטית (P < 0.01); במקביל, העדפת הסוכרוז של חולדות קבוצת PSD ב-SCT הייתה נמוכה משמעותית מזו של חולדות קבוצת השבץ, וההבדלים בין שתי הקבוצות בשבועות הרביעי והשוני של הניסוי היו מובהקים סטטיסטית (P < 0.01). בהתבסס על השינויים במדד.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
בתהליך בניית מודל האיסכמיה של מוח העכברים, קיימות שיטות מידול שונות, כולל שיטת קשירה, שיטת קרניוטומיה, שיטת חנק ושיטת חסימת חוטים. בהשוואה לשלוש שיטות המידול: קשירה, קרניוטומיה ואסקסיה, שיטת חסימת החוטים מציגה יתרונות משמעותיים וייחודיים. היתרונות הללו טמונים בעיקר בשלושה היבטים מרכזיים: האופי המינימלי הפולשני של הפעולה, דיוק בקרת הזמן והמרחב, ואמינות הדגם 1,2,3.
ראשי.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין מה לחשוף.
תודות
יואנקאי סו ויונגהאו סון כתבו את כתב היד, כולל פרשנות התוצאות וחלק הדיון. הוילינג טיאן ערך את הניסויים וניתח את הנתונים. נינג דינג ושין וואנג סקרו את כתב היד. זיטונג יאנג וג'ינגיאו ג'או תרמו לחיפוש הנתונים.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| זכרים בוגרים של חולדות ספרג-דולי | מעבדת Vital River לטכנולוגיית בעלי חיים, בייג'ינג, סין | לא. SCXK2012-0001 | 300– 320 גרם |
| קפסולות פלואוקסטין הידרוכלוריד | פאתאון צרפת, ג'יאנגסו, סין | 0943A | |
| גרגירי YNJYP | המחלקה לרוקחות, בית החולים השלישי המסונף של אוניברסיטת הרפואה הסינית בבייג'ינג | תוצרת בית | |
| תיבה פתוחה למבחן שדה פתוח | תוצרת בית | - | |
| נתרן פנטופנוברביטל | תאגיד סיגמא של אמריקה | P3761-5 | |
| חוט ההסתרה | בייג'ינג שאדונג ביוטכנולוגיה בע"מ | 2838-A4 | |
| מיכל מים לניסוי שחייה כפויה | תוצרת בית | - |
מקורות
- Sun, P., et al. Effects of "Tong-du-tiao-shen" acupuncture on hippocampal neuron protection and monoamine neurotransmitters in rats with post-stroke depression. Chin. Acupunct Moxibustion. 39 (7), 741-747 (2019).
- Sun, M., et al.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
