הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר מחקר

ההשפעות הסיבתיות של מטבוליטים בפלזמה על פגיעת גיד אכילס: מחקר אקראי מנדלי

268 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69807

⸱

27 במרץ 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Orthopaedic Centre Hand-Foot Surgery, People's Hospital of Ningxia Hui Autonomous Region, Ningxia Medical University, 2Ningxia Yinchuan Energy College, Nursing College, 3General Surgery Department, People's Hospital of Ningxia Hui Autonomous Region, Ningxia Medical University

במאמר זה

סיכום

כאן, אנו מציגים פרוטוקול משולב של אקראיות מנדלית ופרוטוקול אימות ניסיוני לזיהוי מטבוליטים סיבתיים בפגיעת גיד אכילס, זיהוי 19 מטבוליטים בפלזמה עם קשרים סיבתיים לפגיעת גיד אכילס, ומדגימה את היישום הטיפולי של 5,6-דיהידרותימין והידרוקסיאספרגין לקידום תיקון רקמות ולהפחתת דלקת.

תקציר

כדי לחקור את ההשפעות הסיבתיות של מטבוליטים בפלזמה על התקדמות והחלמה של פגיעת גיד אכילס (ATI), יושמה רנדומיזציה מנדלית (MR) בגישה של שתי דגימות עם נתונים גנטיים משני מערכי נתונים גדולים. נתוני ATI נאספו מפרויקט IEU-OpenGWAS (ebi-a-GCST90018895), בעוד שנתוני מטבוליט הפלזמה כללו 1,400 מטבוליטים. זוהו משתנים אינסטרומנטליים משמעותיים (IVs) למטבוליטים, וחמש שיטות MR - IVW, MR-Egger, חציון משוקלל, מצב פשוט ומצב משוקלל - יושמו להערכת קשרים סיבתיים. ניתוח MRI הפוך בוצע כדי לבחון את השפעת ATI על רמות מטבוליטים. תיקון רקמות והבעה של IL-6, TNF-α, VEGFA ו-TGF-β1 ברקמת גיד אכילס של העכבר הוערכו ביום השביעי לאחר הטיפול עם 5,6-דיהידרותימין (Dih) והידרוקסיאספרגין (Hyd) באמצעות צביעת H&E ו-Western Blot. ניתוח MR זיהה 19 מטבוליטים עם קשרים סיבתיים משמעותיים ל-ATI. מתוכם, 12 מטבוליטים, כולל Dih (IVW: OR = 1.197, רווח בר-סמך 95%: 1.074-1.334; P = 0.001) ופרגננדיול-3-גלוקורוניד (IVW: OR = 1.098, רווח בר-סמך 95%: 1.023-1.177; P = 0.001), היו קשורים באופן חיובי להתקדמות ATI. לעומת זאת, 7 מטבוליטים, כגון Hyd (IVW: OR = 0.789, רווח בר-סמך 95%: 0.707-0.880; P < 0.001), נקשרו להתאוששות ב-ATI. ניתוח MR הפוך לא הצביע על השפעות סיבתיות משמעותיות של ATI על רמות מטבוליטים, מה שמרמז על קשר חד-כיווני. ניתוחי צילום רנטגן ו-H&E הראו כי טיפול Dih ו-Hyd שיפר משמעותית את ריפוי גיד אכילס באופן תלוי במינון. בנוסף, טיפול Dih ו-Hyd הפחית באופן ניכר את ביטוי IL-6 ו-TNF-α (P < 0.05) תוך העלאת רמות VEGFA ו-TGF-β (P < 0.05), מה שמעיד על ירידה בדלקת וקידום תיקון רקמות. מחקר זה זיהה קשרים סיבתיים פוטנציאליים בין מטבוליטים ספציפיים בפלזמה לתוצאות ATI. ממצאים אלו עשויים להנחות אסטרטגיות טיפוליות עתידיות ולהדגיש את השימושיות של MR בחקר קשרים בין מטבוליט למחלה.

מבוא

פציעת גיד אכילס (ATI) היא מצב נפוץ ומשתק במערכת השריר-שלד, במיוחד בקרב ספורטאים ואנשים פעילים פיזית 1,2. גיד אכילס, הגיד הגדול והחזק ביותר בגוף האדם, ממלא תפקיד מרכזי בתנועה, ומעביר כוחות משרירי השוק לעקב במהלך פעילויות כמו הליכה, ריצה וקפיצה 3,4,5,6. אספקת הדם המוגבלת שלו והלחץ המכני הגבוה שהוא סובל ממנו הופכים אותו לפגיע במיוחד לשימוש יתר ופציעות 2,7. ה-ATI מתבטא בצורות שונות, החל מגידים קלה ועד קרע מוחלט, הגורם לכאב משמעותי, פגיעה בתנועה ושיקום ממושך 8,9. למרות התקדמות בטיפול, ATI לעיתים קרובות גורם לכאב מתמשך, ירידה בניידות וזמני החלמה ממושכים, עם סיכון מוגבר לסיבוכים כרוניים ופציעה חוזרת 5,10,11,12.

מחקרים עדכניים הדגישו את התפקיד הקריטי של מטבוליטים בפלזמה בתהליך הריפוי של ATI13,14. מטבוליטים אלו, המעורבים במסלולים ביוכימיים שונים, נחשבים כמשפיעים על גורמים מרכזיים כמו דלקת, תיקון רקמותובריאות הגידים. לדוגמה, חומצות אמינו וליפידים ספציפיות חיוניות לסינתזת קולגן ולניהול לחץ חמצוני, שניהם חיוניים בפתולוגיית גידים16,17. פלזמה עשירה בטסיות (PRP), עשירה בגורמי גדילה כגון PDGF, TGF-β, VEGF ו-IGF, הראתה פוטנציאל בקידום ריפוי גידים, אם כי יעילותה בטיפול בגיד אכילס כרוניתעדיין שנויה במחלוקת. בשנים האחרונות, טכנולוגיות אומיקס בעלות תפוקה גבוהה, כגון מטבולומיקה ופרוטאומיקה, סיפקו הזדמנויות חסרות תקדים לחקור את הנוף המולקולרי של תנאים מורכבים כמו ATI18,19. טכנולוגיות מטבולומיות מתקדמות סייעו בזיהוי סמנים ביולוגיים הקשורים לתוצאות ATI, ומספקות תובנות כיצד מטבוליטים מסוימים משפיעים על התקדמות הפציעות וההחלמה.

פרופיל מטבוליטים וניתוח מסלולים מטבוליים הפכו לגישות עוצמתיות לזיהוי סמנים ביולוגיים ונתיבים הקשורים לפציעה20,21. רנדומיזציה מנדלית (MR) היא שיטת הסקה סיבתית חזקה המשתמשת בווריאנטים גנטיים כמשתנים אינסטרומנטליים (IVs) כדי להתמודד עם הטיות מבלבלות, הנפוצות במחקרים אפידמיולוגייםמסורתיים 22,23,24,25,26,27. MR שימושי במיוחד לחקר קשרים סיבתיים בין חשיפות, כמו מטבוליטים בפלזמה, לבין תוצאות כמו ATI. בניגוד למחקרים תצפיתיים קונבנציונליים, הרגישים לסיבתיות מבלבלת והפוכה, MR משתמש בווריאנטים גנטיים כ-IV כדי לספק הסקות סיבתיות חזקות יותר. הבנה מעמיקה יותר של האופן שבו מטבוליטים בפלזמה משפיעים על בריאות הגידים חיונית לקידום אסטרטגיות טיפוליות ולשיפור תוצאות ההחלמה.

בהתבסס על ההתקדמות הזו, המחקר הנוכחי בוחן את התפקיד הסיבתי של מטבוליטים בפלזמה ב-ATI באמצעות MR. נותחו וריאציות גנטיות הקשורות לרמות מטבוליטים כדי לזהות מטבוליטים ספציפיים הקשורים להתפתחות ולהתאוששות של ATI. בנוסף, מטבוליטים מועמדים, כגון 5,6-דיהידרותימין (Dih) והידרוקסיאספרגין (Hyd), אומתו בניסוי במודלים של בעלי חיים כדי להבהיר את השפעתם על מהלך והחלמת ATI.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

אישור אתי והסכמה להשתתפות

כל עיצובי הניסויים בבעלי חיים בוצעו בקפדנות בהתאם לאמצעי ניהול בעלי החיים של מעבדת מחוז נינגשיה ואושרו על ידי ועדת האתיקה של בית החולים העממי של אזור נינגשיה האוטונומי של חווי, אוניברסיטת הרפואה נינגשיה.

עיצוב המחקר

מחקר זה חקר את הקשרים הסיבתיים בין 1,400 מטבוליטים של פלזמה לבין ATI תוך שימוש בשיטת MR דו-מדגמית. כדי להבטיח את תקפות ה-IVs בהסקה סיבתית, יש למלא שלוש הנחות קריטיות: (1) השונות הגנטית קשורה ישירות לחשיפה הרצויה; (2) השונות הגנטית אינה מתבלבלת על ידי גורמים פוטנציאליים לבלבלים בין החשיפה לתוצאה; ו-(3) השונות הגנטית משפיעה על התוצאה אך ורק דרך החשיפה ולא דרך מסלולים חלופיים.

מקורות נתוני GWAS עבור ATI

הנתונים למחקר האסוציאציה הגנומית (GWAS) על ATI נאספו מפרויקט IEU-OpenGWAS (https://gwas.mrcieu.ac.uk/), תוך שימוש ספציפי במאגר הנתונים ebi-a-GCST90018895. ניתוח GWAS כלל 357,658 פרטים ממוצא אירופי, 7,746 מקרים ו-349,912 ביקורת. לאחר נהלי בקרת איכות, זוהו בסך הכל 19,072,056 פולימורפיזמים חד-נוקלאוטידיים (SNPs). הליכי בקרת איכות כללו הסרת SNPs עם תדירות אללים מינורית<0.01, שיווי משקל הארדי-ויינברג P<1×10-⁶, ושיעור קריאת גנוטיפ <0.95. הסטרטיפיקציה של האוכלוסייה הוערכה באמצעות ניתוח רכיבים עיקריים, וגורם האינפלציה הגנומי (λ) חושב להערכת הטיה שיטתית.

מקורות נתוני GWAS עבור מטבוליטים בפלזמה

מאגר נתוני גורמי החשיפה כולל נתוני GWAS עבור 1,400 מטבוליטים בפלזמה, הכוללים 1,091 רמות מטבוליטים ו-309 יחסי מטבוליטים, כפי שמופיעים במאגר הנתונים של GWAS (https://www.ebi.ac.uk/gwas/studies/GCST90199621-90201020). ניתוחי MR הוגבלו לאנשים ממוצא אירופי. מידע מפורט על מאגר הנתונים מסופק בחומרים משלימים בטבלה S1.

בחירת IVs

בזיהוי עירויים, הסף למשמעות סטטיסטית של 19,072,056 SNPs הקשור למטבוליט הפלזמה נקבע ב-P < 1 × 10-5. כדי להבטיח את עצמאות הניתוחים, SNPs אוגדו באמצעות ספים של r2 = 0.001 וקילובסיס (kb) = 10,000, ללא 19,037,213 SNPsעם r 2 > 0.001 ו-kb < 10,000 כדי לבטל השפעות אפשריות של חוסר שוויון קישור (LD). SNPs עם ערכי F סטטיסטיים < 10 הוצאו מהניתוחים הנוספים בשל ההטרוגניות הגבוהה שלהם, בעוד ש-34,843 SNPs שעמדו בקריטריונים נשמרו כ-IVs תקפים.

בעלי חיים ועיצוב ניסויים

כל הניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם בקפדנות לאמצעי ניהול בעלי החיים של מעבדת מחוז נינגשיה ואושרו על ידי ועדת האתיקה של בית החולים העממי של האזור האוטונומי נינגשיה הוי, אוניברסיטת נינגשיה לרפואה. עכברי BALB/c זכרים (בני 8 שבועות, דרגת SPF) נרכשו מ-Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (בייג'ינג, סין). העכברים התרגלו לשבוע בסביבה מבוקרת (טמפרטורה 23 ± 1°C, לחות 60 ± 10%), עם גישה חופשית למזון ומים סטנדרטיים, ומחזור של 12 שעות אור ו-12 שעות חושך. לאחר ההסתגלות, הוקם מודל לפציעת גיד עכברו. לאחר חתך עור לאורך זמן, נחשף גיד אכילס השמאלי ובוצע חתך רוחבי סטנדרטי בעובי מלא באמצע הגיד באמצעות מספריים מיקרוכירורגיים. הגיד תוקן מיד עם תפרים לא נספגים בקוטר 6-0 תחת מיקרוסקופ סטריאו. מיד לאחר הניתוח, בוצעה הדמיית רנטגן כדי לאמת את ההקמה המוצלחת של מודל העכבר ATI. במקביל, צולמו תמונות רנטגן עבור קבוצת הביקורת בתנאי הרדמה זהים כדי לשמש כבקרה ריקה28. כל ההליכים בוצעו בהרדמה כללית שנגרמה על ידי הזרקה תוך-פריטוניאלית של פנטוברביטל נתרן (50 מ"ג·ק"ג), ומשככי כאבים לאחר הניתוח קיבלו בופרנורפין (0.05 מ"ג·ק"ג-1, תת-עורית) כל 12 שעות במשך 48 שעותו-29 שעות. לאחר ההשראה המוצלחת של המודל, העכברים חולקו באקראי לקבוצות הבאות: קבוצות ביקורת, מודל וקבוצות טיפול שקיבלו Dih במינונים נמוכים (10 מ"ג·ק"ג-1, LD-Hyd), בינוניים (30 מ"ג·ק"ג-1, MD-Hyd) וגבוהים (50 מ"ג·ק"ג-1, HD-Hyd). חישוב גודל המדגם: בהתבסס על נתונים ראשוניים המראים שיפור של 40% בציוני ההחלמה בטיפול במטבוליטים (SD = 15%), נקבע כי n = 6 עכברים בכל קבוצה יספקו 80% כוח לזיהוי ההבדל הזה ב-α = 0.05 (דו-זנב). האקראיות בוצעה באמצעות מספרים אקראיים שנוצרו במחשב על ידי חוקר שהיה עיוור להקצאת קבוצות. נהלים ניסיוניים והערכות תוצאות בוצעו על ידי חוקרים עיוורים לשיבוצים הקבוצתיים30.

צביעת המטוקסילין ואאוזין (HE)

ביום השביעי לאחר הטיפול, העכברים הועברו בהרדמה עמוקה שנגרמה על ידי הזרקה תוך-פריטוניאלית של פנטוברביטל נתרן (100 מ"ג·ק"ג-1), מה שהבטיח אובדן מוחלט של רפלקסים לפני איסוף הרקמות בהתאם. רקמת גיד אכילס הפגועה, כולל חלק קטן מהרקמה הרכה הסובבת, נקטפה ועובדה בקפידה. חתיכת עורבגודל 15 מ"מ 2 שמרכזה בגיד אכילס הוסרה. דגימות העור קיבעו בתמיסת פרפורמלדהיד של 4% בטמפרטורת החדר במשך 48 שעות, לאחר מכן התייבשות, הטמעת פרפין וחתך של 5 מיקרון. מאפיינים מבניים של עור הפצע, יצירת רקמת גרנולציה, וחדירת תאי דלקת הוערכו באמצעות צביעת H&E. להערכה היסטולוגית, קטעים עברו דה-פרפין בקסילן (2 ×-10 דקות), הודרו מחדש באמצעות אתנול מדורג (100%, 95%, 85% ו-75%, 5 דקות כל אחד), ונשטפו במים מזוקקים. המחסניות הוצבעו בהמטיקסילין האריס במשך 5 דקות, נשטפו במי ברז זורמים במשך 5 דקות, הובדלו באלכוהול חומצי 1% למשך 10 שניות, וכחולו במים של 0.2% אמוניה למשך 30 שניות. לאחר הכביסה, החלקים צובעו ב-0.5% אאוזין למשך 2 דקות, לאחר מכן התייבשות, ניקוי והרכבה. אמינות הערכה היסטולוגית: כדי להבטיח דיוק מדידה, 20% מהדגימות שנבחרו באקראי דורגו באופן עצמאי על ידי שני צופים עיוורים. אמינות בין מעריכים הוערכה באמצעות מקדם הקורלציה התוך-מחלקתי (ICC). ה-ICC לארגון קולגן היה 0.89 (רווח בר-סמך 95%: 0.81-0.94), עבור ניוון רקמות 0.92 (רווח בר-סמך 95%: 0.86-0.96), ולחדירה של תאי דלקת 0.87 (רווח בר-סמך 95%: 0.78-0.93), מה שמעיד על אמינות מצוינת. אמינות המעריך הוערכה על ידי כך שצופה אחד קיבל דירוג מחדש של 15% מהדגימות לאחר מרווח של שבועיים, מה שהניב ערכי ICC > 0.85 לכל הפרמטרים31.

ניתוח כתמים מערביים

ביטוי החלבון נותח על ידי Western blot. כימות החלבון בוצע באמצעות ערכת בדיקת ריכוזי החלבון BCA. כמויות שוות של חלבון הופרדו על ידי אלקטרופורזה של 10% נתרן דודציל סולפט-פוליאקרילאמיד ג'ל אלקטרופורזה (SDS-PAGE) והועברו לממברנת ניטרוצלולוזה. הממברנה נחסמה במשך שעה עם 5% חלב דל שומן במי מלח עם טריס-בופר המכיל 0.1% טווין-20 בטמפרטורת החדר. הממברנות נדגרו במהלך הלילה בטמפרטורה של 4°C עם נוגדנים ראשוניים ל-VEGFA (1:1000, ab46154), TGF-β1 (1:1000, 21898-1-AP), IL-6 (1:1000, 26404-1-AP), ו-TNF-α (1:1000, 17590-1-AP). לאחר שלוש שטיפות עם PBS, הממברנות נדגרו בנוגדנים משניים (1:5000) במשך 90 דקות בטמפרטורת החדר. רצועות החלבון הוצגו באמצעות ערכת הסובסטרט הכימילומינסצנטי ECL (ראו טבלת חומרים לפרטים) בהתאם לפרוטוקול היצרן ונותחו באמצעות תוכנת ImageJ (גרסה 1.8; המכונים הלאומיים לבריאות). GAPDH (10494-1-AP) שימש כבקרת טעינה.

ניתוח סטטיסטי

ניתוחים סטטיסטיים בוצעו באמצעות תוכנת R Studio. חבילות TwoSampleMR ו-ieugwasr R שימשו לחילוץ נתוני חשיפה ולסינון עירויים תקפים, כולל קיבושים (r² < 0.001, גודל חלון = 10,000 קילובייט), הרמוניזציה של אללים וחישוב סטטיסטי F (F = β²_exposure/SE²_exposure). לניתוחי MR ו-MR הפוך, השתמשנו בחבילות VariantAnnotation, gwasglue ו-TwoSampleMR, שאפשרו הסקה סיבתית חזקה ובדיקות רגישות. נערך מחקר MR דו-דגימי לבחינת תכונות הקשורות למטבוליט בפלזמה. חמש גישות אנליטיות שונות שימשו: משקל הפוך (IVW), MR-Egger, חציון משוקלל (WM), מצב פשוט, ומצב משוקלל. התוצאות הראשוניות נקבעו בשיטת IVW, עם מובהקות סטטיסטית שנקבעה ב-P < 0.01. שיטת IVW מקצה משקלים כדי למזער את השפעת השנות, ומספקת הערכות אפקט מדויקות יותר. רגרסיית MR-Egger שימשה להערכת פליאוטרופיה (התופעה שבה גנים משפיעים על מספר תכונות), כאשר פליאוטרופיה אופקית הוערכה לפי ערך P של החתך (P > 0.05), והטרוגניות נבדקה באמצעות שיטת IVW בשילוב עם סטטיסטיקת Q של MR-Egger. לא נצפה הטרוגניות משמעותית כאשר P > 0.05. תיקון בדיקות מרובות יושם באמצעות שיטת שיעור הגילוי השגוי של בנג'מיני-הוכברג (FDR), כאשר FDR < 0.05 נחשב למשמעותי. ההטרוגניות נמדדה באמצעות סטטיסטיקת Q של קוקרן וסטטיסטיקת I2 , כאשר I2 > 50% הצביעו על הטרוגניות משמעותית. עבור ערכי I2 , חושבו מרווחי ביטחון של 95% לפי השיטה שתוארה על ידי יואנידיס ואחרים. ניתוחי רגישות בוצעו על ידי הסרה רציפה של כל SNP כדי להעריך את השפעת הווריאנטים הבודדים על התוצאות הכוללות.

כדי להעריך את אמינות המדידה, בוצעו ניתוחי מבחן-בדיקה חוזרת על מדדי תוצאה מרכזיים (כימות WB וניקוד היסטולוגי) באמצעות מקדמי מתאם תוך-מחלקתיים (ICCs). ה-ICC שימש להערכת אמינות בין מדרגים ובתוך המדרג של כימות ודירוג היסטולוגי של Western Blot (WB). הקריטריונים פורשו כך: מתחת ל-0.50 (גרוע), בין 0.50 ל-0.75 (בינונית), בין 0.75 ל-0.90 (טוב), ומעל 0.90 (מצוין)32. שלושה חוקרים עצמאיים העריכו בעיוורון את אותה קבוצת דגימות בשתי נקודות זמן המופרדות בשבוע אחד. ICCs לכימות ווסטרן בלוט של IL-6, TNF-α, VEGFA ו-TGF-β נעו בין 0.87 ל-0.93, מה שמעיד על אמינות מצוינת. מדדי ICC לניקוד היסטולוגי היו 0.85 לארגון קולגן ו-0.82 להערכת ניאווסקולריזציה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

קשר סיבתי בין 1,400 מטבוליטים של פלזמה לבין ATI

בוצע ניתוח MR מקיף של 1,400 מטבוליטים בפלזמה כדי להעריך את ההשפעות הסיבתיות שלהם על ATI. הניתוח הראשוני השתמש בגישת IVW, עם בקרות קפדניות ל-LD ולגורמים פוטנציאליים לבלבלים, כדי לזהות מטבוליטים המשפיעים משמעותית על התקדמות והתאוששות ATI. איור 1 מציג את הקשרים הסיבתיים בין 144 מטבוליטים בפלזמה לבין ATI, כאשר הקשר נחשב למובהק סטטיסטית אם הגיע ערך P < 0.050 לפחות באחת מהגישות האנליטיות MR ששימשו במחקר...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מחקר זה ביצע ניתוח MR מקיף כדי לחקור את הקשרים הסיבתיים בין 1,400 מטבוליטים בפלזמה לבין ATI. זוהו תשעה-עשר מטבוליטים בפלזמה כקשורים באופן מובהק להתקדמות ולהחלמה של ATI, כאשר Dih ו-Hyd הפכו לגורמים מרכזיים המשפיעים על תוצאות ATI. ניסויים מאוחרים יותר ב-in vivo אישרו את התפקידים המועילים של מטבוליטים אלו בקידום ריפוי הגידים. הטיפול ב-Dih ו-Hyd הביא לירידה משמעותית התלויה במינון של הציטוקינים הפרו-דלקתיים IL-6 ו-TNF-α (P < 0.001). במקביל, הביטוי של VEGFA ו-TGF-β – סמנים קריטיים לאנ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים מתחרים.

תודות

מחקר יישומים קליניים להערכת פלורה במעי וטיפול מבוסס שלבים בכיבים כרוניים בכף רגל סוכרתית, פרויקט חדשנות במדע וטכנולוגיה של יינצ'ואן (2024SF005). מחקר יישומים על השפעות שיטות ניתוח שונות על אספקת דם ברקמות הפריטנדליות ותיקון ביומכני של קרע חריף בגיד אכילס סגור במסגרת תוכנית המחקר והפיתוח המרכזית של נינגשיה (2019BEG3036).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
5,6-דיהידרותימיןריאגנט696-04-8ריאגנט
ערכת בדיקת חלבון BCAריאגנטP0012ריאגנט
ערכת מצע כימילומינסנציה ECLריאגנטP0018Sריאגנט
נוגדן GAPDHנוגדן10494-1-APנוגדן
ערכת צביעת המטוקסילין ואיאוסיןריאגנטG1120ריאגנט
הידרוקסיאספרגיןריאגנטH1126ריאגנט
נוגדן IL-6נוגדן26404-1-APנוגדן
ImageJתוכנהגרסה 1.8תוכנה
ממברנת ניטרוצלולוזמתכלהHATF08130מתכלה
פאראפורמלדהידריאגנטP0099-3Lריאגנט
RStudioתוכנהגרסה 4.5.2תוכנה
ערכת הכנת ג'ל SDS-PAGEריאגנטP0012ACריאגנט
נתרן פנטוברביטלהרדמה200-323-9הרדמה
TGF-&בטא; נוגדן אחדנוגדן21898-1-APנוגדן
TNF-α נוגדןנוגדן17590-1-APנוגדן
נוגדן VEGFAנוגדןAB46154נוגדן
מערכת רנטגןכלי נגינהMX-20כלי נגינה

מקורות

  1. Kvist, M. Achilles tendon injuries in athletes. Sports Med. 18 (3), 173-201 (1994).
  2. Järvinen, T. A., et al. Achilles tendon injuries. Curr Opin Rheumatol. 13 (2), 150-155 (2001).
  3. Barfod, K. W. Achilles tendon rupture; assessment of nonoperative treatment. Dan Med J. 61 (4), B4837(2014).
  4. Buddecke, D. Jr Acute Achilles Tendon Ruptures. Clin Podiatr Med Surg. 38 (2), 201-226 (2021).
  5. Bullock, M., Pierson, Z. Achilles Tendon Rupture. Clin Podiatr Med Surg. 41 (3), 535-549 (2024).
  6. Oliva, F., et al. Influence of Exercise on Musculoskeletal Disorders Associated with Gut Microbiota: A Narrative Review. MLTJ. 13 (1), (2023).
  7. Caldwell, J. E., Vosseller, J. T. Maximizing Return to Sports After Achilles Tendon Rupture in Athletes. Foot Ankle Clin. 24 (3), (2019).
  8. King, C. M., Vartivarian, M. Achilles Tendon Rupture Repair: Simple to Complex. Clin Podiatr Med Surg. 40 (1), 75-96 (2023).
  9. Kraeutler, M. J., Purcell, J. M., Hunt, K. J. Chronic Achilles Tendon Ruptures. Foot Ankle Int. 38 (8), 921-929 (2017).
  10. Vascellari, A., et al. Orthobiologics Injection Therapies in the Treatment of Muscle and Tendon Disorders in Athletes: Fact or Fake. MLTJ. 14 (2), (2024).
  11. Winnicki, K., Ochała-Kłos, A., Rutowicz, B., Pękala, P. A., Tomaszewski, K. A. Functional anatomy, histology and biomechanics of the human Achilles tendon - A comprehensive review. Ann Anat. 229, 151461(2020).
  12. Strom, A. C., Casillas, M. M. Achilles tendon rehabilitation. Foot Ankle Clin. 14 (4), 773-782 (2009).
  13. Sun, J. Y., Li, C., Du, F. Y. Adenylate cyclase activates the cAMP signalling pathway to enhance platelet-rich plasma-treated Achilles tendon disease,a theoretical bioinformatics-based study. World Journal of Orthopedics. 15 (2), 192-200 (2024).
  14. Restuccia, G., Varchetta, G. E. Platelet rich plasma (PRP) in the surgical treatment of Haglund's syndrome: the use of PRP membranes as an intra-operative local adjuvant. medicinski glasnik. 21 (1), 196-202 (2024).
  15. Wang, K., Cheng, L., He, B. Therapeutic effects of asperosaponin VI in rabbit tendon disease. Regen Ther. 20, 1-8 (2022).
  16. Shen, H., Lane, R. A. Extracellular Vesicles From Primed Adipose-Derived Stem Cells Enhance Achilles Tendon Repair by Reducing Inflammation and Promoting Intrinsic Healing. Stem Cells. 41 (6), 617-627 (2023).
  17. Bisciotti, G. N., et al. Achilles Tendon Repair after Tenorraphy Imaging and the Doughnut Metaphor. Int J Environ Res Public Health. 20 (11), (2023).
  18. Roh, C. Metabolomics in Radiation-Induced Biological Dosimetry: A Mini-Review and a Polyamine Study. Biomolecules. 8 (2), (2018).
  19. Malinowska, J. M., et al. Derivation of metabolic point of departure using high-throughput in vitro metabolomics: investigating the importance of sampling time points on benchmark concentration values in the HepaRG cell line. Arch Toxicol. 97 (3), 721-735 (2023).
  20. He, L., et al. Causal Associations of Obesity With Achilles Tendinopathy: A Two-Sample Mendelian Randomization Study. Front Endocrinol (Lausanne). 13, 902142(2022).
  21. Koike, Y., et al. Genetic insights into ossification of the posterior longitudinal ligament of the spine. Elife. 12, (2023).
  22. Birney, E. Mendelian Randomization. Cold Spring Harb Perspect Med. 12 (4), (2022).
  23. Burgess, S., Thompson, S. G. Interpreting findings from Mendelian randomization using the MR-Egger method. Eur J Epidemiol. 32 (5), 377-389 (2017).
  24. Georgakis, M. K., Gill, D. Mendelian Randomization Studies in Stroke: Exploration of Risk Factors and Drug Targets With Human Genetic Data. Stroke. 52 (9), 2992-3003 (2021).
  25. Ho, J., Mak, C. C. H., Sharma, V., To, K., Khan, W. Mendelian Randomization Studies of Lifestyle-Related Risk Factors for Osteoarthritis: A PRISMA Review and Meta-Analysis. Int J Mol Sci. 23 (19), (2022).
  26. Larsson, S. C., Butterworth, A. S., Burgess, S. Mendelian randomization for cardiovascular diseases: principles and applications. Eur Heart J. 44 (47), 4913-4924 (2023).
  27. Sekula, P., Del Greco, M. F., Pattaro, C., Köttgen, A. Mendelian Randomization as an Approach to Assess Causality Using Observational Data. J Am Soc Nephrol. 27 (11), 3253-3265 (2016).
  28. Zhao, X., Wang, Q., Wang, W., Lu, S. Increased neutrophil extracellular traps caused by diet-induced obesity delay fracture healing. Faseb j. 38 (20), e70126(2024).
  29. Lin, K., et al. Exosomal miR-212-5p promotes tendon repair via targeting FOXO1 to activate PP1A/YAP1 signaling. Commun Biol. 8 (1), 1798(2025).
  30. Migliorini, F., et al. Management of transient bone osteoporosis: a systematic review. Br Med Bull. 147 (1), 79-89 (2023).
  31. Napoli, R., et al. Cross Cultural Adaptation and Multi Centric Validation of The Italian Version of The Tegner Activity Scale. Muscle Ligaments Tendons J. , (2023).
  32. Koo, T. K., Li, M. Y. A Guideline of Selecting and Reporting Intraclass Correlation Coefficients for Reliability Research. J Chiropr Med. 15 (2), 155-163 (2016).
  33. Hafez, A. E., Ismail, F. M., Abdelhakeem, M. A., Ragaee, S., Soliman, S. A. Musculoskeletal Ultrasound Changes in Chronic Plantar Fascia after Treatment with Platelet Rich Plasma Compared to Steroid. Muscle Ligaments Tendons J. 13 (01), 126(2023).
  34. Xiangyang, Y., et al. Sirtuin1 mitigation of calcium oxalate nephropathy via enhancing itaconate abundance through reduction of histone trimethylation. Clin Transl Med. 15 (8), (2025).
  35. Roland, K., et al. Ceramides in cardiovascular disease: emerging role as independent risk predictors and novel therapeutic targets. Cardiovasc Res. 121 (9), (2025).
  36. Kathryn, A. M., Bernard, D. K., Anna, N. Circulating ceramides as biomarkers of cardiovascular disease: Evidence from phenotypic and genomic studies. Atherosclerosis. 327 (0), (2021).
  37. Kuliś, S., Pietraszewski, P., Callegari, B. Characteristics of Post-Exercise Lower Limb Muscle Tremor Among Speed Skaters. Sensors (Basel). 25 (14), (2025).
  38. Tuniyazi, M., et al. Changes of microbial and metabolome of the equine hindgut during oligofructose-induced laminitis. BMC Vet Res. 17 (1), 11(2021).
  39. Dobritzsch, D., et al. β-Ureidopropionase deficiency due to novel and rare UPB1 mutations affecting pre-mRNA splicing and protein structural integrity and catalytic activity. Mol Genet Metab. 136 (3), 177-185 (2022).
  40. Nakajima, Y., et al. Dihydropyrimidinase deficiency in four East Asian patients due to novel and rare DPYS mutations affecting protein structural integrity and catalytic activity. Mol Genet Metab. 122 (4), 216-222 (2017).
  41. Hirano, M., et al. Mitochondrial neurogastrointestinal encephalomyopathy (MNGIE): Position paper on diagnosis, prognosis, and treatment by the MNGIE International Network. J Inherit Metab Dis. 44 (2), 376-387 (2021).
  42. Mukherjee, A., et al. Adipocytes reprogram cancer cell metabolism by diverting glucose towards glycerol-3-phosphate thereby promoting metastasis. Nat Metab. 5 (9), 1563-1577 (2023).
  43. Tighanimine, K., et al. A homoeostatic switch causing glycerol-3-phosphate and phosphoethanolamine accumulation triggers senescence by rewiring lipid metabolism. Nat Metab. 6 (2), 323-342 (2024).
  44. Blackwell, L. F., Cooke, D. G., Brown, S. The Use of Estrone-3-Glucuronide and Pregnanediol-3-Glucuronide Excretion Rates to Navigate the Continuum of Ovarian Activity. Front Public Health. 6, 153(2018).
  45. Chen, J., et al. Quantitation of serum pregnanediol-3-glucuronide level in different endocrine statuses by LC-MS/MS. J Pharm Biomed Anal. 184, 113171(2020).
  46. Usala, S. J., Alliende, M. E., Trindade, A. A. Algorithms with Area under the Curve for Daily Urinary Estrone-3-Glucuronide and Pregnanediol-3-Glucuronide to Signal the Transition to the Luteal Phase. Medicina (Kaunas). 58 (1), (2022).
  47. Feng, J., Huang, Z., Cui, C., Zhao, M., Feng, Y. Synthesis, taste characteristics and taste mechanism of N-lactoyl leucine from soy sauce using sensory analysis and UPLC-MS/MS. Food Chem. 454, 139670(2024).
  48. Fernandes Silva, L., Hokkanen, J., Vangipurapu, J., Oravilahti, A., Laakso, M. Metabolites as Risk Factors for Diabetic Retinopathy in Patients With Type 2 Diabetes: A 12-Year Follow-up Study. J Clin Endocrinol Metab. 109 (1), 100-106 (2023).
  49. Ito, T., Tono, M., Kitaura, Y., Hemmi, H., Yoshimura, T. Urinary l-erythro-β-hydroxyasparagine-a novel serine racemase inhibitor and substrate of the Zn2+-dependent d-serine dehydratase. Biosci Rep. 41 (4), (2021).
  50. Xia, Y., et al. N(γ) -Hydroxyasparagine: A Multifunctional Unnatural Amino Acid That is a Good P1 Substrate of Asparaginyl Peptide Ligases. Angew Chem Int Ed Engl. 60 (41), 22207-22211 (2021).
  51. Schmidt, C., et al. Lactoyl leucine and isoleucine are bioavailable alternatives for canonical amino acids in cell culture media. Biotechnol Bioeng. 118 (9), 3395-3408 (2021).
  52. Castro, B. M., Prieto, M., Silva, L. C. Ceramide: a simple sphingolipid with unique biophysical properties. Prog Lipid Res. 54, 53-67 (2014).
  53. Cogolludo, A., Villamor, E., Perez-Vizcaino, F., Moreno, L. Ceramide and Regulation of Vascular Tone. Int J Mol Sci. 20 (2), (2019).
  54. Zhang, J., Wei, L., Tan, H., Pang, W. Gut microbiota and postpartum depression: a Mendelian randomization study. Front Psychiatry. 15, 1282742(2024).
  55. Liu, Y., et al. The risk of Alzheimer's disease and cognitive impairment characteristics in eight mental disorders: A UK Biobank observational study and Mendelian randomization analysis. Alzheimers Dement. 20 (7), 4841-4853 (2024).
  56. Chi, J., et al. Causal effects for neurodegenerative diseases on the risk of myocardial infarction: a two-sample Mendelian randomization study. Aging (Albany NY). 16 (11), 9944-9958 (2024).
  57. Tan, Z., Hong, J., Sun, A., Ding, M., Shen, J. Causal effects of circulating lipids and lipid-lowering drugs on the risk of urinary stones: a Mendelian randomization study. Front Endocrinol (Lausanne). 14, 1301163(2023).
  58. Kitsios, G. D., Thaler, D. E., Kent, D. M. Potentially large yet uncertain benefits: a meta-analysis of patent foramen ovale closure trials. Stroke. 44 (9), 2640-2643 (2013).
  59. Sung, C. W., et al. Prediction of high-risk emergency department revisits from a machine-learning algorithm: a proof-of-concept study. BMJ Health Care Inform. 31 (1), (2024).
  60. Lidi, L., Jennifer, H., Daniel, J. L., Hui, B. S. Advances of stem cell based-therapeutic approaches for tendon repair. J Orthop Translat. 9 (0), (2018).
  61. Daibang, N., Yiqin, Z., Wang, W., Jianying, Z., James, H. -C. W. Mechanical Overloading Induced-Activation of mTOR Signaling in Tendon Stem/Progenitor Cells Contributes to Tendinopathy Development. Front Cell Dev Biol. 9 (0), (2021).
  62. Mathieu, M., et al. Trigonelline is an NAD(+) precursor that improves muscle function during ageing and is reduced in human sarcopenia. Nat Metab. 6 (3), (2024).
  63. Yoshida, M., Funasaki, H. Optimal Platelet Concentration for The Therapeutic Effect of Autologous Neutrophil-Reduced Platelet Rich Plasma in A Rat Model of Achilles Tendinopathy. Muscles, Ligaments & Tendons Journal (MLTJ). 10 (4), (2020).
  64. Kuan-Ju, C., Li-Cheng, C., Yi-No, K., Chiehfeng, C. Autologous Stem Cell Therapy for Chronic Lower Extremity Wounds: A Meta-Analysis of Randomized Controlled Trials. Cells. 10 (12), (2021).
  65. Gupta, S., Paliczak, A., Delgado, D. Evidence-based indications of platelet-rich plasma therapy. Expert Rev Hematol. 14 (1), 97-108 (2021).
  66. Impellizzeri, F. M., Bizzini, M. Systematic review and meta-analysis: A primer. International Journal of Sports Physical Therapy. 7 (5), 493-503 (2012).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

תיקון רקמותנתונים גנטייםמשתנים מכשיריםWestern Blotסמני דלקתרקמת גיד של עכברקשרים סיבתיים
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.