פיתחנו מודל עכבר חדשני לאבלציה לימפטית קרדיאלית של תורם בהשתלת לב. מודל זה מראה כי הפרעה בלימפה של תורם מפחיתה דחייה חריפה, מפחיתה פגיעות שריר הלב ומארכת את הישרדות השתל, ומספקת תובנות חדשות על תפקוד הלימפה הקרדיאלי בחסינות ההשתלה.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר מחקר
* These authors contributed equally
פיתחנו מודל עכבר חדשני לאבלציה לימפטית קרדיאלית של תורם בהשתלת לב. מודל זה מראה כי הפרעה בלימפה של תורם מפחיתה דחייה חריפה, מפחיתה פגיעות שריר הלב ומארכת את הישרדות השתל, ומספקת תובנות חדשות על תפקוד הלימפה הקרדיאלי בחסינות ההשתלה.
למרות שכלי הלימפה של הלב זכו לתשומת לב גוברת בשנים האחרונות, הקשר בין מערכת הלימפה של התורם לדחייה חריפה בהשתלת לב עדיין לא ברור.
פעילות אלקטרופיזיולוגית של הלב הוערכה באמצעות אלקטרוקרדיוגרפיה (ECG) בעכברים תקינים לפני ואחרי אבלציה לימפטית לבבית. כלי הלימפה העיקריים של לב תורם הוצגו בהזרקת אוונס בלו ולאחר מכן הועברו באמצעות אלקטרוקוטריה. מודל השתלת לב שכלל תפקוד לימפתי לקוי של תורמים הוקם באמצעות לבבות שעברו אבלציה לימפטית. תפקוד השתל הלב הוערך באמצעות אקו לב, ווסטרן בלוטינג ו-ELISA. השפעת אבלציה לימפטית של תורם על דחייה חריפה הוערכה באמצעות צביעת המטוקסילין-אאוזין (HE) ומעקב אחר זמן הישרדות השתל.
תוצאות הא.ק.ג הראו כי לא היו שינויים משמעותיים באלקטרופיזיולוגיה של הלב לפני ואחרי האבלציה הלימפטית, מה שמאשר כי כלי הדם המרכזיים של הלב נותרו ללא פגע. אוונס בלו הוזרק לקצה הלב כדי לסמן את כלי הלימפה. לימפטים עיקריים עברו לאחר מכן אבלציה באמצעות אלקטרוקוטריה. לאחר סיום הליך האבלציה, העכברים עברו הפאריניזציה, ולבם נקטף לאחר מכן. האאורטה והעורק הריאתי נחתכו, והווריד הנבוב העליון/התחתון, יחד עם הוורידים הריאתיים, קשורו. לבבות התורמים המוכנים (שבוטלו) הושתלו לאחר מכן. רמות cTnI ושבר הפליטה הראו כי אבלציה לימפטית לא החמירה את פגיעת הלב. צביעת HE גילתה כי אבלציה של לימפתיקה קרדיאלית של תורם הקלה על דחייה חריפה, הפחיתה את פגיעת שריר הלב והאריכה את הישרדות השתל.
הצלחנו להקים מודל השתלת לב עכברי עם תפקוד לימפתי לקוי של תורם והדגמנו כי אבלציה של לימפתיקה לבבית תורמת יכולה להפחית דחייה חריפה, להפחית נזק לשריר הלב ולהאריך את הישרדות השתל. ממצאים אלו מספקים תובנות חדשות ובסיס להבנת תפקיד מערכת הלימפה הלבבית בהשתלת לב.
דחיית אלוגרפט לבבי נותרה אחת הסיבוכים השכיחים והחמורים ביותר לאחר השתלת לב, המסווגת בעיקר לדחייה תאית חריפה ודחייה מתווכת נוגדנים. למרות שטיפולים מדכאי חיסון מודרניים שיפרו משמעותית את שיעורי ההישרדות של השתל, דחייה ממשיכה להיות גורם מרכזי בתוצאות ההשתלה. לפי הספרות, כ-12% מהמטופלים חווים לפחות פרק אחד של דחייה חריפה בינונית או חמורה בשנההראשונה לאחר ההשתלה.
מערכת הלימפה הלבבית זוכה לתשומת לב גוברת בשל תפקידה הפוטנציאלי בדחיית השתלות. מעבר לתפקידיה המובסים באיזון נוזלים ובפיקוח חיסוני, למערכת הלימפה תפקיד חשוב בוויסות תגובות החיסוניות. כלי הלימפה משמשים כצינורות ראשיים לתאי החיסון לה....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
עכברים זכרים C57BL/6J ו-BALB/c (זכרים, 6-8 שבועות, משקל גוף 25-28 גרם) נשמרו בתנאים ספציפיים ללא פתוגנים. כל ההליכים הניסיוניים בוצעו בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי ועדת האתיקה לבעלי חיים של בית החולים פוואי (מספר אישור: 0108-7-800-ZX(X)-019).
הדמיה ואבלציה של כלי לימפה לבביים בעכברים
כדי לדמות תפקוד לימפתי לבבי, כלי הלימפה המרכזיים של הלב הוסרו באמצעות אלקטרוקוטריה.
כל העכברים הורדמו באמצעות הזרקה תוך-פריטונאלית של 1.25% טריברומואתנול במינון של 0.2 מ"ל ל-10 גרם משקל גוף ואווררו מכנית לאורך כל ההליך. לאחר הרדמה עם טריברומואתנול, עכברי BALB/c....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הערכת תפקוד השתל הלב
מודלים של עכברים להשתלת לב הוקמו הן בקבוצות ביקורת והן בקבוצות ניסוי בהתאם לפרוטוקול המתואר. המצב התפקודי של השתלים הוערך ב-24 שעות לאחר ההשתלה. רמת הביטוי של טרופונין לב בסרום I (cTnI) הייתה גבוהה יותר בקבוצת הניסוי מאשר בקבוצת הביקורת, אך ההבדל לא היה מובהק סטטיסטית (איור 5A). במקביל, אקו לב לא גילה הבדל משמעותי בחלק ההוצאה של השתלים בין שתי הקבוצות (איור 5B, איור משלים S3
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מערכת הלימפה הלבבית מהווה מרכיב חיוני בשמירה על הומאוסטזיס נוזלי הרקמה ובתמיכה בתפקוד החיסון בלב. על ידי הקלה על ספיגת נוזלים אינטרסטיאלית, הובלת שומנים ותנועת תאי חיסון, היא מבטיחה את ביצועי הלב בתנאים פיזיולוגיים ופתולוגיים כאחד. בשנים האחרונות, עדויות הולכות וגדלות הדגישו את המעורבות הקריטית של מערכת הלימפה הלבבית במחלות לב וכלי דם רבות, כגון אוטם שריר הלב, אי ספיקת לב והשתלת לב, אשר לעיתים קרובות מאופיינות בבצקת ותגובותדלקתיות.
בתנא.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחברים מצהירים שאין להם ניגודי עניינים.
עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע לחוקרים צעירים מצטיינים של סין (82125004; לג'יאנגפינג סונג), פרויקט מפתח ביוטכנולוגיה פרונטרי של תוכנית המחקר והפיתוח הלאומית של משרד המדע והטכנולוגיה של סין (2023YFC3404300; לג'יאנגפינג סונג), והקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מענק מס' 82300464 ליואן צ'אנג).
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| עט אלקטרוקואגולציה | וייטאי | V70 | |
| מלקחיים מיקרוסקופיים | ג'ינז'ונג | WA3030 | |
| מלקחיים מיקרוסקופיים | ג'ינז'ונג | WA2040 | |
| מחזיק מחט מיקרוסקופי | ג'ינז'ונג | YZE010 | |
| מחזיק מחט מיקרוסקופי | ג'ינז'ונג | YZE020 | |
| מספריים מיקרוסקופיים | ג'ינז'ונג | YBC010 | |
| מספריים מיקרוסקופיים | ג'ינז'ונג | YBC020 | |
| מחזיק מחט | ג'ינז'ונג | J32010 | |
| מספריים | ג'ינז'ונג | Y00010 | |
| מכונת הנשמה לבעלי חיים קטנים | ג'ואודי | DW-300 |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.