הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מודל עכבר של דלקת עור נמקית של Streptococcus pyogenes

325 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/70159

⸱

6 במרץ 2026

 , 
1Department of Biomedical Sciences, Joan C. Edwards School of Medicine, Marshall University, 2Department of Molecular Microbiology, Center for Women's Infectious Disease Research, Washington University School of Medicine

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר מודל זיהום תת-עורי לעכבר עבור Streptococcus pyogenes המאפשר כימות עצמאי של עומס חיידקים והתקדמות הנגעים. השיטה מספקת פלטפורמה סטנדרטית וניתנת לשחזור להערכת תפקידי גורמי אלימות חיידקית, תגובות חיסוניות של המארח, או התערבויות טיפוליות שמטרתן להפחית נזק לרקמות.

תקציר

סטרפטוקוקוס פיוגנס הוא פתוגן אנושי הגורם לזיהומים חמורים ברקמות רכות נמקיות, המאופיין בהרס מהיר ונרחב של רקמות. אתגר מרכזי בחקר זיהומים אלו הוא היעדר מודלים ניסיוניים המאפשרים הערכה עצמאית של שכפול חיידקים ונזק לרקמות המתווכת על ידי המארח. מאמר זה מציג מודל תת-עורי סטנדרטי וניתן לשחזור של זיהום עור נמק של S. pyogenes , שנועד להתגבר על מגבלה זו. הפרוטוקול מתאר הכנת חיסון חיידקי בשלב לוגרית, זיהום תת-עורי בעכברים, ומעקב אורך של התפתחות הנגעים. השלבים המרכזיים כוללים סוניקציה של תרביות חיידקים לצורך תקנון אורך השרשרת, הדמיה דיגיטלית של נגעים לניתוח כמותי של אזור הכיב, וקביעת עומס חיידקים באמצעות הומוגניזציה של רקמות וציפוי. מודל ורסטילי זה ניתן להתאמה בקלות להערכת השפעות גנים חיידקיים מסוימים, גורמי מארח או התערבויות טיפוליות על התקדמות הזיהום ופתולוגיית הרקמות. על ידי מתן אפשרות להערכה שחזורית וכמותית של פרמטרים חיידקיים ומארחים, שיטה זו מספקת פלטפורמה איתנה לחקר פתוגנזה ובדיקת אסטרטגיות למניעת נזק לרקמות במהלך זיהום סטרפטוקוקי פולשני.

מבוא

סטרפטוקוקוס פיוגנס (Streptococcus קבוצה A, GAS) הוא פתוגן אנושי משמעותי הגורם לזיהומים ברקמות רכות נמקיות (NSTIs)1, מה שמוביל להרס מהיר של העור והרקמות הבסיסיות 2,3,4. חקר הפתוגנזה של זיהומים אלו דורש מודלים של בעלי חיים שמסכמים פגיעה ברקמה מקומית תוך מתן הערכה עצמאית של שכפול חיידקים ופתולוגיה מתווכת מארח5. מודלים רבים של זיהום מסורתיים, כגון חיסון מערכתי או מערכות תרביות תאים במבחנה, מוגבלים ביכולתם להפריד בין עומס חיידקי לנזק לרקמה, מה שמקשה להעריך את התרומה הספציפית של גורמי אלימות או תגובות מארח.6.

המטרה הכוללת של שיטה זו היא לספק מודל תת-עורי סטנדרטי וניתן לשחזור של זיהום עור נמק של S. pyogenes. ההיגיון בטכניקה זו הוא להקים מערכת in-vivo ניתנת לטיפול שמפרידה בין שכפול פתוגן לפגיעה ברקמה המתווכת על ידי המארח. מודל זה גמיש מאוד לזני עכברים נפוצים במעבדה. בעוד שהזן SKH1 (ללא שיער) משמש לעיתים קרובות להקל על ניטור נגעים 7,8, הפרוטוקול פועל ביעילות על זנים בעלי שיער (למשל C57BL/6J) לאחר הסרת הפילציה. דוחות שפורסמו בדרך כלל משתמשים במין או במין יחיד (לעיתים נקבות) ולעיתים קרובות מוצאים אזור פגיעה/עומס חיידקי דומה בתנאים הניסיוניים הספציפיים; עם זאת, רקע גנטי של מארח ומין מין יכולים להשפיע על חומרת מחלת GAS במצבים מסוימים ויש לקחת זאת בחשבון בעת תכנון ניסויים וניתוח תוצאות9. יתרון מרכזי של מודל זה על פני חלופות הוא היכולת שלו לנטר לאורך זמן נגע מקומי, המאפשר כימות מדויק ועצמאי של אזור הכיב ועומס החיידקים מאותו בעל חיים לאורך זמן. עם חיסון וזן שנבחרו כראוי, זיהומים תת-עוריים לעיתים קרובות ממוקדים ומאפשרים חקר התקדמות ופתרון הנגעים. עם זאת, האם הזיהום נשאר מקומי תלוי בזן, באינוקולום ובמארח: איזודות קליניות מסוימות (או זנים שמקבלים מוטציות של CovRS) ואינוקולה גדולה מספיק יכולים להפיץ ולגרום לבקטרמיה או מחלות קטלניות בעכברים חיסוני10. המחברים צריכים לדווח על הזן, החיסון, המסלול וכל שינוי במארח, ולשנות את האינוקולה בעת התאמת המודל לבידוד חדש. גישה זו ניתנת לשחזור גבוה, נגישה ותואמת לניתוחים מגוונים במורד הזרם, כולל היסטולוגיה ופרופיל חיסוני.

הפרוטוקול יושם על מספר זנים של GAS (כולל מבודדים מסוג M1 כגון HSC511 ו-M1T110,12 אחרים) ועל מבודדי NSTI קליניים. מכיוון שפנוטיפים של אלימות שונים בין סוגי eMM ובין מבודדיםבודדים 13, על החוקרים לייעל אמפירית את החיסון ולעקוב אחר התפשטות מערכתית בעת תרגום הפרוטוקול לזנים חדשים.

פרוטוקול זה מתאים לחוקרים בתחום פתוגנזה מיקרוביאלית, אימונולוגיה ומחקר תרגומי המעוניינים לחקור אלימות חיידקית, תגובות חיסוניות של מארח, או אסטרטגיות טיפוליות חדשות המתמקדות בשימור רקמות במהלך זיהום פולשני. העיצוב הסטנדרטי והכמותי שלו מאפשר הערכה קפדנית של ההתערבויות ומספק פלטפורמה גמישה לחקר האינטראקציה בין שכפול פתוגן לבין פגיעה ברקמה המתווכת על ידי המארח.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם לוועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים של בית הספר לרפואה של אוניברסיטת מרשל (IACUC) ומתקן המשאבים לבעלי חיים. כל ההליכים הכוללים את Streptococcus pyogenes בוצעו במתקן בעלי חיים המאובטח על ידי PHS, המוכר על ידי AAALAC, תחת בידוד בטיחות ביולוגית רמה 2 (BSL-2) בהתאם לפרוטוקולי בטיחות ביולוגית מוסדיים. תהליך העבודה הניסיוני מוצג באיור 1.

הערה: פרטים ספציפיים על תגובות, חומרים וציוד מסופקים בטבלת החומרים.

1. הכנת חיידקים לאינוקולום

  1. הכינו תרבית לילה על ידי חיסון Streptococcus pyogenes HSC5 ממלאי קפוא לתוך 10.5 מ"ל מדיום C (0.5% פפטון, 1.5% תמצית שמרים, 10 מ"מ K2HPO4, 0.4 מ"מ MgSO4, ו-17 מ"מ NaCl). דגרו סטטית ב-37 מעלות צלזיוס למשך 16-20 שעות.
  2. מדדו את הצפיפות האופטית ב-600 ננומטר (OD600) של התרבית הלילית. צנטריפוגה 10 מ"ל תרבית בעוצמה של 6,000 x גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר.
  3. החזירו את הכדור החיידקי ל-0.5 מ"ל של מרק טוד יוויט טרי וחם מראש, בתוספת תמצית שמרים של 1%.
  4. הסנן 50 מ"ל של מרק טוד יוויט מחומם מראש עם תמצית שמרים 1% בצינור חרוטי עם החיידקים המושבים עד ל-OD600 התחלתי של 0.05.
  5. דגור את הצינור בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ללא רעידות. תעקוב אחרי ה-OD600 כל 30 דקות.
  6. קצרו את החיידקים כאשר התרבית מגיעה ל-OD600 של ~0.200 באמצעות צנטריפוגה בטמפרטורה של 6,000 x גרם למשך 5 דקות בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.
  7. השליכו את הסופרנטנט והחזירו את הכדור לתמיסת 10 מ"ל של תמיסת מלח PBS (PBS) קרה וסטרילית.
  8. צנטריפוגה שוב את המתלים ב-6,000 x g למשך 5 דקות ב-4 מעלות צלזיוס. החזירו את הגלולה האחרונה ל-1 מ"ל של תמיסת PBS קרה וסטרילית. תשאיר את המתלה על הקרח.
    הערה: ניתן להחזיק את המתלה החיידקית המרוכזת על הקרח עד 30 דקות לפני שממשיכים לסוניקציה.

2. תקנון ריכוז חיידקים

  1. העבר את המתלה החיידקית של 1 מ"ל לצינור מיקרוצנטריפוגה. סוניקציה של המתלה על הקרח באמצעות סוניקטור קרן כדי לשבור שרשראות ארוכות של S. pyogenes.
    אזהרה: יש ללבוש מגן שמיעה מתאים במהלך סוניקציה. ההליך יוצר רעש בתדר גבוה שעלול לגרום לנזק לשמיעה.
  2. הגדר את הסוניקטור לספק 5 מחזורים של פולסים של דקה אחת (תלוי בסוניקטורים). כדי לאשר הפרעת שרשרת אפקטיבית, הנח טיפה של 10 מיקרוליטר של המתלה הסוניקי על סלייד מיקרוסקופ, כסה עם כיסוי והמחשה מתחת ל-40X.
    הערה: מטרת הסוניקציה היא לצמצם שרשראות ארוכות לשרשראות קצרות בעיקר (רצוי 1-4 תאים בכל שרשרת) וקוקוס יחיד. אם שרשראות ארוכות (>10 תאים) עדיין נפוצות, חזור על מחזור הסוניקציה.
  3. הכינו דילול של 1:100 של החיידקים הסוניקטוריים בתמיסת PBS סטרילית.
  4. טעין 10 מיקרוליטר מהחיידקים המדוללים על תא ספירה/המוסיטומטרי חיידקים.
  5. ספרו את מספר שרשראות החיידקים ב-10 ריבועים גדולים של התא תחת מיקרוסקופ.
  6. חשב את ריכוז החיידקים ביחידות יוצרות מושבה למילילטר (CFU/mL) באמצעות הנוסחה: ריכוז = (סך הספירה / 10) × מקדם דילול × 1.25 × 106.
    הערה: כל שרשרת של תאי חיידק נספרת כ-CFU יחיד.
  7. מדלל את המאגר החיידקלי הסוניקי עם PBS קר לריכוז עבודה סופי של 1 × 108 CFU/mL.

3. זיהום תת-עורי בעכברים

  1. יום לפני ההדבקה, גזח את הצד האחורי השמאלי של כל עכבר. השתמש במכונת תספורת חשמלית כדי להסיר את כל השיער לחלוטין מאזור בגודל של כ-2 ס"מ על 2 ס"מ.
  2. הרדמה עכבר בתא השראה (4% אינדוקציה, 1.5% איזופלוראן תחזוקה). כדי לשמור על סנכרון של ההדבקה, מעבדים עכברים במנות קטנות וניתנות לניהול (למשל, 5-10 עכברים בכל אצווה).
  3. באמצעות מזרק של 1 מ"ל המצויד במחט 27 גרם, יש לשאוב 100 מיקרוליטר מהחיסון החיידקי.
  4. הוציאו את העכבר מתא האיזופלוראן והכניסו מיד את המחט תת-עורית לצד האחורי המגולח של העכבר המורדם כשהזדמון פונה כלפי מעלה.
  5. הזרקו לאט את כל נפח 100 המיקרוליטר כדי ליצור בל מקומי. תמשוך את המחט.
  6. החזיר את העכבר לכלוב שלו ומנטר עד שיתאושש לחלוטין מההרדמה.
  7. חזור על שלבים 3.2-3.5 לכל העכברים בקבוצה הניסויית.
  8. הכינו דילול סדרתי של 10 פעמים של החיסון החיידקי שנותר ב-PBS.
  9. לוח נקודות 5 מיקרוליטר מכל דילול על לוחות אגר. דגירה אנאירובית בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס במהלך הלילה כדי לאשר את המנה שנמסרה.

4. ניטור אורך של התקדמות הזיהום

  1. יש לעקוב אחרי כל העכברים הנגועים לפחות פעם ביום לכל סימן לאי נוחות. יש להיצמד לנקודות קצה הומניות מבוססות, שהן חשובות במיוחד כאשר משתמשים בזנים היפר-וירולנטיים או במארחים עם מערכת חיסון מוחלשת.
  2. הרדימו כל עכבר לפי ההליך המתואר בשלב 3.2.
  3. הסר את העכבר מתא האיזופלוראן ומקם אותו על צידו ליד תווית מזהה. כדי לאפשר מעקב אורך של עכברים בודדים, יש לסמן (למשל, אגרוף אוזן, תג אוזן) כל בעל חיים לפני תחילת הניסוי.
  4. צלם תמונה דיגיטלית של אזור הנגע באמצעות מצלמה המותקנת ישירות מעל העכבר.
  5. פתח את התמונה הדיגיטלית בתוכנת ניתוח תמונה (ImageJ/Fiji). בחר את כלי Freehand Selections מתוך סרגל הכלים.
  6. עקבו ידנית אחרי היקף הכיב הנראה בתמונה.
  7. פתח את תפריט הניתוח ובחר ב-Measure כדי לחשב את השטח בתוך ההיקף המסומן.
  8. רשמו את השטח הנמדד במילימטרים רבועים עבור כל עכבר בכל נקודת זמן.
    הערה: ניתן להשהות את הניסוי בשלב זה. העכברים מוחזרים לכלוביהם להמשך ניטור עד לנקודת זמן התצפית הבאה או נקודת הסיום.

5. איסוף רקמות וכימות עומס חיידקים

  1. המתת חסד לעכברים בנקודת הקצה הניסיונית באמצעות שאיפת פחמן דו-חמצני ואחריה ניתוק צוואר הרחם, שיטה שאושרה על ידי IACUC של אוניברסיטת מרשל.
  2. באמצעות מספריים וכירורגיים סטריליים ומלקחיים, כריתו באופן אספטי את כל הנגע וכמות מינימלית של רקמה מסביב. ודאו שהכריתה כוללת את כל עובי העור ואת הרקמה התת-עורית שמתחת, בדרך כלל עד שכבת השרירים אך לא כוללת אותה, אלא אם הזיהום חדר לעין לרצועת השריר.
  3. העבר את הרקמה לצינור מיקרוצנטריפוגה סטרילי בנפח 2 מ"ל עם מכסה בורג, המכיל 1 מ"ל PBS סטרילי ושני חרוזי נירוסטה סטריליים בקוטר 2.8 מ"מ.
  4. תעד את משקל הרקמה.
  5. הומוגניזציה של הרקמה באמצעות הומוגניזר מכני שמכוון ל-6.5 מ'/שנייה למשך 60 שניות.
  6. הנח את הצינור על קרח למשך 5 דקות כדי למנוע התחממות יתר.
  7. הומוגניזציה של הרקמה למחזור שני של 60 שניות במהירות של 6.5 מ'/שנייה.
  8. הכינו דילול סדרתי של פי 10 של ההומוגנט של הרקמה בלוח של 96 בארות באמצעות PBS סטרילי כמדלל. לוח נקודות 5 מיקרוליטר מכל דילול על לוחות אגר.
  9. דגרו את הלוחות אנאירובית בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 24-48 שעות. לדוגמה, הניחו צלחות בתוך צנצנת אטומה עם שקית גנרטור גזים אנאירובית ומד אנאירובי.
  10. סופר את המושבות על לוחות עם 30-300 מושבות. חשב את היחידות היוצרות מושבה למיליקל (CFU/mL) של הומוגננט הרקמות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

מודל הזיהום התת-עורי של העכבר עבור S. pyogenes יוצר בעקביות כיב נקרוטי מקומי ומתקדם, המאפשר כימות בו-זמני של נטל חיידקים ופתולוגיית רקמות. תוצאות מייצגות מהפרוטוקול הסטנדרטי הזה הן כדלקמן.

קבוצות ניסוי מורכבות בדרך כלל מ-6-10 עכברים כדי לספק עוצמה סטטיסטית מספקת (למשל, 80-90%) לזיהוי הבדלים משמעותיים בגודל הנגע ובעומס חיידקים, בהתבסס על מחקרים קודמים 8,14,15. הנתונים מנותחים באמצעות מבחנים סט...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מודל הזיהום הנמק של העכבר S. pyogenes התת-עורי המתואר כאן מספק מערכת חזקה וניתנת לשחזור לניתוח המנגנונים שמאחורי זיהום ברקמות רכות חמורות. הערך העיקרי שלו טמון ביכולת להפריד בין עומס חיידקים לפתולוגיית רקמות, מה שמאפשר מחקרים מכניים של האופן שבו גורמי המארח והפתוגן תורמים באופן עצמאי להתפתחות המחלה. הבחנה זו חשובה במיוחד בזיהום S. pyogenes , שם חומרת דלקת הנמקית משקפת לעיתים תגובה דלקתית מוגזמת של מארח לגורמי אלימות כמו סטרפטוליזינים ולא להתרבות חיידקים בלבד

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים מתחרים.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי קרן הסטארטאפ של אוניברסיטת מרשל ומענק ה-Bench-to-Bedside Institute של WV Clinical and Translational Science Institute (U54GM104942) ל-WX. מענקי המכון הלאומי לבריאות R21 AI163825 (ל-MGC). אנו מודים לד"ר ג'יל חאן (MA, DVM, MPH, DACLAM), מנהלת מתקן משאבי בעלי החיים של אוניברסיטת מרשל, ולד"ר מוניקה ולנטוביץ' (PhD), יו"רית IACUC, על הביקורת של כתב היד הזה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מזרק בנפח 1 מ"לBD309628להזרקה תת-עורית
מחט 28-GBD305109להזרקה תת-עורית
המוציטומטר חיידקי / תא ספירההאוסר סיינטיפיק02-671-6לספירת חיידקים לפני חיסון
מערכת המכולות האנאירובית BD BBL GasPak EZבקטון, דיקינסון ושות' (BD)260001לדגירה אנאירובית
עכברים C57BL/6Jמעבדת ג'קסון664בן 8-12 שבועות
מיכל פחמן דו-חמצני (CO2)ספק מקומילא זמיןלהמתת חסד
קאפ-הורן סוניקטור  (למשל, Q700)קסוניקה431C2לצורך תקנון אורך שרשרת חיידקים
מצלמה דיגיטליתלא זמיןלא זמיןלהדמיית נגעים
קליפרים חשמלייםוואהללדוגמה, 8655-200לגילוח צדדי העכבר
הומוגניזר FastPrep-24ביומדיקל MP116005500לצורך הומוגניזציה של רקמות
ImageJ Softwareהמכונים הלאומיים לבריאות (NIH)לא זמיןhttps://imagej.nih.gov/ij/
איזופלוראןבקסטר1001936060לחומר הרדמה
מערכת ההרדמה איזופלורנית  (חדר ו-Chamber מאייד)VetEquip או דומהלא זמיןלהרדמת עכברים
פפטוןבקטון, דיקינסון ושות' (BD)211677להכנת מדיום C
מלח ממוגן בפוספט (PBS)גיבקו10010023סטרילי, pH 7.4
זן S. pyogenes HSC5מעבדת קפארוןבידוד קליני M1T1
עכברי SKH1מעבדות צ'ארלס ריבר477בן 8-12 שבועות, ללא שיער
חרוזי נירוסטה, 2.8 מ"מיוניברסל מדיקלD1133-28סטרילי
מספריים וכירורגיים סטריליים ומלקחייםכלי מדע מדויק או דומיםלא זמיןלאיסוף רקמות אספטיות
ציר טוד יואיטבקטון, דיקינסון ושות' (BD)249240לתת-תרבית חיידקים
תמצית שמרים  (לדו בינוני)בקטון, דיקינסון ושות' (BD)212750להכנת מדיום C (כמו בתוסף המרק)

מקורות

  1. Hakkarainen, T. W., Kopari, N. M., Pham, T. N., Evans, H. L. Necrotizing soft tissue infections: review and current concepts in treatment, systems of care, and outcomes. Curr Probl Surg. 51 (8), 344-362 (2014).
  2. Brouwer, S., et al. Pathogenesis, epidemiology and control of Group A Streptococcus infection. Nat Rev Microbiol. 21 (7), 431-447 (2023).
  3. Cunningham, M. W. Pathogenesis of group A streptococcal infections and their sequelae. Adv Exp Med Biol. 609, 29-42 (2008).
  4. Henningham, A., Barnett, T. C., Maamary, P. G., Walker, M. J. Pathogenesis of group A streptococcal infections. Discov Med. 13 (72), 329-342 (2012).
  5. Pancholi, V., Caparon, M. Streptococcus pyogenes Metabolism. Streptococcus pyogenes: Basic Biology to Clinical Manifestations. , University of Oklahoma Health Sciences Center. Oklahoma City. (2022).
  6. Ravins, M., et al. Murine soft tissue infection model to study Group A Streptococcus (GAS) pathogenesis in necrotizing fasciitis. Methods Mol Biol. 2427, 185-200 (2022).
  7. Benavides, F., Oberyszyn, T. M., VanBuskirk, A. M., Reeve, V. E., Kusewitt, D. F. The hairless mouse in skin research. J Dermatol Sci. 53 (1), 10-18 (2009).
  8. Cusumano, Z. T., Watson, M. E. Jr, Caparon, M. G. Streptococcus pyogenes arginine and citrulline catabolism promotes infection and modulates innate immunity. Infect Immun. 82 (1), 233-242 (2014).
  9. Chella Krishnan, K., et al. Genetic architecture of Group A streptococcal necrotizing soft tissue infections in the mouse. PLoS Pathog. 12 (10), e1005732(2016).
  10. Pato, C., Melo-Cristino, J., Ramirez, M., Friaes, A. Portuguese Group for the Study of Streptococcal, I. Streptococcus pyogenes causing skin and soft tissue infections are enriched in the recently emerged emm89 clade 3 and are not associated with abrogation of CovRS. Front Microbiol. 9, 2372(2018).
  11. Port, G. C., Paluscio, E., Caparon, M. G. Complete genome sequence of emm type 14 Streptococcus pyogenes strain HSC5. Genome Announc. 1 (6), e00612-e00613 (2013).
  12. Le Breton, Y., et al. Genome-wide discovery of novel M1T1 group A streptococcal determinants important for fitness and virulence during soft-tissue infection. PLoS Pathog. 13 (8), e1006584(2017).
  13. Bergsten, H., Nizet, V. The intricate pathogenicity of Group A Streptococcus: a comprehensive update. Virulence. 15 (1), 2412745(2024).
  14. Watson, M. E. Jr, Neely, M. N., Caparon, M. G. Animal Models of Streptococcus pyogenes Infection. Streptococcus pyogenes: Basic Biology to Clinical Manifestations. , University of Oklahoma Health Sciences Center. Oklahoma City. (2022).
  15. Xu, W., et al. Reprogramming aerobic metabolism mitigates Streptococcus pyogenes tissue damage in a mouse necrotizing skin infection model. Nat Commun. 16, 2559(2025).
  16. Merriman, J. A., Xu, W., Caparon, M. G. Central carbon flux controls growth/damage balance for Streptococcus pyogenes. PLoS Pathog. 19 (5), e1011481(2023).
  17. Zou, Z., et al. Dihydrothiazolo ring-fused 2-pyridone antimicrobial compounds treat Streptococcus pyogenes skin and soft tissue infection. Sci Adv. 10 (13), eadn7979(2024).
  18. Stevens, D. L., Bryant, A. E. Impetigo, Erysipelas and Cellulitis. Streptococcus pyogenes: Basic Biology to Clinical Manifestations. , University of Oklahoma Health Sciences Center. Oklahoma City. (2022).
  19. Mania, A., et al. Invasive group A streptococcal infections as a consequence of coexisting or previous viral infection in the post-COVID-19 pandemic period. J Infect Public Health. 18, 102622(2025).
  20. Stevens, D. L., Bryant, A. E. Severe Group A Streptococcal Infections. Streptococcus pyogenes: Basic Biology to Clinical Manifestations. , University of Oklahoma Health Sciences Center. Oklahoma City. (2016).
  21. Thacharodi, A., et al. The burden of group A Streptococcus (GAS) infections: the challenge continues in the twenty-first century. iScience. 28, 111677(2025).
  22. Qu, G., et al. Comparing mouse and human tissue-resident γδ T cells. Front Immunol. 13, 891687(2022).
  23. Proft, T., Fraser, J. D. Streptococcal Superantigens: Biological Properties and Potential Role in Disease. treptococcus pyogenes: Basic Biology to Clinical Manifestations. , University of Oklahoma Health Sciences Center. Oklahoma City. (2022).
  24. McArthur, J. D., Cook, S. M., Venturini, C., Walker, M. J. The role of streptokinase as a virulence determinant of Streptococcus pyogenes-potential for therapeutic targeting. Curr Drug Targets. 13 (3), 297-307 (2012).
  25. Barnett, T. C., et al. Streptococcal toxins: role in pathogenesis and disease. Cell Microbiol. 17 (12), 1721-1741 (2015).
  26. Ghosh, J., Anderson, P. J., Chandrasekaran, S., Caparon, M. G. Characterization of Streptococcus pyogenes beta-NAD+ glycohydrolase: re-evaluation of enzymatic properties associated with pathogenesis. J Biol Chem. 285 (8), 5683-5694 (2010).
  27. Ghosh, J., Caparon, M. G. Specificity of Streptococcus pyogenes NAD(+) glycohydrolase in cytolysin-mediated translocation. Mol Microbiol. 62 (5), 1203-1214 (2006).
  28. Vega, L. A., Caparon, M. G. Cationic antimicrobial peptides disrupt the Streptococcus pyogenes ExPortal. Mol Microbiol. 85 (6), 1119-1132 (2012).
  29. Mozola, C. C., Magassa, N., Caparon, M. G. A novel cholesterol-insensitive mode of membrane binding promotes cytolysin-mediated translocation by Streptolysin O. Mol Microbiol. 94 (3), 675-687 (2014).
  30. Meehl, M. A., Caparon, M. G. Specificity of streptolysin O in cytolysin-mediated translocation. Mol Microbiol. 52 (6), 1665-1676 (2004).
  31. Hollands, A., et al. Genetic switch to hypervirulence reduces colonization phenotypes of the globally disseminated Group A Streptococcus M1T1 clone. J Infect Dis. 202 (1), 11-19 (2010).
  32. Xu, W., et al. Host cysteine proteases promote the severity of catheter-associated urinary tract infection and kidney fibrosis. mBio. 16 (11), e0216125(2025).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

מאמר זה פורסם

הסרטון יגיע בקרוב

צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.