מאמר שיטה

הקמה וניתוח דחייה חריפה בתיווך נוגדנים בהשתלת לב בעכברים

273 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/70191

⸱

13 בפברואר 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Organ Transplantation Research Institution, Division of Kidney Transplantation, Department of Surgery, The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

מחקר זה קבע מודל עכבר מעשי של דחייה חריפה בתיווך נוגדנים לאחר השתלת לב, המאופיין בייצור DSA חזק, שינויים פתולוגיים טיפוסיים והישרדות אלוגרפט בינונית.

תקציר

גורם מרכזי לכשל אלוגרפט אצל מקבלי השתלת לב הוא דחיית נוגדנים (AMR). לכן, מודל AMR של העכבר משמש ככלי חיוני לפענוח המנגנונים הבסיסיים שלו ולעידוד פיתוח טיפולים חדשניים. במחקר זה, העכברים המקבלים חולקו לשלוש קבוצות: לא רגישים (NS), מוקדמים (PS), ובעלי רגישות מוקדמת בטיפול בציקלוספורין A (PS + CsA). קבוצת ה-NS, שהציגה ממוצע הישרדות אלוגרפט של 6.8 ±-0.7 ימים, לא הראתה עלייה ברמות DSA בסרום וצביעת C4d שלילית באלוגראפט בתוך ארבעה ימים לאחר השתלת הלב (CT), מה שמרמז על פתולוגיה הנשלטת על ידי דחייה תאית חריפה. מחקר זה קבע מודל AMR אקוטי על ידי החדרת רגישות מוקדמת למטופלים עם השתלת עור (ST) שבוע לפני CT, ובכך הפעלת מערכת החיסון מוקדמת. גישה זו הצליחה לגרום לפנוטיפ AMR חמור, כפי שניתן לראות בהישרדות קצרה של אלוגרפט של 2.8 ±-0.4 ימים, עלייה משמעותית ברמות DSA-IgG לאחר ST ואחרי CT, וסימנים פתולוגיים מוקדמים של וסקוליטיס והפקדה נרחבת של C4d בתוך 12 שעות מה-CT. למרות זאת, חומרת המודל הזה מגבילה את יישומו הרחב יותר. כדי למזער את הפעלת תאי ה-T במקביל שנגרמה על ידי ST ולקבוע מודל AMR חריף ספציפי יותר, מחקר זה נתן ציקלוספורין A. כתוצאה מכך, קבוצת PS + CsA הציגה זמן הישרדות באלוגרפט של 5.2 ± 0.4 ימים. רמות DSA-IgG בסרום היו גבוהות משמעותית ביום השביעי לאחר ה-ST ונשארו גבוהות תוך חמישה ימים לאחר ה-CT. הערכה פתולוגית ביום השני לאחר ה-CT אישרה דלקת וסקוליטיס משמעותית והפקדת C4d, ממצאים שעומדים יחד בקריטריונים האבחנתיים ל-AMR חריף בינוני-חמור. לסיכום, מחקר זה קבע מודל עכבר מעשי וניתן לתרגום גבוה של AMR חריף לאחר CT, המוגדר על ידי ייצור DSA חזק, שינויים פתולוגיים אופייניים והישרדות אלוגרפט בינונית.

מבוא

השתלת לב (CT) נשארת הטיפול הסטנדרטי הזהב למחלות לב בשלב סופי1. למרות ששיעור ההישרדות החציוני לאחר ההשתלה עולה כיום על 13 שנים, כישלון השתל לטווח ארוך נשאר בלתי נמנע2. דחייה מתווכת נוגדנים (AMR) היא גורם מרכזי לאובדן השתל המאוחר לאחר CT3. מחקרים הראו כי שכיחות אובדן השתל עקב AMR עולה על זו הנגרמת מדחיית תאי T, והסיכון לכשל השתל ב-AMR מאוחר הוא בערך פי שניים מזה שלAMR 4,5 מוקדם. לכן, זיהוי מוקדם והתערבות בזמן של AMR הם קריטיים לשיפור הישרדות השתלים.

AMR מונע על ידי נוגדנים ספציפיים לתורם (DSA), הגורמים לכשל השתל באמצעות הפעלת משלים, דלקת וסקולרית ופציעה איסכמית6. קישור DSA לאנדותליום וסקולרי מפעיל נזק לאנדותל, מקדם טרומבוזיס ומעורר תגובות דלקתיות חריפות וכרוניות. המנגנונים העיקריים של פגיעה המתווכת על ידי DSA כוללים ציטוטוקסיות תלויה במשלים ובמסלולי ציטוטוקסיות תאי תלויי נוגדנים7. למרות שפותחו טיפולים ממוקדים כמו נוגדן אנטי-C5 אקוליזומאב וסוכן המדלדל תאי B ריטוקסימאב, תוצאות קליניות ב-AMR בשלב מאוחר נותרות לא מספקות 7,8,9. לכן, חקירה מכנית נוספת באמצעות מודלים של בעלי חיים חריפים חיונית להבנת התקדמות המחלה ולזיהוי מטרות טיפוליות חדשות.

מודל ה-CT ההטרוטופי עם כלי דם בעכבר הוא פלטפורמה מבוססת היטב לחקר CT, במיוחד בפגיעות איסכמיה-רפרוזיה ודחייה 10,11,12. תפקוד השתל מנוטר בדרך כלל על ידי מישוש יומי של עוצמת הדופק בבטן, המשקף מצב תפקודי ומגדיר כשל השתל13. עם זאת, מודלים קונבנציונליים לעיתים קרובות אינם מזהים הופעת AMR זמן קצר לאחר ההשתלה ולכן דורשים קדם-רגישות כדי לגרום להיווצרות DSA ולהפעיל AMR חריף. יתרה מזאת, זני עכברים שונים בתגובתיות החיסונית; לדוגמה, עכברי C57BL/6 מציגים הפעלה חזקה יותר של משלים, בעוד שעכברי BALB/c מעדיפים תגובות מוטות ל-Th214,15. כתוצאה מכך, גם אסטרטגיית הקדם-רגישות וגם בחירת זן המקבל הן גורמים קריטיים לביצועי המודל.

במחקרים קודמים, צוות מחקר זה השתמש בזנים שונים של עכברים להשתלת כליות לאחר השתלת עור (ST), הקים מודל AMR, וניתח את מאפייניו, וצבר ניסיון משמעותי 16,17,18. בשנת 2021, צוות זה הקים עוד מודל עכבר AMR אקוטי מושרה על ידי ST ב-CT למחקר יסודי, שהראה יציבות רבה19. בניגוד לעירוי דם אלוגני20 הלא יעיל יחסית או לעירוי הלימפוציטים21 המורכב והממושך, ST מציע פרוטוקול רגישות יציב, יציב ופשוט יותר. מודל זה מאפשר גילוי מוקדם לאחר ההשתלה של רמות DSA גבוהות בסרום ופגיעה אלוגרפטית נראית מ-AMR חריפה, מה שהופך אותו למתאים במיוחד למחקרים התערבותיים על AMR חריף. עם זאת, ה-AMR החריף שנגרם על ידי ST הוא בדרך כלל חמור, וגורם לנזק משמעותי לרקמות שלעיתים מסתיר את התקדמות הפציעה הכרונית. מחקר זה שואף לספק תיאור מפורט נוסף של המתודולוגיה והנהלים ששימשו לקביעת מצב זה, לנתח את המאפיינים האימונולוגיים והפתולוגיים של המודל, ולסכם את הניסיון המעשי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם לתקנות ניהול בעלי החיים הניסיוניות בגואנגדונג, להצהרת הלסינקי ועקרונות 3Rs. הפרוטוקול הניסיוני אושר על ידי ועדת חברת Guangzhou Jennio Biotech בע"מ (מספר אישור JENNIO-IACUC-2024-A027). עכברים זכרים מסוג Balb/c ו-C57BL/6 (בני 6-8 שבועות, במשקל 20-25 גרם), כולם בדרגת SPF ללא פתוגנים ספציפיים, נרכשו ממקור מסחרי. הריאגנטים והציוד ששימשו במחקר זה מפורטים בטבלת החומרים.

1. הכנת בעלי חיים

  1. שים את העכבר בדרגת SPF במערכת המתאימה למתקן בעלי חיים.
  2. חלק את העכברים לשלוש קבוצות ניסוי כפי שמתואר באיור 1
    1. קבוצה לא רגישה (NS): השתמשו בעכברי Balb/c כתורמים ובעכברי C57BL/6 כמקבלי CT.
    2. קבוצה עם רגישות מוקדמת (PS): השתמשו בעכברי Balb/c כתורמים ובעכברי C57BL/6 כמקבלי ST, ואחריהם CT שבוע לאחר מכן.
    3. קבוצת A עם רגישות מוקדמת + ציקלוספורין (PS + CsA): השתמשו בעכברי Balb/c כתורמים ובעכברי C57BL/6 כמקבלי ST, ואחריהם CT שבוע לאחר מכן. מיום ה-ST, יש להזריק לעכברים המקבלים תת-עורית את CsA במינון של 2 מ"ג/(ק"ג·d) ועד לכשל השתל או איסוף דגימת השתל.

2. הכנה לפני הניתוח

  1. ודאו שהעכברים התורמים אינם מקבלים מזון או מים לפני הניתוח, בעוד שהעכברים המקבלים צומים במשך 8 שעות אך אינם מונעים מהם מים.
  2. הרדמה
    1. הניחו את העכבר בתא השראת הרדמה לצורך השראה (ריכוז איזופלורן: 3%-4%; קצב זרימה: 300-500 מ"ל לדקה) (בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי המוסד). נער את תא ההשראה כדי לבדוק אם החיה מורדמת לחלוטין.
      הערה: אם החיה מתהפכת על צידו ואינה מנסה לחזור למצב שכיבה, זה מעיד על הרדמה מלאה.
    2. לאחר התאמת ריכוז התחזוקה על פלטפורמת הניתוח, מוציא את העכבר מתא ההשראה, מקבע את אפו במסכת ההרדמה (ריכוז איזופלורן: 1.0%-2.5%; קצב זרימה: 100-200 מ"ל לדקה), ובודק אם העכבר מורדם במלואו (לחץ על כף הרגל או הזנב עם אצבע; אם אין תגובה, זה מעיד על הרדמה מלאה).

3. קדם-רגישות באמצעות ST (לקבוצות 2 ו-3)

  1. קצירת עור זנב תורם
    1. חטא את עור הזנב של עכברי התורם המורדימים עם 75% אלכוהול.
    2. השתמשו בסקלפל כדי לקטוע את הזנב (בשליש הרחוק), קיבעו את הגדם עם מלקחיים ביד שמאל, והשתמשו בסקלפל ביד ימין כדי לחתוך את העור שבין ורידי הזנב, ולחשוף את הגיד הלבן שמתחת. לאחר מכן, תקבע את עצם הזנב עם מלקחיים, השתמש במלקחיים מעוקלים כדי להדביק את העור בחתך, ולהסיר אותו בזהירות.
    3. הניחו את העור הקלוף בבקבוק המכיל מלח קר וסטרילי, כאשר הרקמה פונה כלפי מטה. חתוך חתיכת עור בגודל 1.0 ס"מ × 1.0 ס"מ לשימוש מאוחר יותר.
  2. ST גבי מקבל
    1. גלח את הפרווה מהאזור הגבי של העכברים המורדמים באמצעות מכונת תספורת שיער, חיטא ב-75% אלכוהול, והניח וילון סטרילי.
    2. השתמש בסכין מנתח לחתוך את העור, אחז בקצוות העור עם מלקחיים משוננים, וחתוך חתיכת עור מעט גדולה מ-1.0 ס"מ × 1.0 ס"מ עם מספריים ליצירת מיטת השתל.
    3. הנח את השתל העור של העכבר התורם על מיטת השתל כשהצד של הרקמה כלפי מטה. לאחר גזירת השתל, תופרים את עור התורם לעור המקבל תחת מיקרוסקופ באמצעות 8-0 חוט ניילון, כדי להבטיח שהעור התורם מונח באופן שווה על מיטת השתל.
    4. כסו את הפצע בתחבושת דבק סטרילית, והניחו את העכבר בכלוב מגורים לאחר שהוא מתעורר.

4. CT

  1. קצירת לב מתורם
    1. גלח את הפרווה מהחזה והבטן של עכברי התורם המורדימים באמצעות מכונת תספורת שיער, חיטא ב-75% אלכוהול, והניח וילון סטרילי.
    2. בצע חתך בטן בקו אמצעי עם סכין מנתח, חושף את החלק העליון של הווריד הנבוב התחתון, והזריק 1 מ"ל של 50 U/mL סליין קר הפאריני (4 מעלות צלזיוס) לווריד הנבוב התחתון באמצעות מזרק.
    3. השתמש במספריים לרקמות כדי לפתוח את חלל החזה ולחשוף את הלב. בודד את האאורטה העולה וחתך אותו לפני הענף הראשון שלו; לבודד את העורק הריאתי ולחתוך אותו בפיצולו; לקשור את הווריד הנוב התחתון ואת רקמת החיבור בהילום הריאתי באמצעות תפרים לא טראומטיים של 6-0; חתכו את הרקמה הרחוקה באתר הקשירה עם מספריים והסירו את הלב.
    4. הכניסו במהירות את הלב שנקטף לתמיסת HCA (היפרטונית) של ציטראט אדנין (HCA) ואחסנו אותו בתערובת מים קרחים לשימוש מאוחר יותר. הורד את עכבר התורם באמצעות שיטת ניתוק צוואר הרחם.
  2. CT מקבל
    1. לגלח את הפרווה מבטן העכברים המורדימים באמצעות מכונת תספורת, לחטא ב-75% אלכוהול, ולהניח וילון סטרילי.
    2. הרם את העור עם מלקחיים עם שיניים ובצע חתך בקו האמצע בדופן הבטן מתהליך הזיקפואיד לבסיס שלפוחית השתן באמצעות מספריים לרקמות. הניחו גזה סטרילית ולחה משני צדי החתך כדי להגן עליו.
    3. השתמשו במקליות כותנה סטריליות כדי לדחוף את לולאות המעי לצד הימני של החתך ועטוף אותן בגזה לחה. לאחר ניתוח ישיר של הפריטונאום, חשפו את הווריד הנוב התחתון ואת האאורטה הבטנית, קשרו את הוורידים המותניים, והשתמשו בקלאמפ וסקולרי כדי לעצור את זרימת הדם לקצוות הדיסטליים והקרובים של האאורטה והווריד הנבוב.
    4. מתחת למיקרוסקופ, יש להשתמש במספריים מיקרו כדי לחתוך את דופן הווריד בכ-2 מ"מ, בהתאם לקוטר עורק הלב הריאתי של התורם; באופן דומה, חתכו את דופן העורק ב-1-2 מ"מ, בהתאם לקוטר האאורטה העולה של התורם.
    5. קחו את לב התורם ובצעו אנסטומוזה מקצה לצד בין עורק הלב הריאתי של התורם לווריד הנוב התחתון של המקבל באמצעות תפרים לא טראומטיים 12-0. באופן דומה, יש לבצע אנסטומוזה מקצה לצד בין האאורטה הקרדיאלית העולה של התורם לבין האאורטה הבטנית של המקבל (בעת קשירת הקשר האחרון, השתמש במי מלח לשטיפת אוויר מהלומן; מטפטף מדי פעם סליין של 4 מעלות צלזיוס על פני הלב של התורם במהלך האנסטומוזה לקירור).
    6. שחרר את הקלמפ הווסקולרי והשבת אספקת הדם ללב (מילוי תקין של העורקים הכליליים נראה, הלב הופך לורוד, והוא חוזר לפעום תוך 1-2 דקות). לאחר החזרת לולאות המעיים, סגרו את חלל הבטן עם תפרי ניילון 4-0.
      הערה: אם הדימום תוך הניתוח עולה על 0.5 מ"ל, ניתן לתת תמלח רגיל תת-עורית לשמירה על נפח הנוזלים.
    7. לאחר הניתוח, יש להניח את העכברים על פלטפורמת חימום של 37 מעלות צלזיוס לצורך ניטור. כאשר העכבר המקבל מתעורר, החזר אותו לכלוב המגורים. העכבר חוזר לאכול ולשתות רגיל לאחר הניתוח.

5. טיפול ומעקב לאחר הניתוח

  1. תצפית על מצב כללי
    1. ודאו תצפית יומית על מצב הכאב של העכבר לאחר הניתוח, בין אם יש ירידה בתיאבון, ירידה בפעילות, ליקוק או גירוד מופרזים של הפצע, או באגרסיביות מוגברת.
    2. ודאו תצפית יומית על הפצע לאחר הניתוח על ידי בדיקת אדמומיות, נפיחות, הפרשה או תסמינים של זיהום גולתי. אם צריך, נקה וחטא את הפצע.
  2. תצפית על הישרדות השתל הלב
    1. ודאו תצפית ומישוש יומיים כדי לבדוק ולתעד את עוצמת דופק הלב המושתל. אם צריך, הרדימו את העכבר ובצעו חתך כדי לצפות בפעימות הלב.
      הערה: כאשר פעימות הלב המושתלות מפסיקות לחלוטין, הן נרשמות ככשל השתל, וזמן ההישרדות נרשם.

6. הערכות לאחר הניתוח

  1. גילוי ברמת DSA
    1. בקבוצת ה-NS, יש לקבל דגימות דם בימים 0, 4 ו-7 לאחר הניתוח לאחר CT כדי לעקוב אחרי רמות DSA לאחר ההשתלה. בקבוצת PS, איסוף דגימות בימים 0, 4 ו-7 לאחר ST ובימים 1 ו-3 לאחר CT כדי להעריך את דינמיקת DSA לאחר קדם-רגישות. בקבוצת PS+CsA, אספו דם בימים 0, 4 ו-7 לאחר ה-ST ובימים 1, 3 ו-5 לאחר CT כדי להעריך את השפעות CsA על רמות DSA.
    2. צנטריפוגה את כל דגימת הדם מהעכבר המקבל ואספו את הסרום (2000 x גרם, 10 דקות, 4 מעלות צלזיוס); דיללו את הסרום 10 פעמים עם PBS ודגרו אותו עם תאי טחול של עכבר תורם בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
    3. לאחר הצנטריפוגה ב-350 × גרם ו-4 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות, יש להשליך את הסופרנטנט. שטוף את התאים על ידי פיפטינג עדין של 1 מ"ל PBS, וחזור על שלב השטיפה פעמיים לאחר הצנטריפוגה.
    4. דגרו את התאים בנוגדן IgG אנטי-עכברי פלואורסצאין איזותיוציאנאט (FITC) ונוגדן IgM לעכבר פיקואריטרין (PE) בטמפרטורה של 4°C למשך שעה.
    5. לאחר שטיפת התאים עם PBS, החזירו אותם לריכוז של 5 × 106 /מ"ל.
    6. השתמש בציטומטריית זרימה לזיהוי שני הנוגדנים בנפרד וניתוח עוצמת הפלואורסצנציה הממוצעת (MFI) כדי להעריך את רמות ה-DSA (IgG, IgM) בעכבר המקבל (הגדרות פרמטר: רכש 10,000 אירועים לניתוח). השתמש ב-FSCA מול SSCA כדי להוציא לכלוך, ואז השתמש ב-FSCA לעומת FSCH gatating כדי להסיר דאבלטים. כלול בקרה שלילית וכוון את המתח של כל ערוץ כדי למקם את האוכלוסייה השלילית בטווח של 100-10 1 .
  2. בדיקה היסטופתולוגית של שתל לב
    1. איסוף השתלים ב-6 שעות, 12 שעות, יום אחד, 2 ימים, 3 ימים, 4 ימים ו-5 ימים לאחר CT. לאחר האיסוף, מקבע את השתלים ב-4% פאראפורמלדהיד, הטמע באופן שגרתי בפרפין, חתך וצבע בהמטוקסילין-אאוזין (H&E). התבוננו בשינויים הפתולוגיים של השתלים תחת מיקרוסקופ אור של 400x.
  3. צביעת C4d
    1. חותכים את הדגימות המוטבעות בפרפין לחלקים של 4 מיקרון, שטחו את החתכים במים בטמפרטורה של 42 מעלות צלזיוס, וייבשו אותם בתנור בטמפרטורה של 60 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
    2. דה-פרפין והידרציה של הרקמה על ידי שימוש רציף בקסילן I, קסילן II, אתנול ומים דה-יוניים.
    3. טבלו את החתכים בתמיסת שאיבת אנטיגנים EDTA, חממו בטמפרטורה של 95-100°C למשך כ-15 דקות, וקררו לטמפרטורת החדר.
    4. דגרו את החתכים בתמיסת מי חמצן של 3% בטמפרטורת החדר למשך 10-15 דקות כדי לנטרל פרוקסידאז אנדוגני.
    5. דילל את נוגדני האנטי-C4d (1:200) עם מדלל נוגדנים ודגור עם החתכים בטמפרטורה של 4°C במהלך הלילה. לאחר הדגירה, שטפו את החלקים עם PBS.
    6. מוסיפים את הנוגדנים המשניים המתאימים ודגרו בטמפרטורת החדר למשך 30 דקות, ואז שטפו עם PBS.
    7. מוסיפים תמיסת כרומוגן DAB ודגרו בטמפרטורת החדר למשך 30 שניות לצביעה.
    8. בצע צביעת נגד עם המטוקסילין, ייבוש באתנול, טבול בקסילן והתקנה עם שרף נייטרלי.
    9. התבונן בתוצאות הצביעה של השתלים תחת מיקרוסקופ אור של 400x.

7. ניתוח סטטיסטי

  1. השתמשו בסטיית ממוצע ± תקן כדי להציג את כל הנתונים.
  2. השתמש במבחן t להשוואות קבוצתיות של נתונים רציפים עם התפלגות נורמלית, בעוד שמבחן Mann-Whitney U להשוואות קבוצתיות של נתונים רציפים שאינם עוקבים אחרי התפלגות נורמלית.
  3. השתמשו בניתוח קפלן-מאייר כדי להשוות את זמן ההישרדות של אלוגרפטים לבביים בין קבוצות.
  4. השתמשו בגרסה 27.0 של SPSS לניתוח סטטיסטי של כל הנתונים, והתייחסו לערך P של <0.05 כמובהק סטטיסטית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

זמן הישרדות באלוגרפט הלב
לאחר הקמת מודל העכבר בהצלחה, הוערכו זמני הישרדות השתל בין קבוצות באמצעות ניתוח קפלן-מאייר. כצפוי, עכברים בקבוצת PS הראו הישרדות ממוצעת קצרה משמעותית של אלוגרפטים לבביים בהשוואה לאלו שבקבוצת ה-NS (2.8 ± 0.4 ימים לעומת 6.8 ± 0.7 ימים, P < 0.01), הנובע מ-AMR חריף. כדי להקל על הערכה עתידית של אסטרטגיות טיפוליות ל-AMR חריפה, ניתנה CsA להארכת הישרדות האלוגרפטים ולהרחבת חלון הטיפול. התוצאות הראו כי קבוצת PS + CsA הייתה בעלת הישרדות ממושכת משמעותית של...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

נכון להיום, הטיפולים ל-AMR בשלב מאוחר אינם יעילים, ושיטות אמינות לאבחון מוקדם חסרות 22,23,24,25. כדי להתמודד עם הפער הזה, מחקר זה הקים מודל עכבר AMR חריף כדי להקל על חקירה מכנית. המקבלים עברו רגישות מוקדמת ל-ST וניתנה להם CsA לדיכוי aTCMR הנלווי. ניתוח פתולוגי הראה כי אלוגרפטים בקבוצת PS+CsA פיתחו נגעים טיפוסיים של AMR, כולל פגיעה מיקרווסקולרית והצטברות C4d, כב...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין ניגוד עניינים.

תודות

מחקר זה נתמך על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס' 82200847), פרויקט המדע והטכנולוגיה של עיר גואנגג'ואו (מס' 2024A03J0765), וקרן המחקר למדעי הרפואה של גואנגדונג (מס' A2025268).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
נוגדן מונוקלונלי אנטי-C4dהיקולט ביוטק (הולנד)HP8034לאימונוהיסטוכימיה (זיהוי הצטברות משלים)
סט מלא של כלי מיקרוכירורגיהחברת ציוד רפואי גואנגג'ואו קיחואה בע"מ.משמש לביצוע ניתוחי השתלת לב בעכברים
מיקרוסקופ כירורגי סטריאוסקופי עם זום רציףבייג'ינג ג'ונגטיאן גואנגג'נג טכנולוגיה בע"מTS-39NKמשמש לביצוע ניתוחי השתלת לב בעכברים
ציקלוספורין Aנוברטיס פארמה (שווייץ)H20100673משמש לעיכוב TCMR בעכברים מקבלים
נוגדן IgG נגד עכבר FITCביו לג'נד (ארה"ב)406001משמש לכימות ציטומטרי זרימה של רמות DSA-IgG
ציטומטר זרימהבקטון דיקינסון, ארה"בBD FACScaliburמשמש להערכת רמות DSA בסרום בעכברים מקבלים
נוגדן IgM אנטי-עכבר PEביו לג'נד (ארה"ב)406507משמש לכימות ציטומטרי זרימה של רמות DSA-IgM
מערכת הרדמה בגזים קטנים לבעלי חיים קטניםאנחווי ג'נגחואה ביו-אינסטרומנט ציוד בע"מ.ZH-MZJמצויד באיזופלורן להרדמה כללית
מהדקי בולדוג וסקולרייםחברת רובוז כירורגיה אינסטרומנטRS-5481Tמשמש לחסימת זרימת הדם במהלך השתלת לב

מקורות

  1. Zhu, Y., et al. The Stanford experience of heart transplantation over five decades. Eur Heart J. 42 (48), 4934-4943 (2021).
  2. Truby, L. K., et al. Donation after circulatory death in heart transplantation: History, outcomes, clinical challenges, and opportunities to expand the donor pool. J Card Fail. 28 (9), 1456-1463 (2022).
  3. Yalcintas, A., et al. Risk factors of antibody-mediated rejection and predictors of outcome in kidney transplant recipients. Exp Clin Transplant. 18 (Suppl 1), 29-31 (2020).
  4. Everitt, M. D., et al. Clinical outcomes after a biopsy diagnosis of antibody-mediated rejection in pediatric heart transplant recipients. J Heart Lung Transplant. 44 (1), 82-91 (2025).
  5. Fernando, S. C., Polkinghorne, K. R., Lim, W. H., Mulley, W. R. Early versus late acute AMR in kidney transplant recipients - A comparison of treatment approaches and outcomes from the ANZDATA Registry. Transplantation. 107 (11), 2424-2432 (2023).
  6. Reed, E. F., et al. Acute antibody-mediated rejection of cardiac transplants. J Heart Lung Transplant. 25 (2), 153-159 (2006).
  7. Halverson, L. P., Hachem, R. R. Antibody-mediated rejection: Diagnosis and treatment. Clin Chest Med. 44 (1), 95-103 (2023).
  8. Coutance, G., et al. Intermediate-term outcomes of complement inhibition for prevention of antibody-mediated rejection in immunologically high-risk heart allograft recipients. J Heart Lung Transplant. 42 (10), 1464-1468 (2023).
  9. Piñeiro, G. J., et al. plasma exchange and immunoglobulins: An ineffective treatment for chronic active antibody-mediated rejection. BMC Nephrol. 19 (1), 261(2018).
  10. Lu, C., et al. Y4 RNA fragment alleviates myocardial injury in heart transplantation via SNRNP200 to enhance IL-10 mRNA splicing. Mol Ther. 33 (4), 1735-1748 (2025).
  11. Zhao, J., et al. Monotherapy with anti-CD70 antibody causes long-term mouse cardiac allograft acceptance with induction of tolerogenic dendritic cells. Front Immunol. 11, 555996(2021).
  12. Lin, C. M., Gill, R. G., Mehrad, B. The natural killer cell activating receptor, NKG2D, is critical to antibody-dependent chronic rejection in heart transplantation. Am J Transplant. 21 (11), 3550-3560 (2021).
  13. See, H. L. E., et al. Heart transplantation from brain dead donors: A systematic review of animal models. Transplantation. 104 (11), 2272-2289 (2020).
  14. Van Averbeke, V., et al. Host immunity influences the composition of mouse gut microbiota. Front Immunol. 13, 828016(2022).
  15. Leão, A. C., et al. Different responses involving Tfh cells delay parasite-specific antibody production in Trypanosoma cruzi acute experimental models. Front Immunol. 16, 1487317(2025).
  16. Liao, T., et al. In vivo attenuation of antibody-mediated acute renal allograft rejection by ex vivo TGF-β-induced CD4⁺Foxp3⁺ regulatory T cells. Front Immunol. 8, (2017).
  17. Zhao, D., et al. Triptolide inhibits donor-specific antibody production and attenuates mixed antibody-mediated renal allograft injury. Am J Transplant. 18 (5), 1083-1095 (2018).
  18. Zhao, D., et al. Mouse model established by early renal transplantation after skin allograft sensitization mimics clinical antibody-mediated rejection. Front Immunol. 8, 1356(2018).
  19. Ma, M., et al. Blockade of IL-6/IL-6R signaling attenuates acute antibody-mediated rejection in a mouse cardiac transplantation model. Front Immunol. 12, 778359(2021).
  20. Qian, Z., et al. Antibody and complement-mediated injury in transplants following sensitization by allogeneic blood transfusion. Transplantation. 82 (7), 857-864 (2006).
  21. Mang, Y., Zhang, S., Zhao, J., et al. Characteristics of pre-sensitization-related acute antibody-mediated rejection in a rat model of orthotopic liver transplantation. Ann Transl Med. 10 (19), 1066(2022).
  22. Böhmig, G. A., et al. Antibody-mediated rejection - treatment standard. Nephrol Dial Transplant. 40 (8), 1615-1627 (2025).
  23. Massat, M., et al. Do anti-IL-6R blockers have a beneficial effect in the treatment of antibody-mediated rejection resistant to standard therapy after kidney transplantation. Am J Transplant. 21 (4), 1641-1649 (2021).
  24. Nickerson, P. W. Rationale for the IMAGINE study for chronic active antibody-mediated rejection (caAMR) in kidney transplantation. Am J Transplant. 22 (Suppl 4), 38-44 (2022).
  25. Lee, B. T., Fiel, M. I., Schiano, T. D. Antibody-mediated rejection of the liver allograft: An update and a clinico-pathological perspective. J Hepatol. 75 (5), 1203-1216 (2021).
  26. Alegre, M. L., Atkinson, C., Issa, F., Valujskikh, A., Zhang, Z. J. Best practices of heart transplantation in mice. Am J Transplant. 25 (9), 1820-1829 (2025).
  27. Liu, Y., et al. Donor MHC-specific thymus vaccination allows for immunocompatible allotransplantation. Cell Res. 35 (2), 132-144 (2025).
  28. Charmetant, X., et al. Inverted direct allorecognition triggers early donor-specific antibody responses after transplantation. Sci Transl Med. 14 (663), eabg1046(2022).
  29. Ma, N., et al. Targeting TFH cells is a novel approach for donor-specific antibody desensitization of allograft candidates: An in vitro and in vivo study. Haematologica. 109 (4), 1233-1246 (2024).
  30. Charreau, B. Cellular and molecular crosstalk of graft endothelial cells during AMR: Effector functions and mechanisms. Transplantation. 105 (11), e156-e167 (2021).
  31. Nankivell, B. J., P'Ng, C. H., Shingde, M. Glomerular C4d immunoperoxidase in chronic antibody-mediated rejection and transplant glomerulopathy. Kidney Int Rep. 7 (7), 1594-1607 (2022).
  32. Manral, P., Caza, T. N., Storey, A. J., Beck, L. H. Jr, Borza, D. B. The alternative pathway is necessary and sufficient for complement activation by anti-THSD7A autoantibodies, which are predominantly IgG4 in membranous nephropathy. Front Immunol. 13, 952235(2022).
  33. Zarantonello, A., Revel, M., Grunenwald, A., Roumenina, L. T. C3-dependent effector functions of complement. Immunol Rev. 313 (1), 120-138 (2023).
  34. Hubler, F., et al. Discovery and characterization of a new class of C5aR1 antagonists showing in vivo activity. J Med Chem. 67 (5), 4100-4119 (2024).
  35. Luan, D., et al. FOXP3 mRNA profile prognostic of acute T cell-mediated rejection and human kidney allograft survival. Transplantation. 105 (8), 1825-1839 (2021).
  36. Carter, N. M., Pomerantz, J. L. Calcineurin inhibitors target Lck activation in graft-versus-host disease. J Clin Invest. 131 (11), e149934(2021).
  37. Notarantonio, A. B., et al. Differential clinical and immunological impacts of anti-T-lymphocyte globulin (ATLG) vs. anti-thymocyte globulin (ATG) in preventing graft-versus-host disease post-allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: A comparative study. Am J Hematol. 100 (4), 626-637 (2025).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Cyclosporine ADSA IgGC4d

מאמרים קשורים