הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר מחקר

אנדוטוקסין בסרום כסמן אבחנתי ללגיונלה פנאומופילה בזיהומים גרם-שליליים

131 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/70502

⸱

30 באפריל 2026

 ,  ,  , 
1Department of Critical Care Medicine, Zhongshan City People's Hospital, 2Department of Radiology, Zhongshan City People's Hospital

במאמר זה

סיכום

אבחון מהיר של זיהום בלגיונלה פנאומופילה אצל חולים קריטיים נותר מאתגר. מחקר קוהורט רטרואקטיבי זה מעריך את כימות האנדוטוקסין בסרום באמצעות בדיקת Limulus amebocyte lysate כסמן ביולוגי נלווה, במטרה לסייע בהבדלת זיהום לגיונלה מפתוגנים אחרים ולהנחות טיפול אנטימיקרוביאלי מוקדם.

תקציר

הבחנה מהירה ומדויקת של זיהומי לגיונלה פנאומופילה מזיהומים חיידקיים גראם-שליליים אחרים נותרה אתגר משמעותי ברפואה נמרצית. למרות הפעילות האנדוטוקסית הפנימית הנמוכה יחסית שלה, תצפיות קליניות הצביעו על רמות גבוהות של אנדוטוקסין במחזור הפעולה אצל חולי לגיונלוזיס. מחקר קוהורט רטרוספקטיבי זה ניתח 118 חולים במצב קריטי עם זיהומים מיקרוביולוגיים מאושרים שאושפזו ביחידת טיפול נמרץ בין ינואר 2020 לדצמבר 2023. החולים סווגו לארבע קבוצות פתוגנים: Legionella pneumophila (n = 18), חיידקים גרם-שליליים אחרים (n = 68), חיידקים גרם-חיוביים (n = 24), ופטריות (n = 8). רמות האנדוטוקסין בסרום נמדדו תוך 24 שעות מהקבלה לטיפול נמרץ באמצעות בדיקת ליזאט כרומוגנית קינטית של Limulus amebocyte. מטופלים עם זיהום בלגיונילה פנאומופילה הראו רמות אנדוטוקסין גבוהות משמעותית מאשר אלו עם זיהומים גרם-שליליים אחרים (ממוצע 2.15 ± 1.28 לעומת 0.61 ± 0.74 EU/mL). באמצעות סף של > 2.5 EU/mL, כימות האנדוטוקסין הראה רגישות של 77.8% וסגוליות של 89.7% להבחנה בין זיהומי לגיונלה, עם ערך חיזוי שלילי של 95.3%. רגרסיה לוגיסטית רב-משתנית הראתה כי אנדוטוקסין > 2.5 EU/mL נשאר קשור באופן עצמאי לזיהום בלגיונלה (יחס OR מותאם 15.7, רווח בר-סמך 95% 3.84–64.2, עמ' < 0.001). ממצאים אלו מצביעים על כך שכימות האנדוטוקסין בסרום עשוי לשמש כסמן ביולוגי עזר לסיוע בזיהוי מוקדם של זיהום Legionella pneumophila אצל חולים קשים.

מבוא

ההכרה הקלינית והטיפול המהיר בזיהומי Legionella pneumophila מהווים אחד האתגרים המשמעותיים ביותר ברפואה נמרצת עכשווית, שבה עיכובים באבחון עלולים להוביל לתוצאות קטסטרופליות אצל מטופלים פגיעים. חיידק זה, גרם-שלילי, גורם לדלקת ריאות קשה עם שיעורי תמותה הנעים בין 25% ל-50% בקרב מטופלים מאושפזים, במיוחד אלו הזקוקים לטיפול נמרץ1. אורח החיים התוך-תאי הייחודי של האורגניזם בתוך מקרופאגים אלוואולריים, יחד עם דרישות הגדילה הקפדניות שלו ועמידותו לסוכנים אנטי-מיקרוביאליים סטנדרטיים, יוצרים סערה מושלמת של מורכבות אבחנתית וטיפולית שתסכלה את הרופאים במשך עשרותשנים.

הגישות האבחנתיות הנוכחיות ללגיונלוזיס נותרות מתסכלות ובלתי מספקות לדחיפות הנדרשת על ידי חולים במצב קריטי. בדיקת האנטיגן לשתן בתקן הזהב, אף שהיא ספציפית, מזהה רק את L. pneumophila serogroup 1, שמהווה כ-80–90% מהזיהומים, ומשאירה פער אבחוני משמעותי לסרוגרופ ומין3 אחרים. שיטות תרבית, אף שהן מקיפות, דורשות מדיום מיוחד לתמצית שמרי פחם עם בופר ובדרך כלל מניבות תוצאות רק לאחר 48–72 שעות, עיכוב שעלול להיות קטלני אצל חולי ספטיקה4. טכניקות אבחון מולקולרית, כולל תגובת שרשרת פולימראז ורצף מטגנומי מהדור הבא, אף שהן רגישות ומהירות, נשארות יקרות ואינן זמינות באופן אוניברסלי, במיוחד בסביבות מוגבלות במשאבים או בשעות לא פעילות כאשר החלטות קליניות מיידיותהן הקריטיות ביותר.

המורכבות האבחנתית מחמירה עוד יותר בשל ההופעה הקלינית הלא-ספציפית של לגיונלוזיס, שיכולה לחקות באופן קרוב צורות אחרות של דלקת ריאות קהילתית חמורה. בעוד שההוראה הקלאסית מדגישה מאפיינים מובחנים כמו היפונטרמיה, תסמינים נוירולוגיים ותסמינים במערכת העיכול, ממצאים אלו אינם נוכחים באופן אוניברסלי ואינם מספיק ספציפיים כדי להבחין באופן אמין בין לגיונלה לפתוגנים חיידקיים אחרים6. כתוצאה מכך, קלינאים נוטים לעיתים להשתמש בטיפול אנטימיקרוביאלי אמפירי רחב טווח שעלול לכסות באופן לא מספק את הלגיונלה או לחשוף מטופלים ללא צורך לחומרים בעלי פרופיל רעילות משמעותי, מה שתורם למשבר הגובר של עמידות אנטימיקרוביאלית7.

הדילמה האבחנתית הזו הגבירה את החיפוש אחר סמנים ביולוגיים מהירים ואמינים שיכולים להנחות החלטות טיפוליות מוקדמות. סמנים דלקתיים מסורתיים, כולל חלבון C-תגובתי, פרוקלציטונין ואינטרלוקין-6, אף שהם מוגברים בזיהומים חיידקיים, חסרים את הספציפיות הנדרשת להבדיל בין לגיונלה לפתוגנים גראם שליליים אחרים8. גישות מתקדמות יותר, כמו חתימות טרנסקריפטומיות של מארח וניתוח פרוטאום, אף שהן מבטיחות בהקשרים מחקריים, נותרות בלתי מעשיות לשימוש קליני שגרתי בשל מורכבותן, עלותן וזמני ההחזרה הארוכיםשלהן.

באופן פרדוקסלי, למרות מחקר נרחב על הפתופיזיולוגיה הייחודית של לג'יונלה, אחת התכונות הבסיסיות ביותר של חיידקים גרם-שליליים, ייצור אנדוטוקסין, זכתה לתשומת לב מוגבלת ככלי אבחון פוטנציאלי ללגיונלוזיס. ליפופוליסכריד (LPS), המרכיב העיקרי של הממברנה החיצונית של חיידקים גרם-שליליים, מפעיל את מפל הדלקת המארח שמאפיינת ספסיס גרם-שלילי10. עם זאת, לגיונלה LPS מציג פעילות אנדוטוקסית מופחתת משמעותית בהשוואה לפתוגנים גרם-שליליים כמו Escherichia coli ו-Pseudomonas aeruginosa, ודורש ריכוזים גבוהים פי 100–1000 כדי לעורר תגובות דלקתיות דומות במודלים במעבדה11. עוצמה מופחתת זו נובעת מהבדלים מבניים ברכיב הליפיד A, כולל שינויים בהרכב חומצות השומן ודפוסי הזרחון שמפחיתים את הזיהוי שלו על ידי קולטן Toll-like 4 ונתיבי איתות נלווים12.

למרות ההפחתה המוכרת הזו בפעילות האנדוטוקסית במבחנה, תצפיות קליניות הצביעו על פרדוקס מוזר: חולים עם דלקת ריאות לגיונלה לעיתים קרובות חווים תגובות דלקתיות מערכתיות חמורות שלא ניתן להבחין באלו שנראו בספסיס גראם-שליליקלאסי 13. הסתירה הברורה הזו בין ממצאי המעבדה למצגים קליניים הובילה לספקולציות לגבי מנגנונים חלופיים להעלאת אנדוטוקסין בלגיונלוזיס, כולל פירוק חיידקי המוני במהלך שכפול תוך-תאי, העברת אנדוטוקסין אנטרובקטריאלית משנית במעיים, או רגישות מוגברת של המארח ל-LPS בלגיונלה בהקשר של מחלה קשה14.

המדידה הקלינית של אנדוטוקסין בסירקולציה התפתחה משמעותית מאז פיתוח בדיקת Limulus amebocyte lysate (LAL) בשנות ה-70. בתחילה שימש בעיקר לבקרת איכות תרופות, וכימות האנדוטוקסין מצא יותר ויותר יישומים ברפואה קלינית, במיוחד באבחון ופרוגנוזה של ספסיס גראם שלילי15. בדיקת פעילות האנדוטוקסין (EAA), המשתמשת בנייטרופילים של מטופלים המוכנים על ידי קומפלקסים של נוגדנים אנדוטוקסינים, הראתה פוטנציאל מיוחד בהבחנה בין זיהומים גראם-שליליים לזיהומים גראם-חיוביים, עם רגישויות מדווחות של 64–85% וספציפיות של 91–95%16. עם זאת, היישום הספציפי של כימות אנדוטוקסין לאבחון לגיונלה מעולם לא הוערך באופן שיטתי, מה שמייצג פער ידע משמעותי בהבנת הפתוגן המאתגר הזה.

התועלת הקלינית הפוטנציאלית של מדידת אנדוטוקסין חורגת מעבר לזיהוי פתוגן פשוט. בעידן של עמידות גוברת לאנטימיקרוביאלים ודגש גובר על ניהול אנטימיקרוביאלי, כלי אבחון מהירים שיכולים להנחות טיפול ממוקד הפכו ליקרי ערך יותרויותר 17. היכולת לשלול בביטחון את זיהום הלגיונלה בהתבסס על רמות אנדוטוקסין נמוכות יכולה למנוע חשיפה מיותרת לקינולונים או מקרולידים, בעוד שרמות גבוהות בהקשרים קליניים מתאימים עלולות להוביל לטיפול פעיל מוקדם בלגיונלה לפני שיהיו זמינות תוצאות בדיקה מאשרות18. גישה כזו עשויה לשפר את תוצאות המטופלים תוך תמיכה בשימוש רציונלי באנטימיקרוביאליים במסגרת טיפול נמרץ.

בסביבות טיפול נמרץ מעשיות, בדיקות אנדוטוקסין יכולות לשמש ככלי עזר מוקדם בתהליך האבחון לדלקת ריאות חמורה. מכיוון שניתן לכימות אנדוטוקסין להתבצע במהירות וזמין באופן נרחב במעבדות קליניות, ייתכן שהוא מספק מידע ראשוני בזמן שבדיקות אבחון קונבנציונליות, כגון בדיקות אנטיגן בדרכי השתן, תרבית או אבחון מולקולרי, ממתינים לטיפול. בהקשר זה, מדידת אנדוטוקסין יכולה להשלים את אסטרטגיות האבחון הקיימות של לגיונלה על ידי סיוע לרופאים להעריך במהירות את הסבירות לאנדוטוקסמיה גראם שלילית ולהעדיף טיפול אנטימיקרוביאלי פעיל בלגיונלה כאשר החשד הקליני גבוה. מחקר זה מספק את ההערכה השיטתית הראשונה של כימות אנדוטוקסין בסרום כסמן ביולוגי אבחנתי להבחנה בין Legionella pneumophila מזיהומים חיידקיים גרם-שליליים אחרים בחולים קריטיים, תוך פתרון פער ידע קריטי זה ואולי לתרום לשיפור גישות האבחון לאחד הפתוגנים המאתגרים ביותר בטיפול נמרץ.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

מחקר קוהורט רטרואקטיבי זה נערך ביחידת טיפול נמרץ רפואי (ICU) עם 22 מיטות בבית החולים העממי של עיר ג'ונגשאן, מרכז רפואי אקדמי שלישוני. פרוטוקול המחקר אושר על ידי ועדת הביקורת המוסדית של בית החולים העממי של עיר ג'ונגשאן (מספר אישור: 2026-032). עקב עיצוב רטרוספקטיבי ושימוש בנתונים שלא מזוהים בדיעבד, הדרישה להסכמה מדעת בוטלה, וכל ההליכים הבטיחו סודיות מטופל באמצעות אנונימיזציה ועמידה בהצהרת הלסינקי וחוקי הגנת המידע הרלוונטיים. בחירת המטופלים וזרימת המחקר מפורטות באיור 1, בעוד ששיטות כימות האנדוטוקסין מתוארות להלן, כאשר התוצאות מסודרות לפי קבוצות פתוגנים כפי שמוצג באיור 2. כל הנתונים הופקו מרשומות רפואיות קיימות וממסדי נתונים במעבדה ללא התערבויות פרוספקטיביות או מגע עם מטופלים.

אוכלוסיית המחקר
החוקרים כללו את כל המטופלים הבוגרים (בני ≥18) שאושפזו בטיפול נמרץ בין ינואר 2020 לדצמבר 2023 ועמדו בקריטריונים הבאים: קריטריוני ההכללה היו: חשד קליני לזיהום חיידקי חמור או אלח דם; תרבית חיידקים חיובית או אישור אבחון מולקולרי; מדידת אנדוטוקסין בסרום בתוך 24 שעות מהכניסה ליחידת טיפול נמרץ; ונתונים קליניים ומעבדתיים מלאים הזמינים לניתוח. קריטריוני ההוצאה היו כדלקמן: זיהומים מעורבים עם פתוגנים מרובים; בדיקת אבחון לא שלמה; טיפול מדכא חיסון עדכני שיכול להשפיע על תגובה דלקתית; מחלות דלקתיות כרוניות; מטופלים שמתו בתוך 24 שעות מהקבלה לפני הערכה מלאה. מאפייני המשתתפים, כולל דמוגרפיה, מחלות נלוות והופעה קלינית, נלקחו כדי להבטיח קבוצה מייצגת של חולים במצב קריטי עם חשד לזיהומים גראם שליליים. לא בוצעו התערבויות במסגרת המחקר, בשל אופיו התצפיתי רטרוספקטיבי; אמצעי בקרה התמקדו בסטנדרטיזציה של איסוף נתונים להפחתת הטיית בחירה.

שיטות מיקרוביולוגיות
האבחון של Legionella pneumophila נקבע באמצעות שילוב של בדיקות אנטיגן בדרכי השתן, תרבית על אגר תמצית שמרי פחם ממוגנת, וריצוף מטגנומי מהדור הבא (mNGS) כאשר זמין. בדיקת אנטיגן שתן שימשה כאמצעי האבחון העיקרי בשל השינוי המהיר והרגישות הקלינית הגבוהה שלהן. תרבית חיידקים בוצעה כאשר דגימות נשימה היו זמינות. mNGS יושם במקרים נבחרים שבהם בדיקות מיקרוביולוגיות קונבנציונליות היו שליליות או לא חד-משמעיות, אך החשד הקליני לפתוגנים לא טיפוסיים נותר גבוה. פתוגנים חיידקיים נוספים זוהו באמצעות שיטות מיקרוביולוגיות סטנדרטיות, כולל מערכות תרבית דם אוטומטיות, טכניקות תרבית קונבנציונליות ואבחון מולקולרי כפי שנדרש קלינית. כל ההערכות המיקרוביולוגיות בוצעו לפי פרוטוקולי מעבדה מאומתים כדי להבטיח דיוק ושחזור. כל הבדיקות המיקרוביולוגיות בוצעו במעבדת המיקרוביולוגיה הקלינית המוסמכת של בית החולים בהתאם לנהלים הסטנדרטיים.

כימות אנדוטוקסין
רמות האנדוטוקסין בסרום נמדדו באמצעות בדיקת LAL (Limulus amebocyte lysate) הכרומוגנית הקינטית בהתאם לנהלים סטנדרטיים במעבדה. דגימות הדם נאספו בחצוצרות סטריליות וללא פירוגן בתוך 24 שעות מהכניסה לטיפול נמרץ. הדגימות צונטרו ב-3000 × גרם למשך 10 דקות לקבלת סרום, ולאחר מכן אוחסנו בטמפרטורה של −80 מעלות צלזיוס עד לניתוח. לפני הבדיקות, דגימות הסרום מדוללות 1:10 במים נטולי אנדוטוקסין כדי להפחית את ההפרעות המטריצות הפוטנציאליות. ריכוזי האנדוטוקסין נמדדו באמצעות מערכת זיהוי אנדוטוקסין ניידת המבוססת על שיטת LAL כרומוגנית קינטית. המדידות בוצעו לפי נהלי זיהוי קינטי סטנדרטיים. טווח זיהוי הבדיקה היה 0.01–10.0 EU/mL, עם מקדם שונות בין הבדיקות < 15%. כל המדגמים נותחו בשכפול, והערך הממוצע שימש לניתוח סטטיסטי. בקרות חיוביות ושליליות שסופקו עם מערכת הבדיקה נכללו בכל הרצה כדי להבטיח אמינות ובקרת איכות.

איסוף נתונים
הנתונים הקליניים נלקחו מרשומות רפואיות אלקטרוניות באמצעות טופס דוח מקרה סטנדרטי. המשתנים כללו דמוגרפיה, מחלות נלוות, הופעה קלינית, ציוני חומרה (APACHE II, SOFA), פרמטרים במעבדה, טיפול אנטימיקרוביאלי ותוצאות קליניות. הערכות התוצאה התמקדו בדיוק האבחון כנקודת הסיום העיקרית, כאשר נקודות הקצה המשניות כללו תמותה ב-7 ימים, 28 ימים ושחרור מבית החולים. פרוצדורות המעקב כללו סקירת רשומות מטופלים עד לשחרור או פטירה כדי לאסוף את כל נתוני התוצאה. התוצאה העיקרית הייתה דיוק האבחון של כימות האנדוטוקסין לזיהוי זיהומים ב-L. pneumophila. תוצאות משניות כללו תמותה ב-7 ימים, 28 ימים ושחרור מבית החולים. הנתונים סווגו לארבע קבוצות פתוגנים: Legionella pneumophila (n = 18), חיידקים גרם-שליליים אחרים (n = 68), חיידקים גרם-חיוביים (n = 24), וזיהומים פטרייתיים (n = 8).

ניתוח סטטיסטי
משתנים רציפים הוצגו כסטיית תקן ממוצעת ± (SD) או כחציון (טווח בין-רבעוני, IQR) לפי התפלגות הנתונים שנבדקה באמצעות מבחן שפירו–וילק. משתנים קטגוריים הוצגו כתדירויות ואחוזים. ההבדלים בין קבוצות הושוו באמצעות ניתוח חד-כיווני של שונות (ANOVA) או מבחן קרוסקל–ווליס למשתנים רציפים, ומבחן פישר המדויק למשתנים קטגוריים, לפי הצורך. ביצועי האבחון של רמות האנדוטוקסין לזיהוי זיהום ב-Legionella pneumophila הוערכו באמצעות ניתוח עקומת ROC. ערך החיתוך האופטימלי נקבע באמצעות מדד יודן. רגישות, ספציפיות, ערך חיזוי חיובי, ערך חיזוי שלילי ויחסי סבירות חושבו עם טווחי אמון תואמים של 95%. ניתוח רגרסיה לוגיסטית חד-משתנית בוצע לראשונה כדי לזהות מנבאים פוטנציאליים לזיהום בלגיונלה. משתנים עם p < 0.10 בניתוח חד-משתני הוזנו לאחר מכן למודל רגרסיה לוגיסטית רב-משתנית כדי לקבוע מנבאים עצמאיים. דווחו יחסי סיכויים מותאמים (ORs) עם טווחי ביטחון של 95%. תוצאות ההישרדות נותחו באמצעות עקומות הישרדות קפלן–מאייר, וההבדלים בין קבוצות הוערכו באמצעות מבחן ה-log-rank. ערך p דו-צדדי < 0.05 נחשב מובהק סטטיסטית. כל הניתוחים והוויזואליזציות הסטטיסטיות בוצעו באמצעות גרסה R 4.3.0.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

אוכלוסיית מחקר ומאפייני הבסיס
מתוך סקר ראשוני של 312 אשפוזים בטיפול נמרץ, 118 מטופלים עמדו בקריטריוני ההכללה ונכללו בקבוצת הניתוח הסופית. מטופלים אלו סווגו לארבע קבוצות פתוגנים: Legionella pneumophila (n = 18), חיידקים גרם-שליליים אחרים (n = 68), חיידקים גרם-חיוביים (n = 24), ופטריות (n = 8) (איור 1). מאפייני הבסיס היו בדרך כלל ניתנים להשוואה בין קבוצות (טבלה 1). חולים עם זיהום בלגיונלה פנאומופילה הראו ש...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מחקר זה מספק את ההערכה השיטתית הראשונה של כימות אנדוטוקסין בסרום כסמן ביולוגי אבחנתי להבחנה בין זיהומי Legionella pneumophila לזיהומים חיידקיים גראם שליליים אחרים בחולים קריטיים. ממצאי המחקר הנוכחיים חושפים פרדוקס בולט שמאתגר את ההבנה המקובלת של הפתופיזיולוגיה של לגיונלה: למרות תועדה מופחתת היטב של עוצמת האנדוטוקסיס המופחתת של האורגניזם במחקרי מעבדה, חולים עם לגיונלוזיס מראים רמות אנדוטוקסינים גבוהות משמעותית במחזור בהשוואה לאלו שנדבקו בחיידקים גרם-שליליים אחרים. תצפית ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים מנוגדים הקשורים למחקר זה. אין קונפליקטים פיננסיים או לא-פיננסיים, כולל תעסוקה, ייעוץ, בעלות על מניות, שכר כבוד או עדות מומחים בתשלום.

תודות

אנו מודים לצוות הטיפול הנמרץ בבית החולים העממי של עיר ג'ונגשאן על תמיכתם באיסוף נתונים ולמטופלים שהנתונים האנונימיים שלהם תרמו למחקר זה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
בדיקת ליזאט אמבוציטים של לימולוס כרומוגנית קינטיתעמיתים מעבדות קייפ קוד / צ'ארלס ריברKTA-2 או מקבילמשמש למדידת אנדוטוקסין כמותית בסרום; טווח זיהוי 0.01– 10.0 EU/mL
אגר תמצית שמרי פחם עם בופראבחון BD / רמל221836 / R05001אגר סלקטיבי לגידול&nb; לגיונילה פנאומופילה.
צינורות איסוף דם סטריליים ללא פירוגןBD Vacutainer / Greiner Bio-One368498 / 455092לאיסוף דם ורידי כדי למנוע זיהום אנדוטוקסין.
צינורות מיקרוצנטריפוגה ללא פירוגןקורנינג / אפנדורף3620 / 022364111לאיסוף ואחסון סרום.
– 80 & deg; מקפיא Cתרמו-סיינטיפיק / פנסוניקפורמה 900 / MDF-U73Vלאחסון ארוך טווח של דגימות סרום
צנטריפוגה (3,000 פעמים; גרם)אפנדורף / תרמו-סיינטיפיק5810R / סורוול ST 8להפרדת הסרום לאחר קרישת דם.
בדיקת אנטיגן בשתן ל־nbsp;L. pneumophilaBinaxNOW / סופיה430-000 / 30400בדיקת אימונוכרומטוגרפיה מהירה עבור  לגיונלה פנאומופילה  אנטיגן סרוגרופ 1.
פלטפורמת ריצוף מטאגנומית מהדור הבאאילומינה / אוקספורד ננופורMiSeq / MinIONשימש לזיהוי פתוגנים כאשר אבחון קונבנציונלי לא היה חד משמעי.
אפאצ'י II & דפי ניקוד של SOFA––משמש להערכת חומרת המחלה באשפוז בטיפול נמרץ.
מערכת רשומות רפואיות אלקטרוניות––משמש להפקת נתונים רטרוספקטיבית (דמוגרפיה, תוצאות מעבדה, טיפולים, תוצאות).
תוכנה סטטיסטית (גרסה R 4.3.0)קרן R–משמש לכל הניתוחים הסטטיסטיים, כולל ROC, רגרסיה ומודלים של הישרדות.
ציוד מעבדה לבדיקות שגרתיות––כולל אנלייזר CBC, אנלייזר כימיה, מד לקטט, מערכות אימונואסיי CRP/PCT ועוד.

מקורות

  1. Cunha, B. A., Burillo, A., Bouza, E. Legionnaires' disease. Lancet. 387 (10016), 376-385 (2016).
  2. Newton, H. J., Ang, D. K., van Driel, I. R., Hartland, E. L. Molecular pathogenesis of infections caused by Legionella pneumophila. Clin Microbiol Rev. 23 (2), 274-298 (2010).
  3. Diederen, B. M. Legionella spp. and Legionnaires' disease. J Infect. 56 (1), 1-12 (2008).
  4. Murdoch, D. R. Diagnosis of Legionella infection. Clin Infect Dis. 36 (1), 64-69 (2003).
  5. Mercante, J. W., Winchell, J. M. Current and emerging Legionella diagnostics for laboratory and outbreak investigations. Clin Microbiol Rev. 28 (1), 95-133 (2015).
  6. Yu, V. L., et al. Distribution of Legionella species and serogroups isolated by culture in patients with sporadic community-acquired legionellosis: an international collaborative survey. J Infect Dis. 186 (1), 127-128 (2002).
  7. Phin, N., et al. Epidemiology and clinical management of Legionnaires' disease. Lancet Infect Dis. 14 (10), 1011-1021 (2014).
  8. Helbig, J. H., et al. Clinical utility of urinary antigen detection for diagnosis of community-acquired, travel-associated, and nosocomial legionnaires' disease. J Clin Microbiol. 41 (2), 838-840 (2003).
  9. Sweeney, T. E., Wong, H. R., Khatri, P. Robust classification of bacterial and viral infections via integrated host gene expression diagnostics. Sci Transl Med. 8 (346), 346ra91 (2016).
  10. Raetz, C. R., Whitfield, C. Lipopolysaccharide endotoxins. Annu Rev Biochem. 71, 635-700 (2002).
  11. Neumeister, B., et al. Low endotoxic potential of Legionella pneumophila lipopolysaccharide due to failure of interaction with the monocyte lipopolysaccharide receptor CD14. Infect Immun. 66 (9), 4151-4157 (1998).
  12. Zähringer, U., et al. The lipopolysaccharide of Legionella pneumophila serogroup 1 (strain Philadelphia 1): chemical structure and biological activities. Prog Clin Biol Res. 392, 113-139 (1995).
  13. Brieland, J., et al. Replicative Legionella pneumophila lung infection in intratracheally inoculated A/J mice. A murine model of human Legionnaires' disease. Am J Pathol. 145 (6), 1537-1546 (1994).
  14. Marshall, J. C. Lipopolysaccharide: an endotoxin or an exogenous hormone. Clin Infect Dis. 41 (Suppl 7), S470-S480 (2005).
  15. Cohen, J. The detection and interpretation of endotoxaemia. Intensive Care Med. 26 (Suppl 1), S51-S56 (2000).
  16. Romaschin, A. D., et al. A rapid assay of endotoxin in whole blood using autologous neutrophil dependent chemiluminescence. J Immunol Methods. 212 (2), 169-185 (1998).
  17. Barlam, T. F., et al. Implementing an antibiotic stewardship program: guidelines by the Infectious Diseases Society of America and the Society for Healthcare Epidemiology of America. Clin Infect Dis. 62 (10), e51-e77 (2016).
  18. Mandell, L. A., et al. Infectious Diseases Society of America/American Thoracic Society consensus guidelines on the management of community-acquired pneumonia in adults. Clin Infect Dis. 44 (Suppl 2), S27-S72 (2007).
  19. Pierrakos, C., Vincent, J. L. Sepsis biomarkers: a review. Crit Care. 14 (1), R15 (2010).
  20. Seymour, C. W., et al. Time to treatment and mortality during mandated emergency care for sepsis. N Engl J Med. 376 (23), 2235-2244 (2017).
  21. Horwitz, M. A., Silverstein, S. C. Legionnaires' disease bacterium (Legionella pneumophila) multiplies intracellularly in human monocytes. J Clin Invest. 66 (3), 441-450 (1980).
  22. Deitch, E. A. Gut-origin sepsis: evolution of a concept. Surgeon. 10 (6), 350-356 (2012).
  23. Derre, I., Isberg, R. R. Legionella pneumophila replication vacuole formation involves rapid recruitment of proteins of the early secretory system. Infect Immun. 72 (5), 3048-3053 (2004).
  24. Hurley, J. C. Endotoxemia: methods of detection and clinical correlates. Clin Microbiol Rev. 8 (2), 268-292 (1995).
  25. Miller, A. C., Beig, A. A., Frerichs, F. C., Barbaree, J. M., Breiman, R. F., Dufour, A. P. Legionnaires' disease: clinical features. Legionella: Current Status and Emerging Perspectives. , 13-18 (1993).
  26. Ketchum, P. A., Novitsky, T. J. Assay of endotoxin by limulus amebocyte lysate. Methods Mol Med. 36, 3-12 (2000).
  27. Zheng, P., et al. Exploration of Biological Properties and Antibacterial Action against Escherichia coli and Staphylococcus aureus of (LLKK)3-Derived Peptides. Chemistry Select. 8 (17), e202300355 (2023).
  28. Ji, C., Xu, X. Recent Advancements in Macrolide Hybrids against Staphylococcus aureus. Curr Top Med Chem. 21 (27), 2455-2473 (2021).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

כימות אנדוטוקסיניםליזט של אמביוציטים מלומיכוסטיפול נמרץקוהורט רטרוספקטיביזיהומים חיידקייםרגרסיה לוגיסטית
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.