הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

אינטובציה אורוטרכיאלית בסיוע וידאו בחולדות באמצעות אוטוסקופ זול שמחובר לסמארטפון

934 צפיות

DOI:

10.3791/70797

14 ביולי 2026

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר שיטה פשוטה, זולה, בסיוע וידאו לאינטובציה אורוטרכיאלית, המאפשרת אינטובציה מהירה ומונחית ויזואלית בעכברים בוגרים תחת הרדמה איזופלורנית.

תקציר

אינטובציה אנדוטרכיאלית אמינה חיונית לפרוצדורות ניסיוניות בעכברים הדורשים הנשמה מבוקרת, במיוחד במהלך ניתוחי חזה ולב וכלי דם. עם זאת, ניהול דרכי הנשימה בעכברים נותר מאתגר טכנית בשל מגבלות אנטומיות ונגישות מוגבלת לטכניקות אינטובציה זמינות. מטרת הפרוטוקול היא לתאר שיטה פשוטה וזולה לאינטובציה אורוטרכיאלית בעכברים באמצעות לרינגוסקופיה ישירה בסיוע וידאו, שיושמה בהצלחה בקבוצה של 50 חולדות.

פרוטוקול זה משתמש באוטוסקופ וידאו זמין מסחרית עם מקור אור משולב וחיבור אלחוטי לסמארטפון, כדי לספק ויזואליזציה בזמן אמת של דרכי האוויר העליונות. השיטה אינה דורשת שינוי במכשיר או מערכות הדמיה מיוחדות. חולדות בוגרות מורדמות בקסילזין ואיזופלוראן, ממוקמות על פלטפורמת אינטובציה מוטה, ומונמרות תחת הנחיה ויזואלית מתמשכת באמצעות מדריך גמיש וצינור אנדוטרכיאלי. מיקום הצינור הנכון מוגדר על ידי התפשטות דו-צדדית של בית החזה, רוויית חמצן יציבה (SpO₂), וגל CO₂ עקבי בסוף הגאות (קפנוגרפיה). לאחר האינטובציה, אוורור מכני מתחיל ללא לחץ קצה-נשימה חיובי, ונפח הגאות נקבע על 7.5 מ"ל/ק"ג. בקבוצה זו, הטכניקה אפשרה אינטובציה מהירה עם שיעור הצלחה גבוה בניסיון ראשון והייתה קשורה לשכיחות נמוכה של סיבוכים פרי-פרוצדורליים. הדמיה מתמשכת עשויה להפחית את הסיכון לאינטובציה בוושט ולפגיעה בדרכי הנשימה. ממצאים אלו תומכים בהיתכנות גישה זו בתנאים שנבדקו, ללא הסקה מעבר להקשר ניסויי זה.

מבוא

חולדות משמשות באופן נרחב במחקר ניסויי ותרגומי, וייתכן שיהיה צורך באינטובציה אנדוטרכיאלית להליכים המחייבים הנשמה מבוקרת 1,2. עם זאת, אינטובציה אמינה בעכברים נותרת מאתגרת טכנית בשל חלל הפה הקטן, פתח הגלוטה הצר והזווית האנטומית של דרכי הנשימה 3,4,5.

הוצעו מספר גישות להתגבר על מגבלות אלו 6,7,8. ביניהם, טכניקות אינטובציה עיוורת שופרו בשנים האחרונות ויכולות לשפר את שיעורי ההצלחה כאשר משתמשים באסטרטגיות מיקום ספציפיות; עם זאת, שיטות אלו נשארות תלויות מאוד במפעיל וממשיכות לשאת סיכון לכשל או לתופעות לוואי כגון הזזת הוושט או פגיעה בדרכי הנשימה3. פותחו טכניקות בעזרת וידאו לשיפור הדמיית הגלוטיס ולשיפור הבטיחות הפרוצדורלית. בעוד שגישות אלו מספקות ויזואליזציה יעילה של דרכי הנשימה, הן לעיתים דורשות ציוד אנדוסקופי מיוחד, מוניטורים חיצוניים, מערכות הרדמה בשאיפה או מכשירים מותאמים אישית, מה שעשוי להגביל את הנגישות והיישום השגרתי 7,9,10.

למרות ההתקדמות הזו, שיטות רבות עדיין מוגבלות בשל מורכבות טכנית, פולשניות או הסתמכות על ציוד יקר או מותאם שקשה לשחזר במעבדות שונות. היתרון העיקרי של הגישה הנוכחית הוא מתן ויזואליזציה של נתיבי אוויר בעלות נמוכה ללא צורך בשינוי במכשירים. פרוטוקול זה מיועד למעבדות הזקוקות לאינטובציה בעלות נמוכה בסיוע ויזואליזציה ללא גישה למערכות אנדוסקופיות ייעודיות.

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה פשוטה, ניתנת לשחזור וזולה לאינטובציה אורוטרכיאלית בעכברים, באמצעות אוטוסקופ וידאו מסחרי המצויד במקור אור משולב וחיבור אלחוטי לסמארטפון. בניגוד לגישות עם סיוע וידאו שתוארו קודם, טכניקה זו אינה דורשת שינוי במכשיר (למשל, הוספת להב פלסטיק קהה עשוי מכסה מזרק בנפח 1 מ"ל מותאם)11 ומונעת את הצורך במערכות הדמיה חיצוניות (למשל, תצוגות מבוססות מחשב)9,12, תוך מתן ויזואליזציה ברורה בזמן אמת של הפתח הגלוטי. לכן, גישה זו מהווה אלטרנטיבה נגישה למערכות ויזואליזציה יקרות יותר ועלולה להקל על ניהול דרכי האוויר במצבים שבהם אין ציוד אנדוסקופי ייעודי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים בבעלי חיים אושרו על ידי ועדת האתיקה של נורמנד לניסויים בבעלי חיים (CENOMEXA; הרשאת פרויקט מס' 46008). בעלי החיים התרגלו במשך 9 ימים במתקן המוסדי לבעלי חיים לפני הניסויים, עם גישה חופשית למזון ולמים.

1. בעלי חיים והרדמה

  1. השתמש בזכרים של חולדות ויסטר (>12 שבועות; 450–460 גרם). רשמו משקל גוף, ואז נתנו קסילאזין (5 מ"ג/ק"ג, תוך-פריטוניאלי) להרדמה ובופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג, תת-עורי) להרדמה.
  2. הניחו בעלי חיים בתא שאיפה ושמרו על הרדמה למשך 15 דקות באמצעות תערובת של אוויר-איזופלוראן ב-2% (2 ליטר לדקה) וחמצן (0.4 ליטר/דקה).
  3. אשר את עומק ההרדמה על ידי היעדר תנועה ספונטנית והיעדר רפלקסים של נסיגה בגפיים הקדמיות, האחוריות והזנב בתגובה לגירוי רעיל.
    1. אם ההרדמה אינה מספקת, יש להחזיר את החיה לתא ההשראה של האיזופלוראן לעוד כמה דקות עד להשגת רמת הרדמה מתאימה.

2. אינטובציה אורוטרכיאלית

  1. הניחו את העכבר במצב שכיבה על פלטפורמת האינטובציה בזווית של 45° ושמרו על מסכת אוורור מעל דרכי הנשימה לאורך כל ההליך לשמירה על חמצון (חמצן 0.4 ליטר/דקה) והרדמה (אוויר 0.4 ליטר לדקה ואיזופלוראן 2%) (איור 1A-C). אבטח את החיה באמצעות חותכות עליונות באמצעות רצועת וולפו (איור 1B). איסוף עודפי איזופלוראן באמצעות מחסנית פילטר פינוי.
  2. הארכי בעדינות את הלשון והכניסו את האוטוסקופ הווידאו (איור 2) לחלל הפה כדי להזיז את הלשון הרחק מהחיך לכיוון רצפת הפה (איור 3A). קדימו את האוטוסקופ עד שהחיך הרך מתגלה (איור 3B), ואז הפכו בעדינות לחשיפת מיתרי הקול (איור 3C).
    1. אם מיתרי הקול לא נראים לוויזואליים, הזזת את הלשון מחדש על ידי הפעלת אחיזה עדינה והזיתה לכיוון רצפת הפה.
    2. אם מתבצעת אינטובציה בוושט, יש להסיר את המדריך ואת צינור האנדוטרכיה. מיקום מחדש של החיה וודא דמיון ברור של מיתרי הקול על ידי משיכה עדינה ללשון. ודאו שהעקמומיות של המדריך הגמיש מכוונת לכיוון מיתרי הקול לפני שאתם מנסים שוב אינטובציה.
    3. אם מתרחשת ירידה ברוויה בחמצן (למשל, הלשון נראית כחולה או סגולה), עצרו את ההליך ומרחו את מסכת האף על חוטם החיה כדי להחזיר את החמצן.
    4. אם ניסיונות האינטובציה אינם מוצלחים (למשל, לאחר שני ניסיונות) ומתרחשת דה-רוויה, החזירו את החיה לתא ההשראה והגבירו את אספקת החמצן כדי לשחזר חמצון מספק תוך שמירה על איזופלוראן לעומק הרדמה מתאים.
  3. הכנס את המדריך הגמיש בין מיתרי הקול באמצעות העיקול הקדמי שלו (איור 3D).
  4. התקדמו את צינור האנדוטרכיה בזהירות מעל המדריך אל קנה הנשימה עד שמתגלה התנגדות מישושית התואמת לטבעות קנה הנשימה (איור 3E).
    הערה: בפרוטוקול זה, המחברים השתמשו בצינור מתכתי בקוטר משוער של 2.8 מ"מ, כפי שמפורט בטבלת החומרים.
  5. שחרר את העכברוש מרצועת ולפו, הסר את המדריך, חבר את צינור האנדוטרכיאל למכונת הנשמה, ואבטח אותו עם סרט דבק (איור 4A).

3. אימות מיקום הצינורות והאוורור

  1. לפני האינטובציה, הגדר את נפח הגאות ל-7.5 מ"ל/ק"ג.
  2. אשר את היעדר אינטובציה סלקטיבית על ידי התבוננות בהתפשטות דו-צדדית של בית החזה, גל קפנוגרפיה יציב, ורוויית חמצן מספקת (איור 4B,C).
  3. אוורר את החיה באופן מכני.
  4. כוונן את קצב הנשימה כדי לשמור על ערכי CO₂ בסוף הגאות בין 50 ל-60 מ"מ כספית.
    1. אם הקפנוגרפיה (CO₂ בסוף הגאות) עולה על 60 מ"מ כספית, הגבר את קצב הנשימה כדי להחזיר ערכים לטווח היעד.

4. תנאי ניטור פריפרוצדורלי של בעלי חיים

  1. מעקב רציף אחרי רוויית החמצן באמצעות מד חמצן. לשמור על רוויית חמצן היקפית (SpO₂) מעל 95%. אם SpO₂ יורד מתחת לסף זה, יש לבדוק אוורור סלקטיבי (אנדובונכיאלי) ומיקום נכון של צינור לפי הצורך.
  2. מעקב אחרי טמפרטורת הגוף באמצעות גלאי תרמי רקטלי. שמרו על טמפרטורת גוף של 37 מעלות צלזיוס לאורך כל ההליך באמצעות כרית חימום.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

הצלחת האינטובציה הוגדרה כמיקום נכון של צינור האנדוטרכיה המאומת לאחר חיבור למכונת הנשמה באמצעות הרחבת חזה דו-צדדית, רוויה יציבה בחמצן (SpO₂), וגל CO₂ עקבי בסוף הגאות.

אינטובציה אורוטרכיאלית בוצעה על ידי מפעיל יחיד במשך 3 חודשים בקבוצה רצופה של 50 חולדות בוגרות. חמישה בעלי חיים נוספים שימשו בשלב הראשוני לקביעת ושיפור הפרוטוקול ולא נכללו בניתוח הסופי. אף בעל חיים לא הוצא מהקבוצה המדווחת.

האינטובציה הייתה מוצלחת בכל בעלי החיים. הליך האי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מחקר זה מתאר טכניקת לרינגוסקופיה ישירה בסיוע וידאו לאינטובציה אורוטרכיאלית בחולדות באמצעות אוטוסקופ וידאו זמין מסחרית המחובר אלחוטית לסמארטפון. בקבוצה זו, השיטה אפשרה אינטובציה מוצלחת בכל בעלי החיים עם שיעור נמוך של סיבוכים פריפרוצדורליים, בתנאים שנבדקו.

מספר מאפיינים טכניים תרמו לביצוע הפרוצדורלי שנצפה. הצורה המעוקלת של להב האוטוסקופ אפשרה את הזזת פסולת הפה כאשר היא קיימת, והוויזואליזציה המתמשכת של מיתרי הקול אפשרה התאמה בזמן אמת למיקום צינור האנדוטרכיאל. אלמ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

תודות

המחברים מודים לחברי מעבדת INSERM U1096 ולצוות מוסד בעלי החיים בפקולטה לרפואה על תמיכתם ועזרתם בביצוע עבודה זו.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מזרק 0.1 מ"ל להרדמהFischerלא חלהזרקה תת-עורית של בופרנורפין
מזרק 1 מ"ל להרדמהFischerלא חלהזרקה תוך-צפקית של קסילזין
מחט 22G להרדמהTERUMOלא חלהזרקה תוך-צפקית של קסילזין
מעמד מחשב נייד מתכוונן Amazonלא חל
תא אינדוקציה להרדמהTemsegaלא חל
מאוורר לבעלי חייםPhysiosuiteלא חל
מדריך קטטר עורקיVygonלא חל
בופרנורפיןVIRBACלא חל0.05 מ"ג/ק"ג
קפנוגרףPhysiosuiteלא חל
צינור אנדוטרכיאלי INSTECHFTSS-16S-76צינור שוטף בקוטר 2.8 מ"מ
משטח חימוםPhysiosuiteלא חל
תא אינדוקציהTemsegaלא חל
איזופלוראןIsoVetלא חל
איזופלוראן  מרחייב’סTemsegaלא חל
אוטוסקופ VitococoAmazonמצלמת Otoscope Oreille 1920P
מד רוויה של חמצן Physiosuiteלא חל
מערכת סקאבנגר F/air evacuation filter cartrigdeלא חל
סמארטפון SamsungGalaxy A52S
גשש טמפרטורהPhysiosuiteלא חל
רצועת Velpeau Velpeauלא חלתחבושת כותנה קרפ, 10 ס"מ × 4 מ' (כ-120 ס"מ בשימוש)
מסיכת אוורור Temsegaלא חל
קסילזיןVIRBACלא חל5 מ"ג/ק"ג

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

ביולוגיהגיליון 233גיליון 233החודש ב-JoVEגיליוןוידאו-לרינגוסקופיהאינטובציה בעלות נמוכהוידאו-לרינגוסקופיה אלחוטיתמודל חולדההנשמה מלאכותית