מאמר שיטה

אסטרטגיית UHPLC-MS/MS ו-HRMS משולבת לסינון תרכובות פוטנציאליות המכילות פוראן הפטוטוטוקסיות ב-Dioscorea bulbifera L.

DOI:

10.3791/70865

⸱

19 במאי 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The First Affiliated Hospital of Guizhou University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Pharmacy, Guizhou University of Traditional Chinese Medicine, 3School of Medicine and Health Management, Guizhou Medical University, 4Guizhou Provincial Engineering Research Center for the Development and Application of Ethnic Medicine and TCM, Guizhou Medical University

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה פיתח אסטרטגיה משולבת המשלבת UHPLC–MS/MS ו-HRMS לסינון תרכובות פוטנציאליות המכילות פוראן כבד ב-Dioscorea bulbifera L.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dioscorea bulbifera L. (DBL), תרופה צמחית מסורתית המשמשת לטיפול בהפרעות ובגידולים בבלוטת התריס, העלתה חששות בטיחותיים משמעותיים בשל השפעותיה הפוטנציאליות לכבד. מחקרים קודמים מצביעים על כך שפגיעת כבד זו עשויה להיות קשורה להפעלה מטבולית של תרכובות מכילות פוראן (FCCs) הקיימות ב-DBL. כאן, אפיינו באופן שיטתי את FCCs ואת המטבוליטים התגובתיים שלהם בתמצית DBL באמצעות גישה אנליטית משולבת המשלבת כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים במיוחד בשילוב עם ספקטרומטריית מסה טנדם (UHPLC-MS/MS) וכרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים במיוחד בשילוב עם ספקטרומטריית מסה ברזולוציה גבוהה טנדם (UHPLC-HRMS). באמצעות ניתוחים ספקטרומטריים ממוקדים ובלתי ממוקדים, זיהינו בסך הכל 849 רכיבים בתמצית המימית של DBL, כולל 10 פורנודיטרפנואידים ו-17 FCCs נוספים. כדי להבהיר את מסלולי ההפעלה המטבולית, השתמשנו בגלוטתיון (GSH) וב-4-ברומובנזילימין (BBA) כסוכני לכידה כפולים במערכת דגירה מיקרוזומלית של כבד העכבר (MLM). באמצעות מטבוליזם מתווך P450, שבעה תוספות תואמות שמקורן בדיוסבולבין B (DSB), C (DSC), D (DSD), E (DSE), L (DSL), N (DSN) ו-2-פנטילפורן נלכדו ואופינו בהצלחה. מחקר זה קובע גישה רגישה וספציפית לפרופיל מקיף של תרכובות פוראן פוטנציאליות להיות הפטוטוקסיות ב-DBL, ומספק תובנות חשובות לגבי היווצרות מטבוליטים תגובתיים ומנגנוני רעילות הקשורים לתרופות צמחיות המכילות פוראן.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

חששות בטיחותיים הקשורים לרפואה הסינית המסורתית (TCM), במיוחד פגיעות כבד הנגרמות מתרופות (DILI), פוגעות בשימושן הקליני הנרחב ובמודרניזציה 1,2,3. עדויות הולכות וגדלות מצביעות על כך שרוב רכיבי ה-TCM אינם רעילים מטבעם; במקום זאת, הרעילות הכבדית שלהם נובעת מהפעלה מטבולית ב-vivo 1,4,5. תרכובות המכילות פוראן (FCCs) מוכרות היטב כקדם-טוקסים בולטים לכבד, ועוברות הפעלה מטבולית בתיווך P450 ליצירת ביניים אלקטרופיליים תגובתיים מאוד, במיוחד ציס-אנדיאלים, החיוניים להתחלת רעילות כבד. מטבוליטים אלקטרופיליים אלו יוצרים תוספות קוולנטיות עם ציסטאין תיולים וקבוצות אמינו של חלבונים חיוניים, ובכך מקלים על התקדמות ההשפעות הרעילות 6,7,8.

ב-TCM, Dioscorea bulbifera L. (DBL) שימש רבות לטיפול בהפרעות בלוטת התריס, גידולים ומחלות עור 9,10. בסך הכל בודדו ואופינו 152 רכיבים כימיים מ-DBL, כולל 41 פוראנודיטרפנואידים11. מתוכם, דיוסבולבין B (DSB), רכיב ביואקטיבי עיקרי, הוכח כמעורר פגיעה כבדית במודלים של עכברים, השפעה הקשורה קשר הדוק להיווצרות הסיס-אנדידיאל (DDE) שמקורו ב-DSB12,13. בהובלת התקדמות במכשור אנליטי, ספקטרומטריית מסה הפכה לכלי חשוב לניתוח רכיבים כימיים מורכבים ומטבוליטים של TCM14,15. באופן קונבנציונלי, אנדיאלים ציס-אנדיאלים המיוצרים על ידי מטבוליזם DSB מזוהים על ידי לכידת מינים אלקטרופיליים עם N-אצטיל-L-ליזין בשילוב עם גלוטתיון או N-אצטיל-L-ציסטאין, ולאחר מכן ניתוח LC-MS/MS של נגזרות פירולה כימית יציבות16,17. בהתבסס על גישה זו, פיתחנו בעבר אסטרטגיה משופרת הכוללת לכידה סימולטנית של ביניים מטבוליים שמקורם בפוראן עם GSH ו-BBA, בשילוב עם ניתוח LC-MS/MS באמצעות סריקת אובדן נייטרלית של 129 Da וסריקת יונים מקדימים של m/z 272 עבור אדדוקטים של GSH, יחד עם סריקת יונים מקדימים 1:1 של m/z 169 ו-171 שמקורה ב-BBA לגילוי פירולה (איור 1)18, 19. למרות שגישה זו יעילה עבור פוראנואידים ידועים, היא מציגה מגבלות ניכרות כאשר מיושמת על תערובות מורכבות, במיוחד עבור FCCs שחסרה מידע מבני מוקדם. לכן, נותר צורך דחוף באסטרטגיה אנליטית מקיפה המסוגלת לאפשר אפיון כימי יסודי של מטריצות מורכבות של TCM תוך תמיכה בסינון יעיל של קדומים רעילים בכבד.

כאן אנו מדווחים על אסטרטגיה משולבת לאפיון שיטתי של FCCs פוטנציאליים להיות הפטוטוקסיים ב-DBL (איור 2). האסטרטגיה כוללת שלושה שלבים מרכזיים: (i) פרופיל כימי מקיף של התמצית המימית של DBL באמצעות מטבולומיקה ממוקדת (WTM) המבוססת על UHPLC–MS/MS; (ii) לכידת מתווכים תגובתיים שנוצרו מ-FCCs עם GSH ו-BBA; ו-(iii) גילוי והבהרה מבנית של תוספות GSH/BBA שנוצרו באמצעות הפעלה מטבולית של רכיבים פוטנציאליים רעילים באמצעות HPLC–MS/MS ו-UHPLC–MS/MS. גישה משולבת זו מאפשרת זיהוי חד-משמעי של קודמים רעילים מרכזיים האחראים לרעילות כבדית הנגרמת על ידי DBL ממטריצות TCM מורכבות, ומספקת מסגרת רגישה וספציפית להערכת בטיחות ה-TCM.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הערה: הריאגנטים והציוד ששימשו במחקר זה מופיעים בטבלת החומרים.

1. הכנת פתרון בדיקת DBL

  1. לאסוף ולאמת שלוש קבוצות של פקעות של Dioscorea bulbifera L. בהתאם למפרט הלאומי לעיבוד TCM, הסר שורשים סיביים מהפקעות, שטוף אותן להסרת לכלוך, חתוך אותן לפרוסות עגולות בעובי 1 ס"מ כשהן טריות, ייבשו את הפרוסות בתנור אוויר מאולץ בטמפרטורה של 60 מעלות צלזיוס, ואז הסר ומקרר אותן לטמפרטורתחדר 20.
  2. שקלו 200 גרם DBL מכל אצווה וטחנו אותם לאבקה גסה (גודל חלקיקים 250-850 מיקרון) באמצעות מועכת מהירה.
  3. השרו 20 גרם אבקה גולמית ב-200 מ"ל מים דה-יוננים (1:10, ללא ויון) למשך 30 דקות. במקביל, עבדו תערובת של שלוש מנות אבקה גסה שהוכנה בשלב 1.2 (מעורבבות ביחס של 1:1:1, כולל/לבן).
  4. הוצא את החומר הרטוב על ידי חימום בריפלוקס למשך 60 דקות. סנן את התמצית דרך גזה או מסננת כדי להסיר שאריות בלתי מסיסות. הוסיפו 200 מ"ל מים דה-יוננים לשאריות הנותרות וחזרו על הפקת הריפלוקס פעמיים, כל פעם למשך 60 דקות. משלבים את שלושת הסינון ומרוכזים את התמצית המאגדת על ידי רתיחה לנפח סופי של 100 מ"ל.
  5. העבר את התמצית המרוכזת למייבש בהקפאה ואקום והליופיליזציה לקבלת אבקה.
  6. שקלו בדיוק 18 מ"ג מכל אצווה של אבקת תמצית. המיס כל אחד מהם ב-1.5 מ"ל של 50% אצטוניטריל, ומערבב את התערובת במשך 30 שניות כדי להבטיח הומוגניות.
  7. צנטריפוגה את התמיסה בעוצמה של 13,800 x גרם למשך 10 דקות בטמפרטורה של 4°C ואספו את הסופרנטנט כתמיסת דגירה של MLM.
  8. פיפט של 20 מיקרוליטר מהתמיסה המקורית, מדלל אותה ל-1:50 עם 50% אצטוניטריל, ומערבולת למשך 30 שניות. לאחר מכן מסננים את התמיסה דרך ממברנה מיקרו-נקבובלית בגודל 0.22 מיקרון כדי לקבל את תמיסת הדגימה מוכנה לניתוח ספקטרומטרי מסה.

2. אפיון כימי של DBL

  1. תנאים כרומטוגרפיים
    1. השתמש בעמודת C18 (2.1 מ"מ x 100 מ"מ, 1.8 מיקרון) וקבע את טמפרטורת תנור העמודה ל-40 מעלות צלזיוס. הכינו את שלב A הנייד כחומצה פורמית של 0.1% (v/v) במים ואת שלב B הנייד כאצטוניטריל.
    2. תכנת את שחרור הגרדיאנט כך: 0–10 דקות, 2%–50% B; 10–11 דקות, 50%–95% B; ו-11–13 דקות, 95% B. הגדר את קצב הזרימה ל-0.4 מ"ל/דקה והזריק 2 מיקרוליטר מהדגימה.
  2. לבצע ניתוח ספקטרומטרי מסה באמצעות הפרמטרים הבאים: מקור היונים: IonDrive Turbo V ליינון אלקטרוספריי (ESI); מצב רכישה: ניטור תגובות מרובות (MRM) עם רכישה סימולטנית במצבי יונים חיוביים ושליליים; מתח ריסוס יונים: +5.5 kV (חיובי) / −4.5 kV (שלילי); גז וילון: 35 psi; טמפרטורת מקור: 400°C; גז מקור יונים 1: 60 psi; גז מקור יונים 2: 60 psi; פוטנציאל פירוק אשכולות (DP): ±100 וולט.
  3. עיבוד נתונים
    1. רכישת ועיבוד נתוני MRM באמצעות תוכנת SCIEX Analyst (v1.6.3). המרו את קבצי הנתונים הגולמיים (.wiff) לפורמט TXT באמצעות MSConvert. הערות על התרכובות שזוהו על ידי שאילתה לספריית המיקרוסופט הקניינית BiotreeDB (V2.1). ההערה התבססה על התאמת זמני שמירה (RT), יחסי מסה-מטען (m/z) ודפוסי פיצול עם תקנים אותנטיים.

3. אפיון של קונוגאטים של GSH/BBA שנוצרו בדגירות MLM

  1. דגירה של MLM
    1. הפשיר לאט את ההשעיה המיקרוזומלית של כבד העכבר על הקרח. על קרח, יש להכין את תערובת הדגירה בצינור מיקרוצנטריפוגה בנפח 2 מ"ל על ידי הוספת הרכיבים המפורטים ברצף למטה. הוסיפו את מערכת ההתחדשות של NADPH בסוף. לקבוצת הביקורת, החליפו את מערכת ההתחדשות של NADPH בנפח שווה של PBS קר כקרח. מערבולת לרגע לערבב.
      1. הכינו תערובת דגירה המורכבת מהרכיבים הבאים: השעיה מיקרוזומלית בכבד העכבר (MLM, חלבון 4 מ"ג/מ"ל): 125 מיקרוליטר; תמיסת כלוריד מגנזיום (MgCl₂) (32 מ"מ): 10 מיקרוליטר; DBE (12 mg/mL) או תמיסה סטנדרטית DSB (35 mM): 10 מיקרוליטר; תמיסת גלוטתיון (GSH) (50 מ"מ): 100 מיקרוליטר; תמיסת BBA (250 מ'מ'): 10 מיקרוליטר; בופר PBS (pH 7.4, מכיל 1.0 mol/L EDTA ו-0.1 mol/L K2HPO4): 145 מיקרוליטר; תמיסת מערכת מתחדשת NADPH (5.0 מ"מ): 100 מיקרוליטר.
    2. מיד עם סיום הדגירה, הסר את כל הצינורות מהאינקובטור. סיימו את התגובה האנזימטית על ידי הוספת 1 מ"ל אצטוניטריל קר (-20 מעלות צלזיוס) לכל צינור.
    3. מערבולת למשך 3 דקות כדי להשקיע חלבונים. צנטריפוגה ב-13,800 x גרם למשך 10 דקות בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.
    4. אסוף את הסופרנאנט, סינן דרך ממברנה של 0.22 מיקרון, והעבר את הסינון לבקבוקון דגימה אוטומטית.
  2. סינון ראשוני של דגירה של תמציות DBL של MLM על ידי HPLC-MS/MS
    1. תנאים כרומטוגרפיים
      1. השתמש בעמודת C18 (150 מ"מ x 4.6 מ"מ, 3 מיקרון) וקבע את טמפרטורת העמודה ל-25 מעלות צלזיוס. הכינו את שלב A הנייד כחומצה פורמית של 0.1% (v/v) במים ואת שלב B הנייד כאצטוניטריל.
      2. הרץ את הגרדיאנט הבא: 0–2 דקות, 10% B; 2–15 דקות, הגדלה ליניארית מ-10% ל-90% B. הגדר את קצב הזרימה ל-0.8 מ"ל לדקה והזרקת 5 μליטר מהדגימה המוכנה.
    2. תנאי ספקטרומטריות מסה. הגדר את טווח הסריקה המלאה ל-m/z 500–1000. סריקות יוני מקדים (PI) ב-m/z 169 ו-171, וסריקת אובדן נייטרלי (NL) של 129 Da במצב יוני חיובי, וסריקת PI ב-m/z 272 במצב יוני שלילי. הגדר פרמטרים מרכזיים כך: מתח ריסוס יונים (IS), +5,500 וולט (חיובי) / −4,500 וולט (שלילי); פוטנציאל פירוק אשכולות (DP), ±70 וולט; פוטנציאל כניסה (EP), ±10 וולט; אנרגיית התנגשות (CE), +35 וולט (חיובי) / −40 וולט (שלילי); פוטנציאל יציאה מתא התנגשות (CXP), ±10 וולט; גז יונים 1 ו-2 (GS1/GS2), 50 psi כל אחד; גז וילון (CUR), 40 psi; וטמפרטורת המקור (TEM), 650 מעלות צלזיוס.
    3. רכוש ועבד את כל נתוני ספקטרומטריית המסה באמצעות תוכנת SCIEX Analyst (v1.6.3).
  3. זיהוי נגזרות פירול ו-FCCs באמצעות UHPLC-HRMS
    1. תנאים כרומטוגרפיים
      1. השתמש בעמודת C18 (2.1 מ"מ x 100 מ"מ, 1.9 מיקרון) וכוון את תנור העמודה ל-30 מעלות צלזיוס. הכינו את שלב A הנייד כחומצה פורמית של 0.1% (v/v) במים ואת שלב B הנייד כאצטוניטריל.
      2. תכנתו את השיפוע כך: 0-20 דקות, 5%-95% B; 20-21 דקות, 95% B. הגדר את קצב הזרימה ל-0.3 מ"ל לדקה והזריק 2 מיקרוליטר מהדגימה.
    2. לבצע ניתוח ספקטרומטרי מסה עם הפרמטרים הבאים: מקור היונים: ESI; מתח ריסוס יונים: +3.5 KV (יונים חיוביים)/-2.5 KV (יונים שליליים); טמפרטורת נימים: 320 מעלות צלזיוס; טמפרטורת מחמם הגשש: 350 מעלות צלזיוס; גז מעטפת: 10 ארב; זרם ריסוס מרבי: 100 מיקרואמפר; רמת RF בעדשת S: 50%; אנרגיית התנגשות: 35 וולט (יונים חיוביים) ו-40 וולט (יונים שליליים); טווח סריקה: 100-1000 מ"/ז.
    3. קדם-עיבוד נתונים
      1. בהתבסס על ה-FCCs שזוהו מ-DBL ומנגנון הלכידה (איור 1), צייר את הקונוגטים החזויים של GSH/BBA באמצעות ChemBioDraw Ultra 14.0 (איור משלים 1).
      2. ייבא את קבצי ה-HRMS הגולמיים (.raw) למודול Qual Browser של Xcalibur (גרסה 4.1). צור תהליך זיהוי בתוכנה לסינון GSH/BBA-conjugates.
      3. השוו את ספקטרום MS1 ו-MS 2 הניסיוניים עם המבנים החזויים של קונגוגטים GSH/BBA שמקורם ב-FCCs (חזוי באמצעות ChemBioDraw Ultra 14.0) בהתבסס על מנגנוני ההצמדה הידועים (איור 1 ואיור משלים 1). השתמש בסף עוצמת שיא מינימלי של 1 x 105 ובסבילות דיוק מסה של ± 10 ppm לכל היונים המנוטרים. אשר קונוגטים בהתבסס על דפוס איזוטופ ברום האופייני (בערך 1:1) שנצפה הן בספקטרום MS1 והן ב-MS2, כולל יוני אבחון ב-m/z 169 ו-171.
      4. קבעו את המשקלים המולקולריים של ה-FCCs האב על ידי חיסור מסת תג GSH/BBA מהיונים המולקולריים שנצפו. השתמש ב-472/474 Da (C17H21O5N4BrS) לחיסור.
      5. אפיין את ה-FCCs האב ב-DBL באמצעות UHPLC–HRMS בהתבסס על התוצאות שהושגו לעיל.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

רשויות FCC מזוהות ב-DBL
כדי לאפיין את הפרופיל הכימי של ה-DBL, נעשה שימוש בשילוב של WTM מבוסס שלושה קוואדרופולים ופרופיל HRMS. גישה כפולה זו אפשרה ניתוח מקיף של זוגות יונים שהופקו, ויצרו כרומטוגרמות יונים שהופקו (EICs, איור 3A) וכרומטוגרמות יונים כוללות (TICs, איור 3B). בתנאי הכרומטוגרפיה והגילוי האופטימליים, זוהו סך הכל 849 תרכובות ב-20 מחלקות כימיות (איור 3C). ראוי לציין כי זוהו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקרים קודמים על רעילות כבד של DBL התמקדו בעיקר בביניים מטבוליים של FCCs בודדים באמצעות אסטרטגיות לכידה ממוקדת 9,22. למרות שגישות אלו מספקות תובנות מכניות חשובות, יעילותן במטריצות צמחיות מורכבות מוגבלת לעיתים קרובות בשל גילוי לקוי של ביניים ביואקטיביים בעלי שפע נמוך. במחקר הנוכחי, פיתחנו תהליך אנליטי משודרג לזיהוי שיטתי של FCCs הפטוטוקסיים ב-DBL. היתרון העיקרי של אסטרטגיה זו הוא השילוב של WTM, לכידת ביניים תגובתית ו-HRMS, המאפשרי...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס' 82360759), קרן המדע הטבעי של מחוז גויז'ואו (מס' ZK [2024]406, ZK [2024] 397, תחנת פוסט-דוקטורט [2021]007, BSH [2024]005), ואוניברסיטת גויז'ואו לרפואה סינית מסורתית TD Hopes [2023]005.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
4-ברומובנזילאמיןג'יודינג כימיקלים (שנחאי) טכנולוגיה בע"מX114214A
אצטוניטרילסיגמא-אלדריץ' (שנגחאי) מסחר בע"מ1000294000
צנטריפוגהWuxi BaiTaKe Biotechnology Co., LtdCR3180
כרומטוגרפיה   דגימה  בקבוקיםג'ג'יאנג ALWSCI Technology Co., LtdC0000008
דיוסבולבין Bצ'נגדו פופיידה ביוטכנולוגיה בע"מ18022603
Dioscorea bulbifera L.-DBL-1; DBL-2; DBL-3החומרים הצמחיים אומתו על ידי פרופ' וייקה ג'יאנג (אוניברסיטת גוויג'ואו לרפואה סינית מסורתית, גואיאנג, סין), עם דגימות שוברים שהופקדו במעבדה המרכזית לפרמקולוגיה בסיסית במחוז גויג'ואו.
איזון אלקטרונימפעל המכשירים האלקטרוניים של שנגחאי אנטינגFA1004B
חומצה פורמיתתרמו פישר סיינטיפיק בע"מ195715
גלוטתיוןסיגמא-אלדריץ' (שנגחאי) מסחר בע"מSLBX5462
מהירות גבוהה   מכתשיונגקאנג ביאו מוצרי חומרה בע"מXC-2000Y
עכברי קונמינג מיקרוסומי כבד (זכרים)חברת דליאן מיילון ביוטכנולוגיה בע"מ.MB12496-1
כלוריד מגנזיוםמדעי הסולארביולוגיה של בייג'ינג חברת טכנולוגיה בע"מM8161
מתנולסיגמא-אלדריץ' (שנגחאי) מסחר בע"מ646377
מסנן מיליפורחברת ציוד ניסיוני טיאנג'ין ג'ינטנג בע"מNylon66
NADPH Na4מדעי הסולארביולוגיה של בייג'ינג חברת טכנולוגיה בע"מ102X022
תנורכלי מעבדת טיאנג'ין & חברת ציוד בע"מGFL125
סליין מופעל בפוספטBeyotime Biotechnology  Co., LtdC0221B
תרמוסטטיק  מים  Bath  אוסצילטורשנגחאי זיג'יה אינסטרומנט בע"מTHZ-82A
אולטרה-פריזרתרמו פישר סיינטיפיק בע"מTDE60086FV-ULTS
מנקה אולטרסונישנגחאי זיג'יה אינסטרומנט בע"מL10-250A
מערבל מערבולתמפעל כלי הציוד הרפואי של ג'יאנגסו היימןVM-D

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ma, Z., Shi, Z., Xiao, X., Wang, J. New insights into herb-induced liver injury. Antioxid Redox Signal. 38 (16-18), 1138-1149 (2023).
  2. Yang, Y., et al. A review of herb-induced liver injury in mainland China. Front Pharmacol. 13, 813073(2022).
  3. Shen, T., et al. Incidence and etiology of drug-induced liver injury in mainland China. Gastroenterology. 156 (8), 2230-2241 (2019).
  4. Zhou, Y., et al. Mechanism of drug-induced liver injury and hepatoprotective effects of natural drugs. Chin Med. 16 (1), 135(2021).
  5. Wang, Y., et al. Metabolic activation of toxic natural products from herbal and dietary supplements leading to toxicities. Front Pharmacol. 12, 758468(2021).
  6. Pan, J., et al. Difference in hepatotoxicity of furan-containing components in Cortex Dictamni correlates with the efficiency of their metabolic activation. Phytomedicine. 114, 154778(2023).
  7. Liao, Y., et al. DNA damage and up-regulation of PARP-1 induced by columbin in vitro and in vivo. Toxicol Lett. 379, 20-34 (2023).
  8. Tian, M., Peng, Y., Zheng, J. Metabolic activation and hepatotoxicity of furan-containing compounds. Drug Metab Dispos. 50, 2458-2471 (2022).
  9. Hu, Z., et al. Development of a mechanism-based biomarker for Dioscorea bulbifera L. exposure and hepatotoxicity in rats. Phytomedicine. 102, 154172(2022).
  10. Narzary, C., Sarkar, D., Das, P., Papi, D. Ethnobotany phytochemistry, and pharmacological activity of Dioscorea bulbifera: A comprehensive review. Chem Biodivers. 22 (1), e202401408(2025).
  11. Guan, X., et al. Bioactivity,toxicity and detoxification assessment of Dioscorea bulbifera L.: A comprehensive review. Phytochem Rev. 16 (3), 573-601 (2017).
  12. Jiang, Y., et al. Disruption of acetyl-CoA acyltransferase 2 resulting from exposure to diosbulbin B. Chem Res Toxicol. 38 (7), 1203-1214 (2025).
  13. Yang, Y., et al. Histones H2B/H3 selectively modified by acis-enedial metabolite resulting from metabolic action of diosbulbin B: Potential target proteins for antitumor agent design. J Med Chem. 68 (13), 13408-13420 (2025).
  14. Shao, L., et al. Pharmacokinetics and UPLC–MS/MS analysis of delsoline in mouse whole blood. J Anal Methods Chem. 2018, 9412708(2018).
  15. Shi, H., et al. RefMetaPlant: A reference metabolome database for plants across five major phyla. Nucleic Acids Res. 52 (D1), D1614-D1628 (2024).
  16. Tan, R., et al. Diosbulbin B: An important component responsible for hepatotoxicity and protein covalent binding induced by Dioscorea bulbifera L. Phytomedicine. 102, 154174(2022).
  17. Li, W., et al. Metabolic activation of furan moiety makes diosbulbin B hepatotoxic. Arch Toxicol. 90 (4), 863-872 (2016).
  18. Wang, K., Li, W., Chen, J., Peng, Y., Zheng, J. Detection of cysteine- and lysine-based protein adductions by reactive metabolites of 2,5-dimethylfuran. Anal Chim Acta. 896, 93-101 (2015).
  19. Zhang, Z., et al. Sensitive bromine-based screening of potential toxic furanoids in Dioscorea bulbifera L. J Chromatogr B. 1057, 1-14 (2017).
  20. National Pharmacopoeia Committee. National standard for processing of traditional Chinese medicines. , People’s Medical Publishing House. , Beijing. (1988).
  21. Wang, K., et al. Chemical identity of interaction of protein with reactive metabolite of diosbulbin B. in vitro and in vivo. Toxins. 9 (8), 249(2017).
  22. Wang, K., et al. Selective and sensitive platform for function-based screening of potentially harmful furans. Anal Chem. 86 (21), 10755-10762 (2014).
  23. Sawada, Y., et al. Widely targeted metabolomics based on large-scale MS/MS data for elucidating metabolite accumulation patterns in plants. Plant Cell Physiol. 50 (1), 37-47 (2009).
  24. Zhang, Q., et al. Formation of furan from linoleic acid thermal oxidation: (E,E)-2,4-decadienal as a critical intermediate product. J Agric Food Chem. 72 (8), 4384-4392 (2024).
  25. Fan, X. Furan formation from fatty acids as a result of storage, gamma irradiation, UV-C and heat treatments. Food Chem. 175, 439-444 (2015).
  26. Zhang, S., et al. 8-Epidiosbulbin E acetate triggers apoptosis via metabolic activation-mediated crosstalk between mitochondria and endoplasmic reticulum. Ecotoxicol Environ Saf. 302, 118614(2025).
  27. Li, W., et al. A metabolic activation-based chemoproteomic platform to profile adducted proteins derived from furan-containing compounds. ACS Chem Biol. 17 (4), 873-882 (2022).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

UHPLC HRMSP450
הסרטון יגיע בקרוב

מאמרים קשורים