הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מודל פצע עור כירורגי לעכברוש: גישה למחקרי ריפוי פצעים והערכת ביוחומרים

389 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/71306

⸱

21 ביולי 2026

במאמר זה

סיכום

מתואר מודל פצע מעור עכברוש המאפשר הערכה של תרופות שונות בתנאים פיזיולוגיים או פתולוגיים בשלבים שונים של תהליך ההחלמה. בנוסף, מפורט פרוטוקול לביצוע פלנימטריה ידנית למעקב אחר קצב התכווצות הפצע במהלך תיקון הרקמות.

תקציר

ריפוי פצעי העור הוא תהליך ביולוגי מורכב הכולל שלבים מתואמים של דלקת, התרבות ועיצוב מחדש. בהינתן הצורך להבין טוב יותר את המנגנונים הבסיסיים של ריפוי פצעים, מודלים של פצעים בבעלי חיים בניתוח משמשים להעמקת הידע בתהליך זה ולהקל על פיתוח גישות טיפוליות חדשניות. במודלים כאלה, השראת פצעי עור באמצעות ביופסיות מאגר משמשת לעיתים קרובות, שכן היא מניבה נגעים סטנדרטיים. עם זאת, טכניקה זו מגבילה את הנגע לצורה עגולה, מה שעשוי לא להתאים למטרות ניסיוניות מסוימות. בהקשר זה, מוצג פרוטוקול כירורגי פשוט וניתן לשכפול להשראת פצעים כריתתיים בעובי מלא בעכברים, באמצעות מודל מרובע סטנדרטי בצד. שיטה זו מאפשרת יצירת נגעים בגדלים וגיאומטריות משתנים, ומספקת גמישות ניסויית גבוהה יותר המותאמת למטרות הספציפיות של כל מחקר ומאפשרת ניטור תהליך הריפוי בתנאים פיזיולוגיים או פתולוגיים. בנוסף, מתוארת שיטה למעקב אחר קצב התכווצות הפצע באמצעות פלנימטריה ידנית. למרות שיישום פרוטוקול זה דורש תשומת לב לפרטים ומיומנות טכנית, אין צורך במיומנויות כירורגיות מתקדמות.

מבוא

ריפוי פצעים עוריים הוא תהליך ביולוגי מורכב ומתוזמר הכולל אירועים מתואמים רבים שמטרתם לשקם את שלמות הרקמה. התופעה מתקדמת בשלבים מובחנים אך חופפים, הכוללים המוסטזיס ודלקת, התרבות ועיצוב מחדש1. השלב הדלקתי מתחיל דקות לאחר היווצרות הפצע, מגיע לשיאו בין 24 ל-48 שעות לאחר הפציעה, וכולל גיוס תאי חיסון ושחרור מתווכים דלקתיים. שלב ההתרבות מתאפיין באפיתליאליזציה מחדש וביצירת רקמת גרנולציה, שמתחיל 4 עד 5 ימים לאחר הפציעה ועלול להימשך שבועות. לבסוף, הפצע נכנס לשלב השיקום, שמתחיל בשבוע השלישי לאחר הפציעה ויכול להימשך חודשים או שנים, ומאופיין בארגון רקמתי2. כאשר ההחלמה אינה מתקדמת כראוי, היא עלולה לגרום לפצע כרוני, שמטיל נטל משמעותי הן על המטופל והן על מערכת הבריאות, מה שמדגיש את הצורך לפתח גישות טיפוליות חדשות.

יצירת פצע כריתה באמצעות הסרה כירורגית של כל שכבות העור (אפידרמיס, דרמיס ורקמה תת-עורית) מהחיה מאפשרת חקירת דלקת, יצירת רקמות גרנולציה, שינוי אפיתליאליזציה, אנגיוגנזה ותהליך העיצוב מחדש4. בעשורים האחרונים, אימוץ מודלים לריפוי פצעים אפשר גילויים רבים, והרחיב את הידע וההבנה של האירועים המולקולריים והתאיים שמאפשריםתהליך זה. מודלים ב-vivo נשארים הכלים החיזויים ביותר לחקר תיקון פצעים אנושיים, שכן הם מייצגים בצורה מדויקת יותר את המיקרו-סביבה המרפאית המלאה בשל נוכחות סוגי תאים מרובים, רמזים סביבתיים ואינטראקציות פאראקריניות6. בהקשר זה, חולדות ועכברים נמצאים בשימוש נרחב בשל קלות הטיפולוהתחזוקה שלהם.

במודלים אלה, ביופסיות מאגרוף משמשות לעיתים קרובות ליצירת פצעים כירורגיים משום שהן מספקות כריתה סטנדרטית. כתוצאה מכך, רוב המודלים הניסיוניים המתוארים בספרות מבוססים על הקמת נגעים מעגליים7–12. למרות שגישה זו מקובלת באופן נרחב, השימוש בגאומטריות חלופיות יכול לגוון את הגישות המתודולוגיות הזמינות למחקרי ריפוי פצעים. בהקשר זה, יצירת פצעים באמצעות סכין מנתחים מאפשרת יצירת נגעים בגדלים שונים ובצורות מוגדרות מחוץ לדפוס המעגלי הסטנדרטי המשמש בביופסיות מכה 13,14,15,16,17,18. יתרה מזאת, מחקרים השוואתיים במודלים של בעלי חיים הראו כי חתכי סכין גורמים לפחות נזק לרקמה הראשונית בהשוואה לטכניקות אחרות.

פרוטוקול זה מתאר שיטה ניתוחית חלופית להשראת פצעי עור בעובי מלא בעכברים, באמצעות מודל נגע מרובע בצד. הגישה המוצגת מסייעת בסטנדרטיזציה של אזור הנגע ובמעקב אחר תהליך תיקון הרקמות. יתרה מזאת, הוא רלוונטי למחקרים שמטרתם להעריך את השפעות האסטרטגיות הטיפוליות והביוחומרים השונים לאורך שלבי הריפוי העור השונים בתנאים פיזיולוגיים או פתולוגיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים הניסיוניים אושרו על ידי ועדת האתיקה לשימוש בבעלי חיים (CEUA) של אוניברסיטת סנטה קרוז (UESC). חולדות ויסטר (Rattus norvegicus) הושגו ממעבדת הרבייה, התחזוקה והניסויים של בעלי חיים (LaBIO)/מתקן בעלי חיים ב-UESC, בהתאם לפרוטוקול CEUA/UESC מס' 010/25. כל ההליכים בטיפול בבעלי חיים בוצעו בהתאם למדריך NIH לטיפול ושימוש בבעלי חיים במעבדה ועמדו בהנחיות מוסדיות לרווחת בעלי חיים ושימוש אתי. העיצוב הכולל של פרוטוקול הניסוי מוצג באיור 1, והחומרים והציוד המשמשים בפרוטוקול זה מפורטים בטבלת החומרים הזמינה כחומר משלים.

figure-protocol-1
איור 1: עיצוב ניסויי של פרוטוקול השראה לפצע עור במודלים של חולדות. (א) לאחר הרדמה בבעלי חיים, גילוח את אזור הניסוי; (ב) לעורר הרדמה בתא עם איזופלורן, ולאחר אובדן הרפלקסים, לשמור על מישור הרדמה מספק באמצעות מסכת פנים; (ג) לבצע אנטיספסיסיה של האזור המגולח, סימון מידות הנגע באמצעות קליפר, ויצירת פצע ניתוחי באמצעות סכין סטרילית; (ד) להגן על הנגע באמצעות ציפוי סרט שקוף ולבצע פלנימטריה ידנית באמצעות נייר דבק; (ה) מתן הקלה לאחר הניתוח עם טרמדול הידרוכלוריד כל 12 שעות במשך 3 ימים; (ו) ליישם את הטיפול הניסיוני 24 שעות לאחר השראת הפצע; (ז) לבצע המתת חסד בנקודת הזמן הניסויית שנקבעה מראש וממשיך באיסוף דגימות ומעקבי פלנימטריה לניתוחים הבאים. הדמות הזו נוצרה על ידי המחברים באמצעות BioRender. גלוואו, מ. (2026) https://BioRender.com/jsiygmf. רישיון פרסום מצורף. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

1. בעלי חיים וטיפול

  1. השתמש בזכרים בוגרים של עכברי ויסטר בגיל 2 עד 3 חודשים.
  2. ביום שלפני הניתוח, ודאו שכלובי החיות נקיים ומחוטאים, וסמנו אותם לפי קבוצות הניסוי.
  3. ביום הניתוח, שקלו כל בעל חיים באמצעות משקל דיגיטלי ורשמו את הערכים.
  4. לחלק את בעלי החיים באקראי לכלובים שהיו מחוטאים ומסומנים קודם, תוך שמירה על קיבולת הדיור כדי להבטיח את תנאי רווחת בעלי החיים.
  5. באמצעות סמן קבוע בקצה דק, זהה כל בעל חיים בזנב לפי קבוצת הניסוי ומספרו, כדי להבטיח מעקב לאורך כל הניסוי.
    הערה: ניתן להשתמש גם בבעלי חיים נקביים בפרוטוקול זה, בהתאם לזמינות בעלי החיים במתקן המוסדי ולמטרות הספציפיות של המחקר. מומלץ לזהות בעלי חיים אלפאנומרי, כאשר האות מציינת את קבוצת הניסוי והמספר מציין את בעל החיים. לדוגמה, A1 מתייחס לקבוצה A, חיה 1.

2. הליך טרום-ניתוחי

  1. הרדמה
    1. הכינו מראש: כותנה, 70% אתנול, מזרק היפודרמי אחד בנפח 1 מ"ל עם מחט לכל בעל חיים, מורפין סולפט (10 מ"ג/מ"ל), והכינו את תא ה-CO₂.
    2. בצע אנטיספסיסיה באזור הבטן של החיה באמצעות 70% אתנול וכותנה. כתרופה טרום-הרדמה, ניתן לתת מורפין סולפט במינון של 5 מ"ג/ק"ג (10 מ"ג/מ"ל) תוך-פריטונית ברבע הימני התחתון של הבטן.
    3. עשר דקות לאחר מתן תרופות טרום-הרדמה, יש להכניס את החיה לתא הפחמן.
      אזהרה: מורפין סולפט, מחטים, מערכות חשיפה לפחמן פחמן ו-70% אתנול חייבים להיות מטופלים אך ורק על ידי צוות מיומן המשתמשים בציוד מגן אישי (PPE) מתאים, כולל כפפות, מעיל מעבדה ומשקפי מגן. מחטים ומזרקים חייבים להיות מושלכים במיכלים מאושרים, בעוד שפסולת כימית וביולוגית חייבת להיפטר בהתאם לתקנות הבטיחות הביולוגית והפסולת המסוכנת המוסדית.
      הערה: במהלך תקופת ההמתנה של 10 דקות, בצע את הליך ההרדמה בתא CO₂ והכין את אזור הפצע.
  2. הליך הרדמה
    1. הכינו מראש: הרדמה לשאיפת איזופלורן 4% וולט (אחוז נפח), תא CO₂, ושמיכה תרמית אחת.
    2. השרה של הרדמה עם איזופלורן בריכוז של 4 V% בתא CO₂.
    3. לאחר איבוד הרפלקסים, העבר את החיה מתא CO₂ למסכת הפנים.
    4. שמרו על הרדמה של בעלי חיים עם איזופלוראן ב-2 וולט או בריכוז הנדרש לשמור על מישור הרדמה כירורגי מתאים, עם זרימת גזים טרייה של 50 מ"ל לדקה.
    5. במהלך ההליך, שמרו על טמפרטורת גוף החיה באמצעות שמיכה תרמית.
      הערה: מישור הרדמה כירורגי מספק נחשב מושג כאשר החיה מראה היעדר תגובות רפלקסיות, כולל היעדר תגובת גמילה לגירוי מכני בין-דיגיטלי, יחד עם תנועות נשימתיות סדירות והיעדר תנועות גוף רצוניות לאורך כל ההליך.
      אזהרה: איזופלוראן הוא חומר הרדמה נדיף שמסכן חשיפה לנשיפה. לכן, מומלץ מאוד להשתמש במערכת הרדמה עם אוורור מוצא מתאים. בנוסף, המפעילים חייבים ללבוש ציוד מגן אישי, כולל חלוקים, כפפות, מסכות וכובעים. נדרש ניטור רציף של מישור ההרדמה וטמפרטורת הגוף לאורך כל ההליך. חומרי הרדמה שנותרו וחומרים חד-פעמיים מזוהמים חייבים להיזרק בהתאם לתקנות מוסדיות לפסולת כימית וביולוגית.
  3. הכנת אתר הפצע
    1. הכינו מראש: ספוגי גזה, להב נירוסטה, 70% אתנול, ו-10% פובידון-יוד או 0.2% כלורהקסידין מימי.
    2. מרחו ספוג גזה וסבון על אזור הצד השמאלי של החיה.
    3. על שולחן הניתוחים, מקם את החיה במצב דקוביטוס לטרלי ימין.
    4. גלח את הצד השמאלי באמצעות להב נירוסטה או מכונת גילוח חשמלית.
    5. בצע אנטיספסיסיה טרום-ניתוחית של האזור המגולח עם ספוג גזה ו-70% אתנול (שלוש פעמים), ואחריו ספוג גזה ו-10% פובידון-יוד או 0.2% כלורהקסידין מימי (שלוש פעמים).
      אזהרה: יש לטפל בגזעים בזהירות ולהשליך אותם במיכלים קשיחים מתאימים לאחר השימוש. בנוסף, יש לטפל בכימיקלים המתוארים באמצעות ציוד מגן אישי מומלץ ולהימנע ממגע עם העיניים והריריות. יש להשליך להבים משומשים במיכלים חדים מאושרים, בעוד שיש להשליך גזה מזוהמת, שאריות חיטוי וחומרים ביולוגיים בהתאם לתקנות הבטיחות הביולוגית והפסולת המסוכנת המוסדית.

3. השראת פצע עורי

  1. הכינו מראש: קליפר אחד, טוש קבוע דק אחד, גזה וכלי ניתוח סטריליים (סכין סכין מס' 23, מספריים מאיו, ומלקחיים אנטומיים)
  2. באמצעות הקליפר והטוש הקבוע, מסמן ארבע נקודות שווה מרחק על העור, תוך קווי מתאר של ריבוע בגודל 1 על 1 ס"מ.
  3. צור את הפצע הניתוחי על ידי הסרת העור לחלוטין באזור המסומן באמצעות להב סכין סטרילי מס' 23, מספריים מאיו, ומלקסי אנטומיים סטריליים, תוך חשיפת הרקמה התת-עורית והשרירים שמתחת.
  4. השגת המוסטאזיס במקום באמצעות גזה סטרילית, תוך הפעלת לחץ עדין ישירות על הפצע עד שהדימום נפסק.
    זהירות: דם ורקמות חייבים להיחשב כפסולת ביולוגית שעלולה להיות זיהומית. לאחר ההליך, יש להבטיח סילוק נכון בהתאם לסטנדרטים של בטיחות ביולוגית מוסדית.
    הערה: ודא שטכניקות אספטיות מתאימות מיושמות לאורך כל הליך ההשראה לפצע. חובה לצוות הם ציוד מגן אישי (PPE), כולל רשת שיער, כפפות, מסכה וחלוק מעבדה, וכן שימוש בכלי ניתוח סטריליים.

4. תכנון ידני של אזור הפצע

  1. הכינו מראש: ציפוי סרט שקוף, גיליון נייר לבן (8.5 × 11 אינץ'), טוש קבוע עם קצה דק, וסרט דבק שקוף.
  2. חתכו מלבנים של תחבושת הסרט השקופה במידות 5 על 3.5 ס"מ ומכסים את כל הפצע.
  3. על דף נייר לבן, זיהו את הקבוצה (למשל, קבוצה A), את החיה (למשל, A1, A2, A3, A4), ואת יום איסוף הפלנימטריה של הפצע. שייך D0 לפלנימטריה שהושגה ביום ההשראה של הפצע ו-DX לפלנימטריות שנאספו ביום המתת החסד המתאים (למשל, D3, D7, D14, D21).
  4. השתמש בתחבושת הסרט השקופה כדי לתעד את אזור הפצע ולהעביר אותו לנייר המכתבים. לשם כך, ממקמים את הסרט מעל הפצע, ובאמצעות טוש קבוע בקצה דק, מבצעים פלנימטריה ידנית על ידי מעקב אחר קווי המתאר של כל הפצע.
  5. באמצעות סרט דבק שקוף, יש להדביק את הפלנימטריה שהושגה לנייר מכתב בהתאם לזיהוי המתאים (קבוצה/בעל חיים/יום). הפלנימטריות ישמשו למעקב אחר אזור הפצע וקביעת קצב ההתכווצות לאורך כל הניסוי.
    הערה: מומלץ להשתמש בתחבושות כדי למנוע מריבות בין בעלי חיים, ליקוק מופרז באזור הפגוע וקניבליזם, שעלול להחמיר פצעים או להפריע להחלמה. D0 מתאים ליום ההשראה של הפצע (קו בסיס). נקודות זמן D3, D7, D14 ו-D21 מציינות את הימים שלאחר האינדוקציה (3, 7, 14 ו-21) שבהם מתבצעת המתת חסד ואיסוף פלנימטריה של בעלי חיים, ומאפשרות ניטור שלבי ההחלמה בתקופות הדלקתיות, ההתרבות והעיצוב מחדש.

5. טיפול מיידי לאחר הניתוח

  1. הכינו הידרוכלוריד טרמדול מראש והשאירו מזרק היפודרמטי סטרילי בנפח 1 מ"ל עם מחט לכל בעל חיים, תוך שמירה על תנאים אספטיים קפדניים. כמו כן, יש להכין תחבושות קרפ וסרט רפואי להגנה מפני הפצעים.
  2. התחילו בהקלה על כאבים עם 5 מ"ג/ק"ג טרמדול הידרוכלוריד (50 מ"ג/מ"ל) תת-עורית כל 12 שעות ושמרו על הטיפול למשך 3 ימים.
  3. עטוף את אזור הפצע הכירורגי בתחבושת קרפ ואבטח אותו עם סרט רפואי כדי להגן על אתר הפצע.
  4. הכניסו את העכבר לכלוב אישי ועקבו אחריו כדי להבטיח החלמה מהרדמה וניתוח.
  5. לאחר ההחלמה, החזירו את החיה לכלוב המתאים לה.

6. טיפול

  1. לאחר 24 שעות של השראה לפצע, התחל את הטיפולים הניסיוניים הרצויים, תוך החלפת התחבושות מדי יום.
    הערה: משך הטיפול תלוי בכל פרוטוקול ניסויי ספציפי.

7. המתת חסד

  1. לבצע המתת חסד על המדגם המיועד מכל קבוצה בהתאם לפרוטוקול שאושר על ידי ועדת האתיקה לבעלי חיים.
  2. לאחר אישור המוות, יש לבצע פלנימטריה ידנית של הפצע כפי שמתואר בשלב 4.
    הערה: במחקר זה, המתת חסד נגרמה על ידי כריתת ראש באמצעות מכשיר גיליוטינה המתאים למכרסמים, שבוצע על ידי צוות מיומן בהתאם בקפדנות להנחיות אתיות ורווחת בעלי חיים מוסדיות. המוות אושר על ידי היעדר תנועות נשימה, דופק ותגובות רפלקסיות לאחר ההליך.

8. מדידת אזור הנגע

  1. תוכנת ניתוח תמונות נדרשת להערכת אזור הנגע. בנוסף, נדרשים גם פלנימטריה ידנית וסרגל מילימטר למדידת פצע ומעקב.
  2. הורידו את תוכנת ניתוח התמונות שנבחרה וצרו חשבון, במידת הצורך, כדי לגשת לפלטפורמה.
  3. לפני תחילת הניתוח, בחרו שתי נקודות קבועות (למשל, A ו-B) בתמונת הפלנימטריה, ובאמצעות סרגל המילימטר, מדדו את המרחק בין הנקודות ורשמו את הערך המתקבל בנפרד (איור 2, שלב A).
  4. צלמו את הפלנימטריות המוגבלות מראש עם הנקודות שהוזכרו קודם. שמרו את הקבצים עם זיהוי קבוצת הניסוי המתאימה (איור 2, שלב ב').
  5. פתח את פלטפורמת ניתוח התמונה והתחל הערכת אזור הפצע.
  6. כאשר התמונה פתוחה בתוכנה, השתמשו בסמן או במסך המגע של הסמארטפון כדי לסמן נקודות חדשות, תוך הטמעתה מעל אלו שנעשו קודם, וזיהוי אותן כאזורים A ו-B (איור 2, שלב B).
  7. התוכנית תקבע אוטומטית קו בין נקודות A ל-B ותבקש את המדידה, במילימטרים או סנטימטרים, שמתקבלת באמצעות הסרגל. הזן את המדידה הזו בתוכנה, ואז לחץ על "מדידות".
  8. התוכנית תזהה אוטומטית את אזור הפצע ותספק נתונים על אורך, רוחב, היקף, שטח ועומק. בפלנימטריה, מידע ה"עומק" לא יהיה זמין (איור 2, שלב ג').
  9. שמור את התמונות עם הניתוחים שנוצרו וייצא אותן למיקום הרצוי.
    הערה: הערכת אזור הפצע המתוארת בפרוטוקול זה בוצעה באמצעות תוכנת ניתוח תמונות מסחרית המופיעה בטבלת החומרים. עם זאת, פלטפורמות ניתוח תמונה שוות ערך המסוגלות למדידת פצעים ותכנון דיגיטלי עשויות גם הן לשמש בהתאם להעדפת המשתמש ולזמינות המוסדית. אם התוכנה אינה מזהה אוטומטית את תמונת הפלנימטריה, או אם המתאר שונה ממה שנצפה ויזואלית בפלנימטריה, מומלץ לחזק את המתאר כדי להקל על זיהוי האזור על ידי התוכנה. ניתן להשיג זאת על ידי שימוש בצבע מנוגד (למשל אדום) ויישום טקסטורה על האזור החיצוני על שטח של כ-4 ס"מ רבוע. ניתן להעלות תמונות של מעקבי הפלנימטריה ישירות מגלריית המכשיר או לצלם באמצעות מצלמה לניתוח תוכנה עתידי.

figure-protocol-2
איור 2: מדידת אזור הנגע באמצעות ImitoWound. (A) בפלנימטריה ידנית, סמנו שתי נקודות (A ו-B), ומדדו את המרחק (x) ביניהן באמצעות סרגל מילימטר; (ב) להעלות את תמונת הנגע לתוכנה, ולסמן את אותן נקודות שהוגדרו מראש (A ו-B), תוך הצמתן על המקור; הזנת המדידה שנאספה קודם (X) לכיול קנה מידה; (ג) לבקש את התוכנה להמשיך במדידת שטח הנגע; המתינו כי ערך השטח מחושב אוטומטית ומסופק על ידי המערכת. הדמות הזו נוצרה על ידי המחברים באמצעות BioRender. לסה דה סילבה, מ. (2026) https://BioRender.com/dzko62t. רישיון פרסום מצורף. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

9. קביעת קצב התכווצות הפצע 

  1. לאחר קביעת אזור הפצע בנקודות הזמן המוערכות, השתמשו בנתונים כדי לחשב את קצב התכווצותהפצע 20 באמצעות המשוואה הבאה:
    FF (%) = [(A0 - A x) ÷ A0 ] × 100 (1)
    כאשר A₀ = אזור הפצע ביום 0 ; Ax = אזור הפצע ביום המתת החסד; FF = שבר סגירת הפצע

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

בניסוי זה נעשה שימוש בסולפדיאזין כסף כטיפול ייחוס. המוצר הומרח באופן מקומי על מיטת הפצע 24 שעות לאחר השראת הפצע. הבחירה בסולפדיאזין כסף התבססה על השימוש הקליני המבוסס שלו כסוכן אנטי-מיקרוביאלי ובניהול פצעים עוריים. הנתונים מוצגים כטווח החציוני והבין-רבעוני, כאשר n = 5 בעלי חיים לכל נקודת זמן ניסיונית. איור 3A ממחיש את ההתפתחות המאקרוסקופית של הפצע העור ביום ההשראה (D0) ובימים 3, 7, 14 ו-21, התואמים ליום המתת החסד לכל בעל חיים. איור 3B

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

למרות שהידע על ריפוי פצעים אנושי התקדם משמעותית, קשיים ומגבלות מובנים הופכים את השימוש במודלים ניסיוניים לבלתי נפרדים למחקרבתחום זה. בהקשר זה, הפרוטוקול הנוכחי נועד לתאר מודל פצע כריתה בעובי מלא המושר באמצעות סכין מדרגה על צדי חולדות כשיטה חלופית לטכניקות המסורתיות. האזור הגבי הקשור לשימוש בביופסיות מאגרים מעגליות הוא השיטה הנפוצה ביותר במחקרי ריפוי עור. עם זאת, השימוש בצד כאזור אנטומי חלופי מתועד היטב, ומדגים יישום שווה ערך בהערכת תיקון רקמות 21,22,23.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים מתחרים.

תודות

אנו מודים בהכרת תודה לקרן אמפארו לפסקיסה דו סטאדו דה באהיה (FAPESB), ולקורדנאסאו של אפרפייסואמנטו לפסואל דה ניבל סופריור (CAPES), על התמיכה בחברות; תוכנית הלימודים לתארים מתקדמים בביולוגיה וביוטכנולוגיה של מיקרואורגניזמים (PPGBBM/UESC), לתמיכה כספית. אנו מודים גם לבית החולים הווטרינרי לרפואה (HVET/UESC) על כך שהפכו את חדר הניתוח והציוד לזמינות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אלכוהול (אתנול 70%)DinâmicaP.01.0024.006.06.81חיטוי
מלקחיים אנטומייםSigma-AldrichF3892פלדת אל חלד
תחבושתכללא חליםהגנה על פצע
קליפרMitutoyo530-104הפרדת פצע
כלורהקסידין 0.2% תמיסת חיטוי מימיתRiohexלא חליםחיטוי
תא CO2BontherD149F1LYSZהשראת הרדמה 
תחבושת קרפ Cremer81876515 ס\"מ x 1,25 מ\'
כפפות לטקס חד פעמיותDescarpake0530101לא סטרילי
כרית גזה Cremer8193427.5 x 7.5 ס\"מ
מזרק תת-עוריDercarpack e03242011 מ"ל עם מחט
ImageJImage Jhttps://imagej.net/ij/מדידה פלנימטרית
ImitoWound ImitoWoundhttps://imito.io/pt/imitowoundמדידה פלנימטרית
מגבת נייר מקופלת ביניהם Scott Smart48260ניקוי כללי
איזופלורן Cristália7.89668E+12הרדמה בשאיפה
כפפות לטקס לנוהלכפפות לטקס לנוהל כפפות לטקס לנוהלציוד מגן אישי
סבון נוזליכללא חליםניקוי אזור פצע
מספריים מאיו, ישרים, חדים/חדיםFine Science Tools14001-12פלדת אל חלד
סרגל מילימטרכללא חלים
מורפין סולפט Sigma-AldrichM8777תמיסה להזרקה 1 מ"ג/מ"ל
גיליון נייר כללא חלים
עט קבועכללא חליםסימון עור
פובידון-יודRioquimicaZK48BN72Eחיטוי
להב סקלפל מס\' 23Descarpak740801פלדת אל חלד
ידית סקלפל מס\' 4Sigma-Aldrichלא חליםפלדת אל חלד
להב גילוח מפלדת אל חלדWilkinsonN/Aהסרת שיער
כפפת ניתוח סטריליתDescarpake0212101סטרילי
מסכת ניתוחכללא חליםלא סטרילי
טרמדול הידרוכלורידUniãoQuímica7.89601E+12פתרון להזרקה 50 מ"ג/מ"ל
תחבושת סרט שקוףVital derme 150315 ס\"מ x 10 מ\'
סרט דבק פוליפרופילן שקוףסרט דבק פוליפרופילן שקוף סרט דבק פוליפרופילן שקוףהגנה על פצע
שמיכה תרמית וטרינרית עם כיסוי PVCPrevtechMSO2VT001שמירה על טמפרטורת הגוף 
סרט דבק עמיד למיםCremer81911310 ס\"מ x 4,5 מ\'

מקורות

  1. Lin X, Lai Y. Skin scarring: mechanisms and therapies. Int J Mol Sci. 2024;25(3):1458.
  2. Desjardins-Park HE, Mascharak S, Longaker MT, Wan DC. Endogenous mechanisms of craniomaxillofacial repair: toward novel regenerative therapies. Front Oral Health. 2021;2:676258.
  3. Han G, Ceilley R. Chronic wound healing: a review of current management and treatments. Adv Ther. 2017;34(3):599-610.
  4. Benito-Martínez S, Pérez-Köhler B, Rodríguez M, Izco JM, Recalde JI, Pascual G. Wound healing modulation through the local application of powder collagen-derived treatments in an excisional cutaneous murine model. Biomedicines. 2022;10(5):960.
  5. Elliott S, Wikramanayake TC, Jozic I, Tomic-Canic M. A modeling conundrum: murine models for cutaneous wound healing. J Invest Dermatol. 2018;138(4):736-740.
  6. Chen JS, Longaker MT, Gurtner GC. Murine models of human wound healing. Methods Mol Biol. 2013;1037:265-274.
  7. Rowland MB, Moore PE, Bui C, Correll RN. Assessing wound closure in mice using skin punch biopsy. STAR Protoc. 2023;4(1):101989.
  8. De Moura Estevão LR, et al. Morphological evaluation of wound healing events in the excisional wound healing model in rats. Bio-protocol. 2019;9(13):e3285.
  9. Ansell DM, Campbell L, Thomason HA, Brass A, Hardman MJ. A statistical analysis of murine incisional and excisional acute wound models. Wound Repair Regen. 2014;22(2):281-287.
  10. Masson-Meyers DS, Andrade TAM, Caetano GF, Guimaraes FR, Leite MN, Leite SN, et al. Experimental models and methods for cutaneous wound healing assessment. Int J Exp Pathol. 2020;101(1-2):21-37.
  11. Chen Y, Chen X, Zhou Q. Different effects of a perioperative single dose of dexamethasone on wound healing in mice with or without sepsis. Front Surg. 2023;10:927168.
  12. Zhao J, Zhang S, Gong Z, Mao W, Bao W, Li Q, et al. NLRP3: a key regulator of skin wound healing and macrophage-fibroblast interactions in mice. Cell Commun Signal. 2025;23:55.
  13. Liu T, Qiu C, Ben C, Li H, Zhu S. One-step approach for full-thickness skin defect reconstruction in rats using minced split-thickness skin grafts with Pelnac overlay. Burns Trauma. 2019;7:19.
  14. Nayak BS, Maiya A, Kumar P. Influence of Helium-Neon laser photostimulation on excision wound healing in Wistar rats. Online J Biol Sci. 2007;7:89-92.
  15. Adhirajan N, Shanmugasundaram N, Shanmuganathan S, Babu M. Collagen-based wound dressing for doxycycline delivery: in vivo. evaluation in an infected excisional wound model in rats. J Pharm Pharmacol. 2009;61(12):1617-1623.
  16. Goorani S, Zangeneh MM, Koohi MK, Seydi N, Zangeneh A, Souri N, Hosseini MS. Assessment of antioxidant and cutaneous wound healing effects of Falcaria vulgaris aqueous extract in Wistar male rats. Comp Clin Pathol. 2019;28(2):435-445.
  17. Yassine KA et al. A topical ointment formulation containing powder of Lawsonia inermis leaves accelerates excision wound healing in Wistar rats. Vet World. 2020;13(7):1280-1287.
  18. Kuma DN, et al. Wound healing properties and antimicrobial effects of parkia clappertoniana keay fruit husk extract in a rat excisional wound Model. Biomed Res Int. 2022;2022:9709365.
  19. Wu AY, et al. Comparison of skin incision healing in swine made with a cold steel scalpel, a standard electrosurgical blade, and a novel tissue dissector. Med Res Innov. 2017;1(5):1000124.
  20. Ahmadi H, et al. Photobiomodulation-preconditioned diabetic stem cell transplantation accelerates ischemic wound healing in diabetic rats. Stem Cell Res Ther. 2020;11(1):494.
  21. Zhou Q, et al. Porous sodium carboxymethylamide microspheres for hemostasis and skin wound healing. ACS Appl Bio Mater. 2025;8(4):3076-3085.
  22. Corrêa JMX, et al. Treatment of surgical wounds in rats with copaiba oil-resin (Copaifera reticulata). Rev Bras Ciênc Vet. 2021;28(4):184-189.
  23. Huang L, et al. Topical administration of acyl homoserine lactone improves epithelialization of cutaneous wounds in hyperglycemic rats. PLoS One. 2016;11(7):e0158647.
  24. Dunn L, Prosser HC, Tan JT, Vanags LZ, Ng MK, Bursill CA. Murine model of wound healing. J Vis Exp. 2013;(75):e50265.
  25. Davidson JM, Yu F, Opalenik SR. Immobilization strategies to overcome wound contraction in experimental animal models. Adv Wound Care. 2013;2(4):142-148.
  26. Zhang Y, et al. Establishment and translational evaluation of animal models for skin wound healing: a systematic review. Front Physiol. 2026;17:1800001.
  27. Rizzo AE, Beckett LA, Baier BS, Isseroff RR. The linear excisional wound: an improved model for human ex vivo wound epithelialization studies. Skin Res Technol. 2012;18(1):125-132.
  28. Can H, et al. Clinical, histopathological, and immunohistochemical investigations of the effects of Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) on open wound healing in rats. Pak Vet J. 2025;45(3):1135-1145.
  29. Shehasina KA, et al. Comparison of manual and digital planimetry techniques in full-thickness cutaneous wounds in dogs. Int J Vet Sci Anim Husb. 2024;9(2):603-607.
  30. Gill R, Poojar B, Bairy LK, Praveen KSE. Comparative evaluation of wound healing potential of Manuka and Acacia honey in diabetic and non-diabetic rats. J Pharm Bioallied Sci. 2019;11(2):116-126.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

ביולוגיהגיליון 233גיליון 233ערך ריקגיליוןפצעים ופגיעותכוויותרה-אפיתליזציההשתלהתיקון רקמותמודלים של מחלותחולדותWistar