מתוארת גישה משופרת לעקירה של השן הטוחנת הראשונה בלסת התחתונה בעכברים, והיא מושווית לגישה הקונבנציונלית על מנת להעריך את יעילות ההליך ואת יכולת השחזור שלו. הגישה המשופרת מגבירה את העקביות הפרוצדורלית ומפחיתה את האתגרים הטכניים בהקמת מודל של ריפוי שן בלסת התחתונה של עכברים.
מאמר שיטה
גישה מותאמת לעקירת שן לשיפור היעילות והעקביות הפרוצדורלית במודל של ריפוי שקית שן בלסת התחתונה של עכברים
במאמר זה
סיכום
תקציר
מודל הריפוי של שקע השן (TSHM) הוא מודל בעלי חיים נפוץ לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס התחדשות העצם. למרות שה-TSHM של הלסת התחתונה בעכברים הוא בעל ערך למשחק תהליכים פתולוגיים ספציפיים ללסת התחתונה, ביסוס מודל זה נותר מאתגר מבחינה טכנית בשל המאפיינים האנטומיים והביו-מכניים של אזור הטוחן בלסת התחתונה. פרוטוקול זה מתאר גישה משופרת לעקירה של הטוחן הראשון בלסת התחתונה בעכברים ומשווה את ביצועיה לטכניקה הקונבנציונלית כדי לשפר את יעילות הפעולה ואת השחזוריות שלה. תחת תנאים ניסויים מבוקרים, הגישה המשופרת הפחיתה משמעותית את זמן העקירה הממוצע מ-29 ל-10 דקות. בנוסף, בקבוצה המשופרת נצפו פחות סיבוכים הקשורים לעקירה, כולל שברים בשורש ובעצם האלבולואר, מה שמעיד על עקביות פרוצדורלית משופרת. ניתוח מיקרו-computed tomography (μCT) הדגים עוד שימור משופר של ארכיטקטורת שקע העקירה במהלך שלבי הריפוי המוקדמים. ממצאים אלו מצביעים על כך שגישת העקירה המשופרת מגבירה את יעילות הפעולה ואת השחזוריות, תוך הפחתת האתגרים הטכניים הקשורים לעקירת שיניים בלסת התחתונה של עכברים. פרוטוקול זה עשוי להקל על ביסוס עקבי יותר של מודלים לריפוי שקע השן בלסת התחתונה של עכברים, במיוחד עבור חוקרים בעלי ניסיון מיקרו-כירורגי מוגבל.
מבוא
מודל ריפוי שק השן (TSHM) הוא מודל קלאסי לחקר התחדשות עצם1. מודל זה יוצר פגיעה מאתגרת אך סוב-קריטית בתוך העצם האלבולרית, המאפשרת ריפוי טבעי חיובי ללא התערבות נוספת1. עכברים משמשים באופן נרחב כבעלי חיים למודל בשל הרקע הגנטי שלהם, הדמיון במטבוליזם של העצם לבני אדם, עלויות גידול נמוכות יחסית וקלות התחזוקה2. במהלך העשורים האחרונים, התקדמויות מהירות בטכנולוגיות עריכה גנטית הפכו את העכברים לחיוניים לחקירת המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס התחדשות העצם3. כתוצאה מכך, עקירה של שיניים טחונות בעכברים טרנסגניים שימשה באופן נרחב להקמת TSHM לצורך חקירת מנגנוני הבקרה של התחדשות העצם4,5,6.
מרבית המחקרים הקודמים ביססו מודלים של חור tooth socket (TSHM) בעכברים באמצעות הלסת העליונה4,5,6, מכיוון שהלסת התחתונה קשיחה יותר מבחינה מכנית ופחות גמישה מהלסת העליונה7, מה שמעלה את הקושי הטכני בעקירת השן. בנוסף, שטח הניתוח לעקירת שיערס המולר העליון נגיש יותר יחסית, והלסת העליונה קלה יותר לייצוב מהלסת התחתונה, מה שהופך את הפרוצדורה לפחות תובענית מבחינה טכנית. למרות אתגרים אלו, המורפולוגיה הקשתית והמורחבת של שורש השן האפיקלי במולר הראשון של הלסת התחתונה בעכבר מגבירה את האחיזה המכנית בתוך עצם alveolar הסובבת8,9, מה שמסבך עוד יותר את העקירה (איור 1). עם זאת, מודלים של עקירה מהלסת התחתונה נותרים חיוניים לחקר תהליכים פתולוגיים ספציפיים ללסת התחתונה, כולל אוסטאומייליטיס, אוסטאונקרוזיס של הלסת הקשורה לתרופות, אוסאואינטגרציה של שתלים ושיקום עצם באמצעות ביו-חומרים10,11,12. לפיכך, שיטה הדירה ואמינה לעקירת מולרים מהלסת התחתונה בעכברים היא חשובה למחקרים הדורשים מודלים של ריפוי tooth socket ספציפיים ללסת התחתונה.
איור 1השוואה סכמטית של מורפולוגיית השיניים בבני אדם ובעכברים.
(A) איור סכמטי של שן אדם בוגרת. (B) איור סכמטי של שן טריטורית ראשונה בלסת התחתונה של עכבר מתבגר. (C) איור סכמטי של שן טריטורית ראשונה בלסת התחתונה של עכבר בוגר. הדיאגרמות מדגישות הבדלים במורפולוגיית השורש ובפיזור הצמנטום, התורמים לשיפור הרתנציה המכנית של שיניים טריטוריות ראשונות בלסת התחתונה של עכברים בוגרים בתוך העצם האלבולרית. זגג, דנטין וצמנטום מסומנים בצבעים המתאימים המופיעים במקרא. המאפיינים האנטומיים מבוססים על תיאורים שפורסמו.8,9,15. אנא לחצו כאן כדי להציג גרסה מורחבת של דמות זו.
טכניקה להסרת שיניים שפותחה בעבר על ידי קבוצת המחקר שלנו עושה שימוש במזרקים שהותאמו לשמש כמעלים דנטליים13. למרות ששיטה זו מאפשרת הסרה מוצלחת של השן הטוחנת הראשונה התחתונה הימנית בעכברים, היא דורשת רמה גבוהה של דיוק טכני ובעלת עקומת למידה תלולה הדורשת תרגול נרחב. מפעילים חסרי ניסיון עלולים לגרום בטעות לפגיעות במבנים אנטומיים סמוכים. בנוסף, הסרת השן הטוחנת הראשונה התחתונה השמאלית דורשת אימון נוסף של "תמונת מראה" כדי להגיע למיומנות פרוצדורלית. אתגרים אלו עלולים לפגוע בשלמות של חור השן לאחר העקירה, להפחית את העקביות של תוצאות הריפוי בין בעלי החיים, ולהגביל את הנגישות של המודל עבור חוקרים עם ניסיון מיקרו-כירורגי מוגבל.
פרוטוקול זה מתאר גישה משופרת לעקירה של השן הראשונה במולר התחתון בעכברים, במטרה לשפר את הנגישות התהליכית ואת השחזוריות. הפרוטוקול תוקף בעכברים זכרים בני 8 שבועות מדגם C57BL/6 לצורך הקמת מודל TSHM של השן הראשונה במולר התחתון. הגישה המשופרת הושוותה באופן שיטתי לטכניקה הקונבנציונלית כדי להעריך את היעילות התהליכית, את הצלחת העקירה ואת הסיבוכים הקשורים להליך. בנוסף, נותחו מצבי כישלון טכניים נפוצים להם נתקלו במהלך רכישת השיטה כדי לספק הדרכה מעשית לחוקרים המקימים מודל TSHM במולר התחתון של עכברים.
פרוטוקול
כל ההליכים אושרו על ידי הוועדה לאתיקה של בית הספר לרפואת הפה של מערב סין, אוניברסיטת סיצ'ואן (WCHSIRB-D-2025-188), ובוצעו בהתאם להנחיות המוסדיות לטיפול בבעלי חיים.
הערה: השתמש בעכברים זכרים בני 8 שבועות מדגם C57BL/6 השוקלים 22–29 g. תחזק את החיות על תזונת chow סטנדרטית עם מים הזמינים ad libitum בתנאי מחיה סטנדרטיים (21°C–24°C, 40%–60% לחות, ומחזור אור-חושך של 12 שעות). השתמש בחומרים ובמכשירים המפורטים בטבלת החומרים. השתמש ב-24 עכברים לצורך ההערכה ההשוואתית והצגת מקרים שנכשלו. השתמש בעכברים נוספים לאימון המבצע לפני הניסוי ההשוואתי.
1. הכנה טרום-ניתוחית
- הכנת המכשירים
- הכינו מחטי מזריקה בכי মাপ 25 G לשימוש כמעליים (אופציונלי). כופפו את הקצה המשופע של כל מחט לזווית של כ-20°–40°13.
- הכינו פינצטה רפואית עם שיניים לשימוש כפינצטת שיניים. בדקו את הקצה המשונן תחת הגברה כדי לוודא שהשיניים מיושרות כראוי וללא עיוותים.
- הרכיבו מלהרחבת פה באמצעות גומייה אחת וארבע מחטי מזריקה 25 G. הכינו לוח קצף או קרטון כמשטח עבודה, סרט דביק להצמדת גפי העכבר, ופנס ראש להארת שדה הניתוח.
- הכינו משטח חימום להתאוששות לאחר הניתוח וחממו אותו מראש לטמפרטורה של כ-38°C לפני הניתוח. הכינו גוזי צמר להמסטזיס וכמות מתאימה של תמיסת סליין לניקוי חלל הפה.
- הכינו כיסוף לאצבע לכיסוי האגודל ולהגנה על המבצע במהלך הליך העקירה.
- הניחו בד לא סרוג סטרילי על משטח העבודה ועל משטח החימום כדי לשמור על שדה סטרילי.
- הכנת ההרדמה
- חטאו את בטן העכבר באמצעות גוז צמר ספוג בתמיסת חיטוי פובידון- יוד. מזריקו פנטוברביטל נתרן 1% (50 mg/kg) תוך-פריטונית14. העריכו את עומק ההרדמה באמצעות מבחן צביטה של הבהו and מזריקו הרדמה נוספת במידת הצורך.
הערה: אם רפלקס צביטת הבהו חוזר או אם הפרוצדורה מתקרבת למשך ההרדמה הצפוי, הפסיקו את הפעולה ומזריקו הרדמה נוספת בהתאם לפרוטוקול הווטרינרי המוסדי המאושר. - מרחו משחה רפואית עינית וטרינרית לשתי העיניים מיד לאחר ההרדמה כדי למנוע התייבשות של קרנית.
- חטאו את בטן העכבר באמצעות גוז צמר ספוג בתמיסת חיטוי פובידון- יוד. מזריקו פנטוברביטל נתרן 1% (50 mg/kg) תוך-פריטונית14. העריכו את עומק ההרדמה באמצעות מבחן צביטה של הבהו and מזריקו הרדמה נוספת במידת הצורך.
- הכנה לחיטוי וסטריליזציה
- חטאו את משטח הניתוח, משטח החימום, הסרט הדביק, כיסוף האצבע ואזור העבודה שמסביב באמצעות אתנול 75%. השתמשו במקלוני צמר סטריליים חדשים, בד לא סרוג, גומיות ומחטים עבור כל עכבר. סטריליזו את הפינצטה המשוננת ואת תמיסת הסליין באמצעות פרוטוקול סטריליזציה בקיטור המוסדי הסטנדרטי לפני השימוש.
אזהרה: אתנול 75% הוא חומר דליק. השתמשו בו באזור מאוורר היטב, הרחוק מחום, ניצוצות, להבות גלויות ומקורות הצתה אחרים. לבשו ציוד מגן אישי מתאים. המתינו למכשירים ומשטחים שטופים באתנול להתייבש לחלוטין לפני תחילת הפרוצדורה. - בצעו היגיינת ידיים לפני תחילת הפרוצדורה. לבשו בגדי ניתוח נקיים, כובע ניתוח סטרילי, מסכה כירורגית וכפפות סטריליות.
- חטאו את משטח הניתוח, משטח החימום, הסרט הדביק, כיסוף האצבע ואזור העבודה שמסביב באמצעות אתנול 75%. השתמשו במקלוני צמר סטריליים חדשים, בד לא סרוג, גומיות ומחטים עבור כל עכבר. סטריליזו את הפינצטה המשוננת ואת תמיסת הסליין באמצעות פרוטוקול סטריליזציה בקיטור המוסדי הסטנדרטי לפני השימוש.
2. התהליך הכירורגי
- קיבוע וניקוי העכבר
- הצב את העכבר במנח גב (supine) על לוח הקיבוע ואבטח את הגפיים באמצעות סרט דבק. הכנס שתי מחטות 25 G לתוך לוח הספוג בגובה המישור האורביטלי-אוזני, והכנס שתי מחטות 25 G נוספות מתחת ללסת התחתונה.
- הנח את גומיית הגומי מעל המחטות ולרוחב השיניים החותכות כדי להחזיק את הפה פתוח. הסת את הלשון בעדינות והצב אותה בצד הנגדי לאתר העקירה כדי למנוע חסימה של השדה הכירורגי. השתמש בטבח הראשון של הלסת התחתונה הימנית כדוגמה מייצגת לאורך פרוטוקול זה.
- הסר שאריות מזון וחומרים זרים אחרים מחלל הפה באמצעות כדור צמר קטן שהורטב בתמיסת סליין.
הערה: סחוץ היטב את כדור הצמר כדי להסיר עודפי סליין ולמנוע חדירת נוזלים לחלל הפה, דבר שעלול לגרום לחנק.
- ביטול התנגדות דיסטלית ומזיאלית (אופציונלי)
- השתמש בפינצטה ביד שמאל כדי להסיט את הפינה הימנית של הפה ולחשוף באופן מלא את הטבח הראשון של הלסת התחתונה הימנית ואת הרקמות הרכות הבוקאליות והלינגואליות הסמוכות.
- החזק את הפינצטה ביד ימין. לאחר מכן, החזק מחט 25 G ביד שמאל והכנס אותה בזהירות לרסן הפריודונטלי הבוקאלי הסמוך לשורש הדיסטלי כדי ליצור חלל ברסן הפריודונטלי.
- הקדם את המחט לאט לעבר האזור הפרי-אפיקלי תוך סיבוב שלה לכיוון מזיאלי ולינגואלי לעבר הטבח כדי לשחרר את השורש מהשקע האלבולרי.
- הכנס מחט 25 G לתוך פיסורת השורש (root furcation) מהצד הבוקאלי והגבה אותה אוקלוזלית בעזרת יד שמאל. הכנס מחט 25 G שנייה לרסן הפריודונטלי הלינגואלי הסמוך לשורש המזיאלי בעזרת יד ימין כדי ליצור חלל ברסן הפריודונטלי, ולאחר מכן סובב את המחט לכיוון דיסטלי ובוקאלי.
- הוצא את שתי המחטות מהשדה הכירורגי לאחר השלמת השחרור המקדים של הרסן הפריודונטלי.
הערה: בצע שחרור מקדים של הרסן הפריודונטלי רק כאשר השן מראה ניידות מינימלית והתנגדות בולטת לאחר ניuע נדנוד ראשוני עם הפינצטה.
- נדנוד ועקירה
- ייצב את ראש העכבר באמצעות האצבעות המורה והאמצעית של יד שמאל. הצמד את האגודל, המכוסה בשרוול אצבע, אל השיניים החותכות של הלסת התחתונה לתמיכה, תוך החזקת הפינצטה ביד ימין.
- החזק את קצות הפינצטה בניצב למישור האוקלוזלי ובמקביל לציר האורכי של השן. הנח את הקצוות המשוננים בתוך פיסורת השורש כדי להשיג משיכה יציבה.
הערה: אין לתפוס את שורש השן ישירות עם הפינצטה, שכן הדבר עלול לגרום לשבירת השורש. - תפוס את הכתר בעזרת הפינצטה ובצע תנועות נדנוד בוקאו-לינגואליות עדינות. הגבל את זווית הנדנוד הבוקאלית ל-30° ואת זווית הנדנוד הלינגואלית ל-50°. בצע תנועת נדנוד אחת כל 1–1.5 s.
- שמור על משיכה לאורך הציר האורכי של הטבח מהאפקס לעבר הכתר, תוך הפעלת תמיכה נגדית קבועה נגד השיניים החותכות של הלסת התחתונה באמצעות כרית האגודל השמאלי כדי לייצב את הלסת התחתונה.
הערה: שמור על תמיכה נגדית רציפה ויציבה תוך הימנעות מדחיסה מופרזת או מהסטה של השיניים החותכות ושל הרקמות הרכות הסמוכות. - המשך בתנועות הנדנוד עד שהשן תהפוך בהדרגה לניידת והמשטח האוקלוזלי יורם באופן נראה לעין מעל הטבחים הסמוכים. שמור על קצות הפינצטה במקביל לציר האורכי של השן לאורך כל הפרוצדורה, ולאחר מכן עקור את השן מרגע שהושגה ניידות מספקת.
הערה: לפני הפעלת כוח העקירה הסופי, העריך את ניידות השן על ידי נדנוד עדין של הכתר בכיוון בוקאו-לינגואלי. המשך בעקירה רק כאשר ניתן להסיט את הכתר בהתנגדות מינימלית ואמפליטודת התנועה הבוקאו-לינגואלית מגיעה לכמחצית מרוחב הכתר. העריך מחדש את עומק ההרדמה מיד לפני העקירה המלאה. הגש הרדמה נוספת במידת הצורך (איור 2).
איור 2השוואה בין השיטות הקונבנציונליות והמשופרות לעקירת השן הראשונה בטוחת הלסת התחתונה בעכברים.
(A) איור סכמטי של שיטת העקירה הקונבנציונלית, שבה מחט 25 G כפופה מוחדרת לרסן השן (periodontal ligament) ומשמשת כמנוף להרחקה (luxation) של השן. (B) איור סכמטי של שיטת העקירה המשופרת, שבה פינצטה אופתלמית משננת תופסת את הכתר ומפעילה משיכה במקביל לציר האורכי של השן. (C) תמונה מייצגת של הקצה הכפוף של מחט ה-25 G המשמשת כמעלה (elevator). (D) תמונה מייצגת של הפינצטה האופתלמית המשננת המשמשת כפינצטת מיקרו-עקירה. (E) תמונה תוך-ניתוחית מייצגת המראה את שקע העקירה מיד לאחר עקירת שן טוחנת ראשונה תחתונה; קווים מקווקוים מסמנים את שקעי העקירה. (F) מבט ל侧 (בוקאלי) של שן טוחנת ראשונה תחתונה שנעקרה בהצלחה. (G) מבט לשוני של אותה שן טוחנת ראשונה תחתונה שעוקרה. סריגי קנה מידה = 2 ממ" (C,D) ו- 400 µm (ה–ז). אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של איור זה.
3. בדיקת השיניים שהוצאו וחללי העקירה
- בדקו את השן שהוצאה כדי לאשר את הסרתה המלאה ואת שלמותה המבנית. ודאו כי המורפולוגיה של השורש נשמרה, עם שורש מזיאלי ארוך יותר, שורש דיסטלי קצר יותר והרחבה אפיקלית15. ודאו ששיירי עצם אלבולרית אינם נותרים דבוקים לשן שהוצאה.
- בדקו את חלל העקירה כדי לאשר שהוא נקי ושאין בו שיירי שורש (איור 2).
הערה: אם קיים חשד לשורש שנותר או נשבר במהלך העקירה, הימנעו מטיפול חוזר מכיוון שניסיונות מרובים עלולים להחמיר את הפגמים בחלל העקירה. בדקו את אתר העקירה תחת הגדלה כדי לאשר נוכחות של שיירי שורש. רשמו מקרים עם שורשים שנותרו או נשברו כעקירות שנכשלו והסִירו אותם מהערכת המודל העוקבת. טפלו בבעלי חיים אלו בהתאם לפרוטוקול בעלי החיים המאושר.
4. טיפול לאחר ניתוח
- יש להניח פן ספיגה יבש להשגת המוסטזיס. נקה את חלל הפה באמצעות כדור פן קטן שהורטב בתמיסת סליין, ולאחר מכן החזר את הלשון למקומה.
הערה: הרטב את כדור הפן בנפח המינימלי של סליין סטרילי הדרוש כדי להרטיב את פניו מבלי להיווצר נוזל חופשי. - תן carprofen (במינון של 5 mg/kg, בהזרקה תת-עורית) לאחר הניתוח לצורך אלגזיה פוסט-אופרטיבית.
- הנח את בעל החיים על משטח חימום ועקב אחר מצבו באופן רציף עד להסכמתו.
- לאחר ההתאוששות מההרדמה, ספק מזון סטנדרטי רך או תזונת ג'ל על רצפת הכלוב למשך 3 ימים, עם גישה חופשית (ad libitum) למים. חזור לתזונה רגילה של מזון סטנדרטי לאחר שאיששת התנהגות האכלה תקינה.
- עקב אחר צריכת מזון, משקל גוף, פעילות, התנהגות טיפוח, נפיחות פנים, דימום מהפה וסימני כאב או מצוקה במרווחי זמן שנקבעו מראש.
5. הכשרת מפעילים
- שבצו באופן אקראי שני מפעילים, ששניהם אינם בעלי ניסיון קודם במודלים של התחדשות רקמות קשות בעכברים, לקבוצת העקירה הקונבנציונלית או לקבוצת העקירה המודפית. הכשיר את המפעילים בנפרד תחת פיקוחו של אותו מדריך, השולט בשתי גישות העקירה, הקונבנציונלית והמודפית.
- במהלך השבוע הראשון, הנחה כל מפעיל לתרגל את הליך העקירה שהוקצה לו על גופות של עכברים כדי להכיר את זרימת העבודה הכירורגית.
- במהלך השבוע השני, פקח על ההכשרה בעכברים חיים כדי להעריך ולשכלל את היישום המעשי של כל טכניקה. עקב אחר כל הליך כדי להבטיח הרדמה נאותה ולמנוע סיבוכים כירורגיים בלתי מכוונים, כולל פגיעה מקרית ברקמות הרכות הסביבות עקב מניפולציה שגויה של המכשירים או נזק למבנים האלבולריים. אשר את מיומנות המפעיל כאשר המפעיל מסוגל לבצע באופן עצמאי שלוש עקירות מוצלחות ברצף. לאחר השלמת ההכשרה תחת פיקוח, התחל בניסויי העקירה ההשוואתיים.
6. הכנת הדגימות
- יש להקלי ע את העכברים באמצעות פריקה צווארית. יש להוציא את הלסתות התחתוניות מהראש ולהסיר את הרקמה הרכה הדבוקה אליהן.
- יש לקבע את הלסתות התחתוניות בתמיסת 4% paraformaldehyde למשך 48 h. יש לשמור את הדגימות ב-PBS לפני סריקת µCT.
7. µCT ואנליזות
- סרוק את הלסתות התחתונות באמצעות סורק µCT. הגדר את פרמטרי הסריקה ל-80 kV, 500 µA, רזולוציית ווקסל של 10 µm, וסריקה שכבה אחר שכבה.
- כוייל את מערכת ה-µCT באמצעות פנטום הידרוקסיאפטיט. סרוק את הפנטום וייצא את התמונות השחזוריות באמצעות DataViewer.
- נתח את תמונות הפנטום באמצעות CTAn. הגדר עקומת כיול על ידי קורלציה בין ערכי בליעת ה-CT שנמדדו של רכיבי הפנטום לבין צפיפויות המינרלים הידועות שלהם, כדי להמיר ערכי בליעה ל-BMD.
- החל פרמטרי סריקה ושחזור זהים על כל הדגימות.
- שחזר את כל מערכי הנתונים באמצעות זרימת העבודה הסטנדרטית לשחזור ב-CTAn הקשורה למערכת ה-µCT. החל הגדרות שחזור, הגדרת ROI וקריטריונים לניתוח כמותי זהים על כל הדגימות. בצע שחזור תלת-ממדי בנפרד באמצעות Mimics Research לצורך ויזואליזציה מייצגת, בהתאם לאותה הגדרת ROI ששימשה לניתוח הכמותי ב-CTAn.
- הגדר את אזור העניין (ROI) על ידי בחירת אזור השורש הדיסטלי של השן הטחון הראשונה שחולצה מהלסת התחתונה. אסוף 100 פרוסות רוחביות רצופות הנמתחות אפיקלית מחיבור השמנתי-זחית (cementoenamel junction) של השן הטחון השנייה הסמוכה.
- סמן ידנית את ה-ROI בכל פרוסה לאורך הגבול של העצם האלוולארית שנוצרה מחדש סביב חלל העקירה. בצע עיבוד תמונות וניתוח כמותי המשך באמצעות CTAn עם פרמטרי ניתוח זהים לכל הדגימות.
- בצע שחזור תלת-ממדי באמצעות Mimics Research. חשב את שכיחות שברים בשורש ופגמים בדופן החלל כפרופורציה של דגימות הלסת התחתונה המראות כל מצב ביחס למספר הכולל של דגימות הלסת התחתונה.
- בצע את כל הניתוחים הסטטיסטיים והפק גרפים באמצעות GraphPad Prism v10.1.2. העरक את הנורמליות של משתנים רציפים באמצעות מבחן Shapiro–Wilk.
- הגדר את העכבר הבודד ואת חלל העקירה התואם לו כיחידה הניסויית לכל הניתוחים.
- השווה בין הקבוצות את זמן העקירה, ה-BMD וה-BV/TV באמצעות מבחן Student’s t דו-זנבי ללא התאמה. השווה את שכיחות השברים בשורש ופגמי דופן החלל באמצעות מבחן Fisher’s exact.
- סמן מובהקות סטטיסטית באופן הבא: *, p < 0.05; **, p < 0.01; ו-***, p < 0.001. השתמש ב-“ns” כדי לציין שאין הבדל מובהק סטטיסטית בין שתי הקבוצות.
תוצאות
המאפיינים האנטומיים הרלוונטיים לעקירה של השן הטוחנת הראשונה במנדיבולה מוצגים ב-איור 1, וגישות העקירה הקונבנציונלית והמשופרת מוצגות באופן סכמטי ב-איור 2A,B. תמונות מייצגות של המחט המוכנה והפינצטה האופתלמית המשוננת, של חללי העקירה הטריים ושל השן הטוחנת הראשונה שנערקה מהמנדיבולה מוצגות ב-איור 2C–G. זרימת העבודה המלאה של הפרוצדורה מסוכמת ב-איור 3. כדי להשוות את היעילות והעקביות של שתי הגישות, שני מפעילים עם ניסיון שווה בטיפול בעכברים הוקצו באופן אקראי לבצע עקירה של השן הטוחנת הראשונה במנדיבולה באמצעות השיטה הקונבנציונלית או השיטה המשופרת. כל העכברים היו זכרים מסוג C57BL/6 בני 8 שבועות. זמן העקירה וסיבוכים הקשורים לפרוצדורה תועדו מיד לאחר העקירה, בעוד שחללי העקירה נבדקו באמצעות µCT לאחר שבועיים של ריפוי. זמן העקירה תועד במהלך הפרוצדורה ולכן לא ניתן היה להעריכו באופן סמי (blindly); השיניים שנערקו ומערכי הנתונים של ה-µCT קודדו לפני ההערכה, כך שהמעריך לא ידע מה הייתה שיטת העקירה.
איור 3תהליך העבודה של פרוצדורות עקירת השן הראשונה בלסת התחתית בעכברים, בשיטה הקונבנציונלית ובשיטה המשופרת.
תהליך העבודה מתחיל בהכנת המכשירים, הרדמה, חיטוי ועיקור, וקיבוע של העכבר. לאחר מכן הפרוטוקול מתפצל לגישות העקירה הקונבנציונלית והמשופרת. הגישה הקונבנציונלית כוללת הסרה רצופית של התנגדות דיסטלית ומזיאלית לפני עקירת השן, בעוד שהגישה המשופרת כוללת הרפיה מוקדמת רשות של הרצועה הפריודונטלית, ולאחריה תנועות נדנוד ועקירת השן באמצעות פינצטה אופטלמית משננת. שתי הגישות מסתיימות בבדיקה של השן הנעקרת ואתר העקירה, ולאחריה טיפול לאחר הניתוח. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מורחבת של דמות זו.
תמונות µCT מייצגות שהתקבלו מיד לאחר העקירה ולאחר שבועיים של ריפוי מוצגות ב-איור 4A–D. הגישה המשופרת הפחיתה באופן משמעותי את זמן העקירה הממוצע בהשוואה לגישה הקונבנציונלית (10 min לעומת 29 min, p = 0.0006; איור 4E). שבר בשורש התרחש ב-2/6 עכברים (33.3%) בקבוצה המשופרת וב-4/6 עכברים (66.7%) בקבוצה הקונבנציונלית, ללא הבדל מובהק סטטיסטית בין הקבוצות (p = 0.5455; איור 4F). פגמים בדופן השקע נצפו ב-0/6 עכברים בקבוצה המשופרת וב-4/6 עכרים (66.7%) בקבוצה הקונבנציונלית; הבדל זה לא היה מובהק סטטיסטית (p = 0.0606; איור 4G). לאחר שבועיים של ריפוי, ניתוח µCT הראה ערכי BMD ו-BV/TV גבוהים באופן משמעותי בקבוצה המשופרת מאשר בקבוצה הקונבנציונלית (p = 0.0188 ו-p = 0.0253, בהתאמה; איור 4H,I). תוצאות אלו מדגימות זמני עקירה קצרים יותר בגישה המשופרת ומצביעות על עקביות משופרת של העקירה תחת התנאים הניסויים שנבחנו.
איור 4השוואה בין הגישה הקונבנציונלית לגישה המשופרת לעקירת השן הראשונה בטוחת הלסת התחתונה בעכברים והחלמה של שקית השן בעקבות זאת.
(A–D) תמונות מייצגות של מיקרו-טומוגרפיה ממוחשבת (µCT(A-D) תמונות של שקעי עקירה מיד לאחר העקירה (A,B) ושבועיים לאחר העקירה (C,D) באמצעות הגישה הקונבנציונלית (A,C) או הגישה המשופרת (B,D). פאנלים 1–3 מראים תצפיות סגיטליות, קורונליות וטרנסברסליות, בהתאמה, ופאנל 4 מראה את השחזור התלת-ממדי התואם. קווים מקווקווים אדומים מתווים את קווי המתאר המקוריים של השורש. קווים מקווקווים לבנים וחצים אדומים מצביעים על פגמים בדופן השקע. קווים כתומים רציפים ב-A1, B1, C1 ו-D1 מצביעים על המיקומים התואמים של תצפיות החתך הרוחבי. קווים מקווקווים כחולים ב-C1, C2, D1 ו-D2 מצביעים על היקף העצם שנוצרה מחדש בתוך שקע העקירה. עצם שנוצרה מחדש מודגשת באדום בשחזורים התלת-ממדיים (C4,D4). (E–I) השוואה כמותית של ביצועי העקירה וריפוי מוקדם של השקע, כולל זמן עקירה (E), שכיחות של שברים בשורש (F), שכיחות של פגמים בדופן השקע (G), צפיפות מינרלית של העצם (BMD; H), ושבר נפח עצם/נפח רקמה (BV/TV; I). עבור תוצאות פרוצדורליות (E–G), נ = 6 עכברים לקבוצה; עבור µCT ניתוח ריפוי השקע (H,I), נ" = 3 עכברים לכל קבוצה. העכבר הבודד וחלל העקירה התואם נחשבו ליחידה הניסויית. תוצאות רציפות ב-E, H ו-I מוצגות כממוצע ± SD והושוו באמצעות מבחן Student’s דו-זנבי למדגמים בלתי זוגיים. ט תוצאות קטגוריות ב-F וב-G מוצגות כמספרים גולמיים וכאחוזים, והושוו באמצעות מבחן exact של פישר (Fisher's exact test). שבירת שורש התרחשה ב-4/6 מהעכברים (66.7%) בקבוצה הקונבנציונלית וב-2/6 מהעכברים (33.3%) בקבוצה המותאמת. פגמים בדופן האלveולרה התרחשו ב-4/6 מהעכברים (66.7%) בקבוצה הקונבנציונלית וב-0/6 מהעכברים בקבוצה המותאמת. מובהקות סטטיסטית: *, p < 0.05; ***, p < 0.001. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של איור זה.
עקירה מוצלחת הוגדרה כהסרה מלאה של השן הטחון הראשונה בלסת התחתונה ללא שרידי שורש, תוך שימור מבנה השקע האלוולארי לצורך הערכת הריפוי העוקבת, כפי שמוצג ב-איור 4A–D. עקירה נחשבה לבלתי מוצלחת כאשר הסרה חלקית של השן או נזק שנגרם במהלך הפרוצדורה פגעו בהערכה העוקבת של ריפוי השקע. תוצאות בלתי מוצלחות מייצגות מוצגות ב-איור 5A–F. שבר בכתר מוצג ב-איור 5A, שבר בשורש הדיסטלי מוצג ב-איור 5B, ופגם בשורש המזיאלי מוצג ב-איור 5C. שרידי שורש ושבר בקצה השורש מוצגים ב-איור 5D,E, בהתאמה. נזק מבני באזור תעלת העצב האלוולארי התחתון מוצג ב-איור 5F. תוצאות בלתי מוצלחות אלו היו קשורות לשליטה לא נכונה בזווית או בעומק הכנסת המחט, מסלולי עקירה לא מתאימים, הפעלת כוח מוגברת או מניפולציה מוגברת. הכללה של תוצאות מוצלחות ובלתי אופטימליות מדגימה את מגוון התוצאות שעשויות להתרחש במהלך יישום הפרוטוקול ומספקת קריטריונים לפירוש הצלחה או כישלון של העקירה.
איור 5. דוגמאות מייצגות של עקירות כושלות של השן הטוחנת הראשונה בלסת התחתונה בעכברים.
(A–F) תמונות µCT מייצגות ושחזורים תלת-ממדיים הממחישים סיבוכים נפוצים הקשורים לעקירה. (A) שבר בכתר. (B) שבר בשורש הדיסטלי. (C) פגם בשורש המזיאלי. (D) שארית שורש. (E) שבר בקצה השורש. (F) נזק למבנים אנטומיים סובבים. קווים מקווקווים אדומים מתוחים סביב קווי המתאר המקוריים של השורש. קווים מקווקווים לבנים מתוחים סביב פגמים גרמיים או מבנים אנטומיים סמוכים. חצים אדומים מצביעים על אתרי הפגיעה או על שאריות שורש שנותרו. שורשים שבורים ושיניים סמוכות מודגשים באדום בשחזורים התלת-ממדיים המוצגים בפנלים A, B, D ו-E. פנלים C ו-F כוללים תצוגות חתך רוחבי מייצגות של השחזורים התלת-ממדיים. כל הדגימות נאספו שבועיים לאחר עקירת השן. סרגי קנה מידה = 200 µm. קיצור: µCT, מיקרו-טומוגרפיה ממוחשבת. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של איור זה.
דיון
הקמה מוצלחת של TSHM דורשת עקירה מלאה של השן תוך שימור המבנה האלווולרי הסובב, שכן פגיעה הקשורה לעקירה עלולה לפגוע ברגנרציה עתידית של העצם16. לפיכך, השחזרות של הליך העקירה מהווה גורם קריטי לאמינות המודל17. במחקר זה, גישה משופרת לעקירת שן טריס (molar) ראשונה תחתית המבוססת על פלייר הושוותה באופן שיטתי לטכניקה קונבנציונלית המבוססת על מנוף תחת תנאי הדרכה סטנדרטיים. השיטה המשופרת הדגימה יעילות פרוצדורלית ושחזרות משופרות, כפי שבאו לידי ביטוי בזמן עקירה קצר משמעותית ובפחות סיבוכים הקשורים לעקירה. באופן ספציפי, לאחר אותה תקופת הדרכה של שבועיים, זמן העקירה הממוצע התקצץ מ-29 min בגישה הקונבנציונלית ל-10 min בגישה המשופרת. יתרה מכך, לא נצפו פגמים בדפנות השקע האלווולרי בקבוצה המשופרת, בעוד שסיבוך זה הופיע תכוף בקבוצה הקונבנציונלית. אף ששכיחות שבירת השורש לא נבדלה באופן מובהק בין הקבוצות, השכיחות הנמוכה יותר שנצפתה בשיטה המשופרת מעידה על עקביות פרוצדורלית משופרת תחת התנאים הניסויים הנוכחיים. בנוסף, שימור משופר של מבנה שקע העקירה היה קשור לריפוי עצם מוקדם ומשופר לאחר שבועיים. יחד, ממצאים אלה מצביעים על כך שהטכניקה המשופרת עשויה להפחית את השונות התלויה במבצע במהלך הקמת המודל.
בדיקה ישירה של השן שנשלפה ושל השקע מספיקה לזיהוי שגרתי של שברים בולטים בשורש ופגמים משמעותיים בשקע. במחקר השוואתי זה, נעשה שימוש ב-µCT ככלי תיקוף אובייקטיבי לזיהוי שקיעים של שרירי שורש ופגמים עדינים בדופן השקע, ולכימות תוצאות ריפוי מוקדמות של השקע. ניתן לייחס את הביצועים המשופרים של הגישה המעודכנת להבדלים באסטרטגיה המכנית ששימשה לעקירה של השן. טכניקות עקירה קונבנציונליות עבור TSHM במנדבולה של עכברים מסתמכות בדרך כלל על הליכי לוקסציה (luxation)13,18, שבהם כוח מכני מופעל באמצעות מכשירים שמוכנסים מסביב לטוחן ומוחלים בהדרגה כדי להניע את השן. עם זאת, מכיוון שלטוחנים הראשונים במנדבולה של עכברים יש מורפולוגיית שורש אפקלית מורחבת ונגישות כירורגית מוגבלת9, הליכים אלו עלולים ליצור מאמץ מכני מקומי באתר ההחדרה ובמבני alveolar סביבם. בניגוד לכך, הגישה המעודכנת מעבירה את נקודת הפעלת הכוח הראשית מאזור השורש אל הכתר היציב יותר. על ידי הפעלת משיכה מבוקרת במקביל לציר הארוך של השן תוך ייצוב סימולטני של המנדבולה, אסטרטגיה זו עשויה להקל על הרחבה הדרגתית של שקע העקירה ולהפחית ריכוז מאמצים בלתי מבוקר. חשוב לציין כי התאמה זו מפשטת גם את שלב בקרת הכוח העיקרי במהלך העקירה, ובכך עשויה להוריד את הסף הטכני עבור חוקרים עם ניסיון מוגבל במיקרו-כירורגיה.
למרות יתרונות אלו, מספר שיקולים טכניים נותרים חשובים ליישום מוצלח של פרוטוקול זה, כיוון שהתוצאה נשארת תלויה בטכניקה של המפעיל. ראשית, יש לשמור על כיוון הכוח המופעל במקביל לציר האורכי של השן כדי לשפר את האחיזה בכתר ולמזער ריכוזי מאמץ מיותרים ושברים בשורש הקשורים להפעלת כוח שאינו במקביל לציר. שנית, יש להימנע מעומק הכנסה מופרז של פינצטת השן או ממניפולציה מופרזת, שכן כל אחד מהם עלול לפגוע בשלמות של מכתש העקירה. שלישית, במהלך שלב השחרור המקדים הרשות של הרסן הפריודונטלי, יש להחדיר את המחט במקביל לציר האורכי של שורש השן כדי למזער פגיעה בעצם האלבולרית הסובבת, בהתאם לדיווח קודם של המחברים13. לפיכך, אף על פי שהגישה המעודכנת משפרת את הנגישות הפרוצדורלית, הכשרה נאותה וטיפול סטנדרטי נותרים חיוניים להשגת תוצאות עקביות.
יש לשקול מספר מגבלות בעת פירוש ממצאים אלו. ראשית, גודל המדגם להערכה ב-µCT היה מוגבל יחסית. לכן, יש לפרש את ההבדלים שנצפו בריפוי עצם מוקדם כראיה התומכת בביסוס משופר של המודל, ולא כראיה מכריעה לריפוי מוגבר. שנית, רק שני מפעילים השתתפו במחקר זה. כתוצאה מכך, הערכת השונות בין-מפעילים הייתה מוגבלת וייתכן שהוכנסה הטיה הקשורה למפעיל. שלישית, הפרוטוקול תוקף רק בשיניים טחונות ראשונות תחתונות ימניות של עכברים זכרים בני 8 שבועות. לא בוצעו השוואות כמותיות של הצלחת העקירה, סיבוכים הקשורים להליך וריפוי השקע בין קבוצות גיל שונות. בהתאם לכך, השאלה האם ניתן להכליל את היתרונות שנצפו לבעלי חיים מגילים או מינים שונים דורשת חקירה נוספת.
לסיכום, מחקר זה מציג גישה אופטימלית לעקירה של השן הטוחנת הראשונה בלסת התחתונה של עכבר ומבסס את יעילותה באמצעות השוואה ישירה לטכניקה הקונבנציונלית. השיטה המשופרת מאפשרת הקמה הדירה יותר של TSHM בלסת התחתונה של עכברים תוך הפחתת החסם הטכני הראשוני עבור מתחילים. ממצאים אלו מספקים הדרכה מעשית לחוקרים המקימים מודלים של ריפוי שק שן בלסת התחתונה.
גילויים
המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים.
תודות
עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעים טבעיים של סין (מענק מס׳ 82571084) ותוכנית המדע והטכנולוגיה של מחוז סיצ'ואן (מענק מס׳ 2024JDKXJ0001).
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מחטי מזריק 25 G | Beyotime | FS802-30pcs | מחטי מזריק חד-פעמיות המשמשות כמורחב פה ולשחרור מקדים אופציונלי של הרצועת periodontal |
| תמיסת פאראפורמלידה 4% | Solarbio | P1110 | תמיסת פאראפורמלידה 4% המשמשת לקיבוע דגימות |
| אתנול 75% | Ouse Medical Devices Store | N/A | אתנול בדרגה רפואית 75% המשמש לחיטוי שטח פנים |
| עכברים C57BL/6 | Charles River | 213 | עכברים זכרים מסוג C57BL/6 בני 8 שבועות במשקל 22–29 g |
| Carprofen | Solarbio | C5350 | משכך כאבים לאחר ניתוח הניתן תת-עורית במינון של 5 mg/kg |
| כדורי צמר | Ouning Medical Devices | N/A | כדורי צמר סטריליים המשמשים לניקוי הפה ולהמסטזיס |
| CTAn v1.18.4.0+ | SkyScan | N/A | תוכנה המשמשת לניתוח תמונות μCT |
| DataViewer v1.5.6.2 | SkyScan | N/A | תוכנה המשמשת לצפייה וייצוא של תמונות μCT משוחזרות |
| כיסויי אצבעות | LeSu Office | MEKU-1/2/3B | כיסויי אצבעות המשמשים להגנה על האגודל במהלך העקירה |
| לוח ספוג | Dongguan Lijianglong Industrial Co., Ltd. | N/A | לוח ספוג המשמש כפלטפורמה לניתוח ולקיבוע |
| תזונת ג'ל | ReadyDietech | J10001 | תזונה לאחר ניתוח המסופקת על רצפת הכלוב למשך 3 ימים, במידה ונעשה בה שימוש |
| GraphPad Prism v10.1.2 | GraphPad | RRID: SCR_002798 | תוכנה המשמשת לניתוח סטטיסטי ויצירת גרפים |
| פנס ראש | Bazhou Pengen Protective Equipment Factory | N/A | פנס ראש המשמש להארת השטח הכירורגי |
| משטח חימום | Shijiazhuang Jianuan Electrical Appliances Co., Ltd. | N/A | משטח חימום שחומם מראש לכ-38 °C לצורך התאוששות לאחר הניתוח |
| פנטום הידרוקסיאפטיט | QRM | QRM-70127 | פנטום כיול המשמש להמרת ערכי בליעה של CT לצפיפות מינרלים של העצם |
| מכשיר הגדלה | Olympus Corporation | SZX10 | מכשיר המשמש לבדיקת קצות הפינצטה המשוננת ושל שקע העקירה תחת הגדלה |
| מסכה | Senlun Medical Devices Specialty Store | N/A | מסכה כירורגית |
| סורק טומוגרפיה ממוחשבת זעירה | Bruker SkyScan | SkyScan 1276 | סורק μCT המשמש ב-80 kV, 500 μA, ורזולוציית ווקסל של 10 μm |
| Mimics Research v21.0 | Materialise | RRID: SCR_015802 | תוכנה המשמשת לשחזור תלת-ממדי |
| סודיום פנטוברביטל | Sigma-Aldrich | P3761 | מלח סודיום פנטוברביטל המשמש כתמיסת הרדמה בריכוז 1% |
| תמיסת סליין בופר פוספט | Solarbio | P1010 | אבקת סליין בופר פוספט 0.01 M, pH 7.2–7.4 |
| תמיסת חיטוי פובידון-יוד | Belkon Pharmacy Flagship Store | N/A | תמיסת פובידון-יוד המשמשת לחיטוי הבטן |
| גומיות | Foshan Puli Rubber Products Factory | N/A | גומיות המשמשות להרכבת מורחב הפה |
| תמיסת מלח | Thermo Fisher | BR0053G | טבליות סליין המשמשות להכנת תמיסה לניקוי הפה |
| תזונת מאכל סטנדרטית | Jiangsu Xietong Pharmaceutical and Biotechnology Engineering Co., Ltd. | XTC01WC-001 | מאכל סטנדרטי המשמש לשגרה בבית הגידול ומומר למרקם רך להזנה לאחר ניתוח |
| סטריליזטור קיטור | Institutional facility | N/A | ציוד המשמש לסטריליזציה של הפינצטות המשוננות ותמיסות המלח |
| מקלוני צמר סטריליים | Kangbailai Medical Devices Store | N/A | מקלוני צמר סטריליים לשימוש חד-פעמי |
| כפפות סטריליות | Senlun Medical Devices Specialty Store | N/A | כפפות לטקס סטריליות |
| בד לא-סרוג סטרילי | Shandong Xinhua Infection Control Supplies Hangzhou Store | N/A | בד לא-סרוג סטרילי המשמש לכיסוי משטח הניתוח ומשטח החימום |
| כובע כירורגי סטרילי | Senlun Medical Devices Specialty Store | N/A | כובע כירורגי סטרילי |
| בגדי ניתוח | Senlun Medical Devices Specialty Store | N/A | בגדי ניתוח נקיים הנלבשים במהלך ההליך |
| סרט הדבקה | Thermo Fisher | 15947 | סרט הדבקה המשמש לקיבוע גפי העכבר |
| פינצטות עיניים משוננות | Beyotime | FS229 | פינצטות עיניים משוננות המשמשות כפינצטות דנטליות |
| משחה עינית וטרינרית | Dechra Veterinary Products | 143-16 | משחה עינית הנמרח לאחר הרדמה למניעת התייבשות הקרנית |
מקורות
- Chavez MB, et al. Bone sialoprotein is critical for alveolar bone healing in mice. J Dent Res. 2023;102(2):187-196.
- Guan B, Liu L, Liu Y. Application and characterisation of four genetically engineered animal models (mouse/zebrafish/rhesus monkey/drosophila) in acute myeloid leukemia. Gene. 2025;963:149607.
- Varshney GK, Burgess SM. Crispr-based functional genomics tools in vertebrate models. Exp Mol Med. 2025;57(7):1355-1372.
- Phanrungsuwan A, Donnelly B, Millán JL, Foster BL. Targeted alkaline phosphatase therapy enhances alveolar bone healing in X-linked hypophosphatemia in mice. J Periodontal Res. 2026;61(3):309-322. doi:10.1111/jre.70044.
- Mohamed FF, et al. Dentoalveolar defects and impaired alveolar bone healing in a neural crest-directed conditional knockout mouse model of hypophosphatasia. Bone. 2025;198:117538.
- Oka H, et al. Subset of the periodontal ligament expressing leptin receptor contributes to part of hard tissue-forming cells. Sci Rep. 2023;13(1):3442.
- Chen S, Rittel D, Shemtov Yona K. The normal stiffness of the edentulous alveolar process. Bone Rep. 2021;14:101066.
- Lungová V, et al. Tooth-bone morphogenesis during postnatal stages of mouse first molar development. J Anat. 2011;218(6):699-716.
- Iwama H, et al. Acellular extrinsic fiber cementum is invariably present in the superficial layer of apical cementum in mouse molar. J Histochem Cytochem. 2024;72(2):109-120.
- Hadad H, et al. Rodents as an animal model for studying tooth extraction-related medication-related osteonecrosis of the jaw: Assessment of outcomes. Arch Oral Biol. 2024;159:105875.
- Mouraret S, et al. A pre-clinical murine model of oral implant osseointegration. Bone. 2014;58:177-184.
- Yu F, Liu L, Xia L, Fang B. Establishment of a C57BL/6 mandibular critical-size bone defect model. J Craniofac Surg. 2021;32(7):2562-2565.
- Yu C, Yu F, Li F, Ye L. The establishment of a murine mandibular molar extraction socket healing model. J Vis Exp. 2023;(191). doi:10.3791/64855.
- University of Michigan Unit for Laboratory Animal Medicine. Guidelines on anesthesia and analgesia in mice. Updated January 23, 2026. Available at: https://az.research.umich.edu/animalcare/guidelines/guidelines-anesthesia-and-analgesia-mice/. Accessed August 5, 2026.
- Qiu Y, et al. Investigation of the furcation morphology of permanent mandibular first molars by using micro-computed tomography. BMC Oral Health. 2024;24(1):1150.
- Vieira AE, et al. Intramembranous bone healing process subsequent to tooth extraction in mice: Micro-computed tomography, histomorphometric and molecular characterization. PLoS One. 2015;10(5):e0128021.
- Jiang J, Mou J, Wang S, Liu J. Protocol for establishing a mouse model of bilateral maxillary first molar extraction to study alveolar bone healing. STAR Protoc. 2026;7(1):104366.
- Liang B, Zhang W, Xue Y. Observation and analysis of tooth extraction wound healing process of maxillary first molars in C57BL/6 mice. Chin J Pract Stomatol. 2019;12(232):e6.
הדפסות חוזרות והרשאות
תגיות
מאמר זה פורסם
הסרטון יגיע בקרוב