הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

גישה מותאמת לעקירת שן לשיפור היעילות והעקביות הפרוצדורלית במודל של ריפוי שקית שן בלסת התחתונה של עכברים

107 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/72974

⸱

8 בספטמבר 2026

 ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Oral Diseases & National Center for Stomatology & National Clinical Research Center for Oral Diseases, West China Hospital of Stomatology, Sichuan University, 2Department of Endodontics, West China Hospital of Stomatology, Sichuan University

במאמר זה

סיכום

מתוארת גישה משופרת לעקירה של השן הטוחנת הראשונה בלסת התחתונה בעכברים, והיא מושווית לגישה הקונבנציונלית על מנת להעריך את יעילות ההליך ואת יכולת השחזור שלו. הגישה המשופרת מגבירה את העקביות הפרוצדורלית ומפחיתה את האתגרים הטכניים בהקמת מודל של ריפוי שן בלסת התחתונה של עכברים.

תקציר

מודל הריפוי של שקע השן (TSHM) הוא מודל בעלי חיים נפוץ לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס התחדשות העצם. למרות שה-TSHM של הלסת התחתונה בעכברים הוא בעל ערך למשחק תהליכים פתולוגיים ספציפיים ללסת התחתונה, ביסוס מודל זה נותר מאתגר מבחינה טכנית בשל המאפיינים האנטומיים והביו-מכניים של אזור הטוחן בלסת התחתונה. פרוטוקול זה מתאר גישה משופרת לעקירה של הטוחן הראשון בלסת התחתונה בעכברים ומשווה את ביצועיה לטכניקה הקונבנציונלית כדי לשפר את יעילות הפעולה ואת השחזוריות שלה. תחת תנאים ניסויים מבוקרים, הגישה המשופרת הפחיתה משמעותית את זמן העקירה הממוצע מ-29 ל-10 דקות. בנוסף, בקבוצה המשופרת נצפו פחות סיבוכים הקשורים לעקירה, כולל שברים בשורש ובעצם האלבולואר, מה שמעיד על עקביות פרוצדורלית משופרת. ניתוח מיקרו-computed tomography (μCT) הדגים עוד שימור משופר של ארכיטקטורת שקע העקירה במהלך שלבי הריפוי המוקדמים. ממצאים אלו מצביעים על כך שגישת העקירה המשופרת מגבירה את יעילות הפעולה ואת השחזוריות, תוך הפחתת האתגרים הטכניים הקשורים לעקירת שיניים בלסת התחתונה של עכברים. פרוטוקול זה עשוי להקל על ביסוס עקבי יותר של מודלים לריפוי שקע השן בלסת התחתונה של עכברים, במיוחד עבור חוקרים בעלי ניסיון מיקרו-כירורגי מוגבל.

מבוא

מודל ריפוי שק השן (TSHM) הוא מודל קלאסי לחקר התחדשות עצם1. מודל זה יוצר פגיעה מאתגרת אך סוב-קריטית בתוך העצם האלבולרית, המאפשרת ריפוי טבעי חיובי ללא התערבות נוספת1. עכברים משמשים באופן נרחב כבעלי חיים למודל בשל הרקע הגנטי שלהם, הדמיון במטבוליזם של העצם לבני אדם, עלויות גידול נמוכות יחסית וקלות התחזוקה2. במהלך העשורים האחרונים, התקדמויות מהירות בטכנולוגיות עריכה גנטית הפכו את העכברים לחיוניים לחקירת המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס התחדשות העצם3. כתוצאה מכך, עקירה של שיניים טחונות בעכברים טרנסגניים שימשה באופן נרחב להקמת TSHM לצורך חקירת מנגנוני הבקרה של התחדשות העצם4,5,6.

מרבית המחקרים הקודמים ביססו מודלים של חור tooth socket (TSHM) בעכברים באמצעות הלסת העליונה4,5,6, מכיוון שהלסת התחתונה קשיחה יותר מבחינה מכנית ופחות גמישה מהלסת העליונה7, מה שמעלה את הקושי הטכני בעקירת השן. בנוסף, שטח הניתוח לעקירת שיערס המולר העליון נגיש יותר יחסית, והלסת העליונה קלה יותר לייצוב מהלסת התחתונה, מה שהופך את הפרוצדורה לפחות תובענית מבחינה טכנית. למרות אתגרים אלו, המורפולוגיה הקשתית והמורחבת של שורש השן האפיקלי במולר הראשון של הלסת התחתונה בעכבר מגבירה את האחיזה המכנית בתוך עצם alveolar הסובבת8,9, מה שמסבך עוד יותר את העקירה (איור 1). עם זאת, מודלים של עקירה מהלסת התחתונה נותרים חיוניים לחקר תהליכים פתולוגיים ספציפיים ללסת התחתונה, כולל אוסטאומייליטיס, אוסטאונקרוזיס של הלסת הקשורה לתרופות, אוסאואינטגרציה של שתלים ושיקום עצם באמצעות ביו-חומרים10,11,12. לפיכך, שיטה הדירה ואמינה לעקירת מולרים מהלסת התחתונה בעכברים היא חשובה למחקרים הדורשים מודלים של ריפוי tooth socket ספציפיים ללסת התחתונה.

תרשים אנטומיה של השן: חתכים המראים זגג (אמייל), דנטין וצמנטום; A, B, C מציינים שלבים.
איור 1השוואה סכמטית של מורפולוגיית השיניים בבני אדם ובעכברים. 
(A) איור סכמטי של שן אדם בוגרת. (B) איור סכמטי של שן טריטורית ראשונה בלסת התחתונה של עכבר מתבגר. (C) איור סכמטי של שן טריטורית ראשונה בלסת התחתונה של עכבר בוגר. הדיאגרמות מדגישות הבדלים במורפולוגיית השורש ובפיזור הצמנטום, התורמים לשיפור הרתנציה המכנית של שיניים טריטוריות ראשונות בלסת התחתונה של עכברים בוגרים בתוך העצם האלבולרית. זגג, דנטין וצמנטום מסומנים בצבעים המתאימים המופיעים במקרא. המאפיינים האנטומיים מבוססים על תיאורים שפורסמו.8,9,15. אנא לחצו כאן כדי להציג גרסה מורחבת של דמות זו.

טכניקה להסרת שיניים שפותחה בעבר על ידי קבוצת המחקר שלנו עושה שימוש במזרקים שהותאמו לשמש כמעלים דנטליים13. למרות ששיטה זו מאפשרת הסרה מוצלחת של השן הטוחנת הראשונה התחתונה הימנית בעכברים, היא דורשת רמה גבוהה של דיוק טכני ובעלת עקומת למידה תלולה הדורשת תרגול נרחב. מפעילים חסרי ניסיון עלולים לגרום בטעות לפגיעות במבנים אנטומיים סמוכים. בנוסף, הסרת השן הטוחנת הראשונה התחתונה השמאלית דורשת אימון נוסף של "תמונת מראה" כדי להגיע למיומנות פרוצדורלית. אתגרים אלו עלולים לפגוע בשלמות של חור השן לאחר העקירה, להפחית את העקביות של תוצאות הריפוי בין בעלי החיים, ולהגביל את הנגישות של המודל עבור חוקרים עם ניסיון מיקרו-כירורגי מוגבל.

פרוטוקול זה מתאר גישה משופרת לעקירה של השן הראשונה במולר התחתון בעכברים, במטרה לשפר את הנגישות התהליכית ואת השחזוריות. הפרוטוקול תוקף בעכברים זכרים בני 8 שבועות מדגם C57BL/6 לצורך הקמת מודל TSHM של השן הראשונה במולר התחתון. הגישה המשופרת הושוותה באופן שיטתי לטכניקה הקונבנציונלית כדי להעריך את היעילות התהליכית, את הצלחת העקירה ואת הסיבוכים הקשורים להליך. בנוסף, נותחו מצבי כישלון טכניים נפוצים להם נתקלו במהלך רכישת השיטה כדי לספק הדרכה מעשית לחוקרים המקימים מודל TSHM במולר התחתון של עכברים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים אושרו על ידי הוועדה לאתיקה של בית הספר לרפואת הפה של מערב סין, אוניברסיטת סיצ'ואן (WCHSIRB-D-2025-188), ובוצעו בהתאם להנחיות המוסדיות לטיפול בבעלי חיים.

הערה: השתמש בעכברים זכרים בני 8 שבועות מדגם C57BL/6 השוקלים 22–29 g. תחזק את החיות על תזונת chow סטנדרטית עם מים הזמינים ad libitum בתנאי מחיה סטנדרטיים (21°C–24°C, 40%–60% לחות, ומחזור אור-חושך של 12 שעות). השתמש בחומרים ובמכשירים המפורטים בטבלת החומרים. השתמש ב-24 עכברים לצורך ההערכה ההשוואתית והצגת מקרים שנכשלו. השתמש בעכברים נוספים לאימון המבצע לפני הניסוי ההשוואתי.

1. הכנה טרום-ניתוחית

  1. הכנת המכשירים
    1. הכינו מחטי מזריקה בכי মাপ 25 G לשימוש כמעליים (אופציונלי). כופפו את הקצה המשופע של כל מחט לזווית של כ-20°–40°13.
    2. הכינו פינצטה רפואית עם שיניים לשימוש כפינצטת שיניים. בדקו את הקצה המשונן תחת הגברה כדי לוודא שהשיניים מיושרות כראוי וללא עיוותים.
    3. הרכיבו מלהרחבת פה באמצעות גומייה אחת וארבע מחטי מזריקה 25 G. הכינו לוח קצף או קרטון כמשטח עבודה, סרט דביק להצמדת גפי העכבר, ופנס ראש להארת שדה הניתוח.
    4. הכינו משטח חימום להתאוששות לאחר הניתוח וחממו אותו מראש לטמפרטורה של כ-38°C לפני הניתוח. הכינו גוזי צמר להמסטזיס וכמות מתאימה של תמיסת סליין לניקוי חלל הפה.
    5. הכינו כיסוף לאצבע לכיסוי האגודל ולהגנה על המבצע במהלך הליך העקירה.
    6. הניחו בד לא סרוג סטרילי על משטח העבודה ועל משטח החימום כדי לשמור על שדה סטרילי.
  2. הכנת ההרדמה
    1. חטאו את בטן העכבר באמצעות גוז צמר ספוג בתמיסת חיטוי פובידון- יוד. מזריקו פנטוברביטל נתרן 1% (50 mg/kg) תוך-פריטונית14. העריכו את עומק ההרדמה באמצעות מבחן צביטה של הבהו and מזריקו הרדמה נוספת במידת הצורך.
      הערה: אם רפלקס צביטת הבהו חוזר או אם הפרוצדורה מתקרבת למשך ההרדמה הצפוי, הפסיקו את הפעולה ומזריקו הרדמה נוספת בהתאם לפרוטוקול הווטרינרי המוסדי המאושר.
    2. מרחו משחה רפואית עינית וטרינרית לשתי העיניים מיד לאחר ההרדמה כדי למנוע התייבשות של קרנית.
  3. הכנה לחיטוי וסטריליזציה
    1. חטאו את משטח הניתוח, משטח החימום, הסרט הדביק, כיסוף האצבע ואזור העבודה שמסביב באמצעות אתנול 75%. השתמשו במקלוני צמר סטריליים חדשים, בד לא סרוג, גומיות ומחטים עבור כל עכבר. סטריליזו את הפינצטה המשוננת ואת תמיסת הסליין באמצעות פרוטוקול סטריליזציה בקיטור המוסדי הסטנדרטי לפני השימוש.
      אזהרה: אתנול 75% הוא חומר דליק. השתמשו בו באזור מאוורר היטב, הרחוק מחום, ניצוצות, להבות גלויות ומקורות הצתה אחרים. לבשו ציוד מגן אישי מתאים. המתינו למכשירים ומשטחים שטופים באתנול להתייבש לחלוטין לפני תחילת הפרוצדורה.
    2. בצעו היגיינת ידיים לפני תחילת הפרוצדורה. לבשו בגדי ניתוח נקיים, כובע ניתוח סטרילי, מסכה כירורגית וכפפות סטריליות.

2. התהליך הכירורגי

  1. קיבוע וניקוי העכבר
    1. הצב את העכבר במנח גב (supine) על לוח הקיבוע ואבטח את הגפיים באמצעות סרט דבק. הכנס שתי מחטות 25 G לתוך לוח הספוג בגובה המישור האורביטלי-אוזני, והכנס שתי מחטות 25 G נוספות מתחת ללסת התחתונה.
    2. הנח את גומיית הגומי מעל המחטות ולרוחב השיניים החותכות כדי להחזיק את הפה פתוח. הסת את הלשון בעדינות והצב אותה בצד הנגדי לאתר העקירה כדי למנוע חסימה של השדה הכירורגי. השתמש בטבח הראשון של הלסת התחתונה הימנית כדוגמה מייצגת לאורך פרוטוקול זה.
    3. הסר שאריות מזון וחומרים זרים אחרים מחלל הפה באמצעות כדור צמר קטן שהורטב בתמיסת סליין.
      הערה: סחוץ היטב את כדור הצמר כדי להסיר עודפי סליין ולמנוע חדירת נוזלים לחלל הפה, דבר שעלול לגרום לחנק.
  2. ביטול התנגדות דיסטלית ומזיאלית (אופציונלי)
    1. השתמש בפינצטה ביד שמאל כדי להסיט את הפינה הימנית של הפה ולחשוף באופן מלא את הטבח הראשון של הלסת התחתונה הימנית ואת הרקמות הרכות הבוקאליות והלינגואליות הסמוכות.
    2. החזק את הפינצטה ביד ימין. לאחר מכן, החזק מחט 25 G ביד שמאל והכנס אותה בזהירות לרסן הפריודונטלי הבוקאלי הסמוך לשורש הדיסטלי כדי ליצור חלל ברסן הפריודונטלי.
    3. הקדם את המחט לאט לעבר האזור הפרי-אפיקלי תוך סיבוב שלה לכיוון מזיאלי ולינגואלי לעבר הטבח כדי לשחרר את השורש מהשקע האלבולרי.
    4. הכנס מחט 25 G לתוך פיסורת השורש (root furcation) מהצד הבוקאלי והגבה אותה אוקלוזלית בעזרת יד שמאל. הכנס מחט 25 G שנייה לרסן הפריודונטלי הלינגואלי הסמוך לשורש המזיאלי בעזרת יד ימין כדי ליצור חלל ברסן הפריודונטלי, ולאחר מכן סובב את המחט לכיוון דיסטלי ובוקאלי.
    5. הוצא את שתי המחטות מהשדה הכירורגי לאחר השלמת השחרור המקדים של הרסן הפריודונטלי.
      הערה: בצע שחרור מקדים של הרסן הפריודונטלי רק כאשר השן מראה ניידות מינימלית והתנגדות בולטת לאחר ניuע נדנוד ראשוני עם הפינצטה.
  3. נדנוד ועקירה
    1. ייצב את ראש העכבר באמצעות האצבעות המורה והאמצעית של יד שמאל. הצמד את האגודל, המכוסה בשרוול אצבע, אל השיניים החותכות של הלסת התחתונה לתמיכה, תוך החזקת הפינצטה ביד ימין.
    2. החזק את קצות הפינצטה בניצב למישור האוקלוזלי ובמקביל לציר האורכי של השן. הנח את הקצוות המשוננים בתוך פיסורת השורש כדי להשיג משיכה יציבה.
      הערה: אין לתפוס את שורש השן ישירות עם הפינצטה, שכן הדבר עלול לגרום לשבירת השורש.
    3. תפוס את הכתר בעזרת הפינצטה ובצע תנועות נדנוד בוקאו-לינגואליות עדינות. הגבל את זווית הנדנוד הבוקאלית ל-30° ואת זווית הנדנוד הלינגואלית ל-50°. בצע תנועת נדנוד אחת כל 1–1.5 s.
    4. שמור על משיכה לאורך הציר האורכי של הטבח מהאפקס לעבר הכתר, תוך הפעלת תמיכה נגדית קבועה נגד השיניים החותכות של הלסת התחתונה באמצעות כרית האגודל השמאלי כדי לייצב את הלסת התחתונה.
      הערה: שמור על תמיכה נגדית רציפה ויציבה תוך הימנעות מדחיסה מופרזת או מהסטה של השיניים החותכות ושל הרקמות הרכות הסמוכות.
    5. המשך בתנועות הנדנוד עד שהשן תהפוך בהדרגה לניידת והמשטח האוקלוזלי יורם באופן נראה לעין מעל הטבחים הסמוכים. שמור על קצות הפינצטה במקביל לציר האורכי של השן לאורך כל הפרוצדורה, ולאחר מכן עקור את השן מרגע שהושגה ניידות מספקת.
      הערה: לפני הפעלת כוח העקירה הסופי, העריך את ניידות השן על ידי נדנוד עדין של הכתר בכיוון בוקאו-לינגואלי. המשך בעקירה רק כאשר ניתן להסיט את הכתר בהתנגדות מינימלית ואמפליטודת התנועה הבוקאו-לינגואלית מגיעה לכמחצית מרוחב הכתר. העריך מחדש את עומק ההרדמה מיד לפני העקירה המלאה. הגש הרדמה נוספת במידת הצורך (איור 2).

השוואת טכניקות לעקירה של שיניים, תרשים ותוצאות; שיטות קונבנציונליות ומודעות עם שורשים שעקרו.
איור 2השוואה בין השיטות הקונבנציונליות והמשופרות לעקירת השן הראשונה בטוחת הלסת התחתונה בעכברים. 
(A) איור סכמטי של שיטת העקירה הקונבנציונלית, שבה מחט 25 G כפופה מוחדרת לרסן השן (periodontal ligament) ומשמשת כמנוף להרחקה (luxation) של השן. (B) איור סכמטי של שיטת העקירה המשופרת, שבה פינצטה אופתלמית משננת תופסת את הכתר ומפעילה משיכה במקביל לציר האורכי של השן. (C) תמונה מייצגת של הקצה הכפוף של מחט ה-25 G המשמשת כמעלה (elevator). (D) תמונה מייצגת של הפינצטה האופתלמית המשננת המשמשת כפינצטת מיקרו-עקירה. (E) תמונה תוך-ניתוחית מייצגת המראה את שקע העקירה מיד לאחר עקירת שן טוחנת ראשונה תחתונה; קווים מקווקוים מסמנים את שקעי העקירה. (F) מבט ל侧 (בוקאלי) של שן טוחנת ראשונה תחתונה שנעקרה בהצלחה. (G) מבט לשוני של אותה שן טוחנת ראשונה תחתונה שעוקרה. סריגי קנה מידה = 2 ממ" (C,D) ו- 400 µm (ה–ז). אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של איור זה.

3. בדיקת השיניים שהוצאו וחללי העקירה

  1. בדקו את השן שהוצאה כדי לאשר את הסרתה המלאה ואת שלמותה המבנית. ודאו כי המורפולוגיה של השורש נשמרה, עם שורש מזיאלי ארוך יותר, שורש דיסטלי קצר יותר והרחבה אפיקלית15. ודאו ששיירי עצם אלבולרית אינם נותרים דבוקים לשן שהוצאה.
  2. בדקו את חלל העקירה כדי לאשר שהוא נקי ושאין בו שיירי שורש (איור 2).
    הערה: אם קיים חשד לשורש שנותר או נשבר במהלך העקירה, הימנעו מטיפול חוזר מכיוון שניסיונות מרובים עלולים להחמיר את הפגמים בחלל העקירה. בדקו את אתר העקירה תחת הגדלה כדי לאשר נוכחות של שיירי שורש. רשמו מקרים עם שורשים שנותרו או נשברו כעקירות שנכשלו והסִירו אותם מהערכת המודל העוקבת. טפלו בבעלי חיים אלו בהתאם לפרוטוקול בעלי החיים המאושר.

4. טיפול לאחר ניתוח

  1. יש להניח פן ספיגה יבש להשגת המוסטזיס. נקה את חלל הפה באמצעות כדור פן קטן שהורטב בתמיסת סליין, ולאחר מכן החזר את הלשון למקומה.
    הערה: הרטב את כדור הפן בנפח המינימלי של סליין סטרילי הדרוש כדי להרטיב את פניו מבלי להיווצר נוזל חופשי.
  2. תן carprofen (במינון של 5 mg/kg, בהזרקה תת-עורית) לאחר הניתוח לצורך אלגזיה פוסט-אופרטיבית.
  3. הנח את בעל החיים על משטח חימום ועקב אחר מצבו באופן רציף עד להסכמתו.
  4. לאחר ההתאוששות מההרדמה, ספק מזון סטנדרטי רך או תזונת ג'ל על רצפת הכלוב למשך 3 ימים, עם גישה חופשית (ad libitum) למים. חזור לתזונה רגילה של מזון סטנדרטי לאחר שאיששת התנהגות האכלה תקינה.
  5. עקב אחר צריכת מזון, משקל גוף, פעילות, התנהגות טיפוח, נפיחות פנים, דימום מהפה וסימני כאב או מצוקה במרווחי זמן שנקבעו מראש.

5. הכשרת מפעילים

  1. שבצו באופן אקראי שני מפעילים, ששניהם אינם בעלי ניסיון קודם במודלים של התחדשות רקמות קשות בעכברים, לקבוצת העקירה הקונבנציונלית או לקבוצת העקירה המודפית. הכשיר את המפעילים בנפרד תחת פיקוחו של אותו מדריך, השולט בשתי גישות העקירה, הקונבנציונלית והמודפית.
  2. במהלך השבוע הראשון, הנחה כל מפעיל לתרגל את הליך העקירה שהוקצה לו על גופות של עכברים כדי להכיר את זרימת העבודה הכירורגית.
  3. במהלך השבוע השני, פקח על ההכשרה בעכברים חיים כדי להעריך ולשכלל את היישום המעשי של כל טכניקה. עקב אחר כל הליך כדי להבטיח הרדמה נאותה ולמנוע סיבוכים כירורגיים בלתי מכוונים, כולל פגיעה מקרית ברקמות הרכות הסביבות עקב מניפולציה שגויה של המכשירים או נזק למבנים האלבולריים. אשר את מיומנות המפעיל כאשר המפעיל מסוגל לבצע באופן עצמאי שלוש עקירות מוצלחות ברצף. לאחר השלמת ההכשרה תחת פיקוח, התחל בניסויי העקירה ההשוואתיים.

6. הכנת הדגימות

  1. יש להקלי ע את העכברים באמצעות פריקה צווארית. יש להוציא את הלסתות התחתוניות מהראש ולהסיר את הרקמה הרכה הדבוקה אליהן.
  2. יש לקבע את הלסתות התחתוניות בתמיסת 4% paraformaldehyde למשך 48 h. יש לשמור את הדגימות ב-PBS לפני סריקת µCT.

7. µCT ואנליזות

  1. סרוק את הלסתות התחתונות באמצעות סורק µCT. הגדר את פרמטרי הסריקה ל-80 kV, 500 µA, רזולוציית ווקסל של 10 µm, וסריקה שכבה אחר שכבה.
  2. כוייל את מערכת ה-µCT באמצעות פנטום הידרוקסיאפטיט. סרוק את הפנטום וייצא את התמונות השחזוריות באמצעות DataViewer.
    1. נתח את תמונות הפנטום באמצעות CTAn. הגדר עקומת כיול על ידי קורלציה בין ערכי בליעת ה-CT שנמדדו של רכיבי הפנטום לבין צפיפויות המינרלים הידועות שלהם, כדי להמיר ערכי בליעה ל-BMD.
    2. החל פרמטרי סריקה ושחזור זהים על כל הדגימות.
    3. שחזר את כל מערכי הנתונים באמצעות זרימת העבודה הסטנדרטית לשחזור ב-CTAn הקשורה למערכת ה-µCT. החל הגדרות שחזור, הגדרת ROI וקריטריונים לניתוח כמותי זהים על כל הדגימות. בצע שחזור תלת-ממדי בנפרד באמצעות Mimics Research לצורך ויזואליזציה מייצגת, בהתאם לאותה הגדרת ROI ששימשה לניתוח הכמותי ב-CTAn.
  3. הגדר את אזור העניין (ROI) על ידי בחירת אזור השורש הדיסטלי של השן הטחון הראשונה שחולצה מהלסת התחתונה. אסוף 100 פרוסות רוחביות רצופות הנמתחות אפיקלית מחיבור השמנתי-זחית (cementoenamel junction) של השן הטחון השנייה הסמוכה.
    1. סמן ידנית את ה-ROI בכל פרוסה לאורך הגבול של העצם האלוולארית שנוצרה מחדש סביב חלל העקירה. בצע עיבוד תמונות וניתוח כמותי המשך באמצעות CTAn עם פרמטרי ניתוח זהים לכל הדגימות.
  4. בצע שחזור תלת-ממדי באמצעות Mimics Research. חשב את שכיחות שברים בשורש ופגמים בדופן החלל כפרופורציה של דגימות הלסת התחתונה המראות כל מצב ביחס למספר הכולל של דגימות הלסת התחתונה.
  5. בצע את כל הניתוחים הסטטיסטיים והפק גרפים באמצעות GraphPad Prism v10.1.2. העरक את הנורמליות של משתנים רציפים באמצעות מבחן Shapiro–Wilk.
    1. הגדר את העכבר הבודד ואת חלל העקירה התואם לו כיחידה הניסויית לכל הניתוחים.
    2. השווה בין הקבוצות את זמן העקירה, ה-BMD וה-BV/TV באמצעות מבחן Student’s t דו-זנבי ללא התאמה. השווה את שכיחות השברים בשורש ופגמי דופן החלל באמצעות מבחן Fisher’s exact.
    3. סמן מובהקות סטטיסטית באופן הבא: *, p < 0.05; **, p < 0.01; ו-***, p < 0.001. השתמש ב-“ns” כדי לציין שאין הבדל מובהק סטטיסטית בין שתי הקבוצות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

המאפיינים האנטומיים הרלוונטיים לעקירה של השן הטוחנת הראשונה במנדיבולה מוצגים ב-איור 1, וגישות העקירה הקונבנציונלית והמשופרת מוצגות באופן סכמטי ב-איור 2A,B. תמונות מייצגות של המחט המוכנה והפינצטה האופתלמית המשוננת, של חללי העקירה הטריים ושל השן הטוחנת הראשונה שנערקה מהמנדיבולה מוצגות ב-איור 2C–G. זרימת העבודה המלאה של הפרוצדורה מסוכמת ב-איור 3. כדי להשוות את היעילות והעק...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הקמה מוצלחת של TSHM דורשת עקירה מלאה של השן תוך שימור המבנה האלווולרי הסובב, שכן פגיעה הקשורה לעקירה עלולה לפגוע ברגנרציה עתידית של העצם16. לפיכך, השחזרות של הליך העקירה מהווה גורם קריטי לאמינות המודל17. במחקר זה, גישה משופרת לעקירת שן טריס (molar) ראשונה תחתית המבוססת על פלייר הושוותה באופן שיטתי לטכניקה קונבנציונלית המבוססת על מנוף תחת תנאי הדרכה סטנדרטיים. השיטה המשופרת הדגימה יעילות פרוצדורלית ושחזרות משופרות, כפי שבאו לידי ביטוי בזמן עקירה קצר משמעותית ובפחות סיבוכים ה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעים טבעיים של סין (מענק מס׳ 82571084) ותוכנית המדע והטכנולוגיה של מחוז סיצ'ואן (מענק מס׳ 2024JDKXJ0001).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מחטי מזריק 25 GBeyotimeFS802-30pcsמחטי מזריק חד-פעמיות המשמשות כמורחב פה ולשחרור מקדים אופציונלי של הרצועת periodontal
תמיסת פאראפורמלידה 4%SolarbioP1110תמיסת פאראפורמלידה 4% המשמשת לקיבוע דגימות
אתנול 75%Ouse Medical Devices StoreN/Aאתנול בדרגה רפואית 75% המשמש לחיטוי שטח פנים
עכברים C57BL/6Charles River213עכברים זכרים מסוג C57BL/6 בני 8 שבועות במשקל 22–29 g
CarprofenSolarbioC5350משכך כאבים לאחר ניתוח הניתן תת-עורית במינון של 5 mg/kg
כדורי צמרOuning Medical DevicesN/Aכדורי צמר סטריליים המשמשים לניקוי הפה ולהמסטזיס
CTAn v1.18.4.0+SkyScanN/Aתוכנה המשמשת לניתוח תמונות μCT
DataViewer v1.5.6.2SkyScanN/Aתוכנה המשמשת לצפייה וייצוא של תמונות μCT משוחזרות
כיסויי אצבעותLeSu OfficeMEKU-1/2/3Bכיסויי אצבעות המשמשים להגנה על האגודל במהלך העקירה
לוח ספוגDongguan Lijianglong Industrial Co., Ltd.N/Aלוח ספוג המשמש כפלטפורמה לניתוח ולקיבוע
תזונת ג'לReadyDietechJ10001תזונה לאחר ניתוח המסופקת על רצפת הכלוב למשך 3 ימים, במידה ונעשה בה שימוש
GraphPad Prism v10.1.2GraphPadRRID: SCR_002798תוכנה המשמשת לניתוח סטטיסטי ויצירת גרפים
פנס ראשBazhou Pengen Protective Equipment FactoryN/Aפנס ראש המשמש להארת השטח הכירורגי
משטח חימוםShijiazhuang Jianuan Electrical Appliances Co., Ltd.N/Aמשטח חימום שחומם מראש לכ-38 °C לצורך התאוששות לאחר הניתוח
פנטום הידרוקסיאפטיטQRMQRM-70127פנטום כיול המשמש להמרת ערכי בליעה של CT לצפיפות מינרלים של העצם
מכשיר הגדלהOlympus CorporationSZX10מכשיר המשמש לבדיקת קצות הפינצטה המשוננת ושל שקע העקירה תחת הגדלה
מסכהSenlun Medical Devices Specialty StoreN/Aמסכה כירורגית
סורק טומוגרפיה ממוחשבת זעירהBruker SkyScanSkyScan 1276סורק μCT המשמש ב-80 kV, 500 μA, ורזולוציית ווקסל של 10 μm
Mimics Research v21.0MaterialiseRRID: SCR_015802תוכנה המשמשת לשחזור תלת-ממדי
סודיום פנטוברביטלSigma-AldrichP3761מלח סודיום פנטוברביטל המשמש כתמיסת הרדמה בריכוז 1%
תמיסת סליין בופר פוספטSolarbioP1010אבקת סליין בופר פוספט 0.01 M, pH 7.2–7.4
תמיסת חיטוי פובידון-יודBelkon Pharmacy Flagship StoreN/Aתמיסת פובידון-יוד המשמשת לחיטוי הבטן
גומיותFoshan Puli Rubber Products FactoryN/Aגומיות המשמשות להרכבת מורחב הפה
תמיסת מלחThermo FisherBR0053Gטבליות סליין המשמשות להכנת תמיסה לניקוי הפה
תזונת מאכל סטנדרטיתJiangsu Xietong Pharmaceutical and Biotechnology Engineering Co., Ltd.XTC01WC-001מאכל סטנדרטי המשמש לשגרה בבית הגידול ומומר למרקם רך להזנה לאחר ניתוח
סטריליזטור קיטורInstitutional facilityN/Aציוד המשמש לסטריליזציה של הפינצטות המשוננות ותמיסות המלח
מקלוני צמר סטרילייםKangbailai Medical Devices StoreN/Aמקלוני צמר סטריליים לשימוש חד-פעמי
כפפות סטריליותSenlun Medical Devices Specialty StoreN/Aכפפות לטקס סטריליות
בד לא-סרוג סטריליShandong Xinhua Infection Control Supplies Hangzhou StoreN/Aבד לא-סרוג סטרילי המשמש לכיסוי משטח הניתוח ומשטח החימום
כובע כירורגי סטריליSenlun Medical Devices Specialty StoreN/Aכובע כירורגי סטרילי
בגדי ניתוחSenlun Medical Devices Specialty StoreN/Aבגדי ניתוח נקיים הנלבשים במהלך ההליך
סרט הדבקהThermo Fisher15947סרט הדבקה המשמש לקיבוע גפי העכבר
פינצטות עיניים משוננותBeyotimeFS229פינצטות עיניים משוננות המשמשות כפינצטות דנטליות
משחה עינית וטרינריתDechra Veterinary Products143-16משחה עינית הנמרח לאחר הרדמה למניעת התייבשות הקרנית

מקורות

  1. Chavez MB, et al. Bone sialoprotein is critical for alveolar bone healing in mice. J Dent Res. 2023;102(2):187-196.
  2. Guan B, Liu L, Liu Y. Application and characterisation of four genetically engineered animal models (mouse/zebrafish/rhesus monkey/drosophila) in acute myeloid leukemia. Gene. 2025;963:149607.
  3. Varshney GK, Burgess SM. Crispr-based functional genomics tools in vertebrate models. Exp Mol Med. 2025;57(7):1355-1372.
  4. Phanrungsuwan A, Donnelly B, Millán JL, Foster BL. Targeted alkaline phosphatase therapy enhances alveolar bone healing in X-linked hypophosphatemia in mice. J Periodontal Res. 2026;61(3):309-322. doi:10.1111/jre.70044.
  5. Mohamed FF, et al. Dentoalveolar defects and impaired alveolar bone healing in a neural crest-directed conditional knockout mouse model of hypophosphatasia. Bone. 2025;198:117538.
  6. Oka H, et al. Subset of the periodontal ligament expressing leptin receptor contributes to part of hard tissue-forming cells. Sci Rep. 2023;13(1):3442.
  7. Chen S, Rittel D, Shemtov Yona K. The normal stiffness of the edentulous alveolar process. Bone Rep. 2021;14:101066.
  8. Lungová V, et al. Tooth-bone morphogenesis during postnatal stages of mouse first molar development. J Anat. 2011;218(6):699-716.
  9. Iwama H, et al. Acellular extrinsic fiber cementum is invariably present in the superficial layer of apical cementum in mouse molar. J Histochem Cytochem. 2024;72(2):109-120.
  10. Hadad H, et al. Rodents as an animal model for studying tooth extraction-related medication-related osteonecrosis of the jaw: Assessment of outcomes. Arch Oral Biol. 2024;159:105875.
  11. Mouraret S, et al. A pre-clinical murine model of oral implant osseointegration. Bone. 2014;58:177-184.
  12. Yu F, Liu L, Xia L, Fang B. Establishment of a C57BL/6 mandibular critical-size bone defect model. J Craniofac Surg. 2021;32(7):2562-2565.
  13. Yu C, Yu F, Li F, Ye L. The establishment of a murine mandibular molar extraction socket healing model. J Vis Exp. 2023;(191). doi:10.3791/64855.
  14. University of Michigan Unit for Laboratory Animal Medicine. Guidelines on anesthesia and analgesia in mice. Updated January 23, 2026. Available at: https://az.research.umich.edu/animalcare/guidelines/guidelines-anesthesia-and-analgesia-mice/. Accessed August 5, 2026.
  15. Qiu Y, et al. Investigation of the furcation morphology of permanent mandibular first molars by using micro-computed tomography. BMC Oral Health. 2024;24(1):1150.
  16. Vieira AE, et al. Intramembranous bone healing process subsequent to tooth extraction in mice: Micro-computed tomography, histomorphometric and molecular characterization. PLoS One. 2015;10(5):e0128021.
  17. Jiang J, Mou J, Wang S, Liu J. Protocol for establishing a mouse model of bilateral maxillary first molar extraction to study alveolar bone healing. STAR Protoc. 2026;7(1):104366.
  18. Liang B, Zhang W, Xue Y. Observation and analysis of tooth extraction wound healing process of maxillary first molars in C57BL/6 mice. Chin J Pract Stomatol. 2019;12(232):e6.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

עקירה של שן בלסת התחתונהמודל עכברירגנרציה של עצםעקביות בעקירהמיקרו-CTשבר בעצם הלסתסיבוכים בעקירהארכיטקטורת השקע

מאמר זה פורסם

הסרטון יגיע בקרוב

צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.