Question 1

מדוע טכניקה אספטית היא קריטית במחקר במיקרוביולוגיה סביבתית?

Accepted Answer

טכניקה אספטית מונעת זיהום חיידקי ופטריות של ריאגנטים, מצעי תרבית ודגימות סביבתיות, תוך מניעת זיהום צולב בין דגימות. זיהום עלול להוביל לעלויות גבוהות להחלפת תרביות, ובמיוחד של בידודים נדירים מסביבות ייחודיות שעשויים להיות בלתי ניתנים להחלפה. הטכניקה גם מגנה על החוקרים על ידי הפחתת העברת פתוגנים במהלך העבודה במעבדה.

Question 2

מהם מקורות הזיהום העיקריים במעבדה למיקרוביולוגיה?

Accepted Answer

מקורות זיהום נפוצים כוללים מיקרואורגניזמים מהאוויר הדבקים לחלקיקי אבק וסיבים, מיקרובים על משטחי העבודה במעבדה ובציוד שאינו סטרילי, ומיקרובים המועברים מהשיער, הגוף והלבוש של החוקר. הבנת מקורות אלו מסייעת בהנחיה לשימוש נכון בשיטות עבודה אספטיות לשמירה על סביבת עבודה סטרילית ולהגנה על שלמות התרביות.

Question 3

כיצד מבער בנזן יוצר סביבת עבודה סטרילית?

Accepted Answer

מבער בונסן מייצר חום הגורם לקונבקציית אוויר, ובכך יוצר זרם אוויר עולה המרחיק מזהמים נישאים באוויר מסביבת הלהבה. זרם אוויר זה יוצר שטח סטרילי שבו ניתן לבצע עבודות ניסוייות בטכניקה אספטית באופן בטוח. הלהבה מעקרת בנוסף כלים כגון לולאות הזרקה ומוטות זכוכית באמצעות חשיפה ישירה לחום.

Question 4

מהו ההליך הנכון לעיקור מצעי גידול באוטוקלאב?

Accepted Answer

המס את רכיבי המצע המוצקים בממס הנוזלי המצוין בתוך כלי שניתן לעקר באוטוקלאב, בתוספת מקל ערבוב מגנטי. סגור את כלי הזכוכית במכסה באופן רפוי כדי לאפשר התפשטות של גזים במהלך החימום. הדבק סרט אוטוקלאב, ולאחר מכן עקר בהתאם להוראות היצרן, בדרך כלל במשך 20 דקות בטמפרטורה של 121°C. ודא שפסיי הסרט הפכו לשחורים, דבר המעיד על כך שהטמפרטורה המתאימה הושגה.

Question 5

כיצד מעבירים חיידקים באופן אספטי באמצעות לולאת ה接種ה (inoculating loop)?

Accepted Answer

עקרו את לולאת ההזרקה על ידי העברתה בלהבה עד שתהיה לוהטת (אדומה). עבור אגר מוצק, הקישו בעדינות בלולאה החמה על אזור ריק באגר כדי לצננה, ולאחר מכן גרדו מושבה אחת. עבור תרבית נוזלית, העבירו את פיית המכל בלהבה 2-3 פעמים, הכניסו את הלולאה המצוננת ושאבו כמות של לולאה אחת. עקרו תמיד את הלולאה לאחר השימוש כדי למנוע זיהום.

Question 6

איזו טכניקה מייצרת מושבות חיידקים מבודדות על צלחת אגר?

Accepted Answer

העבירו את לולאת ההזרקה הלוך ושוב על פני מגזר אחד של אגר סטרילי. סטריליזציה וקירור של הלולאה, ולאחר מכן בצעו רבוב שני בזווית קהה, כך שהקווים הראשונים בלבד יחתכו את הרבוב הראשון. חזרו על פעולות הסטריליזציה והריבוב פעמיים נוספות. מושבות בודדות יופיעו ברבוב האחרון, בעוד ששכבה דחוסה של חיידקים (bacterial lawn) תכסה את הרבובים המוקדמים יותר.

Question 7

כיצד מיישמים טכניקות אספטיות בחקר בקטריופאגים בדגימות סביבתיות?

Accepted Answer

חוקרים מגדלים תרביות חיידקים בתנאים אספטיים, לאחר מכן מערבבים תמיסות פאגים המופקות מקרקע עם תרבית החיידקים וזורעים על אגר. על הצלחת נוצר מסב (bacterial lawn), אך בנקודות הזיהום מופיעים פלאקים (plaques) – אזורים בהירים שבהם הווירוסים הרגו את החיידקים. לאחר מכן ניתן לטהר פאגים מפלאקים אלו לצורך מחקר נוסף באמצעות שיטות לזיהוי בקטריופאגים בדגימות סביבתיות.

טכניקה אספטית במדעי הסביבה - חידון הערכה