Question 1

מהו ההבדל בין דפנות התאים של חיידקים גרם-חיוביים לחיידקים גרם-שליליים?

Accepted Answer

לחיידקים גרם-חיוביים יש שכבת פפטידוגליקן עבה המתכווצת במהלך הפסקה של הצבע (decolorization), ובכך היא לוכדת קומפלקסים של קריסטל ויולט- יוד בתוך דופן התא. לחיידקים גרם-שליליים יש שכבת פפטידוגליקן דקה יותר, השנדחית בין שתי ממברנות, מה שמאפשר לחומר מסיר הצבע לפגוע בממברנה החיצונית ולשטוף את קומפלקסי הצבע, דבר שמוביל לצבעים שונים תחת מיקרוסקופ.

Question 2

כיצד נקשר קריסטל ויולט (crystal violet) לתאי חיידקים במהלך צביעת גרם?

Accepted Answer

קריסטל ויולט (crystal violet) בעל מטען חיובי נקשר באופן חלש לדפנות תאי חיידקים בעלות מטען שלילי. לאחר מכן, יוד של גרם (Gram's iodine) יוצר קומפלקס בלתי מסיס עם צבע הקריסטל ויולט, מקבע אותו בתוך מבנה דופן התא ומאפשר הדמיה תחת מיקרוסקופ. היווצרות קומפלקס זה חיונית כדי שתהליך הצביעה יעבוד ביעילות.

Question 3

אילו שלבים נדרשים להכנת מריחה חיידקית לצביעת גרם?

Accepted Answer

ערבבו כמות קטנה של תרבית חיידקית מבודדת עם מים מזוקקים סטריליים על פלטה מזכוכית כדי ליצור עקביות דלילה דמוית חלב. הניחו למריחה להתייבש בטמפרטורת החדר, ולאחר מכן בצעו קיבוע בחום על ידי העברה מהירה של הפלטה דרך להבה, כדי להדביק את החיידקים לפני השטח של הזכוכית באופן קבוע.

Question 4

מדוע משתמשים בספראנין כצבע נגד בתהליך צביעת גראם?

Accepted Answer

ספראנין (Safranin) מיושם לאחר הפרוקולורציה (decolorization) כדי לה可וויזואליזציה של חיידקים גרם-שליליים, הנראים בצבע אדום או ורוד תחת מיקרוסקופ. צבע נגד זה מבטיח שגם תאים גרם-חיוביים הנראים בכחול או סגול וגם תאים גרם-שליליים יהיו גלויים ובני הבחנה בדגימה הסופית, לצורך סיווג חיידקי מדויק.

Question 5

כיצד מבודדים מושבות חיידקים מדגימות קרקע סביבתיות?

Accepted Answer

מדללים דגימות קרקע בדילול סדרתי ומפזירות אותן על מצע אגרוז (agarose) דל חומרי הזנה. לאחר דגירה, נבחרות מושבות מהדילול הגבוה ביותר המכיל 30 עד 300 מושבות נפרדות, והן נזרעות על צלחות רעננות בתבנית זיג-זג כדי להשיג מושבות בודדות ומבודדות לצורך תרבית וספירה של חיידקים מדגימות קרקע.

Question 6

איזה מידע ניתן להפיק מתצפית על תאי חיידקים שנצבעו בצביעת גראם תחת מיקרוסקופ?

Accepted Answer

צביעת גראם חושפת את המורפולוגיה הבקטריאלית, כולל צורת התא, גודלו וסידורו, כגון שרשראות או צברים. הצבע מעיד על סיווג הגראם: כחול או סגול לתאים גרם-חיוביים ואדום או ורוד לתאים גרם-שליליים, מה שמאפשר סיווג מהיר של בקטריות לשתי מחלקות מבניות רחבות.

Question 7

כיצד תורם צביעת גראם לזיהוי חיידקים ביישומים קליניים וסביבתיים?

Accepted Answer

צביעת גרם מספקת הבחנה חזותית מהירה בין אוכלוסיות חיידקים, ובכך מאפשרת אסטרטגיות זיהוי ממוקדות. לדוגמה, ידיעה כי חיידק הוא גרם-חיובי מאפשרת בחירה של גששים של חומצה נוקלאית פפטידית (PNA) הספציפיים למין, או שימוש במצעים סלקטיביים כגון אגר ציקלוסרין המעכב צמיחה של חיידקים גרם-שליליים, ובכך מקלה על בידוד החיידקים הרלוונטיים.

כתמי גרם של חיידקים ממקורות סביבתיים - חידון הערכה