טיהור תמצית שומנים כוללת עם כרומטוגרפיה של עמוד

1. התקנה והכנת חומרים

1. להשיג תמצית שומנים הכוללת (TLE) באמצעות שיטת מיצוי ממס (Sonication, Soxhlet, או מיצוי ממס מואץ (ASE)).
2. אסוף את הדברים הבאים: פיפטות זכוכית בורוסיליקט בעירה ונורות, ג'ל סיליקה, הקסאן, דיכלורומתאן (DCM) ומתנול.
   1. חומרים אלה ניתן לרכוש מכל קמעונאי כימי. ריאגנטים צריכים להיות טהורים וחופשיים מפחמימנים.
3. כמו כן להשיג צמר זכוכית בעירה ובקבוקוני זכוכית בורוסיליקט 4 מ"ל.
4. הקפד על אמצעי לתמיכה בעמודה ובבקבוקוני האיסוף במהלך ההליך. לדוגמה, דוכן עם מלחציים ומתלה נתעב. מעבדות רבות מהונדסות מתלים בהתאמה אישית המכילים מספר עמודות ובקבוקוני איסוף(איור 2). פעולה זו מאפשרת להפעיל עמודות רבות בו-זמנית.

2. שיטות

1. התחל עם הדגימה היבשה בוויאל 4 מ"ל. אם המדגם שוקל יותר ~ 10 מ"ג כאשר יבש, ייתכן שיהיה צורך לפצל לפני ביצוע השלבים הבאים כמו ג'ל סיליקה יכול להגיב רק עם מסה סופית של חומר אורגני.
2. להשעות את הדגימה בכמות קטנה של הקסאן. זהו הקוטב הראשון והפחות מבין שלושת הממיסים המשמשים בניסוי זה.
3. אם יש מדגם דבוק לחלק הפנימי של המשחקון, sonicate הדגימות במשך 5 דקות.
4. טען כמות קטנה של צמר זכוכית לחלק העליון של פיפטה באמצעות קבוצה של פינצטה נקייה. דחפו בעדינות את צמר הזכוכית לתחתית הפיפטה, בעזרת פיפטה אחרת, כדי ליצור תקע.
5. מעבירים בזהירות ג'ל סיליקה לפיפטה עד שהוא חצי מלא.
6. הנח מקטורן איסוף פסולת בגודל 4 מ"ל מתחת לעמודה.
7. השרו את ג'ל הסיליקה בפיפטה עם 3 כרכים של הקסאן. זה תנאי העמודה, מסיר בועות אוויר, ושוטף כל זיהומים את ג'ל סיליקה.
8. לאחר הכביסה הסופית, להסיר את מקטורון איסוף הפסולת ולהחליף אותו עם בריון כדי לאסוף את שבר קוטבי.
9. מעבירים בזהירות את כל הדגימה בהקסאן לעמוד באמצעות פיפטה. יש לשטוף את מחמת הדגימה פעמיים נוספות בכמויות קטנות של הקסאן, ולהעביר לעמודה. אפשר את הקסאן המדגם הועבר לתוך להשרות לחלוטין לתוך ג'ל סיליקה. בשום שלב במהלך ההליך צריך ג'ל סיליקה להתייבש.
10. המשך להוסיף hexane לחלק העליון של המדגם עד שציפוי האוסף מתחת לעמודה כמעט מלא (~ 4 מ"ל).
    1. אפשר לכל ההקסאן להיכנס לג'ל סיליקה לפני שמתחילים עם הממס הבא.
11. מקם את מקטורן אוסף אמצע הקוטביות מתחת לעמודה.
12. הוסף DCM לראש העמודה עד שציפוי האוסף כמעט מלא. שוב, אפשר לכל DCM להיכנס לתחנת האוסף לפני הפעלת הממס הבא.
13. מקם את בון אוסף הקוטב מתחת לעמודה.
14. הוסף מתנול לראש העמודה עד שהאוסף נתעב כמעט מלא.