נהלי טיפול בסיסיים

0 views13:24 min

1. טיפול בעכברים חיסוניים (קונבנציונליים)

הוכח כי הפרעות חיסוניות של עכברים דומות מאוד לאלה בבני אדם. ² מכיוון שלבעלי חיים אלה יכולות אימונולוגיות מוגבלות, נהלים בטיפול ובטיפול בבעלי חיים אלה נועדו למזער את הסיכון למחלות זיהומיות באמצעות בקרות הנדסיות, ציוד מגן אישי לצוות הטיפול בבעלי חיים, והליכי הפעלה סטנדרטיים; אלה מפחיתים את הזיהום של הזדקנות וציוד אחר שבו בעלי החיים נמצאים במגע.

הוצאה ממכולות: קבלת בעלי חיים ממוסדות אחרים או מוכרי בעלי חיים מהווה סיכון לבעלי החיים שכבר שוכנו במתקן בעלי החיים. במהלך המעבר, תיבות הובלת בעלי החיים יכולות לבוא במגע עם סוכנים פתוגניים. לכן, יש לבצע הליך תקין בעת פרקת המכולות.
1. דרישות ציוד מגן אישי מינימלי (PPE) הן כפפות, חלוק מעבדה נקי או סקראבס, מסכת חלקיקים ומשקפי בטיחות בעת הטיפול בבעלי החיים.
2. בחר את הכלוב המתאים, כולל מכסה מוט התיל ואת החלק העליון של המחסום. הכלוב צריך להיות מרוהט עם מצעים מתאימים וחומרי קינון. יש להכין את כל ההסתה ולהניח אותה באזור המקבל לפני הגעת בעלי החיים.
3. עם ההגעה, תיבות התחבורה ממוקמות בחדר מאובטח ומבוקר בטמפרטורה. לאחר מכן, בדוק את המיכל לנזק.
4. לחטא את המשטחים החיצוניים של מיכל המשלוח עם מוצר כולין דו חמצני להרוס כל פתוגנים מזיקים. ודא כי חומר החיטוי נמצא במגע עם התיבה בהתאם להמלצות היצרנים, בדרך כלל 15-30 דקות.
5. מניחים את המיכל בתחנת העברת בעלי חיים (ATS). ה- ATS מספק זרימת אוויר מסוננת HEPA בתוך מכסה המנוע המספקת הגנה מפני אלרגנים על ידי יצירת מחסום אוויר ואקום בין המשתמש לאזור העבודה. זה מבטיח חשיפה מינימלית לשיער /קשקשים של בעלי חיים וחומר מצעים בכלוב. האוויר החד-כיווני מגן גם על בעלי החיים מפני אוויר החדר שמסביב, וממזער את הסיכוי לזיהום.
6. לאחר פתיחת המכולה, להעריך את הבריאות הכללית של בעלי החיים. תרשמו שימו לב לכל החיות הפצועות או החולות.
7. מניחים את החיות בכלובים שהורכבו בגדלים הקבוצתיים הנכונים. התקבצות צריכה להיות בהתאם לתקנות החלל, והפרוטוקול הניסיוני שאליו יוקצו.
8. כסו את הכלוב עם מכסה מוט התיל. אבטחו את המחולק על מכסה התיל כדי ליצור שני אזורים במכסה.
9. בחר את האוכל המתאים והניח את האוכל בצד אחד של מכסה מוט התיל. השאר את הצד השני פתוח כדי לאפשר זרימת אוויר טובה יותר.
10. מים יסופקו באמצעות בקבוקי מים או מערכת השקיה אוטומטית. בקבוקי מים משמשים לעכברים שננגמו לאחרונה כדי להבטיח שהם יוכלו לשמור על רמות ההידרציה שלהם. עבור IVC caging עם השקיה אוטומטית, לטעון את צינור השקיה לפני הנחת אותו על המדף.
11. הנח את הכלוב על מתלה. אם אתם משתמשים בהפריה 40, בדקו שהכלוב מעורב באופן מלא על המדף, ושצינור הלגימה מאובטח למערכת השקיה.
כלוב שינוי עכברים קונבנציונליים
1. כלובי בעלי חיים מוחלפים ב-ATS. ATS מחוטא בסוף כל מפגש.
2. ניתן לפתוח רק כלוב אחד בכל פעם.
3. החלפה מוכנה עם המצעים המתאימים וחומרי הקינון מובאת לחדר החיות. מספר קטן של כלובים ממוקמים ב- ATS.
4. כלובי IVC עם צינורות לגימה פנימיים חייבים להיות מחויבים כדי לכפות מים לתוך הלגימה כדי להסיר את החלל המת של האוויר בצינור הלגימה. אם לא טעון כראוי, העכברים לא יוכלו לספק מספיק לחץ על צינור הלגימה כדי להסיר את האוויר ממנו.
5. דרישות ציוד מגן אישי מינימלי (PPE) הן כפפות, חלוק מעבדה נקי או סקראבס, מסכת חלקיקים ומשקפי בטיחות בעת הטיפול בבעלי החיים.
6. כלוב של בעלי חיים שיש לשנות ממוקם בכלוב חדש, ולאחר מכן ב- ATS.
7. בעלי חיים מועברים ביד או באמצעות מלקחיים מרופדים. כפפות משתנות בין כלובים או בין קבוצות של עכברים. כפפות יכולות גם להיות מחוטאות עם כימיקל לא רעיל בין כלובים.
8. הוכח כי העברת אזור הקינון של העכברים לכלוב נקי מסייעת במעבר לכלוב הנקי, במיוחד עבור זכרים ששוכנים בקבוצה. פריטי העשרה אחרים מועברים גם הם לכלוב החדש.
9. לאחר החלק העליון של הכלוב או המאכיל ממוקם בכלוב החדש, מזון מתווסף.
10. החלק העליון של המחסום ממוקם על הכלוב החדש וכלוב מוחזר למדף.
11. כלובי IVC חייבים להיות מעוגנים כראוי לתוך המדף כדי להבטיח כי שסתומי האוויר והמים עוסקים.

2. טיפול בעכברים אימונו-קום-מובטחים

פרק ממכולות משלוח
1. יש לפרוק בעלי חיים אימונוקום בתנאים סטריליים. כל האנשים המטפלים בעכברים לקויי מערכת החיסון חייבים ללבוש שמלת אדים מעוקרת, מסכה, מצנפת שיער וכפפות סטריליות. טכניקה אספטית יש להשתמש בכל עת בעת מסירת בעלי חיים אלה.
2. כל הציוד וההערכה היו צריכים להיות מעוקרים על ידי קיטור, קרינת UV, או מעוקר כימית עם טבילה ב 70% אתנול במשך 30 דקות לפחות יש שתי אפשרויות לעריקור סטרילי: החלפה סטנדרטית כי כבר עטוף קיטור מעוקר, או החלפה כי הוא מעוקר - בדרך כלל באמצעות הקרנה - על ידי הספק. הכלובים האלה הם שימוש אחד, יחידות חד פעמיות.
3. לפני מניפולציה עכברים מתחת מכסה המנוע זרימה למינאר, מכסה המנוע מרוסס עם 70% אתנול עם המפוח פועל. מפוח מכסה המנוע צריך להישאר על כל עת כדי לשמור על הסביבה סטרילית. לאחר כל שימוש, מכסה המנוע מרוסס בחומר חיטוי וננגב מכל הפסולת ושוב מרוסס ב-70% אתנול.
4. באופן אופטימלי, שני אנשים נדרשים לקבלתם התקינה של העכברים האימונוקוםיים: אחד לטיפול בבעלי החיים בטכניקות אספטיות (הטכנאי הסטרילי), ואחד שיטפל בפריטים מזוהמים (הטכנאי הלא סטרילי). האדם הלא סטרילי עדיין צריך ללבוש שמלה נקייה עם שרוולים ארוכים; חלוק מעבדה או חלוק; מסכה; מצנפת; וכפפות סטריליות כדי למנוע זיהום של הפנים סטרילי אם הם צריכים להגיע לתוך מכסה המנוע.
5. הכן מכסה מנוע זרימה למינאר כפי שתואר בעבר. עדיף שיהיה ברדס המוקדש לבעלי חיים אימונוקומוניים. מומלץ כי מכסה המנוע להיות מצויד באורות עיקור אולטרה סגולים (UV) שניתן להשתמש בהם כדי לחטא את פנים מכסה המנוע בין שימושים. שעון הים מנוצל כדי להבטיח כי פני השטח של מכסה המנוע יש חשיפה נאותה לקרני UV.
6. החלק החיצוני של כל האספקה המונחת במכסה המנוע מרוסס ב-70% אלכוהול, כולל האריזה החיצונית של מזון, מים והזדקנות.
7. מכולות מרוססות בתמיסת כלור דו-חמצני לפני שהן ממוקמות במכסה המנוע. לאחר שהונחו במכסה המנוע, הם יישארו פתוחים במשך 15-30 דקות.
8. המטפל המיועד לבעלי חיים פותח את המזון והמים הסטריליים מתחת למכסה המנוע.
9. הטכנאי הלא סטרילי פותח את תיבת המשלוח מתחת למכסה המנוע. יש להקפיד על ידי הטכנאי הלא סטרילי כדי להימנע ממגע עם המשטחים הפנימיים של מכסה המנוע ובפנים של תיבת המשלוח.
10. המטפל בבעלי החיים פותח את הכלוב הסטרילי, ומכין את הכלוב על ידי הנחת מזון ומים על ראש הכלוב. העכברים מוסרים מקופסת המשלוח ומונחים בכלוב הסטרילי.
11. מצב בעלי החיים הוא ציין על ידי המטפל בבעלי חיים סטריליים. כל בעלי חיים שנראים חולים או שיש להם פציעות ברורות יופרדו. כל הכלובים המסומנים בבעלי חיים הזקוקים לתשומת לב וטרינרית יוצבו לטיפול, שינוי כלוב או מניפולציה ניסיונית אחרונה, כדי להפחית את הזיהום הפוטנציאלי של בעלי חיים אחרים.
12. האדם הלא סטרילי יסיר את הכלוב המאוכלס מהשכונה. ניתן להניח כלובים על מתלה סטנדרטי ככלובים סטטיים, או על מתלה מאוורר כמו IVCs. בעירוי, העכברים צריכים להיות מסופקים עם חומרי קינון נוספים כדי לסייע בוויסות תרמי.
13. המטפל בבעלי חיים צריך להחליף כפפות לאחר כל מכולה כדי למנוע זיהום צולב אפשרי של קבוצות של בעלי חיים. מספר המכולה של המשלוח נרשם בכרטיס הכלוב כדי לעקוב אחר מקור בעלי החיים במקרה של מחלה.
14. ניתן לשמור חומרים מתכלים שאינם בשימוש לשימוש עתידי בתנאי שניתן יהיה לאטום מחדש את הגורם המכיל המקורי. מזון שאינו בשימוש מוסר מהחדר.
15. עכברים צריכים לעבור תקופת התאקלות של שבוע לפחות לפני השימוש הניסיוני.
החלפת כלוב לעכברים אימונוקום
1. כלובי העכבר משתנים לפחות פעם בשבוע, או לעתים קרובות יותר אם יש צורך בכך.
2. צעדים להכנת מכסה המנוע, הכנת כלוב, PPE כוח אדם זהים עבור פרקת בעלי החיים.
3. בעלי חיים מועברים ביד או באמצעות מלקחיים מרופדים. המטפל המיועד בבעלי חיים צריך reglove לאחר כל 5-10 כלובים, אם הכפפות קרועות או מזוהמות, או אם בעל חיים נראה חולה.
4. כל כלובים עם בעלי חיים שנראים חולים יוצבו בסוף הסדר המשתנה של הכלוב, כדי למנוע חשיפה אפשרית של בעלי חיים בריאים לפתוגנים או מזהמים.
5. אם יש להוסיף מזון ו/או מים לכלוב לפני שינוי הכלוב המתוכנן הבא, יש לעשות זאת באופן טפיטי מתחת למכסה המנוע המוכן.

Overview

Loading...

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מקור: קיי סטיוארט, RVT, RLATG, CMAR; ואלרי א. שרודר, אר.די.ג'י, אר-אל-ג'י. אוניברסיטת נוטרדאם, IN

עכברים וחולדות מהווים יותר מ-90% מבעלי החיים המשמשים למחקר ביו-רפואי. הטיפול הנכון בחיות מחקר אלה הוא קריטי לתוצאות הניסויים. ישנם נהלים כלליים החלים על רוב העכברים והחולדות האלה, אבל חלק מבעלי החיים, כגון אלה immunocompromised, דורשים צעדים נוספים לנקוט כדי לקיים אותם לניסויים.

עכברים אימונוקוםיים נפוצים כוללים את אלה שהתרחשו באופן טבעי בעכברים מלידה ואלה שנוצרו באמצעות הנדסה גנטית. העכברים האימונוקום הראשונים ששימשו במחקר היו עכברים "עירומים". עכבר BALB/c עירום (nu) התגלה בשנת 1966, בתוך מושבה BALB /c כי היה לייצר עכברים חסרים שיער ותימין. לעכברים האתימיים האלה יש מערכת חיסונית מעוכבת נטולת תאי T. ערכו של בעל חיים זה התגלה עד מהרה לשימוש במחקרים של זיהומים מיקרוביאליים, ליקויים במערכת החיסון, וחיסון עצמי. אמנם לא נפוץ כמו עכבר עירום, יש גם חולדה בעירום. החולדה העירומה לקויה בתאי T ומציגה אוכלוסיות תאים מרוקנות באזורים תלויי תימוס של איברי לימפה היקפיים. עכבר נוסף המחסור במערכת החיסון הוא עכבר הכשל החיסוני המשולב החמור (SCID). לעכברים אלה יש פגם הפוגע בייצור של תאי B ו- T פונקציונליים. עם חוסר היכולת להרכיב תגובה חיסונית נאותה, עכברים אלה יכולים לשמש כמקבלי פונדקאי להשתלות של תאים אנושיים. מספר זני עכבר מהונדסים גנטית עם ליקויים במערכת החיסון זמינים מסחרית. ¹ חומרת המחסור משתנה עם השינוי הגנטי; עם זאת, כל העכברים והחולדות האימונו-קומונו-תימודים מטופלים באופן דומה.

כתב יד זה יתאר את הטיפול בבעלי חיים חיסוניים ואימונו-קום כאחד. הדיור, הדיאטה, הדרישות הסביבתיות והטיפול יידונו עבור שתי קבוצות בעלי החיים.

Procedure

Loading...

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. טיפול בעכברים חיסוניים (קונבנציונליים)

הוכח כי הפרעות חיסוניות של עכברים דומות מאוד לאלה בבני אדם. ² מכיוון שלבעלי חיים אלה יכולות אימונולוגיות מוגבלות, נהלים בטיפול ובטיפול בבעלי חיים אלה נועדו למזער את הסיכון למחלות זיהומיות באמצעות בקרות הנדסיות, ציוד מגן אישי לצוות הטיפול בבעלי חיים, והליכי הפעלה סטנדרטיים; אלה מפחיתים את הזיהום של הזדקנות וציוד אחר שבו בעלי החיים נמצאים במגע.

הוצאה ממכולות: קבלת בעלי חיים ממוסדות אחרים או מוכרי בעלי חיים מהווה סיכון לבעלי החיים שכבר שוכנו במתקן בעלי החיים. במהלך המעבר, תיבות הובלת בעלי החיים יכולות לבוא במגע עם סוכנים פתוגניים. לכן, יש לבצע הליך תקין בעת פרקת המכולות.
1. דרישות ציוד מגן אישי מינימלי (PPE) הן כפפות, חלוק מעבדה נקי או סקראבס, מסכת חלקיקים ומשקפי בטיחות בעת הטיפול בבעלי החיים.
2. בחר את הכלוב המתאים, כולל מכסה מוט התיל ואת החלק העליון של המחסום. הכלוב צריך להיות מרוהט עם מצעים מתאימים וחומרי קינון. יש להכין את כל ההסתה ולהניח אותה באזור המקבל לפני הגעת בעלי החיים.
3. עם ההגעה, תיבות התחבורה ממוקמות בחדר מאובטח ומבוקר בטמפרטורה. לאחר מכן, בדוק את המיכל לנזק.
4. לחטא את המשטחים החיצוניים של מיכל המשלוח עם מוצר כולין דו חמצני להרוס כל פתוגנים מזיקים. ודא כי חומר החיטוי נמצא במגע עם התיבה בהתאם להמלצות היצרנים, בדרך כלל 15-30 דקות.
5. מניחים את המיכל בתחנת העברת בעלי חיים (ATS). ה- ATS מספק זרימת אוויר מסוננת HEPA בתוך מכסה המנוע המספקת הגנה מפני אלרגנים על ידי יצירת מחסום אוויר ואקום בין המשתמש לאזור העבודה. זה מבטיח חשיפה מינימלית לשיער /קשקשים של בעלי חיים וחומר מצעים בכלוב. האוויר החד-כיווני מגן גם על בעלי החיים מפני אוויר החדר שמסביב, וממזער את הסיכוי לזיהום.
6. לאחר פתיחת המכולה, להעריך את הבריאות הכללית של בעלי החיים. תרשמו שימו לב לכל החיות הפצועות או החולות.
7. מניחים את החיות בכלובים שהורכבו בגדלים הקבוצתיים הנכונים. התקבצות צריכה להיות בהתאם לתקנות החלל, והפרוטוקול הניסיוני שאליו יוקצו.
8. כסו את הכלוב עם מכסה מוט התיל. אבטחו את המחולק על מכסה התיל כדי ליצור שני אזורים במכסה.
9. בחר את האוכל המתאים והניח את האוכל בצד אחד של מכסה מוט התיל. השאר את הצד השני פתוח כדי לאפשר זרימת אוויר טובה יותר.
10. מים יסופקו באמצעות בקבוקי מים או מערכת השקיה אוטומטית. בקבוקי מים משמשים לעכברים שננגמו לאחרונה כדי להבטיח שהם יוכלו לשמור על רמות ההידרציה שלהם. עבור IVC caging עם השקיה אוטומטית, לטעון את צינור השקיה לפני הנחת אותו על המדף.
11. הנח את הכלוב על מתלה. אם אתם משתמשים בהפריה 40, בדקו שהכלוב מעורב באופן מלא על המדף, ושצינור הלגימה מאובטח למערכת השקיה.
כלוב שינוי עכברים קונבנציונליים
1. כלובי בעלי חיים מוחלפים ב-ATS. ATS מחוטא בסוף כל מפגש.
2. ניתן לפתוח רק כלוב אחד בכל פעם.
3. החלפה מוכנה עם המצעים המתאימים וחומרי הקינון מובאת לחדר החיות. מספר קטן של כלובים ממוקמים ב- ATS.
4. כלובי IVC עם צינורות לגימה פנימיים חייבים להיות מחויבים כדי לכפות מים לתוך הלגימה כדי להסיר את החלל המת של האוויר בצינור הלגימה. אם לא טעון כראוי, העכברים לא יוכלו לספק מספיק לחץ על צינור הלגימה כדי להסיר את האוויר ממנו.
5. דרישות ציוד מגן אישי מינימלי (PPE) הן כפפות, חלוק מעבדה נקי או סקראבס, מסכת חלקיקים ומשקפי בטיחות בעת הטיפול בבעלי החיים.
6. כלוב של בעלי חיים שיש לשנות ממוקם בכלוב חדש, ולאחר מכן ב- ATS.
7. בעלי חיים מועברים ביד או באמצעות מלקחיים מרופדים. כפפות משתנות בין כלובים או בין קבוצות של עכברים. כפפות יכולות גם להיות מחוטאות עם כימיקל לא רעיל בין כלובים.
8. הוכח כי העברת אזור הקינון של העכברים לכלוב נקי מסייעת במעבר לכלוב הנקי, במיוחד עבור זכרים ששוכנים בקבוצה. פריטי העשרה אחרים מועברים גם הם לכלוב החדש.
9. לאחר החלק העליון של הכלוב או המאכיל ממוקם בכלוב החדש, מזון מתווסף.
10. החלק העליון של המחסום ממוקם על הכלוב החדש וכלוב מוחזר למדף.
11. כלובי IVC חייבים להיות מעוגנים כראוי לתוך המדף כדי להבטיח כי שסתומי האוויר והמים עוסקים.

2. טיפול בעכברים אימונו-קום-מובטחים

פרק ממכולות משלוח
1. יש לפרוק בעלי חיים אימונוקום בתנאים סטריליים. כל האנשים המטפלים בעכברים לקויי מערכת החיסון חייבים ללבוש שמלת אדים מעוקרת, מסכה, מצנפת שיער וכפפות סטריליות. טכניקה אספטית יש להשתמש בכל עת בעת מסירת בעלי חיים אלה.
2. כל הציוד וההערכה היו צריכים להיות מעוקרים על ידי קיטור, קרינת UV, או מעוקר כימית עם טבילה ב 70% אתנול במשך 30 דקות לפחות יש שתי אפשרויות לעריקור סטרילי: החלפה סטנדרטית כי כבר עטוף קיטור מעוקר, או החלפה כי הוא מעוקר - בדרך כלל באמצעות הקרנה - על ידי הספק. הכלובים האלה הם שימוש אחד, יחידות חד פעמיות.
3. לפני מניפולציה עכברים מתחת מכסה המנוע זרימה למינאר, מכסה המנוע מרוסס עם 70% אתנול עם המפוח פועל. מפוח מכסה המנוע צריך להישאר על כל עת כדי לשמור על הסביבה סטרילית. לאחר כל שימוש, מכסה המנוע מרוסס בחומר חיטוי וננגב מכל הפסולת ושוב מרוסס ב-70% אתנול.
4. באופן אופטימלי, שני אנשים נדרשים לקבלתם התקינה של העכברים האימונוקוםיים: אחד לטיפול בבעלי החיים בטכניקות אספטיות (הטכנאי הסטרילי), ואחד שיטפל בפריטים מזוהמים (הטכנאי הלא סטרילי). האדם הלא סטרילי עדיין צריך ללבוש שמלה נקייה עם שרוולים ארוכים; חלוק מעבדה או חלוק; מסכה; מצנפת; וכפפות סטריליות כדי למנוע זיהום של הפנים סטרילי אם הם צריכים להגיע לתוך מכסה המנוע.
5. הכן מכסה מנוע זרימה למינאר כפי שתואר בעבר. עדיף שיהיה ברדס המוקדש לבעלי חיים אימונוקומוניים. מומלץ כי מכסה המנוע להיות מצויד באורות עיקור אולטרה סגולים (UV) שניתן להשתמש בהם כדי לחטא את פנים מכסה המנוע בין שימושים. שעון הים מנוצל כדי להבטיח כי פני השטח של מכסה המנוע יש חשיפה נאותה לקרני UV.
6. החלק החיצוני של כל האספקה המונחת במכסה המנוע מרוסס ב-70% אלכוהול, כולל האריזה החיצונית של מזון, מים והזדקנות.
7. מכולות מרוססות בתמיסת כלור דו-חמצני לפני שהן ממוקמות במכסה המנוע. לאחר שהונחו במכסה המנוע, הם יישארו פתוחים במשך 15-30 דקות.
8. המטפל המיועד לבעלי חיים פותח את המזון והמים הסטריליים מתחת למכסה המנוע.
9. הטכנאי הלא סטרילי פותח את תיבת המשלוח מתחת למכסה המנוע. יש להקפיד על ידי הטכנאי הלא סטרילי כדי להימנע ממגע עם המשטחים הפנימיים של מכסה המנוע ובפנים של תיבת המשלוח.
10. המטפל בבעלי החיים פותח את הכלוב הסטרילי, ומכין את הכלוב על ידי הנחת מזון ומים על ראש הכלוב. העכברים מוסרים מקופסת המשלוח ומונחים בכלוב הסטרילי.
11. מצב בעלי החיים הוא ציין על ידי המטפל בבעלי חיים סטריליים. כל בעלי חיים שנראים חולים או שיש להם פציעות ברורות יופרדו. כל הכלובים המסומנים בבעלי חיים הזקוקים לתשומת לב וטרינרית יוצבו לטיפול, שינוי כלוב או מניפולציה ניסיונית אחרונה, כדי להפחית את הזיהום הפוטנציאלי של בעלי חיים אחרים.
12. האדם הלא סטרילי יסיר את הכלוב המאוכלס מהשכונה. ניתן להניח כלובים על מתלה סטנדרטי ככלובים סטטיים, או על מתלה מאוורר כמו IVCs. בעירוי, העכברים צריכים להיות מסופקים עם חומרי קינון נוספים כדי לסייע בוויסות תרמי.
13. המטפל בבעלי חיים צריך להחליף כפפות לאחר כל מכולה כדי למנוע זיהום צולב אפשרי של קבוצות של בעלי חיים. מספר המכולה של המשלוח נרשם בכרטיס הכלוב כדי לעקוב אחר מקור בעלי החיים במקרה של מחלה.
14. ניתן לשמור חומרים מתכלים שאינם בשימוש לשימוש עתידי בתנאי שניתן יהיה לאטום מחדש את הגורם המכיל המקורי. מזון שאינו בשימוש מוסר מהחדר.
15. עכברים צריכים לעבור תקופת התאקלות של שבוע לפחות לפני השימוש הניסיוני.
החלפת כלוב לעכברים אימונוקום
1. כלובי העכבר משתנים לפחות פעם בשבוע, או לעתים קרובות יותר אם יש צורך בכך.
2. צעדים להכנת מכסה המנוע, הכנת כלוב, PPE כוח אדם זהים עבור פרקת בעלי החיים.
3. בעלי חיים מועברים ביד או באמצעות מלקחיים מרופדים. המטפל המיועד בבעלי חיים צריך reglove לאחר כל 5-10 כלובים, אם הכפפות קרועות או מזוהמות, או אם בעל חיים נראה חולה.
4. כל כלובים עם בעלי חיים שנראים חולים יוצבו בסוף הסדר המשתנה של הכלוב, כדי למנוע חשיפה אפשרית של בעלי חיים בריאים לפתוגנים או מזהמים.
5. אם יש להוסיף מזון ו/או מים לכלוב לפני שינוי הכלוב המתוכנן הבא, יש לעשות זאת באופן טפיטי מתחת למכסה המנוע המוכן.

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Transcript

Loading...

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מכיוון שעכברים וחולדות מהווים יותר מתשעים אחוז מבעלי החיים המשמשים למחקר ביו-רפואי, טיפול נכון באורגניזמים אלה הוא קריטי לתוצאות הניסויים. הליכי טיפול אלה מתחילים כבר בהתחלה עם פריקת בעלי החיים ממכולות המשלוח, להחלפת כלובים, לשמירה על תנאי מגורים נאותים, מתן תזונה מתאימה והבטחת סביבה מתאימה. למרות שישנם נהלים כלליים החלים על רוב העכברים והחולדות במעבדה, חלק מבעלי החיים, כמו אלה הסובלים ממדוכאי חיסון, דורשים תשומת לב נוספת על מנת לקיים אותם למטרות ניסוי.

סרטון זה יתאר את הסטנדרטים ונהלי הטיפול החיוניים הן לבעלי חיים בעלי יכולת חיסונית והן לבעלי חיים מדוכאי חיסון. ולבסוף, נדגים כמה ניסויים לדוגמה שמראים כיצד מדענים משתמשים בידע הזה למטרות מחקר שונות.

קבלת בעלי חיים ממוסדות אחרים מהווה סיכון לבעלי החיים שכבר שוכנים במתקן, שכן במהלך ההובלה, תיבות ההובלה עלולות לבוא במגע עם גורמים פתוגניים. לכן, יש לנקוט בהליך נכון בעת פריקת מכולות המשלוח.

לפני הטיפול בבעלי חיים כלשהם, חשוב ללבוש את ציוד המגן האישי המתאים, או PPE. ה-PPE המינימלי ללבוש הוא מעיל מעבדה, כפפות, משקפי בטיחות ומסכה כירורגית שתפחית את החשיפה לאבק ואלרגנים. השלב הבא הוא בחירת כלובים מתאימים לבעלי חיים נכנסים. לאחר מכן, רהט את הכלוב במצעים וחומרי קינון מתאימים. וקח את הכלובים המוכנים לחדר הקבלה מבוקר הטמפרטורה, כך שיהיו מוכנים להעברה לפני הגעת בעלי החיים.

עם הגעת המשלוח, הנח את ארגזי ההובלה במקום בטוח בחדר הקבלה. בדוק את המיכל לאיתור נזק וחטא את המשטחים החיצוניים כדי להשמיד פתוגנים מזיקים. ודא שחומר החיטוי נמצא במגע עם הקופסה למשך 15-30 דקות לפחות, בהתאם להמלצות היצרן. לאחר מכן, הנח את המיכל בתחנת העברת בעלי חיים, או ATS. תחנה זו מציעה זרימת אוויר חד-כיוונית מסוננת ביעילות גבוהה או HEPA בתוך מכסה המנוע. HEPA מגן על המשתמש מפני אלרגנים ומגן על בעלי החיים מאוויר החדר שמסביב, וממזער את הסיכוי לזיהום. לאחר מכן, פתח את מיכל המשלוח והעריך את הבריאות הכללית של המכרסמים. רשום כל בעל חיים שנראה פצוע או חולה. לאחר מכן, הכניסו אותם לכלוב שכבר הורכב בגדלי הקבוצה המתאימים, כסו את הכלוב במכסה מוט התיל ואבטחו את המחיצה ליצירת שני אזורים. בחר את המזון המתאים והניח אותו בצד אחד והשאיר את הצד השני פתוח כדי לאפשר זרימת אוויר טובה יותר. לבסוף, אם בעלי החיים אינם מונחים על מתלה עם השקיה אוטומטית, הוסיפו בקבוק מים כדי להבטיח אספקת מים מספקת. זכרו, יש לחטא את ה-ATS בסוף כל מפגש, והמפוח חייב להיות כבוי בעת החיטוי.

להחלפת כלובים, הנח את שני הכלובים - כלוב טרי עם חומר המצעים המתאים והכלוב המשומש עם בעלי החיים - ב-ATS. ניתן להעביר את בעלי החיים מהכלוב הישן לכלוב החדש ביד או בעזרת מלקחיים מרופדים. שתי השיטות הללו נדונו בסרטון אחר של אוסף זה. זכור שניתן לפתוח רק כלוב אחד של בעלי חיים בכל פעם. עבור עכברים זכרים או נקבות עם המלטה, הוכח כי העברת אזור הקינון של העכברים לכלוב הנקי מסייעת לבעלי החיים במעבר. לאחר הנחת החלק העליון של הכלוב על הכלוב החדש, העבירו מזון מהחלק העליון של הכלוב הישן לחלק העליון החדש והוסיפו עוד מזון במידת הצורך. לאחר מכן, הניחו את החלק העליון של המחסום והחזירו את הכלוב למתלה. זה נוהג טוב להחליף כפפות בין כלובים או בין קבוצות.

הליך הפריקה של בעלי חיים מדוכאי חיסון שונה במקצת, מכיוון שהדברים צריכים להיות סטריליים. מומלץ שהמפוח בתוך מכסה המנוע יהיה דולק לפחות 24 שעות לפני השימוש. בדומה לבעלי חיים בעלי חיסון, עם הגעת המשלוח יש לרסס את המכולה בתמיסת חיטוי בחדר הקבלה ולהשאיר אותה פתוחה למשך 15-30 דקות. ב-ATS המיועד לעכברים מדוכאי חיסון, יש לרסס את מכסה המנוע הלמינרי ב-70% אתנול 30 דקות לפני מניפולציה של בעלי חיים. זה אידיאלי ששני אנשים ישתתפו בפעילות הפריקה הזו - אדם אחד יהיה הטכנאי הסטרילי שלובש את החלוק המעוקר בקיטור וזוג כפול של כפפות סטריליות כדי לטפל בבעלי החיים בטכניקות אספטיות והשני יהיה הטכנאי הלא סטרילי שלובש חלוק בידוד נקי וזוג כפפות לטיפול בפריטים מזוהמים. שניהם צריכים לחבוש מסכה, מצנפת שיער ומשקפי בטיחות.

לפני פתיחת מיכל המשלוח בתוך מכסה המנוע, הניחו בהם את כל האספקה והכלוב ורססו את החלק החיצוני שלהם באלכוהול. ועם הגעת המשלוח, הניחו את קופסת החיות שהתקבלה במכסה המנוע ורססו אותה גם באתנול 70%. ישנן שתי אפשרויות לכלוב סטרילי, או כלוב סטנדרטי שנעטף ועוקר בקיטור, או יחידות חד פעמיות שעברו עיקור באמצעות הקרנה על ידי הספק.

התחל את הליך הפריקה על ידי פתיחת המזון הסטרילי, ולאחר מכן פתיחת תיבת ההובלה. בשלב זה, על המטפל להשליך את זוג הכפפות הסטריליות הראשון. לאחר מכן, האדם הלא סטרילי פותח את הכלוב הסטרילי ומעביר אותו באופן אספטי למטפל בבעלי חיים שלאחר מכן מסיר את מכסה המנוע ואת מכסה מוט התיל, ומניח אותם הפוכים במכסה המנוע. לאחר מכן, צינור הלגימה בכלוב מתמלא במים בתחנה הממוקמת במכסה המנוע. לבסוף, המטפל בבעלי חיים מכניס את החיה לכלוב, מאבטח אותה עם מכסה מוט התיל, מוסיף מזון ומציב את מכסה המנוע במקומו. שים לב שמפוח מכסה המנוע צריך להישאר דולק כל הזמן כדי לשמור על הסביבה הסטרילית. בסוף, האדם הלא סטרילי מוציא את הכלוב המאוכלס ממכסה המנוע ומניח אותו על מתלה מתאים. כדי למנוע זיהום צולב אפשרי בין קבוצות, על המטפל בבעלי חיים להחליף כפפות לאחר כל מכולת משלוח.

להחלפת כלובים של בעלי חיים מדוכאי חיסון, הכנת מכסה המנוע והכלובים וציוד ההגנה האישי זהים לפריקת בעלי חיים אלה. וטכניקת ההעברה זהה לבעלי החיים בעלי היכולת החיסונית, אך בתנאים סטריליים.

עכשיו בואו נדון בתנאי דיור הולמים לבעלי החיים, שהוא היבט חשוב נוסף במתן טיפול חיוני. עכברים וחולדות שוכנים בעיקר בכלוב מסוג קופסת נעליים עם תחתית מוצקה המכילה חומר מצעים. כלוב העכברים הטיפוסי מספק 75 אינץ' רבועים של שטח רצפה, המתאים למקסימום 5 עכברים בוגרים. מצד שני, כלוב חולדות הוא בשטח של 142 אינץ' רבוע והוא מתאים ל-2 חולדות בוגרות. כלובים סטטיים מכוסים בדרך כלל במכסה מוט תיל וחומר פילטר מתווסף מעל החלק העליון של הכלוב כמכסה מנוע. לכלובים מאווררים בנפרד, או IVC, יש גם מכסה מוט תיל ומכסה מנוע, אך הם מונחים על מתלה המספק זרימת אוויר לתוך הכלוב. זה מבטל את הצורך להחליף את הכלוב בתדירות גבוהה כמו כלובים סטטיים, מה שעשוי להועיל לבעלי חיים מדוכאי חיסון.

לכל מערכות הכלובים יש אספקה לאספקת מזון ומים. ישנם מזינים המונחים בתוך כלוב בעלי החיים או שחלק ממכסה מוט התיל משמש לאחסון מזון. יש להניח מזון כך שלא יתלכלך על ידי בעלי החיים. מים מסופקים בדרך כלל באמצעות בקבוק מים המונח בחלק העליון של הכלוב, או באמצעות שסתום שתייה אוטומטי שהוא מרכיב מובנה בכלוב בעלי החיים. לאפשרות שסתום שתייה, כאשר הכלוב מחובר למתלה, מים מועברים לצינור למערכת השקיה אוטומטית שנועדה לענות על צרכי החיה בכל מתקן החי.

המדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה קובע כי יש לחטא את כל כלי הכלוב לפחות כל שבועיים. ייתכן שיהיה צורך להחליף כלובים ואביזרים מסוימים לעתים קרובות יותר בהתאם לרמת הריח והאמוניה במתחם.

עכשיו בואו נדבר על אספקת מזון ומים נאותים לבעלי חיים בעלי יכולת חיסונית ומדוכאי חיסון. ישנם הזנות רבות זמינות מסחרית עם הרכבי חלבון, פחמימות ושומן משתנים. באופן אידיאלי, הזנות צריכות להכיל 15-19% חלבון, 44% פחמימות ו-4-9% שומן. עבור בעלי חיים מדוכאי חיסון, ודא שהמזון עבר סטריליזציה.

מי ברז, או אוסמוזה הפוכה שהם מי RO, יכולים לשמש לבעלי חיים בעלי יכולת חיסונית, אך עבור בעלי חיים חסרי חיסון, מים יכולים להוות מקור לזיהום, ולכן יש לעקר אותם. הסטריליות במים נשמרת על ידי הוספת 2 טיפות של 12 חומצה הידרוכלורית מולרית ל-8 ליטר מי RO, אשר יחמיצו את המים ל-pH של 2.5-3 ויגבילו את צמיחת החיידקים. לאחר מכן שופכים את המים בבקבוקים בודדים ומכסים אותם בנייר אלומיניום. הניחו את מכסי הבקבוקים עם צינורות הלגימה בנפרד בשקית חיטוי, והכניסו הכל לחיטוי לעיקור אדים.

עכשיו בואו נדון בתנאים הסביבתיים הסטנדרטיים החיוניים לטיפול בבעלי חיים.

ברמת הכלוב, דיור סוציאלי הוא חובה אלא אם כן יש הצדקה מדעית או אם בעל חיים אינו תואם לכל האחרים. העשרת הסביבה בבקתות נייר וחומרי קינון מאפשרת לבעלי החיים להפגין התנהגויות ספציפיות למינים כמו בניית קן ומחילה, מה שבתורו מפחית את רמת הלחץ ומגביר את הרווחה הכללית של בעלי החיים. חומרי קינון מספקים גם אזור שינה רווי בפרומונים מרגיעים המסייעים בשיכון של מספר עכברים זכרים באותו כלוב. כפי שהוזכר קודם, העברת אזור הקינון לכלוב הנקי עם החלפת הכלוב מסייעת במניעת תוקפנות, במיוחד אצל זכרים, מכיוון שבעלי החיים מוכנסים לסביבה חדשה. עבור בעלי חיים עירומים אתימיים, יש לשקול לספק מצעים נוספים וחומרי קינון מסוג נייר מגורר בכלובים שלהם כדי לסייע בוויסות החום.

ברמת החדר, הטמפרטורה לעכברים וחולדות צריכה להיות בין 68 ל-79? F. רמת הלחות בחדר צריכה להיות 30-70%, מכיוון שרמות נמוכות יותר עלולות לגרום למצב המכונה זנב טבעת. הפרמטר השלישי בחדר הוא תאורה. זה כולל עוצמת אור ומחזורים. בדרך כלל, חדר החיות מוגדר למחזור אור של 12 שעות / 12 שעות חושך. עוצמת התאורה צריכה להשתנות בהתאם לפעילות בחדר. כאשר טכנאים עובדים, ניתן להשתמש ברמות תאורה גבוהות יותר. עם זאת, יש להוריד אותו לכ-325 לוקס לאחר סיום כל הפעילות. לבסוף, יש לשלוט בקפידה גם על זרימת האוויר בתוך החדר. מינימום של 10-15 החלפות אוויר של 100% אוויר צח אמורים להתרחש בכל שעה. זה מפחית את החיידקים והריחות בחדר החיות.

לבסוף, בואו נראה כיצד חוקרים משתמשים בידע הזה על דיור, תזונה והעדפות סביבתיות של חיות מעבדה בניסויים שלהם.

כפי שצוין קודם לכן, חיות מעבדה בדרך כלל מפגינות התנהגות של בניית קנים, מה שמפחית מתח, וחוקרים השתמשו בזה כאינדיקטור לרווחת בעלי חיים. בניסוי הספציפי הזה, מדענים פיתחו מערכת בלתי משוחדת כדי לדרג את הקן שנבנה ולאחר מכן השתמשו בה כדי לחקור את השפעת טמפרטורת הסביבה על התנהגות בניית הקן. כפי שניתן לראות, עלייה בטמפרטורה גרמה לירידה משמעותית בציון, מה שמדגיש את תפקיד הטמפרטורה שמסביב לרווחת בעלי החיים.

בהתחשב בכך שעכברים וחולדות אוהבים פחמימות, חוקרים השתמשו במזון בצורות שונות כדי לבחון את התפקוד המוטורי של בעלי חיים. זה כולל ניתוח מיומנות במהלך סוגים שונים של משימות טיפול במזון, ובחינת התנהגות הגעה לאחר התערבויות כירורגיות או תרופתיות.

לבסוף, ידוע שעכברים וחולדות הם ליליים והם לא מעדיפים אזורים מוארים. מדענים משתמשים בידע הזה כדי לבנות סביבה לחקר חרדה במינים אלה. לדוגמה, כאן החוקרים הכניסו בעלי חיים לשדה פתוח פשוט וחקרו את הזמן שבילו עכברי הבר והנוקאאוט באזורי ההגשה הפנימיים והחיצוניים, כדי לנתח את ההשפעה של הפלת גנים על התנהגות דמוית חרדה.

זה עתה צפיתם בהקדמה של JoVE להליכי טיפול חיוניים בעכברים וחולדות. כעת עליכם להבין טוב יותר את האמצעים שיש לנקוט כדי להבטיח שהסביבה והטיפול בבעלי חיים אלה לא יגרמו נזק לבריאות בעלי החיים ועליכם גם לדעת כיצד חוקרים יכולים לשנות את הפרמטרים הללו כדי להשיג מטרות מדעיות שונות. כמו תמיד, תודה שצפית!

Questions that this video will help you answer

Explore More Videos

Animal Care Procedures

Immunocompromised Animals

Housing Conditions

Personal Protective Equipment

Animal Transfer Station

Environmental Requirements

Food Water Supply

Sterile Technique

Experimental Applications