Question 1

מהו ההבדל בין חיידקים גרם-חיוביים לחיידקים גרם-שליליים?

Accepted Answer

חיידקים גרם-חיוביים הם בעלי שכבת פפטידוגליקן עבה השומרת על צביעת קריסטל ויולט, ולכן הם נראים בסגול כהה. חיידקים גרם-שליליים הם בעלי שכבת פפטידוגליקן דקה יותר ותכולת ליפידים גבוהה יותר, ולכן הם מאבדים את הצבע הסגול במהלך הסרת הצבע ונצבעים בצביעת נגד באדום על ידי ספראנין, הנקשר לשכבת הליפופוליסכריד שלהם.

Question 2

מדוע משתמשים בקיבוע בחום בצביעת גרם אך לא בצביעת קפסולה?

Accepted Answer

קיבוע בחום מקבע את התאים הבקטריאליים לזכוכית הנספח והופך אותם לקולטים יותר של צבעים בצביעת גרם. עם זאת, בצביעת קפסולה נמנעים מקיבוע בחום מכיוון שהוא עלול לפגוע בקפסולה או לייבש אותה, מה שיוביל לתוצאות שליליות שגויות, וכן עלול לכווץ את התאים, דבר היוצר אזור בהיר המדמה קפסולה וגורם לתוצאות חיוביות שגויות.

Question 3

כיצד צביעת קפסולה חושפת קפסולות חיידקיות?

Accepted Answer

צביעת קפסולה משתמשת בצביעה שלילית, שבה מיושם צבע חומצי כגון Congo red כדי לצבוע את הרקע ואת התאים הבקטריאליים, בעוד שהקפסולות נותרות ללא צבע. הקפסולה נראית כהילה שקופה סביב התאים הבקטריאליים הצבועים בסגול על רקע כהה, דבר ההופך אותה לנראית תחת מיקרוסקופ אור.

Question 4

מהן אנדו-ספורות ומדוע קשה לצבוע אותן?

Accepted Answer

אנדוספורות הן מבנים רדומים, עמידים ולא רבמאיים שחיידקים מייצרים בתנאים קשים, כגון טמפרטורות קיצוניות או התייבשות, כדי להבטיח את הישרדותם. קשה לצבוע אותן בטכניקות סטנדרטיות כיוון שהן אינן חדירות למספר רב של צבעים, דבר המצריך שיטות מיוחדות כגון טכניקת Schaeffer-Fulton עם malachite green וחום.

Question 5

אילו צבעים מתקבלים מצביעת אנדוספורות ועל מה הם מעידים?

Accepted Answer

בצביעת אנדוספורות (endospores), תאים וגטטיביים מופיעים בגוון ורוד-אדום לאחר צביעה נגדית בספראנין, בעוד שאנדוספורות שומרות על צביעת המליכיט הירוק ומופיעות בגוון כחול-ירוק. צבעים מובחנים אלו מאפשרים להבדיל בין חיידקים יוצרי נבגים לחיידקים שאינם יוצרים נבגים, ומאשרים את נוכחותם של נבגים בדגימה שעלולה להוביל לזיהום חיידקי.

Question 6

כיצד ניתן להשתמש בצביעת גרם כדי לזהות מורפולוגיה וסידור של חיידקים?

Accepted Answer

לאחר צביעת גראם, ניתן לבחון תאים חיידקיים תחת מיקרוסקופ אור כדי לקבוע את צורתם ואת סידורם. קוקים (Cocci) הם חיידקים עגולים, בעוד שבצילים (Bacilli) הם בעלי צורה של מקל. חיידקים עשויים להסתדר כתאים בודדים, זוגות, שרשראות או צבירים, ומאפיינים מורפולוגיים אלו מסייעים בסיווג ובזיהוי של החיידקים.

Question 7

מדוע צביעה שלילית נחוצה לצפייה בקפסולה?

Accepted Answer

לקפסולות יש הרכב לא-יוני והן נוטות לדחות צבעים, מה שהופך שיטות צביעה פשוטות לבלתי יעילות. צביעה שלילית פועלת על ידי צביעת הרקע והתאים בעוד שהקפסולה נותרת ללא צבע, ובכך היא יוצרת ניגודיות. גישה זו מונעת קיבוע בחום, שעלול לפגוע בקפסולה ולהוביל לתוצאות שגויות בעת שימוש בתרביות טהורות ובידוד של מושבות חיידקים בודדות באמצעות זריעה בקוים.

מיקרוסקופיה וכתמים: גרם, כמוסה וכתמים אנדוספור - חידון הערכה