Name: השתלת רקמות מהונדסות בלב החולדה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-06-24T00:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 59 s
Description: למדו פרוטוקול ניתוחי להשתלת רקמות מהונדסות בלב חולדה. שיטה זו מייצרת מסלול מוליך חשמלי חלופי בחריץ ה-AV ומספקת מודל קליני לטיפול בחסם לב מלא בילדים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכת על ידי מענקי מחקר מן המכון הלאומי לבריאות (HL068915; HL088206) ותרומות לקרן הולכה לב בבית החולים לילדים בבוסטון.

חלק 1: אינדוקציה של הרדמה כללית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חולדה 200-250 גרם לואיס הוא הרדים עם קטמין מ"ג / ק"ג 50 ו -4 מ"ג / ק"ג Xylazine מוזרק עם מחט 30 G לחלל intraperitoneal. הבטן העליונה והחזה הנכונים מקוטע להסיר שיער באתר חתך לנקות ביסודיות עם אתנול 70% ולאחר מכן פתרון povidone-יוד חיטוי מקומי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעל חיים הוא מחובר לצינורות endotracheally באמצעות קטטר תוך ורידי 16 G מחובר למכונת הנשמה חיה קטנה (Apparatus הרווארד). הנשמה מחוברת מאדה לספק 0.5% עד 1.0 Isoflurane (Baxter) מעורבב עם חמצן 100% כדי לשמור על הרדמה כללית. קצב הנשימה ונפח גאות מותאם על פי משקל הגוף של החולדה. חיה ממוקם על כרית חימום (הוד Thermo-Pad), כדי לשמור על חום הגוף במהלך ההליך הכירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לעקוב אחר קצב הלב ואת הרוויה חמצן בכל ההליך הכירורגי מכשיר pulsoximeter (Nellcor) נחתך על אחת הגפיים בחזרה. </li></ol> חלק 2: פתיחת בית החזה ואת השתלת רקמות מהונדסות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> האתר כירורגית מוכן עם כורכת כירורגי סטרילי כי הוא החזיק במקום מלחציים עם מגבת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבצעים חתך מן antero-לרוחב הקיר לרוחב של החזה הימני, ממש מעל המרחב צלעי ה 5. החלל הפנימי של החזה הוא לגשת בחלל צלעי 5 וה מפשק קטן (Roboz) ממוקמת על מנת למקסם את התצוגה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קרום הלב היא לחתוך ממש מעל התוספתן של אטריום הנכון החדר הימני מהבסיס לכיוון הקודקוד של הלב. לאחר מכן, חריץ ה-AV מזוהה ואת השכבה epicardial סמוך למשולש aorto-atrio-חדרית היא הקניטה בעדינות מזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 7-0 Prolene תפר (Ethicon) ממוקם דרך הכתף הבסיס של החדר הימני. 2 x 2 x 2 מ"מ הוא חתיכת גזור מן לבנות את רקמות מהונדסות וממוקמים בתוך חריץ ה-AV וקשר מעדנות עם תפר Prolene. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתחום כירורגית לוודא שהדימום ושני תפרים Vicryl 4-0 (Ethicon) ממוקמים בין העליון מרחב צלעי נמוך סגירת כלוב הצלעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Pneumothorax נראית לעין הוא נחפר על ידי הרחבת הריאות בדרך של מכונת ההנשמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קיר החזה סגור אז בשכבות. </li></ol> חלק 3: שחזור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעוד החיה מתאושש מהניתוח, האתר הוא חתך שחדר עם 5 מ"ל 0.25% Bupivacaine [2]. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החיה היא extubated הבאים הגמילה ממכונת ההנשמה והוא חזר כלוב עם מצע טרי פעם אחת הוא ער לחלוטין sternal. עכברוש ניתנת לאחר מכן 0.01 מ"ג / ק"ג עצירות כאבים תת עורי כל 12 שעות במשך 3 ימים. </li></ol> חלק 4: תוצאות נציג אם מבוצעת כראוי, תיאר כירורגי של השתלת רקמות מהונדסות ב AV-חריץ של הלב (איור 1) תוצאות התאוששות יותר מ 90% של בעלי החיים. <img src="/files/ftp_upload/1139/Figure1.jpg" alt="איור 1"> באיור 1. תצלום של הלב החשוף מראה את האתר של השתלת רקמות מהונדסות.

<ol><li>Choi, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+conduction+through+engineered+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Cardiac conduction through engineered tissue.</a> Am J Pathol. 169, 72-85 (2006).</li>
<li>Shin, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-dose+systemic+bupivacaine+prevents+the+development+of+allodynia+after+thoracotomy+in+rats.+Anesth+Analg%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Low-dose systemic bupivacaine prevents the development of allodynia after thoracotomy in rats. Anesth Analg.</a> 107, 1587-1591 (2008).</li>
<li>Horstick, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+procedure+affects+physiological+parameters+in+rat+myocardial+ischemia%3A+need+for+mechanical+ventilation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Surgical procedure affects physiological parameters in rat myocardial ischemia: need for mechanical ventilation.</a> Am J Physiol. 276, H472-H479 (1999).</li>
</ol>

ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי טיפול בבעלי חיים מוסדיים ועדת השתמש ב מבית החולים לילדים בבוסטון זה.

לקבלת תוצאה חיובית כדי ההליך הכירורגי, חשוב שצריך לצנרר ו פולשני לאוורר את החיה. אם הוא עכברוש מסומם בפשטות מותר לנשום באופן ספונטני, הריאות הן בהכרח התמוטטות בעוד החזה נפתח עקב הצדר נפוץ במכרסמים. לפני שסגר את החזה, pneumothorax כל צריך לחסל לחלוטין הריאות מלא מורחבת להפחית atelectasis. אחרת, הגמילה ממכונת ההנשמה וההחלמה יהיו מוצלחים ובעלי חיים יהפוך hypercapnic ו / או hypoxic [3]. הסרה של רקמת epicardial בתוך חריץ ה-AV הוא מסוכנים ואת עלולה לגרום לדימום ורידי מסיבי מן...

<table><tbody><tr><td>Thermo Pad בגודל 7x4, 4 ליחידה באריזה</td><td>ציוד</td><td>Hood Thermo-Pad, Summerland, BC Canada</td><td>דגם 704R</td><td></td></tr><tr><td>מנשם Inspira ASV</td><td>ציוד</td><td>Harvard Apparatus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מד-חמצן דופק נייד</td><td>ציוד</td><td>Nellcor</td><td>N20PA</td><td></td></tr><tr><td>מסיח (Retractor)</td><td>ציוד</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-6514</td><td></td></tr><tr><td>איסופלוראן (Forane)</td><td>ריאגנט</td><td>Baxter International Inc.</td><td>1001936040</td><td></td></tr><tr><td>קטאמין HCl</td><td>ריאגנט</td><td>Hospira Inc.</td><td>RL-0065</td><td></td></tr><tr><td>קסילזין (AnaSed)</td><td>ריאגנט</td><td>Lloyd, Inc.</td><td>LB15705A</td><td></td></tr><tr><td>בופרנורפין HCL להזרקה</td><td>ריאגנט</td><td>Bedford Laboratories</td><td>Div-BUP-P00</td><td></td></tr><tr><td>בופיבקאין 0.25%</td><td>ריאגנט</td><td>Hospira Inc.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

השתלת רקמות מהונדסות בלב החולדה

Implantation of Engineered Tissue in the Rat Heart

ניתוח מכרסמים לעתים קרובות מרכיב חשוב בהערכת התועלת של רקמות מהונדסות. מגוון רחב של ניתוחים ניתן לבצע חולדות מעבדה או עכברים משותפים אלה לעתים קרובות לשמש שלב ביניים בין העליונה הספסל ניסויים ניסויים בבעלי חיים גדולים או בניסויים בבני אדם. בהתחשב בכך מכרסמים לספק מערכת מודל הוקמה, העלות האפקטיבית, ו-פיזיולוגית רלוונטי אשר לבדוק שילובים הרומן של חומרים פיגומים התאים, הם מתאימים במיוחד ללימודי הנדסה רקמות וכלי דם. נכון להיום, אנו מתארים הליך ניתוחי לב פתוח להשתיל רקמות מהונדסות המכיל ובתאים myogenic בתוך החדרים והעליות (AV) חריץ של לב חולדה. שתלים אלו נועדו ליצור צינור חשמל בין אטריום הנכון החדר הימני עם המטרה הסופית של מתן טיפול חלופי השתלת קוצב לב קונבנציונאלי מטופלים ילדים עם לחסום לב שלם [1]. רקמות מהונדסות הוא מושתל ה-AV-Groove באמצעות פתיחת בית החזה. לענייננו, חולדות לואיס מורדמים ומאוורר פולשני כדי לשמור על לחץ חיובי בדרכי הנשימה במהלך ההליך הכירורגי סטרילית. הגישה אל הלב מבוצע על ידי פתיחת בית החזה זכות דרך חתך לרוחב antero-ב 5<sup&gt; ה</sup&gt; צלעי בחלל. לבנות רקמת קבוע בחריץ ה-AV באמצעות תפר אחד 7-0 Prolene וממוקמים בין החדר אטריום ימין על החלק הגחוני של הלב. Epicardium יוסר חלקית כדי לאפשר מגע ישיר בין התאים הנמען שריר הלב לבין אלה הכלולים רקמות מהונדסות. לאחר ההשתלה, בית החזה נסגר בשכבות, pneumothorax כל הוא פונה, והוא בעל החיים extubated ומטופלים עם משכך כאבים.

כאן אנו מתארים הליך ניתוחי לב להשתיל רקמה מהונדסת העליות והחדרים (AV), חריץ של עכברוש לואיס מבוגר.

ניתוחים במכרסמים מהווים לעיתים קרובות מרכיב חשוב בהערכת התועלת של רקמות מהונדסות. ניתן לבצע מגוון רחב של הליכים כירורגיים ב...

שלום, אני זו מהמעבדה של דאגלס קאוואן במחלקה לאנסטזיולוגיה בבית החולים לילדים ובבית הספר לרפואה של הרווארד. היום נדגים לכם הליך להשתלת רקמה מהונדסת בלב של חולדה. אנו משתמשים בהליך זה במעבדה שלנו כדי ליצור מסלול הולכה חשמלי אלטרנטיבי בין העליות לחדרים.אם כן, בואו נתחיל. סרטון זה מתאר השתלה כירורגית של מבנה רקמה מהונדס המכיל מיובלסטים. פרוטוקול ניסיוני זה להוכחת היתכנות מספק ראיות לכך שניתן לייצר יציקות רקמה in vitro ולהשתילן in vivo במקבלים הזקוקים לשיקום של איבר שאינו תפקודי.הסרטון הנלווה מתאר כיצד תאים נשפכו לתוך התבנית המתאימה לחריץ ה-AV של לב חולדה בוגרת. הפרוטוקול מתחיל בהרדמה של חולדת לואיס השוקלת 200 עד 250 גרם באמצעות תערובת של קטמין ואיליין המוזרקת באמצעות מחט בקוטר 30 gauge לחלל הפריטונאום. ברגע שהחולדה מורדמת לחלוטין ואינה מגיבה לצביטה בכף הרגל, הכינו את הפרוצדורה הכירורגית על ידי גילוח שיערה של הבטן העליונה והחזה הימני.לאחר מכן, צד החתך מנוקה ביסודיות עם 70%ethanol, ולאחריו תמיסת povidone iodine, אנטיספטיקה מקומית. באמצעות קטטר תוורידי במידה 16 gauge, החולדה עוברת אינטובציה ומחוברת למנשם לבעלי חיים קטנים. המנשם מחובר למאדה המכוון לספק 0.5 עד 1%ISO fluorine מעורבב עם 100%oxygen לצורך שמירה על הרדמה כללית.קצב הנשימה ונפח השאיפה והנשיפה מותאמים למשקל הגוף של החולדה. כדי לשמו

implantation-of-engineered-tissue-in-the-rat-heart

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

שיטות להכנת ג'ל מטריצה ​​בזריקות מרקמות decellularized והזרקת אותו לתוך שריר הלב...

ייצור של חומרים בזריקות נגזר ביולוגית של הנדסת רקמות שריר הלב

פליטת אור הדמיה עבור הערכת התגובה החיסונית לאחר השתלת רקמת לב הנדסי (EHT)

השרשה של biograft לטיפול באוטם שריר לב שנגרם על ידי קשירת LAD במודל מכרסם דרשה כמקובל שני ניתוחי לב פתוח. על מנת להקטין את התמותה ולספק תנאים אופטימליים לקיבוע של biomatrices המוצק והדביק הקשורים לתאים, נהלים פולשנית פותחו.

טיפול המבוסס על תאים לאי ספיקת לב בחולדה: חדר זוגי פתיחת בית החזה לאוטם שריר הלב וepicardial השרשה של תאים וBiomatrix

זהו קו מנחה לבניית רקמת כלי דם in vivo באמצעות לולאה עורקית מיקרו-כירורגית או תצורת פדיקל זורם בתוך תא הנדסת רקמות. ניתן להשתמש ברקמות כלי הדם שנוצרות להתחדשות איברים והחלפת פגמים ברקמות, כמו גם לבדיקת תרופות ומודלים של מחלות.

הנדסת רקמות ידי עצמותי כלי דם בתוך<em&gt; In vivo</em&gt; הנדסת רקמות קאמרית

כאן אנו מציגים פרוטוקול להצפנה אינדוקציה של שמאל cryoinjury חדרית ואחריו ההשתלה של תיקון שריר הלב, נגזר iPS-התא האנושי cardiomyocytes במודל של שפן.

השרשת נגזר hiPSC תיקונים שריר הלב לאחר פציעה שריר הלב במודל שפן

אנו מתארים מודל של הטרוהנושא השתלת לב הבטן בחולדות, רומז שינויים של אסטרטגיות נוכחיות, אשר להוביל גישה כירורגית פשוטה. בנוסף, אנו מתארים מודל דחייה הרומן על-ידי הזרקה באוזן של תאים חיוניים שרירי הלב, המאפשר ניתוח נוסף השתלת אימונולוגיים בחולדות.

מודל אימונוולוגי עבור הלב הטרוולפית ושריר הלב השתלת תא בחולדות

פרוטוקול זה מתאר את ההשתלה של סטנטים כליליים אנושיים לתוך אב העורקים הבטן של חולדות עם apoE-/- רקע באמצעות גישה טרנס-ירך. בהשוואה למודלים אחרים של בעלי חיים, מודלים מוריניים נושאים את היתרונות של תפוקה גבוהה, רבייה, קלות טיפול ודיור, וזמינות רחבה של סמנים מולקולריים.

השתלת סטנטים כליליים בגודל אנושי לתוך אב העורקים בטן עכברוש באמצעות גישה טרנס-ירך

פרוטוקול זה מתאר שיטה פשוטה ויעילה להשתלת עלוני מסתם אבי העורקים מתחת לכמוסה הכליתית כדי לאפשר מחקר של אלוראקטיביות של מסתמי הלב.

מודל פשוט להשתלת מסתם לב הטרוטופי במכרסמים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטות לביטוי טרנסגני בלבבות חולדות ועכברים על ידי הזרקה ישירה של הנגיף בהנחיית אקוקרדיוגרפיה. שיטות להערכת הרגישות של לבבות להפרעות קצב חדריות על ידי גירוי חשמלי מתוכנת של לבבות מבודדים, Langendorff-perfused מוסברים גם כאן.

ביטוי טרנסגני נגיפי בלבבות מכרסמים והערכת הסיכון להפרעות קצב לב

עבודה זו מציגה מודל חייתי של פיברוזיס המושרה על ידי מעבר אנדותל למזנכימלי, כפי שניתן לראות במומים לבביים מולדים כגון היצרות קריטית של אבי העורקים או תסמונת לב שמאל היפופלסטית, המאפשרת הערכה היסטולוגית מפורטת של רקמות, זיהוי מסלולי איתות רגולטוריים ובדיקת אפשרויות טיפול.

מודל השתלת לב חולדה הטרוטופי בילוד לחקר המעבר מאנדותל למזנכימלי

כאן, מוצג פרוטוקול להשתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת השרוול, המספק מודל בעל חיים מתאים לחקירת מנגנוני התחדשות רקמות כלי הדם.

השתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת שרוול

למדו פרוטוקול ניתוחי להשתלת רקמות מהונדסות בלב חולדה. שיטה זו מייצרת מסלול מוליך חשמלי חלופי בחריץ ה-AV ומספקת מודל קליני לטיפול בחסם לב מלא בילדים.

השתלת רקמות מהונדסות בלב החולדה

גלה סרטונים נוספים