Name: הכנת עוברים אלקטרונים מיקרוסקופית של תסיסנית לב עוברי צינור (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-12-21T10:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 23 s
Description: למדו הכנת עוברי Drosophila למיקרוסקופיה אלקטרונית שידור לחקר מורפוגנזה של הלב העוברי. שיטה זו מאפשרת הדמיה ברזולוציה גבוהה של מבני תאים וממברנות בסיס.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

העבודה שלנו על היווצרות צינור לב נתמך על ידי קרן המדע הלאומית גרנט (ID פרס 0744165) כדי SGK

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טרי להכין 2ml של פתרון מקבע המכיל Glutaraldehyde 12.5% ​​במאגר Cacodylate 50mm (pH7.4) בתוך צנצנת זכוכית 20 מ&quot;ל הנצנץ. הוסף 8ml של n-heptane ומנערים במרץ. אפשר להפריד בין שני שלבים. הסר השלב העליון המכיל n-heptane רווי glutaraldehyde, מקום לתוך בקבוקון scintillation נקי ומניחים בצד. זה יהיה הפתרון מקבע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> איסוף עוברים שעה 0-20 באמצעות אוסף העובר קאמרית, שהוא סל קטן עם להוסיף רשת נשלפים. הסר את הקרום החיצוני סיסית על ידי השריית עוברים בפתרון אקונומיקה 50% במשך 2-3 דקות, או עד עוברי לצוף אל פני השטח של אקונומיקה. לשטוף ביסודיות עם עוברי ddH20 ואת כתם על מגבת נייר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים, להרים להכניס רשת אשר מכוסה עוברים dechorionated ומקום לתוך הפתרון מקבע, המאפשר עוברים ליפול מן הרשת. אפשר לתקן את עוברי עבור 1.5 שעות ב 4 ° C תוך כדי ערבוב על Nutator. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכינו צלחת פטרי מצופה קלטת דו צדדית. הסר עוברים מן מקבע באמצעות pipet פסטר ומניחים אותם על גבי משטח מודבק של פטרי dish.Transfer העוברים בסכום מינימלי של פתרון מקבע למנוע heptane ב מקבע מ המסת הדבק של הקלטת. נער את צלחת פטרי כדי ליצור שכבה יחידה של העוברים. מניחים צלחת פטרי במנדף עד מתאדה heptane. הוסף מספיק Tween20 PBS + 0.1% כדי לכסות את העוברים. יד devitellinize בסוף שלב 16 עוברים תחת מיקרוסקופ לנתח עם מחט טונגסטן בוטה. שחזור עוברים עם pipet פסטר לתוך צינור מ&quot;ל 1.5 microfuge. צעדים 5-7 מתבצעים בתוך צינור זה microfuge. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף עוברים 0.1M Cacodylate חיץ, pH 7.4 ואז שלאחר לתקן בתמיסה המכילה tetroxide אוסמיום 1% ב 0.1M Cacodylate חוצץ, pH 7.4 שעה 1 בטמפרטורת החדר. שטפו עוברי עם 0.1M Cacodylate חיץ, pH 7.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מייבשים עוברים בסדרה מדורגת של אתנול, אצטון. מייבשים עוברים עם אתנול 50% למשך 10 דקות, ואחריו אתנול 70% למשך 10 דקות. ואז מייבשים אצטון ב 90% במשך 10 דקות, ושני אצטון 100% מדרגות 10 דקות כל אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר אצטון ואז להתחיל את תהליך חדירת ידי הוספת שרף-EPON Spurr 01:01: תערובת אצטון על עוברים. מיקרוגל במשך שלוש דקות באמצעות מיקרוגל Biowave Pelco Pro תוך שמירה על מדגם בלחץ ואקום. החל הלחץ ואקום המדגם עבור חמש דקות נוספות לאחר מיקרוגל הסתיים. הבורסה שרף 01:01, תערובת אצטון עם שרף-EPON Spurr 100% מיקרוגל שוב תחת לחץ ואקום. 100% Exchange-EPON Spurr שרף בפעם האחרונה, ו מיקרוגל בלחץ ואקום. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש pipet פסטר, העוברים מועברים מהצינור microfuge לעצב הטבעה סיליקון. יישר עוברים בשורה כזאת, כי בסופו האחורי של העובר מתיישר עם הקצה החד של עובש. אופים בתנור 70 ° C במשך הלילה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר מדגם ולהתכונן חתך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בגין קיצוץ בסעיפים 1μm באמצעות סכין יהלום histo ריקרט Ultracut E Microtome. שימו לב, כאשר סעיף העובר הראשון הוא הגיע. מנקודה זו, לחתוך 100μm לתוך המדגם. הסר קטע באמצעות לולאה, ואת המקום לשקופית זכוכית. בקצרה החום סעיף על פלטה חשמלית. הכתם בסעיף באמצעות ירידה של מתילן בלו. תחת מיקרוסקופ אור לזהות את לומן לב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים סעיפים 90 ננומטר באמצעות Ultra יהלום 45 ° סכין ריקרט Ultracut E Microtome. תרימי מספר מקטעים על רשת הנחושת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רשתות מגואלות אצטט uranyl 3% רווי באתנול 50% למשך עשר דקות ולאחר מכן לשטוף שלוש פעמים במים מזוקקים כפול. ואז, רשתות הם מוכתמים להוביל ציטרט (0.04gms מומס במים מזוקקים 10 מ&quot;ל כפול NaOH 10M 100 מ&quot;ל) עבור 2.5 דקות בתא המכיל כדורי NaOH ליצור CO 2 ללא הסביבה. רשתות הן שטפה שלוש פעמים במים מזוקקים כפול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדורים נבחנים עם מיקרוסקופ אלקטרונים JEOL 1200EX ב 80Kv, וצילם עם מצלמה דיגיטלית AMT. </li></ol>

<ol><li>Tepass, U., Hartenstein, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Development+of+Cellular+Junctions+in+the+Drosophila+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev.+Biol%22%5BJournal%5D)">The Development of Cellular Junctions in the Drosophila embryo.</a> Dev. Biol. 161, 563-596 (1994).</li>
<li>Sullivan, W., Ashburner, M., Hawley, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSullivan%2C+W+%22Drosophila+Protocols%22">Drosophila Protocols</a>. , (2000).</li>
<li>Santiago-Martinez, E., Soplop, N. H., Patel, R., Kramer, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repulsion+by+Slit+and+Roundabout+prevents+Shotgun%2FE-cadherin-mediated+cell+adhesion+during+Drosophila+heart+tube+lumen+formation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Repulsion by Slit and Roundabout prevents Shotgun/E-cadherin-mediated cell adhesion during Drosophila heart tube lumen formation.</a> J. Cell Biol. 182, 241-248 (2008).</li>
</ol>

המורפוגנזה של הצינור לב תסיסנית עובריים התפתחה כמערכת מודל חשוב ללימוד הידבקות התא שינויים בצורת התא במהלך ההתפתחות העוברית. אחד האתגרים העומדים בפני בלימוד מבנה זה הוא כי לומן של הצינור לב קשה לחזות בעוברים הר שלם. הטכניקה הפגינו וידאו זה, אשר הותאמה מהנהלים שתואר לעיל 1-2, הוכיח להצליח יעיל ומהימן ניתוח מספר לא מבוטל של גנוטיפים עבור צינור לב היווצרות לומן 3.

הכנת עוברים אלקטרונים מיקרוסקופית של תסיסנית לב עוברי צינור

Preparation of embryos for Electron Microscopy of the Drosophila embryonic heart tube

המורפוגנזה של<em&gt; תסיסנית</em&gt; צינור הלב העוברי התפתחה כמערכת מודל יקר ערך לחקר נדידת תאים, תאים תאים הידבקות שינויים בצורת התא במהלך ההתפתחות העוברית. אחד האתגרים העומדים בפני בלימוד מבנה זה הוא כי לומן של הצינור לב, כמו גם את תכונות הממברנה כי הם קריטיים ליצירת צינור לב, קשה לחזות בעוברים הר שלמה, בשל גודלו הקטן של הצינור לב ו התוך lumenal יחסית העובר בחלל. השימוש במיקרוסקופ אלקטרונים השידור מאפשר הגדלה גבוהה יותר של מבנים אלה ונותן את היתרון של בדיקת העוברים חתך, אשר בקלות מגלה את גודלו וצורתו של לומן. בסרטון הזה, אנו בפירוט את תהליך קיבוע אמין, הטבעה, ואת חתך של שלב מאוחר<em&gt; תסיסנית</em&gt; עוברים כדי להמחיש את הצינור לב לומן, כמו גם מבנים תאיים חשובים, כולל תאים תאים צמתים הממברנה במרתף.

אנו מתארים תהליך להטבעת קיבעון, חתך, הדמיה של שלב מאוחר<em&gt; תסיסנית</em&gt; עוברים מיקרוסקופית אלקטרונים Trasmission של הצינור לב עוברי. טכניקה זו מאפשרת הדמיה של לומן צינור לב, כמו גם את קרום במרתף, שבו הקווים לומן של הלב.

המורפוגנזה של צינור הלב העוברי של ה-Drosophila התגלתה כמערכת מודל בעלת ערך לחקר נדידה של תאים, הידבקות בין-תאית ותאים...

סרטון זה מסביר כיצד לבצע מיקרוסקופיה אלקטרונית חודרת, הידועה גם כ-TEM, על לב עוברי של דרוזופילה. הלב הפך למערכת מודל בעלת ערך לחקר נדידת תאים, היצמדות בין תאים ושינויים במורפולוגיית התא. טכניקה זו מאפשרת ויזואליזציה של צורת חלל הלב, כמו גם של רכיבים אולטרה-מבניים כגון ממברנות של תאים, צומתים בין תאים וממברנה בסיסית.כדי להתחיל בהליך זה, מכינים תמיסת קיבוע המתאימה למיקרוסקופיה אלקטרונית חודרת של עוברים של drosophila. לאחר מכן, מעבירים תבנית של עוברים מצופים מגיל 0 עד 20 שעות אל תוך תמיסת הקיבוע. עם סיום התהליך, מוציאים את העוברים מתמיסת הקיבוע ומבצעים להם הנדסה (handy ized) בעודם מודבקים לסרט דו-צדדי.בצלחת פטרי המכילה בופר דאיוני, העוברים צפים בבופר ונאספים באמצעות פיפטה. לאחר מכן, העוברים עוברים קיבוע משלים (postfix) ומדרג התייבשות. לאחר חדירת שרף, הם מועברים לתבנית שיבוץ שבה הם מסודרים.את הבלוק שהתקבל חותכים באמצעות סכין יהלום. נתחים נלקחים על גבי רשתות נחושת, נצבעים ונבחנים. שלום, אני נדין לופ מהמעבדה של סוניטה קרמר במחלקה לפתולוגיה ורפואה מעבדתית באוניברסיטה לרפואה ולשיניים של ניו ג'רזי בבית הספר לרפואה של רוברט ווד ג'ונסון.אני רג' פטאל, המיקרוסקופיסט האלקטרוני גם אני מהמחלקה הפתולוגית של PON. היום נדגים לכם הליך להכנה והדמיה של עוברים של oph עבור מיקרוסקופיה אלקטרונית חודרת (transmission electron microscopy).אנו משתמשים בפרוצדורה זו במעבדה שלנו כדי לחקור את המורפוגנזה של הלב ב-Drosophila. אז בואו נתחיל.לפני הטיפול בעוברי הדרוזופילה, הכין תמיסת קיבוע טרייה עבור שיטת חדירת ההפטאן (Heptane permeation) לקיבוע עובריים. בתוך מנדף, העבר בפיפטה שני מיליליטר של תמיסה שהוכנה טרייה המכילה 12.5% glutaraldehyde בבופר Cate אל תוך מבחנת זכוכית לסנצילציה. הוסף שמונה מיליליטר של ADA heptane ונער בעוצמה.לאחר מכן המתינו דקה אחת. לאחר הפרדת שני השלבים, השלב העליון מכיל את ה-ADA heptane, הרווי ב-glutaraldehyde, המהווה את תמיסת הקיבוע. העבירו באמצעות פיפט את השלב העליון לבקבוק נקי והניחו אותו בצד. כדי לאסוף עוברים בני 0 עד 20 שעות, השתמשו בתא לאיסוף עוברים, שהוא סלסילה קטנה עם רכיב רשת נשלף.התחילו בהוצאת צלחת מיץ הענבים המכילה את העוברים והסירו זבובים מתים. לאחר מכן, בעזרת מים ומכחול, שחררו את העוברים מצלחת מיץ הענבים והעבירו אותם לתא איסוף העוברים באמצעות בקבוק לחיצה המכיל מים.שטפו את העוברים משאריות שמרים עודפות מלוחית מיץ הענבים. הסירו את קרום הכוריון החיצוני על ידי השריית העוברים בתמיסת אקונומיקה 50% למשך שתיים עד שלוש דקות או עד שהעוברים צפים אל הפנימה. שטפו היטב במים מזוקקים וייבשו את העוברים על נייר סופג.באמצעות פינצטה, הרים את רכיב הרשת, שאמור להיות מכוסה כעת בעוברי דגים מצופים. הנח את הרשת לתוך נוזל הקיבוע, ואפשר לעוברים לנשור ממנה. הנח לעוברים להיות מקובעים במשך שעה וחצי בטמפרטורה של 4°C תוך כדי ערבוב על רוקר אורביטלי.עם סיום הדגירה, העבירו את העוברים אל צלחת פטרי המרופדת בסרט דביק דו-צדדי, תוך גרירה של כמות מינימלית ככל האפשר של חומר הקיבוע. נערה את הצלחת כדי לפרוס את העוברים לשכבה אחת, ולאחר מכן הניחו אותה במנדף כימי כדי לאפשר להפטאן להתאדות. לאחר שהעוברים התייבשו, כסו אותם בתמיסת בופר המכילה 0.1% tween hand de vize.עוברים בשלב מאוחר של שלב 16 תחת מיקרוסקופ סטריאוסקופי עם מחט טונגסטן קהה. עוברים שעברו דה-קוריוניזציה צפים וניתן לאסוף אותם באמצעות פיפט פסטור; העבירו את העוברים לשפופרת מיקרו-צנטריפוגה של 1.5 מיליליטר. שטפו את העוברים בבופר ציטראט 0.1 מולרי, ולאחר מכן בצעו קיבוע משני ב-1% Osmium tetroxide למשך שעה אחת בטמפרטורת החדר.לאחר האינקובציה, שטפו את העוברים בבופר Cate. שוב, בצעו דהידרטציה לעוברים בסדרה מדורגת של אתנול ואצטון. התחילו ב-50% ethanol למשך 10 דקות, לאחר מכן ב-70% Ethanol למשך 10 דקות, לאחר מכן בצעו דהידרטציה ב-90% acetone למשך 10 דקות, ולבסוף בשלבים של 100% acetone למשך 10 דקות כל אחד.הסיר את האצטון. התחל בתהליך ההספיגה על ידי הוספת תערובת ביחס של אחד לאחד של שרף ספריי ein ואצטון. ודא שהדגימה נמצאת תחת לחץ ואקום וחמם במיקרוגל למשך שלוש דקות.שמרו על לחץ ואקום למשך חמש דקות נוספות. החליפו את תערובת שרף-אצטון בשרף 100% וחממו שוב במיקרוגל תחת לחץ ואקום. החליפו את השרף וחממו במיקרוגל תחת לחץ.פעם אחרונה, לסך של שלושה שלבי חדירה. העבירו את העוברים מהשפופרת של המיקרו-צנטריפוגה לתבנית שיקוע מסיליקון. סדרו את העוברים בשורה כך שהקצה האחורי של העובר יהיה מיושר עם הקצה המצומצם של התבנית.בשל את הבייקון בתנור בטמפרטורה של 70 °C למשך הלילה. לאחר מכן, הוצא את הגוש שהתקבל לצורך חיתוך. השתמש במיקרוטום כדי לחתוך חתכים בעובי של 1 µm מהעוברים.לאחר שבוצעו חתכים בבלוק והעובר נחשף, השתמשו בלולאה כדי להעביר חתך בודד לעל שקף זכוכית, כדי לקבוע אם הושג העומק המתאים להדמיית הלב לפני תחילת התצפית. חממו קצרות את החתך על פלטה מחממת וצבעו את החתך במתילן כחול על ידי הוספת טיפה אחת לשקף, ולאחר מכן חימום קצר.שטוף שוב במים דה-יוניים ובחן את החתך תחת מיקרוסקופ בעומק החיתוך הרצוי. חלל הלב צריך להיות ניתן לזיהוי באמצעות מיקרוסקופ אור כדי לעמוד במגבלות המקום. קצץ שוב את הבלוק כך שיכלול מקסימום חמישה עוברים בחתך רוחב המראים את לב העובר.חתכו חתכים בעובי 90 nanometer באמצעות המיקרוטום. העבירו מספר חתכים לרשת נחושת. צבעו את הרשת ב-3%al acetate למשך 10 דקות, ולאחר מכן שטפו שלוש פעמים במים מזוקקים.כעת צבעו את הרשת בlead citrate למשך שתי דקות וחצי בתא המכיל גרגרי sodium hydroxide כדי ליצור סביבה נטולת carbon dioxide. לאחר הדגירה, שטפו שלוש פעמים במים מזוקקים. בחנו את החתכים באמצעות מיקרוסקופ אלקטרוני ב-80 kilovolts וצלמו בעזרת מצלמת CCD.כדי לקבוע האם עומק החיתוך והשלבים בוצעו כראוי, יש לוודא כי נוצר חלל לב בוגר בין שני ה-cardio blasts של קו האמצע הגבי. כדי לקבוע האם ממברנות התאים שלמות, יש לבחון את חלל הלב לנוכחות של מטריקס חוץ-תאי ולחפש נוכחות של Christie ומיטוכונדריה. כך הצגנו בפניכם כיצד לקבוע את המבנה העל של לב עוברי של drosophila. בעת ביצוע הליך זה.חשוב לזכור לבצע שלב (staging) נכון של עוברי ה-drosophila, למדוד במדויק את רכיבי השרף ולערבב אותם היטב. תודה שצפיתם ובהצלחה בניסוי שלכם.

preparation-embryos-for-electron-microscopy-drosophila-embryonic

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

טכניקה זו חושפת את neuromusculature עובריים תסיסנית עבור אימונוהיסטוכימיה או הקלטה אלקטרו. זה שימושי לחקר אירועי מוקדם בהתפתחות neuromuscular או ביצוע electrophysiology ב מוטנטים שאינם יכולים לבקוע.

מסיק והכנת תסיסנית עוברים הקלטה אלקטרו ונהלים אחרים

טכניקה נדרש לדמיין את הלב הפועם של הזחל...

לדמיין את הלב הפועם תסיסנית</em

אנו מתארים את הליך להכין...

ויזואליזציה של מערכת העצבים כולה עובריים-Mount תסיסנית עוברים

סרטון זה מתאר את ליבו הבוגר של הזבוב, או נקרא אחרת הכלי הגבי דרוזופילה. הפרוטוקול המוצג מדגים הליך דיסקציה לתכשירי לב חי.

הכנת לב דרוזופילה: טכניקה לחקר פיזיולוגיה של הלב בזבוב הבוגר

מקור: Jeong, S. הדמיה של דפוס ההקרנה האקסונלי של נוירונים מוטוריים עובריים ב-Drosophila. J. Vis. Exp. (2017)סרטון זה מדגים את ההדמיה של הקרנות אקסונליות בעוברים Drosophila. תיוג חיסוני של נוירונים מוטוריים, דיסקציה מדויקת לחשיפת מבנים עצביים ומיקרוסקופ ניגודיות של הפרעות דיפרנציאליות חושפים ביחד ארכיטקטורה עצבית מפורטת, תוך שימת דגש על דפוסי ההקרנה האקסונלית.

הדמיה של דפוסי הקרנה אקסונליים של נוירונים מוטוריים עובריים בדרוזופילה

אנו מתארים פרוטוקול להדמיה נפחית של תאים המסומנים בחלבון פלואורסצנטי עמוק בתוך לבבות עובריים שלמים ולאחר לידה. תוך שימוש בשיטות ניקוי רקמות בשילוב עם צביעה שלמה, ניתן לדמות תאים בודדים עם תווית חלבון פלואורסצנטי בתוך לב עוברי או לאחר לידה בצורה ברורה ומדויקת.

הדמיה הותרה עוברית ולבבות אחרי לידה ברזולוצית תא בודד

עבודה זו מפרטת שיטת אימונוהיסטוכימיה סטנדרטית כדי לדמיין תחזיות נוירונים מוטוריים של שלב מאוחר 16 תסיסנית עוברי melanogaster . הכנת הפילה של עוברי קבוע מוכתמים נוגדן FasII מספק כלי רב עוצמה לאפיין את הגנים הנדרשים עבור pathoninding האקסון המנוע ואת ההכרה היעד במהלך התפתחות עצבית.

ויזואליזציה של דפוס היטל אקסונל של נוירונים מוטוריים עובריים ב<em&gt; תסיסנית</em

אנו מציגים את הפרוטוקולים לבחון התפתחות הלב העכבר באמצעות מיקרוסקופ פלורסנטי הר שלם על העכבר עוברי גזור מן חדרית ספציפי MLC-2v-tdTomato כתב טוק-אין עכברים. שיטה זו מאפשרת לנו לבצע בכל שלב של היווצרות חדרית במהלך התפתחות הלב העכבר מבלי מהגידולים שיטות מעבדה הומנית.

ניתוח התפתחות קאמרית הלב במהלך מופרה העכבר באמצעות כל הר Epifluorescence

מוצג כאן פרוטוקול microinject ובו זמנית תמונה עוברי Drosophila מרובים במהלך התפתחות עוברית באמצעות צלחת מבוססת, דימוי תוכן גבוה.

הכנת עובר Drosophila ומיקרו-היתוך למיקרוסקופיה של תאים חיים שבוצעו באמצעות מנתח תוכן גבוה אוטומטי

באופן קלאסי, האנדוקרדיום של פרימורדיום המסתם העוברי של העכבר נותח באמצעות חתכים רוחביים, קורונליים או סגיטליים. הגישה החדשנית שלנו להדמיה דו-ממדית של האנדוקרדיום באזורים וולוולוגניים מאפשרת קוטביות מישורית וניתוח סידור מחדש של התאים של האנדוקרדיום במהלך התפתחות המסתם.

פנים אל פנים הכנה לכרית אנדוקרדיאלית לניתוח מורפוגנזה מישורית בעוברי עכברים

אנו מציגים פרוטוקול מפורט לתרבית והדמיית עוברי עכבר המאפשר הדמיה תלת ממדית + זמן של תאי אב לבביים. ערכת כלי וידאו זו מתייחסת למיומנויות המפתח הנדרשות להדמיה חיה מוצלחת שאחרת קשה לרכוש מפרסומים של טקסט בלבד.

הדמיה חיה של אבות לב מוקדמים בעובר העכבר

למדו הכנת עוברי Drosophila למיקרוסקופיה אלקטרונית שידור לחקר מורפוגנזה של הלב העוברי. שיטה זו מאפשרת הדמיה ברזולוציה גבוהה של מבני תאים וממברנות בסיס.

הכנת עוברים אלקטרונים מיקרוסקופית של תסיסנית לב עוברי צינור

גלה סרטונים נוספים