Name: שימוש בתגובה optokinetic ללמוד לתפקד החזותי של דג הזברה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-02-02T18:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 59 s
Description: למדו פרוטוקול חדש למדידת תגובה אופטוקינטית בדגי זברה בוגרים. שיטה זו מאפשרת הערכת תפקוד חזותי במודלים של מחקר עצבי ומספקת כלי סטנדרטי לנוירומדעים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים לגב &#39;מניפה שן על התמיכה לה גידול דג הזברה. זו נתמכת על ידי fundings ד&quot;ר הו בינג (האקדמיה הסינית למדעים, &quot;באי רן ג&#39;י הואה&quot;, NSFC 30870833 ו הלאומית למדע תוכנית בסיסית של סין, 2009CB941302). כל הניסויים בבעלי חיים נערכו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי אוניברסיטת המדע והטכנולוגיה של סין (USTC) Animal משאבי מרכז טיפול בבעלי חיים באוניברסיטת ועדת שימוש.

חלק א: בניית המנגנון OKR פרטים מוצגים הפגנה וידאו. חלק שני: OKR של דג הזברה למבוגרים אם המעבדה שלך בנתה מנגנון OKR, המפתח של מבוגר דג הזברה OKR היא להחזיק את הדג. בחלק זה, אנו יראה לכם צעד אחר צעד. המנגנון שלנו מלחינה החלקים הבאים דומים אחרים שהוזכרו. חדר דגים החוזר 7.0 ס"מ קוטר חיצוני, 6.5 ס"מ קוטר פנימי, 7.0 ס"מ גבוהה. התוף סביב החדר דגים 8.5 ס"מ קוטר החוצה, 7.5 ס"מ קוטר פנימי, 7.0 ס"מ גבוהה. זה יכול לסובב עם כיוון השעון ונגד כיוון השעון במהירות של 20 ~ 70 סיבובים לדקה (סל"ד). אחד עשר מחזורים של פסים בשחור לבן נמשכים על נייר העתקה אשר דבק בצד החיצוני של התוף. מערכת האור מורכב משני צינורות אור מעגל בקוטר 21 ס"מ. <img src="/files/ftp_upload/1742/1742fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. המודל של ספוג. הצוק עשה באמצע זה היא לוודא כי שדה הראייה לא היה להיות מוגן. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספוג כפי שמוצג תמונה 1 שהלחין לשני חלקים. החלק השמאלי הוא באורך 3 ס"מ X 3 ס"מ רוחב x גבוה 2 ס"מ. החלק הנכון הוא באורך 3 ס"מ X 3 ס"מ רוחב x גבוה 3 ס"מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את זה הספוג בחלק התחתון של החדר דגים לשפוך מים לגידול לעומק כ 2 ס"מ. בועות האוויר אשר להסתתר הספוג צריך להיות מודח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס סיכה בחלק הקדמי של החלק הימני של ספוג, על 2 מ"מ מאחורי הצוק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי דג הזברה מבוגר ב-MS-222. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את דג הזברה על הספוג עם למעלה הגב ולאפשר צד אחד של סנפיר החזה שלו לפני הפין הראשון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סיכה השני מוכנס מאחורי סנפיר החזה אחרים. זה יכול למנוע הגוף מתכווץ דג הזברה על ידי שיתוף פעולה עם הסיכה הראשונה (ראה גם באיור. 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הצמד את זנבו עם עורק מהדק ולתקן את מהדק עורק בפיסת גומי (פלסטלינה) אשר דבק על החדר דגים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסיכה השלישי והרביעי נטוע באתר ביוב ליד נקבוביות הגוף דגים. זה יכול למנוע דג הזברה לגל בזנבו בעוצמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סיכה החמישי הוא מוצב בין הראשונה את הסיכה השלישית ואז את הסיכה השישי הוא בצד השני של זה. הם יכלו למנוע את דג הזברה מן רעד בגוף שלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סיכה השביעי והשמיני מוכנס האתרים ליד הזימים כדי לשמור על האוריינטציה הראש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יוצקים מים לגידול דגים בתא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחרי דג הזברה מתעוררת, תן לו להסתגל עבור 5 ~ 10 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תדליק את האור של המנגנון הזה ולתת דג הזברה להתאים את התאורה במשך 2 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את המנוע בכונן הסורג ולאפשר דג הזברה להסתגל למשך דקה 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את המצלמה ולתעד את תנועת העיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נתח את זוויות העין 6 ומספרי saccade במחשב האישי (למשל נציג של ניתוח עין זוויות מוצג Fig.2). </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1742/1742fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2. הזווית בין ציר לציר העין הגוף. א) כאשר הכיוון של הסורג הוא האף אל הזמני, הגדרנו את הזווית של הגוף קדימה דגים זווית שלילית את הזווית הגוף דגים זווית חיובית, ולהיפך (לסקירה קצרה גם לראות שופט. 6). מספרים נתון זה מייצג את הרצף של סיכות. ב) OKR למשל ניתוח של דג אחד בקבוצה רגילה. סרט אחד השני הועבר מסגרות הסדרה ואת זוויות העין של כל מסגרת נמדדה עם תמונה הפרו תוכנה פלוס. כל נקודה נתון זה מייצג את כל מסגרת מדדנו. הערות: <ol class="lalpha" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל הפינים משמשים רק כדי למנוע דג הזברה מן הגוף שלה רועד, הדוקה מדי יהיה מזיק לדגים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מהדק העורקים עלולה לפגוע הזנב כשטח מגע שלו קטן. לאחר הזנב היא בחינם, זה ים קשה מאוד לתקן את זה דגים. לעטוף תחבושת סביב הזנב מומלץ במצב כלשהו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסיכה השביעית והשמינית אשר נטועים באתר ליד הזימים לא צריכה להיות מקלט מן העין שלהם צורמת. </li></ol> חלק III. OKR הזחל של דג הזברה 1. Methylcellulose הזחל דג הזברה יכול להיות משותקת פתרון methylcellulose 6% תוך כדי להישאר בחיים זמן רב. הכן פתרון methylcellulose כדלקמן. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מרתיחים 200 מ"ל DDH 2 O בתנור מיקרוגל כ 3 דקות ברמה גבוהה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העברת מים חמים פלטה חמה בחישה ומערבבים במרץ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוסיפים 12 גרם methylcellulose למים חמים בהדרגה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור ערבוב במשך 3 דקות לאחר methylcellulose היטב התפזרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מצננים את הפתרונות עם מי קרח עד שיתברר, ואז למקם אותו על 4 ° C. </li></ol><pclass><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שני זוגות זכר ונקבה של דג הזברה הבוגרת טנק ההזדווגות בשעה 17:00 לאחר ההנקה. למחרת בבוקר ולהעבירם טנק ההזדווגות טריים לאסוף עוברים אחרי שעה 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הביצים נשמרות בינוני העובר ב 28.5 ± 0.5 מעלות צלזיוס אינקובטור עם אור: מחזור האפל של 14:10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצים יהיה בקעו החוצה הפריה 48 שעות שלאחר (hpf) ואת OKR תיבחן על hpf 72 או מאוחר יותר. בסרטון הזה, larvaes נמצאים DPF 5. </li></ol> 3. נוהל של OKR <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים את המנגנון תחת stereoscope מצויד במצלמת CCD ו להדליק את האור של מנגנון זה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הוסף 20 מ"ל methycellulose 6% בצלחת פטרי 55 מ"מ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום larvaes רצופים במרכז של המנה הזו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים בועת אוויר על בהיקף של μl 1 בתחום המצלמה, זה יכול להיות כמראה לשקף את הכיוון של הסורג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את המנוע ולהקליט את תנועת העיניים שלהם. </li></ol> חלק ד '. OMR למבוגרים של דג הזברה למבוגרים דג הזברה OMR יכול גם להיות שנערך עם המנגנון הזה, רק במקום הטור בתא דגים למניעת דגים שוחים על פני מרכז (הראו ב Fig.3a, מהירות סיבוב 36 סל"ד הוא, שחור לבן מחזורים הם 11). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שים דג בתא זה דגים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Stand טור בקוטר 2 ס"מ במרכז תא זה דגים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התאם לרגע אחד הן עדיין צורם צורם הסיבוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שיא התנועה של דג הזברה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתוח שיעור מקרי הזמן במחשב האישי (דוגמה מוצגת Fig.3b, מהירות סיבוב 36 סל"ד הוא, שחור לבן מחזור 11) </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1742/1742fig3.jpg" alt="איור 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 3"> איור 3. OMR של דג הזברה למבוגרים. (א) בעמודה A פלסטיק לבן שהונח במרכז החדר דגים למניעת דגים שוחים על פני זה. (ב) שיעור מקרי של דג הזברה הבוגרת בעקבות צורמת. שיעור מקרי הוגדר חלקם של זמן צורמת הבאים זמן ההקלטה הכולל. הערך של 50% מצביעה על כך הדג הוא שוחה באופן אקראי תוך 100% מציין את הסורג הבאים דגים היטב. עצבי הראייה הן נמחצו עם מלקחיים תכשיטים כ -10 שניות. ההתנהגות של OMR הופיע שחייה אקראי לאחר למחוץ. </pclass>

<ol><li>Beck, J., Gilland, E., Tank, D., Baker, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+the+Ontogeny+of+Optokinetic+and+Vestibuloocular+Behaviors+in+Zebrafish+Medaka%2C+and+Goldfish%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Quantifying the Ontogeny of Optokinetic and Vestibuloocular Behaviors in Zebrafish Medaka, and Goldfish.</a> J Neurophysiol. 92, 3546-3561 (2004).</li>
<li>Brockerhoff, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+the+optokinetic+response+of+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Measuring the optokinetic response of zebrafish larvae.</a> Nature Protocols. 1, 2448-2451 (2006).</li>
<li>Emran, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OFF+ganglion+cells+cannot+drive+the+optokinetic+reflex+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">OFF ganglion cells cannot drive the optokinetic reflex in zebrafish.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 19126-19131 (2007).</li>
<li>Rinner, O., Rick, J., Neuhauss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrast+Sensitivity%2C+Spatial+and+Temporal+Tuning+of+the+Larval+Zebrafish+Optokinetic+Response%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Contrast Sensitivity, Spatial and Temporal Tuning of the Larval Zebrafish Optokinetic Response.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 46, 137-142 (2005).</li>
<li>Roeser, T., Baier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visuomotor+Behaviors+in+Larval+Zebrafish+after+GFP-Guided+Laser+Ablation+of+the+Optic+Tectum%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Visuomotor Behaviors in Larval Zebrafish after GFP-Guided Laser Ablation of the Optic Tectum.</a> The Journal of Neuroscience. 23, 3726-3734 (2003).</li>
<li>Easter, S., Nicola, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Development+of+Vision+in+the+Zebrafish+%28Danio+rerio%29%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">The Development of Vision in the Zebrafish (Danio rerio).</a> Developmental Biology. 180, 646-663 (1996).</li>
<li>Maaswinkel, H., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatio-temporal+frequency+characteristics+of+the+optomotor+response+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">Spatio-temporal frequency characteristics of the optomotor response in zebrafish.</a> Vision Research. 43, 21-30 (2003).</li>
</ol>

על פי ההגדרה של OKR, היא תופעה חיות להזיז את עיניהם להמשיך סריג מסתובב באופן ספונטני. אם התנהגות זו התנהל במשך זמן רב (למשל, מעל 6 שעות), שרירי העין יכול להיות עייף OKR יהיה נחלש. למבוגרים דג הזברה OMR תוארה לחלוטין על ידי אחרים 7. בסרטון הזה, אנחנו רק להראות לך את ההתנהגות הזאת עם המנגנון שלנו. לאחר עצבי הראייה הם כתוש, הם לא יכלו לעקוב אחר זה צורם מאוד. <p class="jove_content" style=";text-align:...

<table><tbody><tr><td>מתילצלולוז</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M6385</td><td>צמיגות 25 cP</td></tr></tbody></table>

שימוש בתגובה optokinetic ללמוד לתפקד החזותי של דג הזברה

Using the optokinetic response to study visual function of zebrafish

בתגובה Optokinetic (OKR) היא התנהגות בעלי חיים רוטט עיניו לעקוב סריג מסתובב סביבו. זה כבר בשימוש נרחב על מנת להעריך את תפקודי הראייה של הזחל דג הזברה 1-5. עם זאת, פרוטוקול סטנדרטי דגים הזחל עדיין לא החלים בקלות zabrafish מבוגר. הנה, אנחנו מציגים כיצד למדוד את OKR של דג הזברה מבוגר עם מנגנון פשוט שהותקן שלנו באמצעות פרוטוקול חדש אשר הוקם במעבדה שלנו. שני מנגנוני שלנו צעד אחר צעד בהליך של OKR ב דג הזברה מבוגר מומחשים וידאו. בנוסף, מדידות של OKR הזחל, כמו גם את התגובה optomotor (OMR) בדיקה של דג הזברה מבוגרים, הם הפגינו גם בסרטון הזה. זה assay OKR של דג הזברה מבוגר בניסוי שלנו עשוי להימשך עד 4 שעות. מבחן OKR כזה מיושם הדגים הבוגרים ייהנו לחקירה פונקציה חזותית יעילה יותר כאשר הדגים הבוגרים מערכת הראייה היא מניפולציה. סו צ&#39;י Zou וו יין תרמו באופן שווה על הנייר הזה.

בתגובה Optokinetic כבר בשימוש נרחב על מנת להעריך את תפקודי הראייה של דג הזברה הזחל. עם זאת, פרוטוקול סטנדרטי דגים הזחל עדיין לא החלים בקלות במבוגרים<sup&gt; 1-5</sup&gt;. הנה, אנחנו מציגים כיצד למדוד את OKR של דג הזברה מבוגר באמצעות פרוטוקול חדש אשר הוקם במעבדה שלנו.

תגובה אופטוקינטית (OKR) היא התנהגות שבה בעל חיים מרעיד את עיניו כדי לעקוב אחר סריג מסתובב סביבו. היא שימשה באופן נרחב להערכת ה...

שלום לכולם. שמי Mean Jing, ואני מ-USTC. כפי שאנו יודעים, התגובה האופטו-קינטית, או בקיצור OKR, היא מבחן התנהגותי שבו בעל חיים מזיז את עיניו כדי לעקוב אחר גרדיאנט.תנועה סביבו. התנהגות זו נמצאה בשימוש נרחב. הערכת התפקודים החזותיים של זחלי דגי זברה.עם זאת, השיטה המשתמשת בפרוטוקול הסטנדרטי לקיבוע דגי לרווה אינה ישימה בקלות עבור דגים בוגרים. לכן, בסרטון זה נדגים פרוטוקול חדש המאפשר להקליט OKR של דגים בוגרים. כמו כן, לצורך השוואה, נדגים את מבחן ה-OKR עבור דגי לרווה ואת מבחן ה-OMR עבור דגים בוגרים.וברשמי, OMR, אני מתכוון לתגובה מוטורית. כעת אראה לכם את המראה של אפליקציית ה-OKR המותאמת שלנו. היא נראית נחמד, נכון?במראה זו, קיים בסיס סריג המונע על ידי מנוע. צינור הסריג נח על בסיס סריג זה ומסתובב יחד איתו. לוחית תא מונחת מעל בסיס הסריג, אך אינה מסתובבת, ומנורה מעגלית משמשת להארת הסריג.וזהו. פשוט מניחים את תא הדגים על לוח התאים ואנחנו מוכנים להתחיל. היי, אני סואי.שלום, אני W. אנו עובדים על הפיתוח העצבי ועל ה-ELL של USPC. היום נראה לכם את ה-sweep של ה-high test של דגי הזברה. אוקיי, בואו נתחיל.ראשית, נדגים כיצד ביצענו את בדיקת ה-OKR עבור דגי זברה בוגרים. כעת, הכניסו את הספוג לתא הדגים ומזגו לתוכו מעט מים. סחטו מעט את הספוג כדי להסיר בועות אוויר.כעת נראה כיצד לקבע את הדג באמצעות סיכות שלב אחר שלב.

using-the-optokinetic-response-to-study-visual-function-of-zebrafish

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

פיתחנו את תגובת חזותית-Motor כדי לכמת את הפלט המוטורי של דג הזברה הזחל בתגובה במרווחים ו decrements אור. בחנו גם מוטנטים דג הזברה חזון, כולל לא optokinetic (NRC) מוטנטים בתגובה, אשר נחשבו עיוור לחלוטין, כאשר נבדק על ידי assay אחר חזון, רפלקס optokinetic.

Assay ההתנהגות כדי למדוד את התגובה של דג הזברה לשינויים לעוצמות אור

VisioTracker היא מערכת אוטומטית לניתוח הכמותי של ביצועים חזותיים של דגים בוגרים וזחל קטנים המבוססים על ההקלטה של ​​תנועות עיניים. הוא כולל שליטה מלאה על תכונות גירוי חזותיים וניתוח בזמן אמת, המאפשר מחקר תפוקה גבוהה בתחומים כגון פיתוח מערכת ראייה ותפקוד, פרמקולוגיה, מחקרי מעגלים עצביים ואינטגרציה חושית.

VisioTracker, גישה אוטומטית חדשנית לניתוח oculomotor

סרטון זה מתאר את בדיקת התגובה האופטוקינטית בדגי זברה. הסרטון מודד את תנועות העיניים הרפלקסיביות בהתבסס על הגירוי החזותי הנע וקובע את חדות הראייה בדגי זברה.

בדיקת תגובה אופטוקינטית: שיטה למדידת חדות ראייה בדגי זברה

סרטון זה מתאר טכניקות אופטוגנטיות על ידי הפעלת נוירונים סומטוסנסוריים מהונדסים גנטית ורישום תגובה התנהגותית מעוררת באמצעות מצלמת וידאו במהירות גבוהה.

Optogenetics של דגי זברה: הפעלת נוירון סומטוסנסורי מהונדס גנטית לחקר תגובות התנהגותיות של זחלים

טכניקות Optogenetic הפכו אותו ניתן ללמוד על התרומה של נוירונים ספציפיים להתנהגות. אנו מתארים שיטה בדג זברת זחל להפעלת נוירונים חושיים יחידים להביע channelrhodopsin ריאנט (שף) עם מדינה-דיודה שאובה מוצקה ליזר (DPSS) ולהקליט את ההתנהגויות שהושרו עם מצלמת וידאו במהירות גבוהה.

הפעלה של נוירונים Optogenetic דג זברה החושית באמצעות שף tdTomato

דג הזברה הייתה כלי חשוב לתחומי מחקר רבים. כאן אנו מדגימים שיטה כדי לעורר תגובה חזותית ולחשב את חדות ראייה תפקודיות בדג הזברה המבוגר.

תגובת Optokinetic כמדד כמותי של חדות ראייה בדג הזברה

אנו מציגים שיטה לניתוח אלקטרורטינוגרפי (ERG) של זחלי דג הזברה תוך שימוש בטכניקות מיקרומניפולציה ואלקטרורטינוגרפיה. זוהי שיטה פשוטה ופשוטה לבדיקת תפקוד חזותי של זחלי דג הזברה in vivo.

ניתוח electroretinogram של התגובה החזותית בדג הזברה זחלים

פרוטוקול זה מתאר גישה לתיוג תותוג טומוטו והדמיה רב ממדית של התפתחות עיניים מוקדמות של דגי זברה. אנו מתארים תיוג, הטמעה והדמיה בארבעה ממדים (4D) באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית לסריקת לייזר, ושיקולים למיטוב רכישת ערכות נתונים לניתוח מנגנונים של מורפוגנזה של אופטית.

הדמיה תלת מימדית של מורפוגנזה של גביע זברה אופטי

המאמר מסביר כיצד להסיר באופן כירורגי עיניים מזחלי דגי זברה חיים כצעד ראשון לקראת חקירת האופן שבו קלט רשתית משפיע על צמיחת והתפתחות של טקטום אופטי. בנוסף, המאמר מספק מידע על הרדמה של זחלים, קיבוע וכריתת מוח, ולאחר מכן אימונוהיסטוכימיה והדמיה קונפוקלית.

הסרת עיניים בזחלי דגי זברה חיים לבחינת גדילה והתפתחות תלויי עצבנות של מערכת הראייה

מניפולציה אופטוגנטית של מסלולי איתות יכולה להיות אסטרטגיה רבת עוצמה לחקור כיצד איתות מפוענח בהתפתחות, התחדשות, הומאוסטזיס ומחלות. פרוטוקול זה מספק הנחיות מעשיות לשימוש במפעילי איתות מסוג Nodal וחלבון מורפוגני עצם (BMP) מבוססי חישת אור-חמצן בעובר המוקדם של דגי הזברה.

הפעלת איתות אופטוגנטי בעוברים של דגי זברה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול מפורט לבחינת פעילות עצבית באזורי מוח של דגי זברה טרנסגניים המבטאים מדדי סידן GCaMP באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית.

ב Vivo הדמיה פלואורסצנטית קונפוקלית של פעילות עצבית הנגרמת על ידי גירוי חושי בדג זברה זחל מרוסן חלקית

למדו פרוטוקול חדש למדידת תגובה אופטוקינטית בדגי זברה בוגרים. שיטה זו מאפשרת הערכת תפקוד חזותי במודלים של מחקר עצבי ומספקת כלי סטנדרטי לנוירומדעים.

שימוש בתגובה optokinetic ללמוד לתפקד החזותי של דג הזברה

גלה סרטונים נוספים