Name: באמצעות מערכת GELFREE 8100 ההיפוך חלוקה על ההיפוך חלוקה משקל מבוסס מולקולרית עם שלב החילוץ נוזלי (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-12-03T16:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 57 s
Description: למדו כיצד להשתמש במערכת GELFREE 8100 לחלוקת חלבונים לפי משקל מולקולרי בשיטת החילוץ הנוזלי. שיטה זו מאפשרת חלוקה יעילה של עד שמונה דגימות בכ-90 דקות עם שחזור גבוה לניתוחים ביוכימיים מתקדמים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. חלבון לדוגמא הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בתוך צינור 500 microfuge μl, לשלב את הפעולות הבאות: </li></ol><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> מגיב </td><td> כרך להוסיף: </td></tr><tr><td> * חלבון המדגם (עד 1 מ"ג) </td><td> עד 112 μL </td></tr><tr><td> מאגר דוגמאות (5X) המסופק בערכה מחסנית </td><td> 30 μL </td></tr><tr><td> DTT 1M </td><td> 8μL </td></tr><tr><td> 18 Ω H 2 O </td><td> x μL לסך של נפח דגימה של 150μL ** </td></tr></tbody></table><ol start="2" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפגל דגימות ב 95 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות. מצננים לטמפרטורת החדר. </li></ol> * הכמות הכוללת של חלבון להיפרד יהיה תלוי במורכבות של המדגם. לקבלת דוגמאות מורכבות יותר, כגון homogenate רקמות, 150-200 מיקרוגרם לערוץ מומלץ. ** אם היקף המדגם הוא פחות מ 112 μL, להוסיף 18 Ω H 2 O להביא את נפח הסופי μL 150. 2. טוען מחסנית GELFREE <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מחסנית GELFREE 8100 משקיק את נייר הכסף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר להתעלמות אוטם צלחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את חוצץ אחסון מן התאים מחסנית באמצעות פיפטה. אם כל 8 חדרי מחסנית ישמשו, מחסנית יכול להיות הפוך כדי לרוקן את מאגר אחסון של התאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את מחסנית לטעינת ידי הוספת מאגר ריצה GELFREE לכל אחד מתאי מחסנית כדלקמן: </li></ol><table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> GELFREE דיו הקאמרית </td><td> נפח הצפת GELFREE ריצה להוסיף </td></tr><tr><td> חיץ האנודה המאגר </td><td> 8 מ"ל </td></tr><tr><td> קטודה מאגר חיץ </td><td> 6 מ"ל </td></tr><tr><td> אוסף לתאי </td><td> 100 μL כל </td></tr></tbody></table><ol start="5" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר וזורקים כל חיץ מן החדר טעינת המדגם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טען את 150 דגימות μL לתאי טעינה באמצעות pipettor 8 ערוצים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנח את מחסנית נטען לתוך תחנת GELFREE 8100 ההיפוך חלוקה. מנמיכים את מערכי אלקטרודות ולסגור את המכסה. </li></ol> 3. ריצה את מחסנית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות התצוגה של מכשיר מסך מגע, לחצו על לחצן שיטה להציג את רשימת מתוכנתים מראש שיטות. כל אחד מתוכנתים מראש שיטות מורכב מתח להגדיר זמן מבוססי הפסקות שנועדו לפתור חלבונים בתוך טווח מסוים של משקל מולקולרי. 8100 GELFREE להשהות באופן אוטומטי לאיסוף חלק במרווחים המפורטים השיטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר בשיטה המתאימה זוהה, לחצו על לחצן לאחזר, והזן את המספר של השיטה מתוכנתים מראש הרצוי באמצעות לוח המקשים על המסך. לחץ על OK, ולאחר מכן לחצו על כפתור להחיל. השיטה יושמה יופיע בתחתית המסך הראשי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לבחור את הערוצים (מספר דוגמאות) אשר ישמשו בטווח, לחצו על לחצן הערוץ על המסך הראשי. כדי לבחור את כל שמונה ערוצים, לחץ על בחר הכל. לאחר מכן, הקש לעשות כדי לחזור למסך הראשי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא מכסה בטיחות סגור כי נורית החיווי הירוקה בחלק התחתון של המסך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להתחיל את ההפרדה לחלבון, לחצו להתחיל. תחנת ההיפוך חלוקה אוטומטית הפסקה כאשר הגיע הזמן לאסוף את השברים. הערה: כאשר המערכת פועלת, חוגי מוצגים בתיבה בצד שמאל של המסך לתאר את המצב של כל ערוץ. עיגול ירוק עולה כי הערוץ הוא פעיל, עיגול צהוב עולה כי המכשיר כבר עצר, עיגול אדום עולה כי הערוץ נכשל. מתח להחיל וזרמים מוצגים בצד ימין של החוגים מצב הערוץ. שברים צריך רק להיות מוסר כאשר החוגים מעמד הפכו צהוב התראת הטקסט מופיע על המסך של המכשיר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי להסיר שברים, לפתוח את המכסה של המכשיר ולהשתמש ערוץ 8-פיפטה לסגת 150 μL מכל אחד לתאי האיסוף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שברים הוסרו, לשטוף את קאמרית אוסף כפול עם הצפת ריצה GELFREE ידי הוספת 100 μl לערוץ ו pipetting למעלה ולמטה פעמיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר כביסה, להוסיף 100uL של GELFREE ריצה הצפת בחזרה לתאי איסוף, לסגור את המכסה, ולחץ על כפתור לחדש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> GELFREE 8100 תוצג עד ההפסקה בפעם הבאה. הזמן הכולל שנותרו הניסוי מוצג בצד ימין של המסך. כדי לעבור בין הזמן שנותר, הזמן שחלף, זמן הפסקה, לחצו על לחצן מעל תיבת הצגת זמן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שכל החלקים כבר שותףllected, הם יכולים מיד לשמש להכנת במורד נוספים, כגון התמקדות isoelectric או ג'ל אלקטרופורזה, או לניתוח באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית ספקטרומטריית מסה או immunoaffinity. </li></ol> 4. נציג תוצאות 200 מיקרוגרם של homogenate הכבד שור חולקה 12 שברים בכל, באמצעות מערכת ההיפוך חלוקה GELFREE. 6 μL של כל חלק היה להריץ על ג'ל SDS סטנדרטית לעמוד 1D ומוכתמת כסף. כפי שניתן לראות בתרשים 1, המדגם היה חלבון מופרדים לתוך 12 שברים ברורים, פורש את טווח משקל מולקולרי של 3.5kDa כדי 150kDa. תקן משקל מולקולרי (ColorBurst, Sigma) מוצגים גם מסלולים 1 ו - 14. ג'ל המוצג כאן מדגיש את קצב התאוששות גבוהה מושגת באמצעות מערכת GELFREE 8100 עבור חלוקה חלבון. ג'ל המוצג כאן מייצג 4% של החלבון התאושש 200 מיקרוגרם. <img src="/files/ftp_upload/1842/1842fig1tmb.jpg" alt="איור 1" border="0"> באיור 1. חלבונים מהכבד שור homogenate מופרדים באמצעות מערכת ההיפוך חלוקה GELFREE. 6 μL של כל חלק 150 μL היה טעון לרוץ על ג'ל SDS 1D דף מוכתם כסף. תקן מולקולרית (MW) משקל היה טעון גם כמצוין. אנא <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1842/1842fig1.jpg">לחץ כאן</a> כדי לראות גרסה גדולה יותר של דמות 1.

<ol><li>Tran, J. C., Doucette, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+Size+Separation+of+Intact+Proteins+in+Solution+Phase+for+Mass+Spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem.%22%5BJournal%5D)">Multiplexed Size Separation of Intact Proteins in Solution Phase for Mass Spectrometry.</a> Anal Chem.. , (2009).</li>
</ol>

המחברים של מאמר זה מועסקים על ידי גילוי חלבון המייצרת ריאגנטים ומכשירים המשמשים במאמר זה.

מערכת 8100 GELFREE ההיפוך חלוקה מספק שיטה מהירה, פשוטה לשעתקו לחלוקת דגימות חלבון מורכב לתוך משקל מולקולרי מבוססי בדידה שברים. זו שיטה חדשה של חלוקה מבטלת את הצורך של הלהקה או חיתוך במקום, מה שהופך אותו ניתן לבודד חלבונים על פני טווח רחב המונית ב 90 דקות. היכולת להעמיס כמויות גדולות יחסית של המדגם להתאושש שברים בשלב נוזל שימושי במיוחד בבידוד וניתוח נמוכה שפע חלבונים, שהם בדרך כלל יותר קשה לזהות. שברים כתוצאה מכך לאחר מכן ניתן להשתמש במגוון רחב של יישומים, כגון LC-MS, MALDI-TOF ו immunoblotting.

באמצעות מערכת gelfree 8100 ההיפוך חלוקה על ההיפוך חלוקה משקל מבוסס מולקולרית עם שלב החילוץ נוזלי

Using the GELFREE 8100 Fractionation System for Molecular Weight-Based Fractionation with Liquid Phase Recovery

מערכת 8100 GELFREE ההיפוך חלוקה היא חלבון רומן חלוקה מערכת שנועדה למקסם התאוששות חלבון במהלך חלוקה משקל מולקולרי מבוסס. מערכת מורכבת של שימוש יחיד, 8 מחסניות מדגם קיבולת כלי GELFREE benchtop ההיפוך חלוקה. במהלך ההפרדה, מתח קבוע מוחל בין האנודה ומאגרי קטודה, וכל תערובת חלבון מונע electrophoretically מתוך חדר טעינה לתוך הג&#39;ל תוכננו במיוחד טור ג&#39;ל. חלבונים מרוכזים ללהקה חזק ג&#39;ל הערמה, והופרדו מבוסס על mobilities electrophoretic שלהם בתוך ג&#39;ל לפתרון. כמו חלבונים elute מהעמודה, הם לכודים והתרכז בשלב נוזלי בתא האיסוף, ללא ג&#39;ל. המכשיר הוא עצר ואז במרווחי זמן מסוים, שברים נאספים בעזרת פיפטה. תהליך זה חוזר על עצמו עד שכל שברים הרצוי נאספו. אם פחות מ 8 דגימות מנוהלות על מחסנית, כל החדרים שאינם בשימוש ניתן להשתמש הפרדות הבאים. טכנולוגיה חדשנית זו מאפשרת הפרדה מהירה ופשוטה של ​​עד 8 תערובות חלבונים מורכבות במקביל, מציע מספר יתרונות בהשוואה לשיטות חלוקה זמין קודם לכן. מערכת זו מסוגלת fractionating עד 1 מ&quot;ג של חלבון הכולל לכל ערוץ, עבור סכום כולל של 8mg בכל מחסנית. חלבונים שלמים על פני טווח רחב מסה מופרדים על בסיס משקל מולקולרי, שמירה על המאפיינים החשובים של physiochemical אנליטי. מלכודת שלב נוזלי מספק עבור התאוששות גבוהה תוך ביטול הצורך הלהקה או חיתוך במקום, מה שהופך את תהליך חלוקה מאוד לשחזור 1.

הסרטון מלווה מתאר את השימוש של מערכת GELFREE 8100 ההיפוך חלוקה, אשר מחיצות דגימות חלבון מורכב על בסיס משקל מולקולרי ומשחזרת את השברים בשלב נוזלי. הסרטון מתאר כיצד הטכנולוגיה עובדת, וכיצד נעשה בו שימוש, ומספק נתונים כתוצאה, עם ניתוח ג&#39;ל אלקטרופורזה polyacrylamide של homogenate מופרדים בכבד בקר.

באמצעות מערכת GELFREE 8100 ההיפוך חלוקה על ההיפוך חלוקה משקל מבוסס מולקולרית עם שלב החילוץ נוזלי

מערכת הפרקציונציה GELFREE 8100 היא מערכת חדשנית לפרקציונציית חלבונים, שתוכננה כדי למקסם את השחזור של חלבונים במהלך תהליך המבוסס על משקל מולקולרי...

שלום, שמי ג'יי הרקינס. אני מדען מחקר ב-Protein Discovery. היום אדגים כמה קל להשתמש במערכת ה-gel free 8, 100 Fractionation החדשה כדי להשיג פרקציונציה מבוססת משקל מולקולרי עם שיעורי התאוששות גבוהים.באמצעות GelFree, ניתן להעמיס עד מיליגרם אחד של חלבון כולל לכל ערוץ, ולבצע הפרדה שחזירה של עד שמונה דגימות בתוך כ-90 דקות. המערכת כוללת מכשיר, מחסנית חד-פעמית וכל התמיסות הדרושות לביצוע הניסוי. בואו נתחיל.התחל את הפרוצדורה על ידי הכנה וסימון של עד שמונה מבחנות בנפח 500 microliter. הוסף עד 1 milligram של דגימת החלבון בנפח של עד 112 microliter. כמות החלבון בדגימה תלויה במורכבות הדגימה.עבור דגימות מורכבות יותר, כגון הומוגנאט הרקמה ששימש להדגמה זו, 150 עד 200 micrograms לכל תעלה יניבו את התוצאות הטובות ביותר. לאחר מכן, הוסיפו 30 microliters של five x sample buffer, המסופק בערכת ה-gel free cartridge. לכל דגימת חלבון, הוסיפו eight microliters של one molar DTT.לאחר מכן, השלימו את הנפח של כל דגימה בעזרת מים לנפח סופי של 150 microliters. לאחר מכן, חממו את המבחנות למשך חמש דקות בטמפרטורה של 95 degrees Celsius כדי לדנטור את הדגימה. הניחו לדגימות המחוממות להתקרר לטמפרטורת החדר בזמן שהדגימה מתקררת.הוצא את מחסנית ה-gel free 8, 100 משקית הפויל. הסר והשלך את אטם הפלטה. הסר את תמיסת השימור מתאי המחסנית באמצעות פיפטה.אם נעשה שימוש בכל שמונת התאים של המחסנית, הפוך את המחסנית כדי לרוקן את תמיסת האחסון מהתאים. לאחר מכן, הוסף 8 mL של תמיסת הרצה ללא ג'ל לכל אחד ממאגרי תמיסת האנודה. הוסף 6 mL לכל אחד ממאגרי תמיסת הקתודה, וטפטף באמצעות פיפט 100 µL לכל אחד מתאי האיסוף.באמצעות פפיט שמונה ערוצים של 100 עד 200 µL, הסירו והשליכו כל תמיסת בופר שזרמה ממאגר בופר הקתודה אל תא טעינת הדגימות, וטענו מיד את הדגימות לתאי הטעינה. לאחר טעינת הדגימות, הכניסו את המחסנית לתחנת הפרדה מסוג GelFree 8, 100. לאחר מכן, הורידו את מערכי האלקטרודות וסגרו את המכסה באמצעות ממשק המשתמש הגרפי וקל התכנות במסך המגע של המכשיר, ועברו לרשימת השיטות התכנוניות הזמינות.בחרו את השיטה המתאימה על ידי לחיצה על כפתור השיטה (method). לחצו על כפתור השליפה (retrieve) והזינו את מספר השיטה המתוכנתת הרצויה. השתמשו במקלדת שעל המסך ולחצו על אישור (okay). לאחר מכן, לחצו על כפתור היישום (apply).השיטה שהוחלה תופיע בתחתית המסך הראשי. כל אחת מהשיטות המתוכנתות מראש מורכבת ממתחים קבועים והפסקות מבוססות זמן שנועדו להפריד חלבונים בטווח ספציפי של משקלים מולקולריים. לאחר בחירת השיטה המתאימה, לחצו על כפתור הערוץ במסך הראשי.לאחר מכן, בחרו את הערוצים שבהם תיעשה שימוש בהרצה. כדי לבחור את כל שמונת הערוצים, לחצו על "בחר הכל" (select all). לאחר מכן לחצו על "סיום" (done).כדי לחזור למסך הראשי, ודאו שמכסה הבטיחות סגור ושנורית החיווי בתחתית המסך היא ירוקה. כעת לחצו על start כדי להתחיל את הניסוי; בעוד המערכת פועלת, העיגולים המוצגים בתיבה בצד שמאל של המסך מתארים את מצבם של הערוצים. עיגול ירוק מעיד על כך שהערוץ פעיל.המתחים והזרמים המופעלים מוצגים מימין למעגלי מצב הערוץ. ה-gel free 8, 100 יעצור באופן אוטומטי לאיסוף פראקציות במרווחים המוגדרים בשיטה. כאשר המכשיר עוצר לצורך איסוף פראקציות, תופיע תיבת טקסט המהודעת על כך שהתרחשה עצירה ומעגלי המצב יהפכו לצהובים.בתוך המחסנית, מופעל מתח קבוע בין מאגרי האנודה והקתודה. תחת פוטנציאל זה, תערובת החלבונים נדחפת באופן אלקטרופורטי מתא הטעינה ואל תוך התבנית המדויקת שתוכננה במיוחד. החלבונים נערמים תחילה בתוך פס צר בג'ל הערימה (stacking gel), ולאחר מכן מופרדים על בסיס המשקל המולקולרי שלהם בג'ל ההפרדה (resolving gel).בעוד החלבונים נשטפים מהג'ל, הם נלכדים ומרוכזים בפאזה נוזלית. בתא האיסוף ללא הג'ל. לאחר מכן המכשיר עוצר.בהתבסס על מרווחי זמן שנבחרו מראש, נאספים הפרקציות באמצעות פיפטה. לאחר מכן, מופעל שוב הפוטנציאל כדי ללכוד את פרקציית המשקל המולקולרי השנייה הרצויה. תהליך זה חוזר על עצמו עד שכל הפרקציות המבוקשות נאספות.כל מחסנית מכילה שמונה ערוצי אלקטרופורזה עצמאיים, כך שהמשתמש יכול להפעיל מספר הערוצים הדרוש לו ולשמור את הערוצים שאינם בשימוש לשימוש במועד מאוחר יותר. כדי להוציא את הפראקציות, פתח את מכסה המכשיר, ולאחר מכן השתמש בפיפט הערוץ המובנה. העבר את ה-150 µL נוזל מכל אחת מתאי האיסוף למבחנות איסוף או לפלטה רב-בארים.לאחר הוצאת הפראקציות, שטפו את תא האיסוף פעמיים עם בופר הרצה נטול ג'ל על ידי הוספת 100 µL לכל תעלה וביצוע שאיבה ודחיפה (pipetting) פעמיים. לאחר השטיפה, הוסיפו 100 µL של בופר הרצה נטול ג'ל בחזרה לתאי האיסוף. סגרו את המכסה ולחצו על כפתור ההמשך (resume).מערכת ה-gel free 8, 100 תפעל עד למרווח הזמן הבא. הזמן הכולל שנותר בניסוי מוצג בצד ימין של המסך. לחץ על הכפתור שמעל התיבה המציגה את הזמן כדי לעבור בין זמן שנותר, זמן שחלף ואפשרות להשהיה.לאחר איסוף כל השברים, ניתן להשתמש בהם באופן מיידי להכנות המשך, כגון מיקוד איזואלקטרי או אלקטרופורזה של ג'ל, או לניתוח באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית, ספקטרומטריית מסות או אימונו-אפיניות. בהדגמה זו, שמונה דגימות חלבון של 200 micrograms כל אחת חולקו ל-12 שברים כל אחת, ובסך הכל ל-96 שברים. כדי להדמיז את תוצאות השבירה, נלקחה מנה מכל אחד מ-12 השברים של דגימת ההומוגנאט של כבד בקר, והורצה על ג'ל 1D סטנדרטי עם צביעת כסף.כפי שמוצג באיור זה, דגימת החלבון פולטה ל-12 פרקציות נפרדות המקיפות את טווח המשקלים המולקולריים מ-3.5 kilodaltons עד 150 kilodaltons. הג'ל המוצג כאן מדגיש את יכולתו של מערכת gel free 8, 100 לבצע פרקציונציה של כמות גדולה של חלבון לפרקציות בעלות משקל מולקולרי מובחן. זהו כלי רב עוצמה עבור פרוטאומיקה בגישות top-down ו-bottom-up באמצעות ספקטרומטריית מסות, כמו גם עבור ניסויי אימונו-אפיניטי שבהם נדרשת פרקציה בודדת ומסוכנת של חלבון שלם בעל משקל מולקולרי ספציפי.היה לנו העונג להדגים לכם עד כמה קל להשתמש במערכת הפרדת השברים gel free 8, 100 כדי לחלק את הדגימה שלכם באופן הדידקטי לשברים בעלי משקלים מולקולריים נפרדים, ולהשיג התאוששות גבוהה של השלב הנוזלי. זהו זה. תודה שצפיתם ובהצלחה בניסויים שלכם.

using-gelfree-8100-fractionation-system-for-molecular-weight-based

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

שיטה אוטומטית לזיהוי מתאימים הידרופובי כרומטוגרפיה אינטראקציה (היק) התקשורת כדי לשמש בתהליך של טיהור חלבון מוצג. השיטה משתמשת בינוני הלחץ כרומטוגרפיה נוזלית כולל מערכת מיזוג חיץ אוטומטי, הזרקת לולאה דגימה דינמי, בחירת העמודה רצף, רב גל ניתוח, חלק פיצול אוסף eluate.

הידרופובי אוטומטי אינטראקציה כרומטוגרפיה טור בחירה עבור שימוש ב טיהור חלבון

סרטון זה מתאר טכניקה להפרדת מולקולות מורכבות מתמציות צמחים באמצעות מיקוד איזואלקטרי בפאזה נוזלית. טכניקה זו מסייעת לטהר ביומולקולות מורכבות במצבן הטבעי, אשר ניתן להשתמש בהן עבור יישומים שונים במורד הזרם.

התמקדות איזואלקטרית בפאזה נוזלית: טכניקת אלקטרופורזה להפרדת מולקולות ביו-אקטיביות מתמצית ג'ימנמה סילבסטר גולמית

האמינות של תוצאות בניסויי metabolomics תלוי באפקטיביות והשחזור של הכנת המדגם. תאר היא שיטה קפדנית ומעמיקה שבמאפשרת מיצוי של מטבוליטים מנוזלים ביולוגיים עם האפשרות של המשך ניתוח עד אלפי תרכובות, או רק את שיעורי המתחם של עניין.

טכניקת הכנה רב שלבים לשחזר חוגים מתחם המטבוליט מרובים לעומק וניתוח Metabolomic אינפורמטיבי

פרוטוקול זה מתאר כיצד להכין ולבצע אלקטרופורזה של לכידת שבר נוזלי מקורי ברור (CN-GELFrEE), טכניקת הפרדה מקורית עבור מכלולים ביומולקולריים לא קוולנטיים וחלבונים מדגימות הטרוגניות התואמת לטכניקות ניתוח חלבונים שונות במורד הזרם.

CN-GELFrEE - Native נקה ג&#39;ל eluted שבר נוזלי אלקטרופורזה מילכוד

פרוטוקול מיצוי מקיף של שומנים, מטבוליטים חלבונים מ רקמות ביולוגיות באמצעות מדגם אחד מוצג.

שיטה פשוטה הפיצול מופץ לניתוח מקיף של מטבוליטים, שומנים וחלבונים מדגם יחיד

כאן, אנו מציגים כימות לא משוחדת של חלבון ספציפי לאתר acetylation ו/או succinylation תפוסה (סטויכיומטריה) של פרוטאום כולו באמצעות ניתוח רציומטרי של שינויים אנדוגני שינויים שהוכנסו לאחר כמותיים acylation כימי באמצעות anhydrides התווית על-ידי איזוטופ יציב. בשילוב עם ספקטרומטר מסה רכישה עצמאית נתונים רגישים, מתקבלים באתר מדויק תפוסת מדידות.

כימות של חלבון ספציפי לאתר ליזין Acetylation ו- Succinylation סטויכיומטריה באמצעות ספקטרומטר מסה רכישה עצמאית נתונים

ב זוחלים, ליפידים העור של בני מינו הינן קריטיות לצורך איתות מינית, עם פוטנציאל השימוש בניהול מין פולש. כאן, אנו מתארים את הפרוטוקולים עבור חילוץ העור ליפידים מן המחסן עור או כל בעלי החיים, קביעת ניתוח המסה סה כ שומנים בדם ואת המפריד בין ליפידים באמצעות כרומטוגרפיה fractionation באמצעות העמודה.

בידוד כימי, כימות, הפרדת שומנים בעור של זוחלים

שיטה מפורטת מסופקת כאן ומתארת את הטיהור, הקיפול והאפיון של חלקיקי חלבון בהרכבה עצמית (סאפאנס) לשימוש בפיתוח החיסונים.

ייצור של E. coli-הביע עצמית הרכבה חלקיקי חלבון עבור חיסונים הדורשים Trimeric אפירופה מצגת

המטרה היא לאנגיופלסטיקה ולבודד אקטיביים מולקולות קטנות, פפטידים מתוך תמצית צמח מורכב, חלבונים של חיידקים פתוגניים על ידי שימוש בשיטת מיקוד בשלב נוזלי (הארה ב) שיטה. יתרה מזאת, המולקולות המופרדות זוהו ופעילותם הביוביולוגית אושרה.

הפרדת מולקולות ביו-אקטיביות קטנות, פפטידים ממקורות טבעיים וחלבונים מחיידקים על ידי שיטת התמקדות איזואלקטריים

אנו מציגים שיטה מהירה וחסכונית לייצור מערכת TX-TL נטולת תאים PURE רקומביננטית באמצעות ציוד מעבדה סטנדרטי.

מערכת ללא תאים טהורים של OnePot

למדו כיצד להשתמש במערכת GELFREE 8100 לחלוקת חלבונים לפי משקל מולקולרי בשיטת החילוץ הנוזלי. שיטה זו מאפשרת חלוקה יעילה של עד שמונה דגימות בכ-90 דקות עם שחזור גבוה לניתוחים ביוכימיים מתקדמים.

באמצעות מערכת GELFREE 8100 ההיפוך חלוקה על ההיפוך חלוקה משקל מבוסס מולקולרית עם שלב החילוץ נוזלי

גלה סרטונים נוספים