Name: Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-04T17:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: חקור השתלת אבי העורקים אורתוטופית במודל עכברוש PVG ל-CI לחקר התפתחות vasculopathy כרונית. שיטה זו מאפשרת הערכת היסטופתולוגיה של neointima ומסייעת בפיתוח אסטרטגיות טיפוליות משופרות לשתלים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים כריסטיאן Pahrmann לעבודה היסטולוגית שלה. מימון סוניה Schrepfer קיבל מענק מחקר של דויטשה Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 ו SCHR992/4-1).]

חולדות שוקל כ 250-300 גרם נרכשים מ צ&#39;ארלס ריבר (Sandhofer מאייתים 7, D-97633 Sulzfeld). השתלות מתבצעות באמצעות חולדות PVG כמו תורמים, וחולדות ACI כמקבל. חולדות הם שוכנו בתנאים רגילים, נמאס תקן עכברוש ושולחת libidum מים המודעה. כל המכשירים כירורגית הם מעוקרים לפני השימוש. התורם הכנה: הרדימי עכברוש עם isoflurane (2,5-3%) באמצעות תא אינדוקציה. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את שיער הבטן ובית החזה מקום חולדה על הגב שלה במקום facemask על האף והפה שלה כדי לשמור על הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את אזור הבטן החזה נרחב באמצעות Provo-יוד, השתמש הבא אתנול 80%, לחזור על פעולה זו שלוש פעמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק רפלקסים צובט את הרגליים האחוריות כדי להיות בטוח כי הוא עכברוש anesthesized מספיק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ולגרום לדימום מחודש את העכברוש על ידי פתיחת הבטן חיתוך חור לתוך אבי העורקים בבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לפתוח את בית החזה כדי למצוא את אבי העורקים החזי יורד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מנתחים את אבי העורקים החזי מן הרקמות הסובבות כמו, עצבים שומן הוושט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> משיכה חתיכת 1.5cm של אבי העורקים באמצעות couter, ללא נזק לרקמות של האאורטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Perfuse השתל אבי העורקים ביסודיות עם תמיסת מלח סטרילית קר לאחסן את השתל ב 4 ° C. </li></ol> הנמען: הרדימי עכברוש עם isoflurane (2,5-3%) באמצעות תא אינדוקציה. טמפרטורת הגוף נשמרת במהלך ההליך הכירורגי. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גילוח באזור הבטן להחיל משחה העין כדי למנוע את העיניים מהתייבשות במהלך ההרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את חולדה על הגב שלה במקום facemask על האף והפה שלה כדי לשמור על הרדמה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחטא את אזור הבטן באמצעות Provo-יוד, השתמש הבא אתנול 80%, לחזור על פעולה זו שלוש פעמים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק רפלקסים צובט את הרגליים האחוריות כדי להיות בטוח כי הוא עכברוש anesthesized מספיק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע חתך בבטן קו האמצע המפריד בין העור והשרירים בשני שלבים כדי לפתוח את הבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים את המעיים כפפה אבקת מלח חימם לחות ללא תשלום. מקפלים את הכפפה סביב המעיים כדי למנוע אובדן לחות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את רקמת שומן המכסה את אבי העורקים בבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח האאורטה בצורת באזור infrarenal אל הסתעפות, נזהר שלא לגרום נזק על ענפי הכלים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אם הענפים ולקשור הכרחי של האאורטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ראשית להשתמש מהדק microsurgical מצד infrarenal של האאורטה גזור כדי לעצור את זרימת הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בשלב הבא, במקום לצבוט שני אחרי הסתעפות של האאורטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עכשיו את זרימת הדם נעצרת, להסיר קטע קצר של האאורטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח את אבי העורקים תורם השתל, כי כבר שמרו מלוחים סטרילית 0,9% על הקרח, לקצר אותו לאורך הולם ומקם אותה בפער. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את אבי העורקים אל אבי העורקים התורם למקבל, ביצוע תפרים פועל באמצעות 8-0 prolene תפר (Ethicon, Norderstedt, גרמניה). התחל עם השקה הקצה לקצה הגולגולת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר השקה דיסטלי end-to-end הוא סיים, בזהירות לפתוח את מהדק דיסטלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כאשר יש דימום לא לאחר פתיחת מלחציים דיסטלי, בזהירות לפתוח את מהדק גולגולתי. במקרה של דימום התפרים, לסגור את מהדק שוב, לאתר את הדימום לעצור את הדימום באמצעות אחד תפר אחד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> צריך להיות גלוי הדופק בסוף הדיסטלי של האאורטה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הבא להעביר את המעיים בחזרה לתוך הבטן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> רוקן את הבטן עם מי מלח סטרילית prewarmed. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את שכבת השרירים של דופן הבטן באמצעות תפרים ריצה 6-0 prolene (Ethicon, Norderstedt, גרמניה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש 5-0 prolene (Ethicon, Norderstedt, גרמניה) פועל תפרים כדי לסגור את העור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעוד העכברוש עדיין הרדמה, להזריק 4-5mg/kg Carprofen תת עורי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לספק שיכוך כאבים מספיק עבור סוג זה של ההליך, metamizol מתווסף מי השתייה (50 מ&quot;ג לכל 100 מ&quot;ל Metamizol) עבור משככי כאבים להשתלה 3 ימים הודעה. </li></ol>

<ol><li>Deuse, T., Hoyt, G., Koyanagi, T., Robbins, R. C., Schrepfer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+and+Inhibition+But+Not+Reversion+of+Chronic+Allograft+Vasculopathy+by+FK778%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prevention and Inhibition But Not Reversion of Chronic Allograft Vasculopathy by FK778.</a> Transplantation. 85, 870-877 (2008).</li>
<li>Mennander, A., Tiisala, S., Halttunen, J., Yilmaz, S., Paavonen, T., Hayry, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+rejection+in+rat+allografts.+An+experimental+model+for+transplant+arteriosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Chronic rejection in rat allografts. An experimental model for transplant arteriosclerosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 11, 671-680 (1991).</li>
<li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 57, 225-225 (1969).</li>
<li>Poston, R. S., Billingham, M., Hoyt, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin+reverses+chronic+graft+vascular+disease+in+a+novel+cardiac+allograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Rapamycin reverses chronic graft vascular disease in a novel cardiac allograft model.</a> Circulation. 100, 67-100 (1999).</li>
<li>Schrepfer, S., Deuse, T., Koch-Nolte, F., Krieger, T., Haddad, M., Schäfer, H., Pelletier, M. P., Robbins, R. C., Reichenspurner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FK778+in+Experimental+Xenotransplantation%3A+A+Detailed+Analysis+of+Drug+Efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">FK778 in Experimental Xenotransplantation: A Detailed Analysis of Drug Efficacy.</a> J Heart Lung Transplant. 26, 70-77 (2007).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

מכמה סיבות מצאנו את המודל orthotopic השתלת מסתם אאורטלי דרך מדויקת יותר לחקור את הפיתוח של TVP לעומת המודל heterotopic השתלת לב: לגבי טכניקה כירורגית, המודל השתלת מסתם אאורטלי מגלם שיטה אפשרית בקלות, המחייב אך ורק את ההישג של end-to-end-השקה, ואילו המודל heterotopic השתלת לב עשוי להיחשב אתגר יותר מורכב מועדת לטעויות על הכישורים של מנתח , המחייב end-to-הצד השקה על שני כלי מרכזי. ניתוח ומדידה של דגימות היסטו...

<table><tbody><tr><td>מיקרוסקופ כירורגי (הגדלה של 25x)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>איסופלורן</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מכשיר גילוח</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>פרובו-יודין (Provo-Iodine)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>סליין 0.9% קר מאוד</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>סליין סטרילי בריכוז 0.9% שחומם מראש</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>משחה לעין</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>כפפה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מספרי מיקרו-כירורגיה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>פינצטה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מהבקים</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>חוט תפירה 8-0 (prolene)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>חוט תפירה 6-0 (prolene)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>חוט תפירה 5-0 (prolene)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>קרופרופן</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מטמיזול</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מקלונים לבד (Q-tips)</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

מודלים המחקר של דחייה כרונית הם חיוניים כדי לחקור תהליכים pathobiological ו pathophysiological במהלך הפיתוח של vasculopathy ההשתלה (TVP). המודל החי נפוץ לב וכלי דם מחקרים דחייה כרונית הוא הלב heterotopic השתלת המודל שבוצעו מכרסמים במעבדה. מודל זה נמצא בשימוש נרחב מאז הניסויים אונו לינדסי (3) פרסם את הטכניקה שלהם. כדי לנתח את הממצאים כלי הדם, הלב צריך להיות מחולק וכלי הכל צריך להימדד. שיטה נוספת לחקור דחייה כרונית של הלב וכלי הדם התהיות המודל השתלת מסתם אאורטלי (1, 2). בשנת המודל אבי העורקים orthotopic ההשתלה, האאורטה יכול בקלות להיות מוערכת בהיסטולוגיה (2). המודל PVG-to-ACI שימושית במיוחד עבור CAV מחקרים, שכן דחייה חריפה של כלי הדם אינו גורם בלבול גדול וטיפול ציקלוספורין A (CSA) אינה מונעת את הפיתוח של CAV, בדומה למה שאנו מוצאים הגדרה קלינית (4 ). A7 יום בתקופה של CSA נדרש במודל זה כדי למנוע דחייה חריפה להשיג ההישרדות לטווח ארוך עם התפתחות TVP. מודל זה יכול לשמש גם כדי לחקור דחייה תאית אקוטית נמק התקשורת מודלים xenogeneic (5).

וידאו זה מדגים את מודל orthotopic השתלת מסתם אאורטלי כמודל פשוט ללמוד את הפיתוח של vasculopathy ההשתלה (TVP) בחולדות.

Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

מודלים מחקריים של דחייה כרונית חיוניים לבחינת תהליכים פתובביולוגיים ופתופיזיולוגיים במהלך התפתחות השתלה...

המטרה הכללית של הליך זה היא לבסס מודל מדויק ושיטה בת feasible לבחינת התפתחות של וסקולופתיית השתלה. דבר זה מושג באמצעות שימוש בשילוב זני PVG ו-CI. השלב השני של ההליך הוא קצירת האורטה של התורם.השלב השלישי של הפרוצדורה הוא הכנת המקבל. השלב האחרון של הפרוצדורה הוא ביצוע אנסטומוזה בין האורטה של התורמה לאורטה של המקבל. לבסוף, ניתן לקבל תוצאות המראות היווצרות של נאו-אינטימה (neointima) באמצעות היסטופתולוגיה.שלום, אני סוניה שוואפל, פרופסור לאימונולוגיה של השתלות במעבדת Thet Eye במרכז הלב האוניברסיטאי בהמבורג, גרמניה. ואני מניש דובוף, גם אני ממעבדת TS Eye.המעבדה שלי מתעניינת באימונולוגיה של השתלות. בסרטון זה נציג בפניכם את מודל ההשתלה האורטוטופית של אבי העורקים, מודל פשוט ותקף לחקר התפתחות של וסקולופתיה לאחר השתלה בעכברים. אנו משתמשים בהליך זה במעבדה שלנו כדי לחקור דחייה כרונית בהשתלות קרדיווסקולריות.במודל השתלת אבי העורקים האורתוטופית, ניתן להעריך את אבי העורקים בקלות באופן היסטולוגי. בנוסף, השתלת PVG למודל CI שימושית במיוחד למחקרי וסקולופתיה של השתלות. זאת מכיוון שדחייה וסקולרית חריפה אינה מהווה גורם הפרעה מרכזי, והתפתחות הווסקולופתיה דומה לממצאים הקליניים.אם כן, נתחיל. התורם המשמש להשתלה אורטוטופית של אבי העורקים הוא חולדה מסוג PVG השוקלת כ-250 עד 300 גרם. לאחר הרדמת בעל החיים, גלחו את ה

orthotopic-aortic-transplantation-rat-model-to-study-development

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אנו מתארים טכניקה שבה קטע של אב העורקים בבטן מעכבר הושתל orthotopically ממש מתחת לעורקי הכליה בנמען אלוגנאית או syngeneic. טכניקה זו יכולה להיות שימושית במחקרים בם השתלה של עורקים גדולים של גודל אחיד נחשבת יתרון.

השתלת אב עורקים בעכברי orthotopic לחקר מחלת כלי דם

אנו מתארים פרוטוקול להשתלת אינטרפוזיציה של אבי העורקים בעכברים. מטרת הפרוטוקול היא לספק מודל שבאמצעותו ניתן לחקור תהליכים פתולוגיים ואסטרטגיות טיפוליות הרלוונטיות לתגובות אלואימוניות בעורקים ולשינויים העורקיים הנובעים מכך התורמים לכישלון השתלת איברים.

עכבר דגם של דחיית כלי דם הנוצרת על-Alloimmune וטרשת עורקים להשתלות

הכניסה פוליאוריתן קטטר לתוך לומן אבי העורקים ואת תפר מצדו של אבי העורקים לגרום היפוקסיה כרונית עקב זילוח של adventitial צינורי. מאמר זה מתאר מודל בעלי חיים הרומן של מפרצת אב-עורקית של הבטן (AAA) עם מאפיינים דומים לאלה של AAA בבני אדם.

יצירת מודל מכרסם של מפרצת אבי העורקים בבטן על ידי חסימת ואסה Adventitial וזורום זלוף

כאן, אנו מציגים פרוטוקול של הטרוסקסואלים השתלת אבי העורקים בעכברים באמצעות שימוש בטכניקת השרוול שאינו תפר במודל מורטין הצווארי. מודל זה יכול לשמש כדי ללמוד את הפתולוגיה הבסיסית של השתלת האלופתיה כרונית (קו) והוא יכול לעזור להעריך סוכנים רפואיים חדשים כדי למנוע את הקמתה.

מורי צוואר הרחם מורנה השתלת מודל באמצעות שינוי שאינו תפר שיטה השרוול

אנו מתארים מודל של הטרוהנושא השתלת לב הבטן בחולדות, רומז שינויים של אסטרטגיות נוכחיות, אשר להוביל גישה כירורגית פשוטה. בנוסף, אנו מתארים מודל דחייה הרומן על-ידי הזרקה באוזן של תאים חיוניים שרירי הלב, המאפשר ניתוח נוסף השתלת אימונולוגיים בחולדות.

מודל אימונוולוגי עבור הלב הטרוולפית ושריר הלב השתלת תא בחולדות

מאמר זה מציג פרוטוקול השתלת דש אוסטאומיו-עורית הטרוטופית חלקית בחולדות ותוצאותיו הפוטנציאליות במעקב אמצע הטווח.

מודל השתלת הינדימבה הטרוטופית חלקית בחולדות

פרוטוקול זה מתאר שיטה פשוטה ויעילה להשתלת עלוני מסתם אבי העורקים מתחת לכמוסה הכליתית כדי לאפשר מחקר של אלוראקטיביות של מסתמי הלב.

מודל פשוט להשתלת מסתם לב הטרוטופי במכרסמים

אנו מדגימים כיצד ליצור מודל מורין של השתלת שורש ריאתי לתוך אבי העורקים היורד כדי לדמות את הליך רוס. מודל זה מאפשר הערכה לטווח בינוני/ארוך של שיפוץ השתלת ריאות במצב מערכתי, המייצג את הבסיס לפיתוח אסטרטגיות טיפוליות לקידום הסתגלותו.

מודל מכרסמים של פעולת רוס: השתלת שתל עורק ריאות סינגני במיקום מערכתי

מודל השתלת הכליה האורתטופית של חולדה תורם לחקר המנגנון של דחיית כליות. המודל הנוכחי מגביר את הישרדותם של המושתלים ללא הפרעה לאספקת הדם ולרפלוקס ורידי של פלג הגוף התחתון באמצעות אנסטומוזיס מקצה לקצה של השתלת כליות ושיטת "מנהרה" מקצה לקצה של אנסטומוזיס בשלפוחית השתן של השופכן.

מודל השתלת כליה אורתוטופית של חולדה לדחיית כליאה

מחקר זה מדגים טכניקת השתלת לב בטן הטרוטופית הניתנת לשחזור בחולדות שמתחילים יכולים ללמוד ולבצע. בנוסף, מודל חדש של רגורגיטציה של אבי העורקים בחולדות נוצר על ידי ביצוע השתלת לב בטן הטרוטופית ופגיעה במסתם אבי העורקים של התורם באמצעות חוט מנחה לאחר הקציר.

השתלת לב בטן הטרוטופית שונה ומודל רגורגיטציה אבי העורקים החדש בחולדות

עבודה זו מציגה מודל חייתי של פיברוזיס המושרה על ידי מעבר אנדותל למזנכימלי, כפי שניתן לראות במומים לבביים מולדים כגון היצרות קריטית של אבי העורקים או תסמונת לב שמאל היפופלסטית, המאפשרת הערכה היסטולוגית מפורטת של רקמות, זיהוי מסלולי איתות רגולטוריים ובדיקת אפשרויות טיפול.

מודל השתלת לב חולדה הטרוטופי בילוד לחקר המעבר מאנדותל למזנכימלי

חקור השתלת אבי העורקים אורתוטופית במודל עכברוש PVG ל-CI לחקר התפתחות vasculopathy כרונית. שיטה זו מאפשרת הערכת היסטופתולוגיה של neointima ומסייעת בפיתוח אסטרטגיות טיפוליות משופרות לשתלים.

Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

גלה סרטונים נוספים