הזרקה אורתוטופית לפד שומן החלב: ביסוס סרטן השד בעכברות

ראשית, לקבוע את קו תאי סרטן השד הרצוי בתרבית. יום לפני הניתוח, לגלח את בטנו של העכבר ולהשתמש קרם depilatory כדי להסיר את הפרווה ולחשוף את הפטמות המפשעות. ביום הניתוח, לאסוף את התאים, להרדים את העכבר ולאשר חוסר תגובה צביטת בוהן. בעזרת פינצטה, צבטו את העור סביב הפטמה כדי ליצור תעלה מורמת.

לאחר מכן, עם מזרק של תאים שנאספו, לחדור את העור. המחט צריכה לעקוב אחר המנהרה עד שהקצה מתקרב לפטמה. העבירו בעדינות את קצה המחט למעלה לתוך כרית שומן החלב, ממש מתחת לפטמה. הסר את הפינצטה כדי ליצור אוהל עור עם המחט ולאחר מכן להזריק לאט את התאים.

לבסוף, משכו את המזרק, תוך הקפדה לא להפריע לבליטה העגולה המקיפה את הפטמה. תאים מוזרקים וגידולים הבאים מבטאים לוציפראז וניתן לעקוב אחריהם באמצעות הדמיה ביולומינסנטית. בפרוטוקול לדוגמה, נראה את הקמתו של סרטן שד אורתוטופי מורין. ביום שלפני הניתוח, יש לרסן ידנית את העכבר המקבל ולהפוך את בטן החיה כלפי מעלה לפרווה כדי לגלח אותה סביב הפטמות הרביעיות.

לנגב את הפרווה עם שכבה דקה של קרם depilatory. השתמשו במים מזוקקים כדי להסיר את הקרם לאחר 30 עד 60 שניות. ולייבש את העכבר עם מגבות נייר רכות. ביום הניתוח, לדלל את תרחיף תאי סרטן השד מורין ל 2 x 10 לתאים 5 למיליליטר של ריכוז PBS בצינור מיקרוצנטריפוגה סטרילי על קרח.

לפני כל הזרקה, לטעון מזרק אחד, מיליליטר אחד מצויד מחט 0.45 על 16,