אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 2:56 דק׳ • April 30th, 2023
- התחילו בהכנת התרכובת לבדיקת רעילות, והפיצו אותה לבארות של צלחת בדיקה. מעבירים תולעים בשלב ההתפתחותי המתאים לכל באר, ומיד מפעילים טיימר. שימו לב לתולעים פגומות ואל תכללו אותן בחישובי ההישרדות שלכם.
לאחר זמן שנקבע מראש, ספרו את מספר התולעים שעדיין חיות בכל באר. האור הבהיר של מיקרוסקופ דיסקציה או טפיחה עדינה על הצלחת אמורים לגרום לתולעים חיות לזוז. חזור על תצפית זו לאחר כל מרווח זמן, עד שרוב בעלי החיים מתים. בפרוטוקול הבא נצפה בזמן ההישרדות של זחלי L4 במהלך חשיפה לפרקוואט, תרכובת הגורמת לעקה חמצונית.
- בהדגמה זו, עקה חמצונית תיגרם באמצעות paraquat. הכינו תמיסת פרקוואט טרייה של 100 מילימולרית כמתואר בטקסט הפרוטוקול הנלווה. פרקוואט היא תרכובת מסוכנת ורעילה ביותר, ויש לטפל בה על פי הנחיות מתאימות.
פיפטה 40 מיקרוליטר של תמיסת הפרקוואט לכל באר של צלחת 96 בארות. השתמש לפחות 12 בארות כמו העתקים של כל מצב שנבדק. בעזרת קוטף תולעי תיל פלטינה, מעבירים חמישה עד שמונה זחלי L4 לכל באר.
ציין את שעת ההתחלה ואת שעת הסיום עבור כל מצב שנבדק. מניחים את צלחת 96 בארות על 20 מעלות צלזיוס. שעה לאחר שעת ההתחלה, הניחו ציונים של בעלי חיים מתים וחיים באמצעות מיקרוסקופ מנתח. נערו בעדינות את הצלחת לפני שתתחילו לספור.
תולעים שאינן זזות גם לאחר שהבחינו באור בעוצמה גבוהה נחשבות למתות. הסתכלו על צורת התולעת, הזנבות
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים