בדיקת הטלת ביצים: שיטה לכימות התנהגות הטלת הביצים של C. elegans

- ניסויים לכימות הטלת ביצים חשפו את המרכיבים הנוירולוגיים והרמזים הסביבתיים המשפיעים על התנהגות זו. שינויים בהתנהגות הטלת הביצים עשויים להצביע על השפעות רעילות על המערכת העצבית-שרירית או מערכת הרבייה.

כדי לבדוק רעילות, הרימו ביציות מסונכרנות התפתחותית על לוחות מדיה לגדילה של נמטודות עם ובלי תרכובת העניין. ניסויים אלה משתמשים במזון תולעים חיידקיות שהומתו בחום כדי למנוע מהחיידקים לעכל את התרכובת. תנו לדור הזה לצמוח עד שיהפכו לצעירים.

לאחר מכן העבירו תולעים לצלחות חדשות בתנאי בקרה או ניסוי מתאימים, והניחו להן להטיל ביצים למשך 24 שעות. בכל יום, מעבירים את הבוגרים לצלחת חדשה, וסופרים את הביצים על הצלחת הקודמת. ממשיכים עד שהבוגרים מפסיקים להטיל, כחמישה ימים לתולעים מסוג בר. חישוב מספר הביצים המוטלות לכל תולעת בוגרת בכל יום, וסכם את הסכום הכולל בסוף הניסוי.

בפרוטוקול לדוגמה, נשתמש בבדיקת הטלת הביצים C. elegans כדי לבדוק אטופוסיד - תרופה כימותרפית - לרעילות רבייה.

- לדגור על הביצים המסונכרנות לגיל על צלחת NGM המכילה DMSO או אטופוסיד בטמפרטורה של 20 מעלות צלזיוס למשך 64 שעות, עד לשלב הבוגר הצעיר. העבירו חמש תולעים בוגרות לצלחות NGM חדשות ללא כימיקלים או צלחות NGM חדשות המכילות את אותו טיפול מקדים כימי, ודגרו עליהן למשך 24 שעות.

העבירו את הבוגרים לצלחות NGM חדשות, כפי שהודגם זה עתה, וספרו את מספר הביצים מדי יום. בנוסף, ספרו את התולעים שזחלו, מתו או שבקעו מבפנים. לבצע חישובים על פי פרוטוקול הטקסט.