JoVE Encyclopedia of Experiments
ביולוגיה
0 צפיות • 2:25 דק' • April 30th, 2023
- ל-C. elegans יש שני סוגי שרירים. השרירים הסרקומרים הבודדים או הלא מפושטים כוללים את אלה בלוע ובפות. שרירי הסרקומרה המרובים (באנגלית: multiple sarcomere או oblicly striated muscles) הם שרירי דופן גוף בצורת רומבואיד, הנקראים על שם התבנית הרגילה של סיבי המיוזין שלהם.
הם מסודרים בזוגות מדורגים כארבעה צרורות המכוונים לאורך בארבעת הרבעים של גוף התולעת הנראים בחתך רוחב. לכל תא יש נקודות חיבור רבות במרווחים שווים להיפודרמיס ולציפורן. סידור זה מסייע לתרגם גלים של התכווצויות שרירים לתנועה חלקה.
כדי לדמיין שרירים אלה, דמיינו תולעים משותקות עם מיוזין GFP מהונדס על ידי מיקרוסקופ קונפוקלי פלואורסצנטי. השתמש בתוכנת ניתוח כדי למדוד את השטח של תא שריר מפוספס ואת כל הפערים בתבנית הסיבים של אותו תא. פערים בארגון סיבי השריר יכולים להצביע על הפרעה על ידי פירוק סיבים או הצטברות של פסולת תאית. חשב את היחס בין שטח הפער לשטח הכולל כדי להגדיר את כמות ההפרעה. בפרוטוקול לדוגמה, נעריך כמותית את המורפולוגיה של שרירי דופן הגוף באמצעות פיג'י.
- כדי למדוד את שטח תא השריר, פתחו את התמונה בתוכנת פיג'י והשתמשו בבחירת מצולע כדי לעקוב בזהירות סביב תא שריר אלכסוני יחיד. התאם את קו המצולע בסוף על-ידי גרירת נקודת העיגון לשיפור העקיבה. נווט אל הכרטיסייה נתח בחלק העליון של התוכנה ולחץ על מדידה כדי לחשב את האזור שנבחר.
לתאי שריר עם אזור מנוון או חסר, עקבו אחר האזור החסר בעזרת הכלי בחירת מצולע ולחצו שוב על 'מדידה'. אם יש פערים מרובים, עקוב אחר כל אחד מהם בנפרד. חשב את היחס בין שטח הרווח לשטח התא כולו. יחס גבוה מצביע על מידה גבוהה יותר של ניוון שרירים, ואם אין אזורים חסרים, היחס מחושב כאפס.