אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 2:14 דק׳ • April 30th, 2023
- בתור התחלה, הניחו זחל דג זברה בתא הקלטה, כגון באר בעלת תחתית זכוכית, שבה הזחל יכול לשחות. לאסוף paramecia, הטרף, בעזרת micropipette, ומניחים אותם בחדר ההקלטה. לאחר מכן, שים טיפה קטנה של מים במרכז הכיסוי להחליק ולהניח אותו מעל החדר כדי למנוע בועת אוויר.
כעת מקם את התא על מערכת התאורה המצוידת באור טבעת LED לבן כדי לחסל צללים ולהפוך את האורגניזמים לגלויים בבירור. התבונן בהתנהגות לכידת הטרף באמצעות מערכת רישום התנהגותית. ברגע שהטרף נראה לעין, הזחל מכנס את עיניו ומבצע סיבוב J כדי לכוון את גופו לעבר הטרף ולוכד אותו. אנו יכולים לכמת את התנהגות לכידת הטרף על ידי רישום מספר הפרמציה שנותרה בתא לאורך זמן. בפרוטוקול הבא, נעריך את התנהגות לכידת הטרף של זחל דג הזברה לאחר אבלציה בלייזר של נוירונים ספציפיים.
- לאחר הגדרת מערכת ההקלטה ההתנהגותית והכנסת זחל לתא הקלטה על פי פרוטוקול הטקסט, השתמשו במיקרופיפטה כדי לאסוף 50 פרמציה והניחו אותם בתא ההקלטה. כדי להניח את החלקת הכיסוי על גבי תא ההקלטה, הניחו טיפה קטנה של מים על החלקת הכיסוי לפני הנחתה על משטח המים של תא ההקלטה כדי למנוע החדרת אוויר לתא.
מקמו את תא ההקלטה במערכת התאורה. לאחר מכן התחל את הקלטת קיטועי הזמן ב -10 פריימים לשנייה למשך 11 דקות. לבסוף, לבצע ניתוח על פי פרוטוקול הטקסט.