הזדווגות וביציות בימוי: שיטה ליצירת עוברים ומייונם לפי שלב התפתחותי

0 views • 2:52 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- התחילו עם מיכל הזדווגות, מיכל עם תוספת נשלפת המאפשרת לביצים ליפול דרכם. הוסיפו שני דגים בוגרים זכרים ושלוש נקבות למיכל הזדווגות חצוי בערב לפני איסוף העוברים כדי להתאקלם זה עם זה למשך הלילה.

למחרת בבוקר, מעבירים את הדגים למיכל הזדווגות חדש המכיל מי מערכת ומסירים את המחיצה. חכו 15 עד 30 דקות כדי לתת לדג זמן להזדווג ולהשריץ.

כעת אספו את העוברים ואחסנו אותם בצלוחית פטרי המכילה את מדיום העובר של האנק. לגדל אותם ב 28.5 מעלות צלזיוס לאורך כל הפרוטוקול. לבחון את המורפולוגיה של העוברים תחת מיקרוסקופ מנתח.

תוכלו להבחין במספר תכונות התפתחותיות. מחשוף של הבלסטודיסק מוליד תאים מרובים. הבלסטודרם לובש צורה של הפוכה מעל תא החלמון. קטעי מזודרם פרקסיאליים מתפתחים בחלק הגבי של העובר וכן הלאה.

מעבר ל-24 שעות לאחר ההפריה, פשוט מיין את העוברים לפי אורך הגוף הכולל. בפרוטוקול לדוגמה, נגדיר הזדווגות של דגי כתב mCherry טרנסגניים ונמיין את העוברים שנוצרו.

- כדי להתחיל, עוברים בתרבית עד גיל שלושה חודשים, שהיא בגרות הרבייה. הפרידו שני דגים זכרים בוגרים ושלוש נקבות מהזן הרצוי למכלי הזדווגות מחולקים של מי מערכת מתוקים בערב שלפני איסוף העוברים. למחרת בבוקר, לאחר שהאורות נדלקים, הסירו את המחיצה ואפשרו לדגים להזדווג באופן טבעי עד שהעוברים נצפים בתחתית המיכל.

אספו עוברים במרווחים של 30 דקות והפרידו צלחות פטרי של תווך העובר עד לאיסוף המספר הרצוי. כדי לשלב את העוברים, תרבו אותם בקבוצות של 50 עד 75 לכל צלחת פטרי של 10 סנטימטרים כדי לקדם תזמון התפתחותי עקבי של כל העוברים. לאחר מכן לשמור את הצלחות ב 28.5 מעלות צלזיוס.

יש למדוד את גיל העובר באמצעות מספר הסומיט לאחר הסגמנטציה עד כ-24 שעות לאחר ההפריה, או HPF, ולהפריד בין העוברים על פי גיל התפתחותי.

13:01

באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי גיליון אור פיתוח תמונה דג הזברה העין

Related Videos

0 Views

10:38

הדור של Parabiotic דג הזברה עוברים ידי Fusion כירורגי של פיתוח Blastulae

Related Videos

0 Views

08:55

ויזואליזציה של הפעילות החשמלית הסלולר עוברי מוקדם דג זברה, גידולים

Related Videos

0 Views

08:22

מסיק והכנת תסיסנית עוברים הקלטה אלקטרו ונהלים אחרים

Related Videos

0 Views

13:48

Dissection חיים של תסיסנית עוברים: שיטות יעיל עבור הקרנת אוספים Mutant ידי מכתים נוגדן

Related Videos

0 Views

11:02

הכרומטין Assay immunoprecipitation עבור גנים ספציפיים רקמות באמצעות שלבים מוקדמים של עוברי עכברים

Related Videos

0 Views

08:43

Loss- ו-של-פונקצית רווח גישה לחקר תא מוקדם קובעי גורל preimplantation עכבר עובר

Related Videos

0 Views

11:19

מניפולציה ploidy של עוברי דג הזברה עם חום 2 הלם טיפול

Related Videos

0 Views

10:35

הדור של הגנום כולו כרומטין קונפורמציה לכידת ספריות מעוברים דרוזופילה בחוזקה בשלבים המוקדמים

Related Videos

0 Views

09:36

להמחיש את צומת ואת צלחת Notochordal Gastrulating עוברי העכבר באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סריקה כל הר Immunofluorescence

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026