אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 4:47 דק׳ • April 30th, 2023
- קרדיומיופתיה היא מצב שבו שריר הלב נחלש ומאבד את היכולת לשאוב דם. מצב זה יכול להיות משוכפל בדגי זברה. ראשית, לדלל תמיסת מלאי של תרופה האחראית על רעילות לב בתמיסת מלח מאוזנת של הנקס כדי להכין מספר ריכוזי עבודה. לאחר מכן, הניחו דג מורדם טריקאין, בצד הגחון כלפי מעלה, על ספוג אחיזה מתחת למיקרוסקופ מנתח. מקמו את המחט בין סנפירי האגן בזווית של 45 מעלות מאופקית.
עכשיו בעדינות לדחוף את המחט 1 עד 2 מ"מ לתוך חלל הצפק לאט להזריק את הפתרון התרופה. המתינו חמש שניות לפני שאתם שולפים את המחט כדי למנוע מהתמיסה לדלוף החוצה. העבירו מיד את הדגים למיכל נקי המכיל מי מערכת מתוקים. רשום את מספר הדגים שמתים בכל יום עקב רעילות לב חמורה, נזק לשריר הלב. התרופה נקשרת לקולטני מוות הנמצאים על קרום התא קרדיומיוציטים ומפעילה אפופטוזיס, וכתוצאה מכך רעילות לב חמורה.
צור עקומת הישרדות, גרף המציג את הסתברות ההישרדות לאורך זמן עבור כל ריכוז תרופה. בדוגמה, נזריק דוקסורוביצין, או DOX, כדי לגרום לקרדיומיופתיה בדג זברה בוגר בשתי דרכים.
לפני הזרקת DOX לדגים, צמו את הדג במשך 24 שעות. לאחר מכן, קבץ את הדגים. בזמן הרדמה, השתמשו בנייר סינון נקי כדי לייבש כל דג ולמדוד את משקל גופו. הכינו קבוצות דגים שנמצאות כולן בטווח של 10% מאותו משקל גוף, כך שניתן יהיה להזריק לכל קבוצה את אותה מנה של DOX. לאחר מכן, חשב את ריכוז העבודה של DOX
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים