zPDX-אנליזה של פולשניות: חקירת התנהגות פולשנית של תאי סרטן גרורתיים בעוברי זברה Xenografts

עוברי דגי זברה שימושיים בחקר פלישת תאים סרטניים. הכן מודלים של xenograft על ידי הזרקת תאים סרטניים גרורתיים מסומנים פלואורסצנטית ותאים לא סרטניים לתוך החלל perivitelline של שני עוברים טרנסגניים. החלל הפריביטלי הוא רווח בין פרידרם העובר לבין שק החלמון. תנו לעוברים לגדול לתקופה הרצויה.

במהלך תקופה זו, תאים סרטניים גרורתיים מתחלקים באגרסיביות באתר ההזרקה בעוד תאים לא סרטניים נשארים יציבים. לאחר הדגירה, השתמשו בפיפט פסטר כדי להעביר עוברים לצלחת תרחיף תחתית זכוכית. יש להסיר עודפי מי ביצית ולמקם את העוברים בתנוחה הרצויה לצורך הדמיה. שמרו על כיסוי על גבי התבשיל והניחו את התבשיל תחת מיקרוסקופ שדה בהיר.

צלם תמונות ונתח את ההתנהגות הפולשנית של שני סוגי התאים. תאים סרטניים גרורתיים נוטים לפלוש לכלי הדם ממקום ההזרקה. הם נעים לאורך מחזור הדם, ואז פולשים לתוך הרקמה שמסביב כדי להתרבות. לעומת זאת, התאים הלא סרטניים נשארים במקום ההזרקה. בפרוטוקול לדוגמה, אנו מזריקים תאי סרטן שד לתוך החלל perivitelline ואת הצינור של Cuvier במודלים xenograft של דגי זברה כדי לחקור גרורות.

כדי לדמיין גרורות, עם פיפטה פסטר, להעביר את העובר דג זברה מוזרק לצלחת פוליסטירן תחתית זכוכית ולהסיר עודפי מי ביצה. דמיינו את כל גוף העובר במיקרוסקופ קונפוקלי המוגדר להגדלה נמוכה כדי לקבל תבנית כללית של הפצת תאי גידול.

השתמש בלייזר של 488 ננומטר כדי להמחיש את כלי הדם של עובר דג הזברה ובלייזר של 543 ננומטר כדי להמחיש תאי גידול מושתלים המסומנים בטוש פלואורסצנטי אדום. לאחר מכן, סרוק את העובר בשמונה עד עשרה שלבים כדי לרכוש תמונה באיכות גבוהה.

• Zebrafish Embryo Xenografts - A research tool used to study cancer cell invasion.
• Perivitelline Space - A niche between the zebrafish embryo periderm and the yolk sac.
• Metastatic Cancer Cells - Malignant cells that can spread aggressively and invade lots areas .
• Non-cancerous Cells - Stable cells that do not invade or proliferate like cancer cells.
• Invasiveness - The capacity of cancer cells to infiltrate healthy tissues.

• Define the concept of Zebrafish Embryo Xenografts - These are used for studying cancer invasion (e.g., invasiveness).
• Outline the Perivitelline Space - It serves as the injection site for xenografts (e.g., perivitelline space zebrafish).
• Describe Metastatic Cancer Cells and their aggressive division and invasion traits.
• Connect to Experiment - The injected metastatic and non-cancerous cells in embryos facilitate the investigation of cellular behaviors.

• What is Zebrafish Embryo Xenografts and how it aids in studying cell invasiveness?
• What is the role of Perivitelline Space in these xenograft models?
• What difference in behavior can be expected between Metastatic Cancer Cells and Non-cancerous Cells?

• Practical Applications - Xenografts help in understanding cancer cell behaviors (e.g., invasiveness).
• Industry Impact - Such studies can guide developments in healthcare and cancer research.
• Societal Importance - Findings may result in better cancer treatments (e.g., combating malignancy).
• Scientific Advances -The methodology aids in real-time tracking of cell actions.