הזרקת ורידים בזנב: שיטה למתן תאים סרטניים למחקרים גרורתיים במודל עכבר

התחילו בהוספת טריפסין לצלחת פטרי המכילה תאי סרטן שד מסומנים כדי לנתק אותם מפני השטח. הוסף מדיום המכיל סרום כדי לעצור את הפעולה של טריפסין. מעבירים את מתלה התא לצינור חרוטי וצנטריפוגות אותו לתא כדורי.

השליכו את הסופרנאטנט והשהו מחדש את התאים במי מלח חוצצי פוספט. הניחו את הצינור על קרח כדי להאט את חילוף החומרים בתאים. טען את מתלה התא המכיל את כמות התאים הנדרשת במזרק נעילת Luer וקבע עליו מחט.

הניחו עכבר במתקן ריסון מכרסם עם זנבו בחוץ. טובלים את הזנב במים חמים כדי להרחיב את הוורידים. ישנם שני ורידים בצדדים הרוחביים ועורק בצד הגחוני של הזנב. נגבו את הזנב באלכוהול, הכניסו את המחט והזריקו את מתלה התא.

ברגע שהם מגיעים לזרם הדם, התאים הסרטניים המוזרקים פולשים לאיברים, כגון הריאות, ומתרבים. לאט להסיר את המחט ולהשתמש גזה סטרילית באתר ההזרקה כדי להפעיל לחץ לעצור דימום. להחזיר את העכבר לכלוב שלו ולהבטיח התאוששות מלאה. בפרוטוקול הבא אנו מדגימים הזרקה של תאי סרטן גרורתיים מסומנים למודל עכברי כדי לכמת גרורות ונשאות של סרטן השד.

שאפו את המדיה ושטפו את לוחות התאים עם 1X PBS. טריפסינזציה של התאים עם 5 מיליליטר טריפסין לכל צלחת של 15 ס"מ למשך שתיים עד חמש דקות ולהעביר את כל התאים לצינור חרוט. שטפו את התאים הנותרים מצלחת תרבית הרקמה עם מספיק מצע צמיחה שלם כדי להרוות את הטריפסין. מוסיפים את הכביסה לאותו