JoVE Encyclopedia of Experiments
מחקר סרטן
0 צפיות • 5:27 דק' • April 30th, 2023
-- תאי הגידול מראים פעילות גליקולית גבוהה. נותבי רדיו כגון F18 fluorodeoxyglucose - FDG - הם אנלוגים גלוקוז המשמשים לצפייה ברקמות סרטניות. ראשית, למדוד את הדעיכה הרדיואקטיבית של תמיסת FDG בכיול מינון. ציירו תמיסת FDG במזרק אינסולין והניחו במחזיק מזרק עופרת. הניחו עכבר בטמפרטורה חמה, כדי למנוע הפעלת רקמת שומן חומה. רקמת שומן חומה פעילה מובילה לספיגה רבה יותר של FDG. מרדימים את העכבר במשך שתי דקות ומעבירים אותו לריסון. דוקרים את הזנב ומודדים את רמת הגלוקוז בדם. היפרגליקמיה יכולה להוביל לספיגה מופחתת של FDG על ידי הריאות.
בתנאים חמים, לחטא ולהרחיב את וריד הזנב של העכבר. הזרקת תמיסת FDG. העבר את העכבר בתוך תא ההרדמה לפיזור FDG מערכתי. בתוך התא הסרטני, הקסוקינאז ממיר FDG לפוספט FDG 6, אשר אינו יכול לעכל עוד, ובכך מצטבר בתוך התא. אבטח את העכבר במצב שכיבה תחת הרדמה בתא הדמיה. ביצוע הדמיית PET/CT. לאחר ההדמיה, תן לעכבר להתאושש בכלוב. פליטת פוזיטרונים מ-F18 נרשמת במהלך סריקת ה-PET, ואילו סריקת ה-CT מציגה צילומי רנטגן של הרקמות. הפרוטוקול הבא מראה הדמיית FDG PET/CT של מודלים של סרטן ריאות פעיל מטבולית.
--זהירות. השתמש בציוד מגן ופעל לפי כל הנהלים הרגולטוריים הרלוונטיים בעת טיפול ברדיואקטיביות. התחילו בחימום כלוב העכברים לטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס, במשך השעה שלפני הזרקת פלואור18 שכותרתה פלואורודוקסיגלוקוז. זה מפחית את צריכת השומן החום של נותב. שקול את העכבר הראשון ורשום את משקלו. לאחר הרדמת העכבר בשיטה מאושרת מוסדית, יש לבדוק את עומק ההרדמה על ידי צביטת הבוהן. אם לא נראית תגובה, המשך בהליך על ידי מריחת משחה אופתלמית על העיניים כדי למנוע יובש במהלך ההרדמה. בזהירות, לדלל פלואור18 שכותרתו fluorodeoxyglucose, בעל זמן מחצית חיים רדיואקטיבי של 109 דקות, במי מלח סטריליים בריכוז הזרקה מתוקן ריקבון מותאם של 70 עד 75 מיקרוקירי לכל 100 מיקרוליטר.
לאחר מכן, משכו 100 מיקרוליטר לתוך מזרק אינסולין עם מחט 28 מד ומדדו את מינון הרדיואקטיביות, באמצעות כיול מינון. רשום את המדידה ואת זמן המדידה כדי לקבוע את תיקון הדעיכה. מניחים את המזרק במחזיק מזרק עופרת. כדי להזריק, תחילה לחמם את הזנב במשך 1 עד 2 דקות עם גזה ספוג במים חמים. ואז, לנגב עם 70% איזופרופנול כדי להרחיב את וריד הזנב, ממש לפני ההזרקה. לנהל את כל נפח המזרק עם הזרקת בולוס דרך וריד זנב לרוחב ולרשום את זמן ההזרקה. לאחר מכן, למדוד את המינון הנותר במזרק באמצעות כיול המינון ולרשום את המדידה ואת הזמן.
לבסוף, הניחו את העכבר המוזרק בתא ההרדמה עם איזופלורן של 1.5% עד 2% בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס כדי לאפשר לבדיקה להיות מופצת דרך מחזור הדם המערכתי של העכבר למשך שעה לפני סריקת ה-PET. לאחר שעה הניחו את העכבר הראשון בתא הדמיה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס, תחת הרדמת חרוט האף והדביקו את גפיו למקומן בעזרת סרט רפואי במצב שכיבה. מקם את תא ההדמיה בסורק PET/CT וקבל את סריקות ה-PET וה-CT כמתואר במדריך לסורק PET/CT. לאחר השלמת בדיקת ה-PET/CT, הוציאו את העכבר מתא ההדמיה ואפשרו לו להתאושש בכלוב.