בדיקת אימונופלואורסנציה: שיטה לזיהוי תאי גידול שנלכדו על חוט רפואי

- קח חוט פונקציונלי עם חלק זהב קטן מצופה הידרוג'ל יחד עם נוגדנים של עניין. טובלים את חלק הזהב של החוט בבקבוקון המכיל תאים סרטניים. סגור אותו עם פקק תיל, ודגר אותו במסובב צינור. תאי הגידול במחזור הדם או CTCs המציגים אנטיגנים על פני השטח נקשרים לנוגדנים שעל החוט. יש לשטוף את החוט על ידי טבילה בבקבוקונים המכילים מלח חוצץ פוספט או PBS ולייבש באוויר. עכשיו לטבול את החוט בתמיסת אצטון כדי לתקן את התאים על ידי ייבוש אותם.

לאחר מכן, הכנס בעדינות את החוט דרך קצה P200 עם החלק הפונקציונלי בתוכו. מלא את הקלטת עם נוגדן מצומד עם fluorochrome כדי לטבול את החוט. נוגדנים מסומנים אלה ייקשרו לאנטיגנים המתאימים שלהם הנמצאים על התאים. אוטמים את הפתח בסרט מעבדה ודגרים לילה בחושך ב-4 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, לשטוף את החוט עם PBS כדי להסיר נוגדנים לא קשורים. הניחו את החוט בתוך מחזיק חוטים וצפו תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי. CTCs הקשורים על ידי נוגדנים פלואורס על החוט. בפרוטוקול הבא, נלכוד CTCs על חוט רפואי ונזהה אותם על ידי צביעה אימונופלואורסצנטית.

- כדי להתחיל את הניסוי, השהה מחדש את כל התוכן של בקבוק T75 שנמצא במפגש של 80% בבקבוקון 5 מיליליטר באמצעות 4 מיליליטר של תווך שלם. לאחר מכן, הסר את החוט מאריזת הזכוכית שלו. טבלו את חלק הזהב הפונקציונלי של החוט לתוך הבקבוקון וודאו שפקק החוט אטום למים מתאים לבקבוקון של